麻荆止咳颗粒对咳嗽变异性哮喘模型豚鼠肺组织瞬时受体电位通道香草醛类受体1型表达的影响

目的:研究麻荆止咳颗粒对咳嗽变异性哮喘(Cough Variant Asthma,CVA)豚鼠瞬时受体电位通道香草醛类受体1型表达及肺组织病理形态的影响。方法:将豚鼠随机分为空白组、模型组、地塞米松组及中药组。豚鼠通过卵蛋白致敏制备CVA大鼠模型;药物干预10 d,观察各组大鼠一般状态、咳嗽次数;通过苏木素-伊红染色观察肺及支气管组织病理形态变化;用免疫组化法观察豚鼠肺组织瞬时受体电位通道香草醛类受体1型蛋白表达情况;以定量聚合酶链反应检测各组豚鼠瞬时受体电位通道香草醛类信使核糖核酸的表达情况。结果:与模型组比较,中药组豚鼠经麻荆止咳颗粒干预后咳嗽次数明显减少(P<0.05),肺及支气管组织病理变化明显减轻,且瞬时受体电位通道香草醛类受体1型蛋白表达明显降低(P<0.05),瞬时受体电位通道香草醛类信使核糖核酸表达明显降低(P<0.01)。结论:麻荆止咳颗粒可通过抑制瞬时受体电位通道香草醛类受体1型的表达降低气道反应性,发挥对CVA模型豚鼠的治疗作用。

激活瞬时受体电位香草醛亚家族1抑制RhoA/Rho激酶改善高脂介导的血管舒张功能异常

目的探讨膳食辣椒素通过激活瞬时受体电位香草醛亚家族1(TRPV1)对高脂饮食介导的血管功能障碍的作用及机制。方法 10周龄雄性C57BL/6 J小鼠,分别给予普通饮食(普通饲料)、普通饮食+辣椒素(普食+0.01%辣椒素)、高脂饮食(高脂饲料)、高脂饮食+辣椒素(高脂饲料+0.01%辣椒素)干预,20周后观察鼠尾血压、离体主动脉环血管收缩和舒张功能、血管电压依赖型钾通道Kv1.4和RhoA/Rho激酶蛋白表达。结果高脂饮食组内皮依赖和非内皮依赖的舒张反应分别为(26±12)%和(18.9±13.0)%,均明显低于普通饮食组的100%和100%(P均<0.01)。高脂饮食+辣椒素组的内皮依赖和非内皮依赖的舒张反应分别为(69±15)%和(46.5±6.0)%,均明显高于高脂饮食组(P均<0.05),但仍明显低于普通饮食组(P<0.05,P<0.01)。高脂饮食组大鼠的血压明显高于普通饮食组[(135±7)mmHg比(116±5)mmHg,P<0.01]。W estern blot检测结果显示,普通饮食+辣椒素组大鼠的Kv1.4蛋白表达明显高于普通饮食组(P<0.05),高脂饮食+辣椒素组大鼠的Kv1.4蛋白表达明显高于高脂饮食组(P<0.05);高脂饮食组大鼠RhoA/Rho激酶蛋白的表达明显高于普通饮食组(P<0.05),普通饮食+辣椒素组明显低于普通饮食组(P<0.05),高脂饮食+辣椒素组明显低于高脂饮食组(P<0.05)。结论膳食辣椒素能够改善高脂介导的血管舒张功能异常,可能与其激活TRPV1通道,从而上调钾通道和抑制RhoA/Rho激酶信号通路相关。

类香草素受体的结构和功能

类香草素受体多表达于 C纤维中 ,属配子闸门非选择性阳离子通道 ,其功能涉及到疼痛、神经源性炎症、哮喘等疾病。其基因定位于人 17号染色体 ,现已被克隆。最近已探测到一些调节位点和作用位点 。

吡美莫司乳膏对成年女性面部皮炎快速抗瘙痒机制

目的探讨吡美莫司乳膏对成年女性面部皮炎快速抗瘙痒机制。方法采用研究者总体评估(IGA)、瘙痒程度(SP)评分及参照由温度敏感瞬时受体电位通道建立的痛痒觉基本规则和分子底物方法,评估外用1%吡美莫司乳膏治疗前、后成年女性患者面部皮炎临床体征、SP及皮肤感觉变化。结果所有患者治疗后第4天和第11天的IGA评分,治疗后第1天、第4天和第11天的SP评分均显著低于治疗前(P均<0.05)。52例患者中,有28例(53.8%)在用药数分钟后出现辣椒素样效应,12例(23.1%)出现樟脑样效应,12例(23.1%)未出现辣椒素样效应或樟脑样效应。结论外用吡美莫司可迅速缓解成年女性面部皮炎的症状和体征,其可能是通过激活皮肤感觉神经上的瞬时受体电位香草类受体1诱导辣椒素样效应或樟脑样效应来达到快速抗瘙痒作用。

吡美莫司乳膏治疗女性面部敏感性皮肤的疗效及其神经源机制

目的探讨吡美莫司乳膏对敏感性皮肤的疗效及其机制。方法采用烧灼感或瘙痒程度评分及参照由温度敏感型瞬时受体电位通道建立的痛痒觉基本规则和分子底物(即分子精神物理学)方法,评估外用1%吡美莫司乳膏治疗前、后敏感性皮肤患者面部烧灼感、瘙痒程度及皮肤感觉的变化。结果外用1%吡美莫司乳膏可终止或显著降低32例敏感性皮肤患者面部烧灼感或瘙痒程度评分(P<0.05)。20例(62.5%)患者外用1%吡美莫司乳膏后,应用部位产生辣椒素样效应(即灼热感后随之瘙痒和/或烧灼感迅速改善),6例(18.8%)患者产生樟脑醇样效应(即温感后随之瘙痒迅速改善),6例(18.8%)患者外用1%吡美莫司乳膏后缺乏辣椒素样反应和/或樟脑醇样反应。结论外用1%吡美莫司乳膏可终止或降低敏感性皮肤患者的神经感觉伤害症状(即烧灼和瘙痒),作用机制与调节皮肤感觉神经上的瞬时受体电位香草类受体1功能有关。

他克莫司软膏对成年中重度面部皮炎快速抗瘙痒机制分析

目的探讨他克莫司软膏对成年中重度面部皮炎快速抗瘙痒和抗炎症机制。方法采用研究者总体评估(IGA)、瘙痒程度(SP)评分及参照由温度敏感瞬时受体电位通道建立的痛痒觉基本规则和分子底物方法,评估外用0.1%他克莫司软膏治疗前、后成年患者面部皮炎临床体征、SP及皮肤感觉变化。结果所有患者治疗后第4天和第11天的IGA评分,治疗后第1天、第4天和第11天的SP评分均显著低于治疗前(P均<0.05)。60例患者中,有34例(56.7%)用药后出现辣椒素样效应,9例(15%)出现樟脑样效应,17例(28.3%)未出现辣椒素样效应或樟脑样效应。结论外用他克莫司软膏可以迅速缓解成年中重度面部皮炎的症状和体征。他克莫司软膏诱导辣椒素样效应或樟脑样效应可能是通过直接或间接激活皮肤感觉神经上的瞬时受体电位香草类受体1途径,最终通过使皮肤感觉神经脱敏或去功能化来达到快速抗瘙痒和抗神经源炎症效应。

外用他克莫司治疗男性肛门瘙痒症疗效及其神经源机制分析

目的探讨他克莫司软膏对肛门瘙痒症的疗效及其机制。方法采用瘙痒程度评分及参照由温度敏感的瞬时受体电位通道建立的痛痒觉基本规则和分子底物(即分子精神物理学)方法评估外用0.1%他克莫司软膏治疗前后的肛门瘙痒症患者瘙痒程度及皮肤感觉的变化。结果外用0.1%他克莫司软膏可终止或显著降低41例男性肛门瘙痒症患者瘙痒程度评分(P<0.05)。在41例患者中,34例(82.9%)患者外用0.1%他克莫司软膏后,应用部位产生辣椒素样效应(即灼热感后随之瘙痒和/或烧灼感迅速改善),7例(17.1%)患者缺乏辣椒素样反应。结论外用他克莫司软膏可终止或降低肛门瘙痒症患者瘙痒,其治疗机制与调节皮肤感觉神经上的瞬时受体电位香草类受体1(TRPV1)功能有关。

吡美莫司乳膏治疗女性面部敏感性皮肤的疗效分析

目的探讨吡美莫司乳膏治疗女性面部敏感性皮肤的效果。方法选取2015年1月至2016年1月在安阳地区医院皮肤科进行治疗的36例面部敏感性皮肤患者,均予以外用1%吡美莫司乳膏进行治疗,并采取灼烧感程度(SB)或瘙痒程度(SP)以及分子精神物理学方法分别对其临床效果及机制进行评估和探讨。结果治疗前患者SB和SP评分分别为(2.31±0.45)分和(2.41±0.51)分,治疗后分别为(0.22±0.41)分和(0.25±0.45)分,治疗后比治疗前明显降低(P<0.05)。36例患者中15例出现不同程度的辣椒素样效应,5例出现樟脑醇样效应,3例出现樟脑醇和辣椒素样效应。结论对面部敏感性皮肤患者外用1%吡美莫司乳膏可有效改善其瘙痒和灼烧感,其作用机制可能与瞬时受体点位香草类受体(TRPV1)有关。

VR1^+细胞模型的构建和Nielsen假说的验证

为研究类香草素受体(vanilloidreceptortype1,VR1)作为刺激性室内空气污染物的触发性生物靶分子的生理作用,在VR1cDNA质粒基础上,应用分子克隆和细胞转染技术构建了体外培养的VR1+HEK293细胞模型,应用此细胞模型进行辣椒素和甲醛致VR1+HEK293细胞死亡实验.结果表明,VR1+HEK293细胞模型构建成功,VR1+细胞死亡实验是一种简便有效的鉴定VR1体外表达的实验方法;甲醛能够激活VR1,且激活反应能被VR1特异性拮抗剂capsazepine所阻断,从而推断甲醛对气道的刺激作用也是通过VR1所介导的.用体外细胞学实验证实了VR1是甲醛作用的生物靶分子,以实验证实了Nielsen假说的正确性.

气态甲醛所致大鼠肺部VR1-mRNA表达的初步研究

目的从分子水平研究中等浓度气态甲醛环境暴露对呼吸系统中类香草素受体(van illo id recep-tor sub type 1,VR 1)基因表达的影响。方法用WH-2型环境气候舱释放的甲醛和净空气,分别通入2只各放有5只幼年大鼠的染毒缸中连续灌流72 h后,迅速取肺,用RT-PCR方法检测大鼠在中等浓度甲醛环境暴露下肺VR 1和管家基因G 3PD表达水平。结果中等浓度甲醛3.0 m g/m3灌流比清洁空气灌流导致幼年大鼠肺VR 1-mRNA表达增加。结论中等浓度甲醛灌流导致幼年大鼠肺部VR 1-mRNA表达量增加。

辣椒素抑制血管紧张素Ⅱ介导的血管收缩

目的观察长期应用辣椒素作为瞬时受体电位通道香草醛类受体1型(TRPV1)激动剂对C57BL/6J小鼠胸主动脉收缩功能的作用。方法2月龄的雄性C57BL/6J小鼠,完全随机分为:普通饲料组(普食组,n=12)和普通饲料+辣椒素组(辣椒素组,n=12)。干预开始及结束时测鼠尾动脉收缩压;喂养6月后,颈动脉插管测颈动脉血压及心率。取小鼠胸主动脉,利用体外血管环张力测定技术,检测其对氯化钾(KCl)、血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)、苯肾上腺素(PE)的收缩反应。采血测血浆肾素、AngⅡ、醛固酮浓度。培养C57BL/6J小鼠胸主动脉血管平滑肌细胞(VSMC),辣椒素(1μmol/L)孵育24 h后,应用Western-blot法检测VSMC的AngⅡ1型受体(AT1R)的表达,应用比率荧光成像系统测定AngⅡ(1μmol)对细胞内游离钙浓度的影响。结果6月后,两组间鼠尾动脉收缩压和颈动脉平均动脉压及心率无显著性差异。两组间胸主动脉对PE诱导的收缩反应无显著性差异;辣椒素组胸主动脉对AngⅡ诱导的收缩反应[(37.5±1.6)%]明显低于普食组[(59.8±1.4)%,P<0.05]。两组间血浆肾素、AngⅡ、醛固酮浓度无显著差异。培养的VSMC,辣椒素干预后AT1R蛋白表达仅为普食组的(62.4±16.6)%(P<0.05)。辣椒素组AngⅡ诱导的细胞内游离钙浓度(0.91±0.12)增加低于对照组(1.37±0.35,P<0.05)。结论应用辣椒素激活TRPV1受体能有效抑制动脉血管对AngⅡ的收缩反应,其机制与下调AT1R的表达,降低AngⅡ诱导的细胞内游离钙增加有关。

小儿久咳合剂对感染后咳嗽(肺热阴虚证)大鼠肺匀浆中SP含量及肺组织中SP、VR1及PGP-9.5表达的影响

目的:观察小儿久咳合剂对感染后咳嗽(肺热阴虚证)大鼠肺匀浆中P物质(SP)含量及肺组织中SP、类香草素受体1(VR1)及蛋白基因产物9.5(PGP-9.5)表达的影响,探讨该药对大鼠气道神经源性炎症的调节作用。方法:从50只SD大鼠中随机选取10只作为空白组,其余40只采用烟熏+内毒素滴鼻+甲状腺素灌胃+辣椒素雾化诱咳法建立感染后咳嗽(肺热阴虚证)大鼠模型,造模成功后随机分为模型组、孟鲁司特钠组、小儿久咳合剂小剂量组、小儿久咳合剂大剂量组,每组10只。各组分别予以相应药物进行干预,空白组及模型组则给予同体积0.9%氯化钠溶液灌胃。ELISA法检测治疗前后各组大鼠肺匀浆中SP含量,免疫组化法检测治疗前后大鼠肺组织中SP、VR1及PGP-9.5表达情况。结果:与模型组比较,小儿久咳合剂大、小剂量组大鼠肺匀浆中SP含量明显降低(P<0.01),肺组织中SP、VR1及PGP-9.5蛋白表达也明显减少。结论:小儿久咳合剂能通过降低肺匀浆中SP含量,减少肺组织中SP、VR1及PGP-9.5的表达来减轻气道神经源性炎症,进而发挥治疗作用。

母菊提取物的止痒作用

研究发现,母菊提取物具有抑制capsazepine样刺激感觉神经的活性,本次探讨了它的止痒作用。 方法:以辣椒辣素诱导豚鼠离体支气管平滑肌特异性抑制活性为指标,评价母菊提取物对感觉神经刺激的抑制活性。记录化合物48/80诱发ddY系小鼠的搔痒行为,以不影响小鼠自发活动的剂量评价该提取物的止痒作用。