氯球嫁接L-脯氨酸绿色催化合成香豆素-3-羧酸酯

将L-脯氨酸嫁接在树脂氯球上,催化水杨醛及其衍生物和丙二酸酯直接合成香豆素-3-羧酸酯类物质,反应具有选择性强、产率高、成本低、三废少、后处理简单、催化剂可以多次重复使用等优点,符合绿色催化的特性。实验表明:反应在100℃下,醛和酯的摩尔比为1:1.2,催化剂的用量1 g,10 mL DMF中反应5h,反应的选择性≥98%,产率高达92%;催化剂循环使用6次反应的产率仍在85%以上。在此优化的反应条件下,高效合成了一系列其他香豆素-3-羧酸酯类物质,产品的结构和纯度通过了NMR、IR和熔点等手段进行了鉴定。

应用DPRA替代方法评价3种香豆素类化合物的皮肤致敏性

应用直接多肽反应试验(DPRA)方法,对化妆品植物提取物原料中存在的蛇床子素、滨蒿内酯、东莨菪内酯3种未知致敏性的香豆素类化合物进行评价。3种香豆素类化合物与半胱氨酸多肽和赖氨酸多肽模拟的皮肤蛋白共同孵育,使用高效液相色谱法检测3种化合物的多肽消耗率。在标准色谱条件下,蛇床子素和滨蒿内酯与两种多肽的反应体系峰型均正常,东莨菪内酯与赖氨酸反应体系峰型异常,以体积分数0.1%的甲酸水-乙腈流动相体系对标准流动相体系进行优化后检测。结果表明:蛇床子素与半胱氨酸反应体系在反应24 h前产生沉淀,致敏性结果为不确定;滨蒿内酯多肽消耗率均值为6.95%,判定致敏性为阳性,反应等级为弱反应;东莨菪内酯的半胱氨酸多肽消耗率为75.82%,优化色谱条件后的赖氨酸多肽消耗率为80.46%,判定致敏性为阳性,反应等级为中度反应。阳性和阴性对照化合物的结果均与小鼠淋巴结试验(LLNA)致敏性结果一致,实验结果可为3种香豆素类化合物的致敏性提供参考和依据。

芸香中香豆素类化学成分研究

目的研究中药芸香(Ruta graveolens L.)中香豆素类化学成分,并探讨其抗炎、抗凝活性。方法本实验利用各种色谱分离技术,结合核磁共振波谱及质谱联用技术对分离得到的单体化合物进行结构鉴定。CCK-8法筛选出无明显细胞毒性的化合物,用于对脂多糖诱导小鼠巨噬细胞(RAW 264.7)释放NO的检测,进行抗炎活性筛选,通过凝血酶原时间的测试进行抗凝活性筛选。结果从芸香提取物中共鉴定出10个香豆素类化合物,分别为补骨脂素(1)、花椒毒素(2)、chalepensin(3)、rutamontine(4)、3-(1',1',dimethyl allyl)-herniarin(5)、佛手苷内酯(6)、异莨菪亭(7)、异嗪皮啶(8)、去甲基软木花椒素(9)、Chalepin(10)。对10个化合物的抗炎、抗凝进行活性评价,结果显示,化合物2、4、9在20μmol/L时对脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导的NO生成有较好的抑制作用,抑制率分别为54.3%±1.7%、51.2%±5.5%、52.3%±1.7%;10个化合物在浓度为1.0 mmol/L条件下,均未表现出抗凝活性。结论从芸香提取物中分离得到10个香豆素类单体化合物,化合物3~5、7~10为首次从芸香中分离得到。该研究结果丰富了芸香的化学成分和生物活性研究,为芸香抗炎活性的开发和利用提供了理论基础。

三氮唑香豆素的合成进展

香豆素衍生物在医药学、农林学、材料学等多个学科都展示出极高的应用价值,因此关于香豆素衍生物的合成已经吸引了诸多课题组的关注与研究。本综述侧重对近年三氮唑香豆素衍生物的合成进行总结,并展望今后含有三氮唑香豆素衍生物的发展趋势。

基于超高效液相色谱三重四极杆质谱法同时检测佛手中香豆素类化合物含量

佛手作为一种药食两用的柑桔类水果,香豆素类化合物是其关键的生物活性成分之一。由于香豆素类化合物结构相似,并且有同分异构体,目前还没有快速准确的方法针对香豆素类化合物进行同时定量。该研究建立了一种超高效液相色谱三重四极杆质谱法(ultra-performance liquid chromatography tandem triple quaternary mass spectrometry,UPLC-QqQ-MS/MS),在14 min内定性并定量4个不同产地佛手柑中的41种香豆素类化合物,包括16种简单香豆素、23种呋喃香豆素和2种其他香豆素,其中有8组同分异构体。该方法灵敏度高、准确度高、精确度高,可用于佛手实际样品中香豆素的筛选和测定,这是迄今为止筛查并定量香豆素最全面和快速的方法。柠檬内酯是佛手中含量最高的香豆素,浙江佛手中检出的香豆素类化合物含量和种类均最多,并且有4种香豆素在佛手中首次检出。

天然柑橘香豆素的分布、提取分析及生物活性研究进展

柑橘包含柑橘属及其近缘植物,常见品种有甜橙、宽皮橘、柚子、柠檬和杂柑等,其果实是全球产量最高、经济体量最大的水果,也是重要的药食同源植物和天然产物宝库。柑橘香豆素类化合物是一大类具有苯并α-吡喃酮结构的次生代谢产物,在植物应对环境胁迫、抵御病虫侵袭等过程中发挥重要作用。大量研究显示柑橘香豆素还对人体和哺乳动物具有多种生物学活性,如抗炎、抗癌、抗病毒以及保护心脑血管、神经和消化系统等作用。随着后疫情时代对药食同源关注度不断提升及大健康产业的加速发展,柑橘精深加工势头强劲,针对其香豆素等天然活性产品的开发利用极具市场潜力。该文综述了天然柑橘香豆素的研究进展,重点就其结构和分布、提取和分析方法以及功能活性作归纳和梳理,旨在为基于结构和活性的柑橘香豆素研究及其精深加工产品开发提供参考。

香豆素类光敏基团对脱氧核苷5′-羟基的选择性保护

以香豆素类化合物作为光可降解保护基,探究了香豆素类化合物对脱氧核苷中5′-位羟基的保护和脱保护性能,为在传统核酸合成中使用光脱保护替代酸脱保护做了前期工作。选择可在紫外及蓝光波段区间进行光化学反应的7-二乙胺基-4-羟甲基香豆素类化合物作为保护基团,并以碳酸酯的形式连接在N-4-乙酰基脱氧胞苷的5′-羟基上,考察该化合物在紫外和蓝光光照下的光化学性质,为构建光调节DNA合成进行前期研究并奠定良好基础。

香豆素降低PARP10表达抑制人结肠癌细胞HCT116增殖

PARP10是ADP-核糖基转移酶家族PARPs的一员,大量分布于细胞质和细胞核中,在细胞免疫应答、转录调控、DNA损伤修复、周期调节等生理过程中起着重要作用。PARP10可通过影响多种信号通路来促进肿瘤细胞的增殖与侵袭,已被发现参与了包括前列腺癌、乳腺癌、胃癌、肝癌等恶性肿瘤的发生过程。本研究通过生物信息学分析以及生化实验证明PARP10在结肠癌细胞的发生发展中也发挥重要作用。敲低PARP10的表达可以显著抑制肿瘤细胞增殖并促进其凋亡。通过筛选,我们发现香豆素(Coumarin)这一天然生物活性化合物可以抑制肿瘤细胞的增殖,并初步证明香豆素通过抑制结肠癌细胞中PARP10蛋白表达而降低结肠癌细胞的增殖能力。本研究为深入理解PARP10在结肠癌中作用以及相关的药物研发提供了新的思路。

基于香豆素和寡聚芳酰胺的Hg^(2+)荧光探针性能及应用研究

该文利用含分子内三中心氢键的寡聚芳酰胺三聚体二酸和3-氨基香豆素的酰胺化反应,高效制备了具有一定刚性骨架的荧光探针,采用核磁共振谱、质谱等手段对其结构进行了表征。深入研究了探针的选择性识别、抗干扰以及可逆性等性能,测定了探针和Hg^(2+)的配位比及检出限,并研究了其定量检测不同水样中Hg^(2+)的能力。结果显示,探针对Hg^(2+)表现出优异的选择性,且不受其他金属离子(K^(+)、Na^(+)、Ca^(2+)、Mg^(2+)、Cu^(2+)、Zn^(2+)、Pb^(2+)、Cd^(2+)、Fe^(3+)、Mn^(2+)、Ni^(2+)、Ag+、Cr^(3+)、Al^(3+)、Co^(2+))的干扰。探针对Hg^(2+)识别具有较好的可逆性,二者配位比为1∶1,其检出限为2.08×10^(-7) mol/L,满足实际水样检测要求。利用红外光谱和核磁共振氢谱对探针识别Hg^(2+)的发光机理进行了推断。此探针可用于不同水样中Hg^(2+)的定量检测,检测结果与原子荧光法基本一致,具有较高的准确度和精密度。

香豆素通过调节Keap1/Nrf2/ARE信号通路减轻脑缺血-再灌注大鼠神经损伤

目的 探讨香豆素通过调节Kelch样环氧氯丙烷相关蛋白(Keap)1/核因子E2相关因子(Nrf)2/抗氧化反应元件(ARE)信号通路减轻脑缺血-再灌注大鼠神经损伤。方法 大鼠随机分为假手术(Sham)组、脑缺血-再灌注损伤模型(CIRI)组,低(2.5 mg/kg)、中(5 mg/kg)、高剂量(10 mg/kg)香豆素组,Keap1/Nrf2/ARE信号通路抑制剂组(ML385)组及ML385+高剂量香豆素组,脑缺血2 h、再灌注24 h后采用Longa5分制法评估大鼠神经行为评分;2,3,5氯化三苯基四氮唑(TTC)染色测量大鼠脑梗死体积;苏木素-伊红(HE)染色观察大鼠脑皮质组织病理学变化;Western印迹检测大鼠脑皮质组织中Keap1/Nrf2/ARE信号通路相关因子[Keap1、Nrf2、血红素氧合酶(HO)-1、醌氧化还原酶(NQO)1]蛋白水平。结果 与Sham组比较,CIRI组神经行为评分、脑梗死体积,脑皮质组织中胞核Nrf2/Nrf2及HO-1、NQO1蛋白增加,Keap1蛋白减少,差异有统计学意义(P<0.05),且神经细胞可见明显病理学改变。与CIRI组比较,低、中、高剂量香豆素组神经行为评分、脑梗死体积及脑皮质组织中Keap1蛋白减少,脑皮质组织中胞核Nrf2/Nrf2及HO-1、NQO1蛋白增加,呈剂量依赖性,差异有统计学意义(P<0.05),且神经细胞损伤程度显著减轻;ML385组神经行为评分、脑梗死体积增加,脑皮质组织中胞核Nrf2/Nrf2及HO-1、NQO1蛋白减少,差异有统计学意义(P<0.05),且神经细胞损伤程度加重。与高剂量香豆素组比较,ML385+高剂量香豆素组神经行为评分、脑梗死体积增加,脑皮质组织中胞核Nrf2/Nrf2及HO-1、NQO1蛋白减少,差异有统计学意义(P<0.05),且神经细胞损伤程度有所加重。结论 香豆素可减轻脑缺血-再灌注大鼠神经损伤,可能通过激活Keap1/Nrf2/ARE信号通路而实现。

不同时期独活不同部位中香豆素类成分积累规律研究

目的:建立采用气相色谱-质谱联用(GC-MS)法分析独活中香豆素类成分的新方法,明确不同时期、不同部位独活中香豆素类成分含量的动态变化规律。方法:采用GC-MS技术对不同时期独活根、茎、叶中主要成分蛇床子素、花椒毒素、二氢欧山芹醇当归酸酯和二氢欧山芹素等香豆素类化合物进行相对定量测定,分析不同时期、不同部位独活中香豆素类成分含量的动态变化。结果:独活不同部位在不同时期的化合物种类数不同,根于10月收获期时化合物种类数达到最多,茎叶于8月种类数达到最大,根、茎、叶中化合物种类数分别为59种、45种、44种,共有成分有38种,且成分种类间存在差异。结论:首次建立了采用GC-MS法分析独活中香豆素类成分的新方法,研究了香豆素类成分的积累规律,发现独活不同部位化学成分种类和含量存在差异性。此项研究为独活药材的质量控制及高效利用提供一定的科学依据。

香豆素通过调控组蛋白去甲基化酶3和骨髓分化蛋白2改善脓毒症相关AKI的机制研究

目的探讨香豆素(Sco)通过调控组蛋白去甲基化酶3(JMJD3)和骨髓分化蛋白2(MD-2)改善脓毒症相关急性肾损伤(AKI)的作用机制。方法24只C57BL6小鼠根据随机数字表法分为对照组、脂多糖(LPS)组、LPS+40 mg/kg Sco组和LPS+80 mg/kg Sco组。除对照组外,其余3组小鼠腹腔注射LPS 10 mg/kg建立脓毒症相关AKI模型,LPS+40 mg/kg Sco组和LPS+80 mg/kg Sco组小鼠在造模成功后分别腹腔注射Sco 40 mg/kg和80 mg/kg,对照组小鼠腹腔注射0.9%氯化钠溶液2 mL/kg。采用HE染色和原位末端转移酶标记法染色检测小鼠肾脏组织损伤程度和细胞凋亡程度,ELISA法检测小鼠血清血肌酐(Scr)、血尿素氮(BUN)水平,Western blot法检测小鼠肾脏组织中JMJD3和MD-2蛋白表达水平。使用LPS(1μg/mL)处理人肾小管上皮细胞系HK-224 h,建立脓毒症细胞模型,随机分为对照组、LPS组、LPS+30μmol/L Sco组、LPS+60μmol/L Sco组、LPS+60μmol/L Sco+过表达对照组和LPS+60μmol/L Sco+过表达JMJD3组。采用流式细胞术检测细胞凋亡情况,Western blot法检测细胞中JMJD3和MD-2蛋白表达水平。结果与对照组小鼠相比,LPS组小鼠肾组织出现明显病理变化,部分肾小管变形,肾小管上皮细胞水肿,肾间质周围炎症细胞浸润,凋亡信号(棕褐色)增强,JMJD3和MD-2蛋白表达水平升高,血清中Scr、BUN水平均升高。而与LPS组相比,LPS+40 mg/kg Sco组和LPS+80 mg/kg Sco组小鼠肾脏组织以上病理变化明显改善,JMJD3和MD-2蛋白表达水平均降低,血清中Scr、BUN水平也均降低,并且LPS+80 mg/kg Sco组变化更明显。与对照组细胞相比,LPS组细胞凋亡水平升高,JMJD3和MD-2蛋白表达水平升高。而相较于LPS组,使用Sco处理后以上变化趋势发生逆转,且Sco浓度越高,趋势变化越显著。此外,过表达JMJD3后细胞凋亡水平升高,JMJD3和MD-2蛋白表达水平均升高。结论Sco通过抑制肾小管上皮细胞JMJD3和MD-2表达,减少细胞凋亡,从而改善脓毒症相关AKI。

QuEChERS/超高效液相色谱-串联质谱法同时测定大米中16种香豆素和香兰素及其衍生物

建立了大米中16种香豆素和香兰素及其衍生物的超高效液相色谱-串联质谱(UPLC-MS/MS)检测方法。大米样品采用1%甲酸乙腈提取,150 mg C_(18)与450 mg无水MgSO_(4)吸附剂净化,采用Agilent SB-C_(18)色谱柱(2.1 mm×50 mm,1.8μm)分离,0.2%甲酸水溶液(含5 mmol/L甲酸铵)和乙腈为流动相梯度洗脱,在电喷雾离子源正负离子模式下采用多反应监测模式(MRM)进行测定,以基质匹配标准溶液内标法定量。结果显示,16种待测组分在各自质量浓度范围内线性关系良好(r≥0.998),方法检出限为0.001~0.400 mg/kg,定量下限为0.004~0.600 mg/kg,平均回收率为71.3%~120%,相对标准偏差(RSD,n=6)为1.6%~6.5%,日内RSD(n=6)为1.0%~8.8%,日间RSD(n=3)为0.60%~14%。该法前处理简单易操作、灵敏度高、准确性好,适用于大米中香豆素与香兰素及其衍生物的同时检测。

高效液相色谱法同时测定化妆品中24种香豆素类化合物及质谱确证

采用高效液相色谱法,建立了同时测定化妆品中24种香豆素类化合物含量的分析方法。乳液、膏霜、水基类样品和唇膏、粉饼等固态类样品分别采用甲醇、四氢呋喃-甲醇(1∶1)混合溶液超声提取后,经色谱柱分离,以甲醇-0.02 mol/L磷酸二氢钠缓冲液(pH 3.5)为流动相进行梯度洗脱,流速1.0 mL/min,二极管阵列检测器多波长检测,外标法定量。经高效液相色谱法检出的疑似阳性样品,采用液相色谱-串联质谱法进行确证。结果表明,24种香豆素类化合物在各自的质量浓度范围内呈良好的线性关系,相关系数r均≥0.9996,检出限为2~19 mg/kg,定量限为5~63 mg/kg。在低、中、高三个加标水平下,方法回收率为94.4%~106.4%,相对标准偏差为0.5%~3.3%。该方法操作简便、准确性好,可用于化妆品中香豆素类化合物的定性筛查和定量测定。

紫外分光光度计测定香豆素改性脂肪族异氰酸酯的转化率

自合成4-羟甲基香豆素改性的脂肪族异氰酸酯样品,利用紫外分光光度计测试4-羟甲基香豆素改性脂肪族异氰酸酯的转化率,线性范围0~25 mg/L,在此范围内R^(2)=0.9995,方法检出限为0.14 mg/L。在低、高、中3种加标水平下,平均加标回收率为95.0%,相对标准偏差为1.4%,表明此方法准确、简便。

不同光照时长处理对柚果皮有色层香豆素代谢的影响

柚是我国南方地区重要的水果,表皮富含大量的香豆素,极易受到外界环境的影响,但其光响应效果尚不明确。为探究香豆素在柚表皮中的光响应机制,通过设置12、24、36、48 h共4个不同光照时长处理来探究光照对柚果皮有色层香豆素代谢的影响。本研究以贡水白柚和矮晚柚为试材,采用靶向代谢组学的检测方法共检测到21种香豆素,随后对贡水白柚、矮晚柚对照组和处理组果皮有色层中香豆素的代谢差异进行比较分析。结果表明:在贡水白柚和矮晚柚果皮有色层共同积累的21种香豆素中,相对含量较高且存在显著差异的香豆素为佛手柑素、橙皮油内酯、蛇床子素。不同光照时长处理对贡水白柚果皮有色层中佛手柑素、橙皮油内酯、蛇床子素、总香豆素的积累有显著影响,对矮晚柚果皮有色层中王草酚、佛手柑素、橙皮油内酯、蛇床子素、总香豆素的积累有显著影响。通过PCA分析显示,经过不同光照时长处理的贡水白柚和矮晚柚果皮有色层中总香豆素的相对含量被明显区分开。综上,光照处理会改变贡水白柚和矮晚柚果皮有色层中香豆素的积累特征,并且矮晚油相较贡水白柚大量积累王草酚和二氢欧山芹素。以上研究结果为揭示光照对柑橘香豆素代谢的调节机制奠定了基础,为提升柑橘药用品质提供了全新的思路。

高效液相色谱-三重四极杆串联质谱法同时测定化妆品中24种香豆素类化合物

建立了高效液相色谱-三重四级杆串联质谱法同时测定化妆品中24种香豆素类化合物含量。水基、乳液、膏霜类样品和唇膏、粉饼等固态类样品分别采用甲醇、甲醇-四氢呋喃(1∶1)混合溶液超声提取后,经Agilent Poroshell 120 SB-C18色谱柱(100 mm×4.6mm,2.7μm)分离,以甲醇-5 mmol/mL甲酸铵(含0.1%甲酸)溶液作为流动相进行梯度洗脱,流量为0.5 mL/min,多反应监测模式检测。24种香豆素类化合物在各自质量浓度范围内与色谱峰面积线性关系良好,相关系数均不小于0.9995,检出限为0.002~0.8μg/kg,定量限为0.004~3μg/kg。在低、中、高三个浓度加标水平下,样品平均加标回收率为84.8%~112.9%,测定结果的相对标准偏差为1.2%~9.8%(n=6)。该方法操作简便、灵敏度高、准确性好,可用于化妆品中香豆素类化合物的定性筛查和定量测定。

气相色谱—质谱联用法同时测定烟用香精香料中18种邻苯二甲酸酯、香豆素及黄樟素

建立了气相色谱—质谱联用法同时测定香精香料中18种邻苯二甲酸酯(PAEs)、香豆素及黄樟素的检测方法,以乙醇为萃取溶剂、涡旋振荡10 min,提取香精香料样品中的PAEs、香豆素及黄樟素。选择DB-5 ms毛细管色谱柱分离各化合物,同时采用选择离子检测的模式进行分析,同位素内标法定量,得到20种化合物的线性方程及相关系数,线性相关系数的范围为0.9991~0.9998,方法检出限为0.07~0.42 mg·kg-1,定量限为0.25~1.41 mg·kg-1,各目标化合物的回收率在85.7%~114.5%,相对标准偏差(n=7)小于4.1%。该方法前处理简单、回收率高、重复性好,适用于香精香料中18种PAEs、香豆素及黄樟素的检测需求。

食用植物油中3种香兰素类及6种香豆素类含量检测方法的研究

通过优化前处理,探索质谱条件,建立液相色谱-串联质谱法,同时对食用植物油中3种香兰素类及6种香豆素类化合物进行含量检测的分析方法,确定方法可行性与准确性。样品经乙腈超声提取,HLB柱净化,氮吹复溶,采用多反应监测正离子模式进行定性,香兰素内标法定量,香豆素外标法定量进行分析。结果表明,9种目标化合物在20~800μg/L浓度范围内线性良好,相关系数(r^(2))为0.9955~0.9999;定量限均为20μg/kg,方法所得9种化合物回收率均在80%~120%之间。该方法灵敏度高,准确性高,可用于食用植物油中3种香兰素类和6种香豆素类化合物的同时检测。

7-甲氧基香豆素和5,6,7,8-四甲氧基香豆素结构和紫外光谱的理论研究

采用密度泛函理论方法系统地研究了7-甲氧基香豆素和5,6,7,8-四甲氧基香豆素。相对于7-甲氧基香豆素,5,6,7,8-四甲氧基香豆素的C5、C6、C8上增加了吸电子基团甲氧基,导致5,6,7,8-四甲氧基香豆素的甲氧基中O与取代基位置C5、C6、C7、C8的键长C5-O11、C6-O12、C7-O13和C8-O14的键长都变长,且C5、C6、C8的电荷变为了正电荷。7-甲氧基香豆素在310 nm处峰和5,6,7,8-二甲氧基香豆素在312 nm处峰都是因为π→π*电荷转移激发;7-甲氧基香豆素在241 nm处峰和5,6,7,8-二甲氧基香豆素在244 nm处峰都是由于π→π*局域激发;7-甲氧基香豆素在197 nm处峰是由于π→π*局域激发而5,6,7,8-二甲氧基香豆素在211 nm处峰不仅由于π→π*局域激发还有n→π*局域激发。