HPLC指纹图谱结合多成分含量测定评价香附质量

目的建立香附药材的高效液相色谱(High performance liquid chromatography,HPLC)指纹图谱,结合4种化学成分含量对不同产地及用药规格香附的质量进行综合评价。方法采集HPLC指纹图谱,并结合聚类分析(Cluster analysis,CA)和主成分分析(Principal component analysis,CA)等多种化学计量学方法对不同产地及用药规格的香附药材进行区分比较。利用HPLC法测定香附药材中香附烯酮、α-香附酮、木犀草素和阿魏酸的含量。结果CA和PCA分析结果显示,不同产地香附均可单独聚为一类,而浙江金华与其他产地香附差异最大,河南尉氏香附综合得分最高,质量较优;正交偏最小二乘法判别分析(Orthogonal partial least square-discriminant,OPLS-DA)结果显示,指纹图谱中13号峰(α-香附酮)、10号峰(香附烯酮)和14号峰是不同产地间香附质量产生差异的主要成分。广东湛江和浙江金华香附中香附烯酮与α-香附酮含量较为接近,香附烯酮含量远大于河南香附,α-香附酮含量远小于河南香附;不同产地香附中阿魏酸和木犀草素含量差异不大。去皮后香附中香附烯酮、α-香附酮和木犀草素含量降低,阿魏酸含量增加。结论不同产地间香附质量存在差异,以河南香附质量最佳。去皮前后香附化学成分相似,无明显种类差异。

基于胆碱类低共熔溶剂高效提取香附总黄酮的研究

目的:采用胆碱类低共熔溶剂高效提取香附药效组分总黄酮。方法:通过中心组合设计法,对胆碱类低共熔溶剂的性质(种类、组分摩尔比、含水量)、提取温度、提取时间、液料比等因素进行分析。结果:研究发现,香附总黄酮的最佳提取条件为:以氯化胆碱为氢键供体,以丙三醇为氢键受体,摩尔比1∶2,含水量20%,配比1∶4,水比例30%,提取温度80℃,提取时间40 min,液固比为15 mL/g。结论:本研究提示可将胆碱类低共熔溶剂作为可持续、高效的天然提取介质应用于香附药效组分的提取。

高效液相色谱法测定舒筋活血片中香附烯酮和α-香附酮的含量

建立HPLC法测定舒筋活血片中香附烯酮和α-香附酮的含量。采用ZORBAX SB-C18(4.6 mm×250 mm,5μm)色谱柱,以甲醇-水(65∶35)作为流动相,流速为1.0 mL/min;检测波长为254 nm;柱温30℃;进样体积5μL。结果显示,香附烯酮在0.422~2.530μg范围内线性关系良好,相关系数为1.000,α-香附酮在0.161~0.964μg范围内线性关系良好,相关系数为1.000;香附烯酮和α-香附酮的精密度、稳定性(24 h)、重复性实验的RSD均小于2.0%(n=6),香附烯酮平均回收率为101.9%,RSD为1.8%,α-香附酮平均回收率为102.7%,RSD为1.6%。该检测方法专属性好,准确度高,简单易行,能够为舒筋活血片的质量控制及评价提供技术支撑。

竹节香附素A联用地西他滨对肝癌细胞QGY-7703甲基化及凋亡研究

目的探讨竹节香附素A(Raddeanin A,RDA)联用地西他滨(Decitabine,DEC)对人肝癌细胞QGY-7703侵袭迁移、甲基化及凋亡的影响。方法以肝癌细胞QGY-7703为研究对象,RDA和DEC处理细胞,CCK-8法检测细胞毒性;transwell实验检测细胞侵袭、迁移能力;DNA甲基化定量试剂盒(亚硫酸氢盐法)测定DNA甲基化水平;RT-PCR检测DNMT1、DNMT3a、DNMT3b mRNA表达情况;Western-blot检测DNMT1、DNMT3a、DNMT3b蛋白表达情况;AnnexinV-FITC染色法检测细胞凋亡情况。结果RDA和DEC对QGY-770348 h的IC 50为5.74μmol/L、4.91μmol/L;RDA、DEC、联合给药对QGY-7703的侵袭抑制率为44.83%、55.17%、84.48%,迁移抑制率为38.45%、58.17%、82.69%;5-甲基胞嘧啶含量空白组为14.78±0.85、RDA组为9.60±0.29、DEC组为4.2±0.02、联合给药组为3.26±0.21;与空白组比较,DEC组能够降低DNMT1、DNMT3a、DNMT3b mRNA和蛋白的表达(P<0.01,P<0.05),RDA能降低DNMT1、DNMT3a、DNMT3b mRNA和DNMT3a、DNMT3b蛋白的表达(P<0.01,P<0.05),与EDC组比较,联合给药组DNMT3a mRNA表达水平和DNMT3a、DNMT3b蛋白表达水平显著降低(P<0.01,P<0.05)。结论RDA与DEC联合用药可以降低QGY-7703细胞侵袭、迁移能力,通过抑制DNA甲基转移酶来降低DNA甲基化水平,并促进细胞的凋亡。

汶香附,带你走出情绪“黑洞”

在现代社会,随着生活节奏的加快和工作压力的增大,越来越多的人面临着情绪问题的困扰。抑郁症作为一种常见的精神障碍,不仅影响着患者的心理健康,还可能导致生理功能的紊乱。目前,临床多使用三环类抗抑郁药物(TCA)、5-羟色胺再摄取抑制剂等对抑郁症患者进行治疗。虽然这些药物显示出疗效,但也伴随着显著的副作用和药物依赖性等挑战。我国传统医学对“郁证”有着较丰富的认识,多使用具有多个靶点、作用温和且不良反应较少的中药进行治疗。其中,汶香附作为一种传统中药材,以其疏肝理气、解郁安神的功效,在治疗抑郁症方面发挥着重要作用。

香附的化学成分及其体外抗炎活性研究

目的研究香附Cyperi Rhizoma的化学成分及其抗炎活性。方法利用硅胶、Sephadex LH-20和制备型正相HPLC对香附95%乙醇提取物进行分离纯化,根据理化性质及波谱数据鉴定所得化合物的结构。以脂多糖诱导的小鼠小胶质细胞BV-2炎症模型评价其抗炎活性。结果从香附中分离得到15个化合物,鉴定为:24-methylenecycloartenone(1)、cyperenal(2)、patchoulenone(3)、4,5,6,7,8,8a-六氢-3,4,8,8-四甲基-1H-3a,7-亚甲基甘菊环-4-醇甲酸酯(4)、4-烯-广藿香醇(5)、cyperenol(6)、cyperolactone(7)、(-)-caryophyllene oxide(8)、humulene epoxideⅡ(9)、humulene diepoxide A(10)、α-tocopherol(11)、litseachromolaevane A(12)、hyperhubein G(13)、nootkatone(14)和mustakone(15)。化合物4和11可显著抑制NO的释放,抑制率分别为(49.17±0.01)%和(51.91±0.05)%。结论本文首次使用制备型正相HPLC技术对香附石油醚层进行系统分离,化合物2、6、9~11和13为首次从莎草科植物中分离得到,化合物12为首次从莎草属植物中分离得到,化合物4、5和7为首次从香附中分离得到。化合物4和11有较强的体外抗炎活性。

香附栽培技术与田间管理——以山东潍坊地区为例

近年来,我国中草药市场得到了长足的发展。香附作为一种能够疏通肝脏气机、治疗郁病、缓解痛经的中草药,市场前景极为广阔。但部分地区由于缺乏科学合理的香附种植方式,香附产量、品质均无法达到预期。鉴于此,该文以山东潍坊地区为例,分析了香附栽培技术要点,同时结合国家、地方相关标准,探讨了除草、施肥、病虫害管理、收获等田间管理措施,希望能够促进香附栽培技术的推广。

香附饮片与4种醋制香附饮片的快速鉴别

目的建立香附饮片与4种醋制香附饮片的傅里叶变换红外光谱图,快速鉴别香附饮片与4种醋制香附饮片;建立香附饮片与4种醋制香附饮片的高效液相指纹图谱,并测定α-香附酮、香附烯酮、5-羟甲基糠醛(5-HMF)、对香豆酸、阿魏酸、木犀草素的含量。方法建立25批香附样品的红外光谱图,利用OMNIC 9.2软件分析其平均红外光谱间的差异,采用Spectrum for Window 3.02软件标定共有峰,计算相对峰高;采用《中药色谱指纹图谱相似度评价系统(2012版)》建立香附饮片与4种醋制香附饮片的高效液相指纹图谱,进行相似度评价,确定共有峰个数;采用SIMCA 14.1软件进行聚类分析、主成分分析、正交偏最小二乘法-判别分析,判断红外光谱图结果与高效液相指纹图谱结果是否相互验证;测定α-香附酮、香附烯酮、5-HMF、对香豆酸、阿魏酸、木犀草素的含量。结果25批香附样品的红外光谱图的相关系数为0.9347~0.9829,共标定16个共有峰,1500~1300 cm^(-1)波段处差异明显。正态分布分析结果显示,2928、1649、995 cm^(-1)波段处可分别将醋煮品、醋炙品、醋蒸品与饮片区分;高效液相指纹图谱结果显示25批样品共有21个共有峰,相似度均大于0.9。指认出3号峰为5-HMF,7号峰为对香豆酸,8号峰为阿魏酸,14号峰为木犀草素,19号峰为香附烯酮,21号峰为α-香附酮;红外光谱图与高效液相指纹图谱聚类分析结果、主成分分析结果与正交偏最小二乘法-判别分析结果一致,均可聚为五类,即能够相互验证;5-HMF的含量经炮制后均有增加。对香豆酸、阿魏酸、木犀草素在饮片中含量最低,经炮制后均有增加。香附烯酮经醋炙、醋煮、醋蒸、醋煮蒸后均有减少,在香附饮片中含量最高。α-香附酮经醋炙后含量略有增加,经醋煮、醋蒸、醋煮蒸后均减少。结论香附饮片与4种醋制香附饮片的红外光谱图之间存在明显差异,能够快速鉴别香附饮片与4种醋制香附饮片;所建立的高效液相指纹图谱与含量测定方法操作简单、准确。

HPLC-UV法测定舒肝和胃丸中α-香附酮和香附烯酮的含量

目的:建立舒肝和胃丸中α-香附酮和香附烯酮的高效液相色谱(HPLC-UV)含量测定法,为该制剂中醋香附含量的质量控制提供依据。方法:对舒肝和胃丸中α-香附酮和香附烯酮同时进行含量测定。采用Agilent ZORBAX SB-C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),流动相为甲醇和水(65∶35),流速1.0 mL·min^(-1),检测波长254 nm,柱温30℃,进样量5μL。结果:采用该方法得到的舒肝和胃丸色谱图中,α-香附酮和香附烯酮色谱峰与相邻色谱峰分离效果较好,满足含量测定的要求;指标性成分α-香附酮、香附烯酮分别在0.08036~0.80360μg、0.2112~2.1120μg范围内线性关系良好,相关系数均为1.000;平均加标回收率分别为102.0%(RSD:1.6%,n=6),102.4%(RSD:2.0%,n=6);稳定性(24 h)、重复性、精密度良好。结论:本研究建立的α-香附酮和香附烯酮HPLC-UV含量测定方法简单、快捷、准确,可为舒肝和胃丸中醋香附含量的控制提供依据。

竹节香附素A通过抑制程序性细胞死亡配体1调节前列腺癌小鼠肿瘤免疫并发挥抗肿瘤作用

目的:探讨竹节香附素A(RA)对前列腺癌移植瘤模型小鼠的治疗效果及潜在作用机制。方法:(1)采用Western blot实验检测不同浓度RA(0、0.5、1、2和4μmol/L)对前列腺癌细胞系PC-3、DU145和RM-1中程序性细胞死亡配体1(PD-L1)蛋白表达的影响。(2)将30只C57BL/6J小鼠随机分为空白对照组、低剂量RA组和高剂量RA组,每组10只。低、高剂量RA组小鼠分别腹腔注射2和4 mg/kg RA,连续给药24 d。记录小鼠体重,统计各组小鼠肿瘤体积和瘤重;采用免疫组化实验检测小鼠肿瘤组织中Ki67和PD-L1蛋白表达;通过流式细胞术检测肿瘤组织中CD8^(+)T细胞、CD4^(+)T细胞和调节性T细胞(Treg)比例,以及干扰素γ(IFN-γ)和颗粒酶B(GzmB)水平。结果:(1)RA处理显著降低PC-3、DU145和RM-1细胞中PD-L1表达水平(P<0.05或P<0.01)。(2)在体内实验中,RA处理组小鼠的肿瘤体积和重量显著减小,同时肿瘤组织中Ki67和PD-L1的表达水平显著降低(P<0.05或P<0.01)。此外,RA处理显著增加小鼠肿瘤内CD8^(+)T细胞和CD4^(+)T细胞的比例,提高IFN-γ和GzmB水平,同时减少活化的Treg数量(P<0.05或P<0.01)。结论:RA对前列腺癌小鼠肿瘤生长具有较好抑制作用,其机制可能与抑制PD-L1表达、增加肿瘤浸润T细胞及抑制Treg有关。

药对香附-干姜与其单味药挥发油成分的比较

分析比较药对香附-干姜及其单味药挥发油成分,应用气相色谱-质谱联用(GC-MS)技术对挥发油成分进行分析。从单味药香附、干姜及其药对分别鉴定出45,42,62种成分。药物配伍后,药对和单味药干姜共有8种化合物,占药对含量的13.48%,药对和单味药香附共有1种化合物,占药对含量的0.73%。药对香附和干姜配伍后与其单味药挥发油化学成分相比有明显变化。

不同醋制方法对香附挥发性成分的影响

(目的)探讨了醋炙和醋蒸两种醋制方法对香附挥发油得率及化学成分的影响。(方法)采用水蒸气蒸馏法分别提取不同样品中的挥发油,并计算各自的提取率;采用气相色谱-质谱联用法(GC-MS)鉴定并比较分析样品中香附挥发油的化学成分;通过NIST 14谱库对质谱图进行相似性检索,用峰面积归一化法计算各成分的相对百分含量,采用加权平均法对挥发油得率及相对百分含量进行综合评价。(结果)生品挥发油的提取率为1.18%,醋炙品8 h、16 h、24 h挥发油的提取率分别为1.15%、1.12%、1.08%,醋蒸品8 h、16 h、24 h挥发油的提取率分别为1.14%、1.03%、1.07%。从生品和醋制样品中共鉴别出34种化学成分,其中生品19种,占挥发油总量的88.66%;醋炙品8 h、16 h、24 h分别为13种、22种、21种,分别占挥发油总量的92.42%、93.24%、90.32%;醋蒸品8 h、16 h、24 h分别为17种、16种、20种,分别占挥发油总量的94.86%、87.86%、95.35%,共有化学成分7种,均以香附烯酮为主成分。从综合评分来看,得分从高到低依次为67.07(醋蒸品24 h)>66.74(醋蒸品8 h)>65.60(醋炙品16 h)>65.04(醋炙品8 h)>63.55(醋炙品24 h)>62.42(生品)>61.81(醋蒸品16 h)。(结论)醋炙品和醋蒸品挥发油提取率较生品低,而化学成分相对含量整体比生品高,综合评价醋蒸品24 h得分最高,可能由于醋制过程中挥发性成分受温度、时间等因素的影响流失、化学结构与成分发生改变所致,因此,在实际生产中既要关注药材成分的性质又要根据需求进行选择合适的闷制时间和炮制方法。

香附四物汤联合米非司酮对痛经患者凝血及疼痛介质水平的影响

目的探讨香附四物汤联合米非司酮对痛经患者的效果,并分析其对凝血和疼痛介质水平的影响。方法按照随机数字表法将2020年1月至2023年7月天水市秦州区妇幼保健院收治的100例痛经患者分为对照组(给予米非司酮进行治疗)与观察组(给予香附四物汤联合米非司酮进行治疗),各50例。比较两组患者临床疗效、疼痛介质因子[前列腺素F_(2α)(PGF_(2α))、前列腺素E_(2)(PGE_(2))和β-内啡肽(β-EP)]水平、凝血功能指标水平和不良反应发生情况。结果与对照组比较,观察组患者的整体疗效和总有效率更优(均P<0.05)。治疗后,两组患者PGF_(2α)水平下降,PGE_(2)、β-EP水平升高,且观察组PGF_(2α)水平低于对照组,PGE_(2)、β-EP水平均高于对照组(均P<0.05)。治疗后,两组患者血小板计数(PLT)、纤维蛋白原(FIB)水平均降低,凝血酶原时间(PT)和活化部分凝血活酶时间(APTT)均延长,且观察组PLT、FIB水平均低于对照组,PT、APTT均长于对照组(均P<0.05)。两组患者不良反应总发生率比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论香附四物汤联合米非司酮治疗痛经的效果显著,可降低疼痛介质因子水平,改善凝血功能,安全性理想。

香附、莱菔子热奄包作用于胃肠起搏点在无痛肠镜检查后腹胀中的疗效观察

目的探讨香附、莱菔子热奄包作用于胃肠起搏点在无痛肠镜检查后腹胀中的作用。方法选取2021年4月至2023年4月于九江市中医医院行无痛肠镜检查后伴有腹胀的120例患者作为研究对象,按照随机数字表法将其分为对照组(60例)和观察组(60例)。对照组患者采取常规护理,观察组患者在常规护理基础上加用香附、莱菔子热奄包干预。比较两组腹胀程度、症状恢复情况、舒适度以及护理满意度。结果干预前,两组患者腹胀程度评分、舒适度评分比较,差异无统计学意义(P>0.05);干预后,观察组腹胀程度评分低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);观察组初次肛门排气时间、腹胀缓解时间均短于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);干预后,观察组Kolcaba的舒适状况量表(GCQ)中社会文化、心理舒适等维度评分均高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);观察组患者满意度中专业技能、护理态度、基本介绍、应答服务、护理效果、需求满足以及满意度总分均高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论在无痛肠镜检查后腹胀患者中采取香附、莱菔子热奄包干预,可缓解患者腹胀程度,加快其症状恢复,有助于提升患者舒适度,患者对护理方式更加满意。

高效液相色谱法测定香附中α-香附酮的含量

目的通过高效液相色谱法(High Performance Liquid Chromatography,HPLC)探索香附中α-香附酮的提取方式和含量的测定方法,达到方法准确可靠简便易操作的目的。方法采用高效液相色谱法。色谱柱为Agilent Eclipse Plus,十八烷基硅烷键合硅胶色谱柱,150×4.6 mm,5μm,流动相为:甲醇—水(70:30),紫外-可见分光检测器;流速为1.0 mL/min;检测波长为240 nm;柱温为35℃。结果香附在0.02314-0.46287 mg/mL线性范围内呈良好线性关系,R2=1,平均回收率99.84%,RSD(Relative Standard Deviation)=0.09%。结论该方法操作简便,灵敏度高,重复性好,准确、可靠,可用于测定香附α-香附酮的含量,并有效控制香附的质量。

元胡香附敷脐治气滞血淤痛经

元胡15克,香附10克。上药一同研成细粉,用水调成糊状,外敷肚脐处,用医用胶布固定。每日2次,每次贴敷30分钟,在月经前3天开始使用,连用3天。下次月经来潮按此法使用,连用3个周期。一般用1个周期即可减轻症状。

香附黄酮的体外抗氧化活性研究

[目的]对香附黄酮的抗氧化作用进行研究。[方法]以浓度95%乙醇为溶剂,水浴回流提取香附中的黄酮,然后采用比色法测定香附黄酮对DPPH.、.OH和O2-.3种自由基的清除作用以及还原能力。[结果]香附黄酮对3种自由基都有明显的清除作用,清除能力大小顺序为DPPH.>.OH>O2-.;清除率与浓度存在明显的量效关系,当黄酮浓度为0.4 mg/L时,其对O2-.的清除率为25.5%,DPPH.的为67.0%,.OH的为28.5%;还原Fe3+能力随黄酮的浓度增加而增强。[结论]香附黄酮具有较强的抗氧化活性。

HPLC法同时测定不同产地香附药材中香附烯酮、圆柚酮和α-香附酮

目的建立HPLC法同时定量测定香附中3种特征性成分香附烯酮、圆柚酮和α-香附酮,并对不同产地香附样品进行测定。方法香附甲醇提取液的分析采用Phenomenex C18色谱柱（4.6mm×250mm,5μm）,流动相为甲醇-水（68∶32）,检测波长为242nm,体积流量为1.0mL/min,柱温为30℃。结果香附烯酮、圆柚酮和α-香附酮进样量分别在0.260-0.912μg、0.028-0.098μg、0.082-0.286μg内呈现良好的线性关系,平均回收率分别为98.3%（RSD为1.5%）、97.9%（RSD为2.0%）、99.1%（RSD为1.4%）。海南、广东、广西、四川省的11批香附中香附烯酮为1.52-4.80mg/g、圆柚酮为0.04-0.20 mg/g、α-香附酮为0.70-1.99 mg/g。结论同一产地香附中3种成分含有量均呈现香附烯酮〉α-香附酮〉圆柚酮的规律。

不同炮制方法对香附中香附烯酮和α-香附酮的影响

基于高效液相法考察不同炮制方法对香附中香附烯酮和α-香附酮的含量的变化规律。取不同产地20批的香附,经醋制、四制和酒制炮制后;采用高效液相色谱法(HPLC)测定香附烯酮和α-香附酮的含量;利用单因素方差分析法比较香附不同炮制品的香附烯酮和α-香附酮的含量,采用Spearman相关分析探究香附烯酮和α-香附酮之间的相关性。在不同香附炮制品中,生香附和四制香附之间的香附烯酮含量差异具有统计学意义,生品香附烯酮含量高于四制香附;香附烯酮和α-香附酮含量呈负相关(r=-0.231,P<0.05)。不同产地香附中2种成分含量差异较大,香附烯酮含量经过醋制,酒制和四制后较生香附均下降,α-香附酮含量在醋制中含量较生香附降低,经过酒制和四制后有所升高。且随着香附中香附烯酮含量的升高,α-香附酮含量有一定程度的降低,这对香附不同炮制品的质量评价标准和炮制工艺的选择提供参考。

鲜香附挥发油镇痛活性及其GC-MS分析

目的:考察鲜香附挥发油的镇痛活性,并分析其化学成分。方法:挥发油提取采用水蒸气蒸馏;镇痛活性采用小鼠醋酸扭体法;成分分析采用GC-MS法。结果:鲜香附挥发油含量达0.4%;挥发油(0.1 g/kg)能够显著减少醋酸所致小鼠扭体次数;GC-MS方法鉴定出54个化学成分,占总挥发油的85.1%,其中主要含香附子烯(41.03%)、氧化石竹烯(5.32%)、α-芹子烯(4.37%)、α-可巴烯(4.36%)、naphthalene,6-isoproenyl-4,8a-dimethyl-1,2,3,5,6,7,8,8a-octahydro-(3.80%)、α-香附酮(3.11%)。结论:鲜香附挥发油具有良好镇痛效果,挥发油化学结构多样,相对含量高于1%的峰占总挥发油的66.4%,其中,香附子烯相对百分含量最高。