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马兜铃酸诱导小鼠淋巴瘤细胞突变的机制
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作者 胡洁 陈灵 《毒理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第2期81-83,共3页
目的为研究马兜铃酸(Aristolochic Acid,AA)的致突变机制提供实验依据。方法挑取对照组和100μg/ml AA处理小鼠淋巴瘤L5178Y tk+/--3.7.2-细胞得到的胸苷激酶(Thymidine kinase,tk)基因突变克隆,提取DNA,用基于PCR的杂合性缺失(Loss of ... 目的为研究马兜铃酸(Aristolochic Acid,AA)的致突变机制提供实验依据。方法挑取对照组和100μg/ml AA处理小鼠淋巴瘤L5178Y tk+/--3.7.2-细胞得到的胸苷激酶(Thymidine kinase,tk)基因突变克隆,提取DNA,用基于PCR的杂合性缺失(Loss of heterozygosity,LOH)的分析方法检测含功能性tk基因(tk+)的11号染色体(11 b)上的断裂情况。结果100μg/ml AA诱导的突变体中tk+基因缺失率为99.01%,其中所有的小克隆(Small Clone,SC)都失去了tk+基因,而大克隆(Large Clone,LC)的LOH发生率为96.6%。进一步分析11号染色体上的分布的3个微卫星位点(D11Mit42,D11Mit29,D11Mit74)的LOH状况如下:6 cm长度的DNA断裂频率为76%,38 cm长度DNA即超过染色体一半长度的DNA断裂频率为34%,整条染色体的缺失率为16%。另外LC在3个微卫星位点(D11Mit42,D11Mit29,D11Mit74)上的LOH发生率分别是:88%,60%和24%;SC的分别为:64%,8%和8%。结论AA是一个强染色体断裂剂。在11b染色体上LC的染色体断裂情况比LC严重。 展开更多
关键词 马兜铃(aa) 小鼠淋巴瘤细胞试验(MLA) 杂合性缺失(LOH)
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马兜铃酸诱导小鼠淋巴瘤细胞tk基因突变的研究
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作者 徐斌 常艳 陈灵 《上海交通大学学报(农业科学版)》 2007年第2期99-104,共6页
马兜铃酸广泛存在于中草药和中成药中,该化合物已被证实可导致人类肿瘤。研究通过体外小鼠淋巴瘤细胞致突变试验来检测马兜铃酸(AA)的致突变率和药剂剂量的相关性,对试验具体所采用的96孔板法进行了详细的论述,并进而希望能够建立可以... 马兜铃酸广泛存在于中草药和中成药中,该化合物已被证实可导致人类肿瘤。研究通过体外小鼠淋巴瘤细胞致突变试验来检测马兜铃酸(AA)的致突变率和药剂剂量的相关性,对试验具体所采用的96孔板法进行了详细的论述,并进而希望能够建立可以用于各种中草药遗传毒性检测的方法。经过试验证实了小鼠淋巴瘤细胞tk基因突变试验方法可以有效地检测马兜铃酸的细胞毒性和致突变性。并且随着AA剂量的增加,L5178Y细胞的相对存活率和悬浮生长率均明显降低。表明AA对L5178Y细胞具有明显的细胞毒性,并可以诱导tk基因的突变。 展开更多
关键词 马兜铃(aa) 小鼠淋巴瘤细胞试验(MLA) 突变频率(MF)
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含马兜铃酸中药单方马兜铃及复方龙胆泻肝丸的体外遗传毒性研究 被引量:5
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作者 马康目 陈灵 《复旦学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2007年第6期992-995,1000,共5页
采用Ames试验和小鼠淋巴瘤致突变试验(MLA)来检测单方马兜铃及复方龙胆泻肝丸的遗传毒性,评价其相关细胞毒性和复方减毒效果;为进一步建立综合的中药遗传毒性测试平台提供试验依据.分别通过对含马兜铃酸(Aristolochic Acid,AA)浓度为20... 采用Ames试验和小鼠淋巴瘤致突变试验(MLA)来检测单方马兜铃及复方龙胆泻肝丸的遗传毒性,评价其相关细胞毒性和复方减毒效果;为进一步建立综合的中药遗传毒性测试平台提供试验依据.分别通过对含马兜铃酸(Aristolochic Acid,AA)浓度为20和40μg/mL,加S9或不加S9的条件下的两味中药的Ames法检测;以及采用MLA96孔微孔板接种法分别对单复方含马兜铃酸浓度为5μg/mL的L5178Y/tk+/--3.7.2c细胞进行染毒,并进行接种效率(PE),相对总增长率(RTG)和突变频率(MF)的测定.结果表明单方马兜铃具有细胞毒性且致突变性较强,以诱导大范围DNA损伤为主;而复方龙胆泻肝丸具有较明显的减毒效果;MLA和Ames试验组合适用于体外中药遗传毒理检测. 展开更多
关键词 马兜铃(aa) 单方马兜铃(FA) 复方龙胆泻肝丸(LDXGW) AMES试验 MLA
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