UPLC-MS/MS法检测正天胶囊中马兜铃酸类成分

目的建立测定正天胶囊中马兜铃酸类成分的分析方法。方法采用Dikma Endeavorsil C18(1.8μm,2.1 mm×100 mm)色谱柱,以乙腈和0.1%甲酸-5 mmol甲酸铵溶液为流动相,梯度洗脱,电喷雾正离子(ESI+),多反应监测(MRM),进样量为5μL,测定正天胶囊中马兜铃酸Ⅰ、马兜铃酸Ⅱ、马兜铃酸Ⅲa、马兜铃酸Ⅳa、马兜铃内酰胺Ⅰ的质量分数。结果10批样品中检出2种马兜铃酸类物质,质量分数分别为马兜铃酸Ⅳa 0.15~1.03 mg/kg、马兜铃内酰胺Ⅰ0.40~1.51 mg/kg。结论本研究建立的正天胶囊中马兜铃酸质量分数测定方法,可为正天胶囊及含马兜铃酸中药制剂的临床应用和安全监管提供参考。

一测多评法测定马兜铃中4个马兜铃酸类成分含量

目的:建立一测多评法测定马兜铃中4个马兜铃酸类成分的含量。方法:以马兜铃酸A为内参物,得到马兜铃酸C、马兜铃酸D和马兜铃酸B与马兜铃酸A的相对校正因子,通过马兜铃酸A的含量和校正因子计算其他3个成分的含量。结果:马兜铃中马兜铃酸类成分间的相对校正因子分别为f马兜铃酸C/马兜铃酸A=0.8389,f马兜铃酸D/马兜铃酸A=0.7822,f马兜铃酸B/马兜铃酸A=0.7782。一测多评法与外标法测定结果无显著差异。结论:所建立的一测多评法准确可靠,可用于马兜铃中4个马兜铃酸类成分的同时分析。

HPLC-MS用于中药马兜铃中6种马兜铃酸类成分的检测

目的建立HPLCMS同时检测6种马兜铃酸类成分的方法。方法采用高效液相质谱联用法检测,色谱柱为DiamonsilC18柱(250mm×4.6mm,5μm);乙腈水系统,分别含0.1%的乙酸和0.1%的四氢呋喃,采用梯度洗脱程序;流速:1.0ml/min,采用DAD检测,波长范围190～400nm。质谱采用ESI负离子模式和选择性离子扫描(SIM)。结果马兜铃酸A、B、C、D、7OH马兜铃酸A和去硝基马兜铃酸A等6种成分可在1h内达到分离并得到同时检测。结论该法可用于含有或可疑含有马兜铃酸类有毒成分中药材及制剂的检测,方法灵敏,快速,专属性较强。

超高效液相-串联质谱法测定镇脑宁胶囊中7种马兜铃酸类成分

目的 建立镇脑宁胶囊中马兜铃酸类成分的超高效液相-串联质谱联用检测分析方法。方法 采用Phenomemex Kinetex (2.1 mm×100 mm, 2.6μm)色谱柱,以甲醇-体积分数0.1%甲酸溶液(含1mmol·L-1乙酸铵)为流动相梯度洗脱,流速0.3 mL·min-1,以正离子多反应监测模式,建立同时测定镇脑宁胶囊中马兜铃酸Ⅲa、7-羟基马兜铃酸Ⅰ、马兜铃酸Ⅳa、马兜铃酸Ⅱ、马兜铃内酰胺BⅡ、马兜铃内酰胺Ⅰ、马兜铃酸Ⅰ共7种马兜铃酸类成分的液质联用检测方法。结果 马兜铃酸Ⅲa、7-羟基马兜铃酸Ⅰ、马兜铃酸Ⅳa、马兜铃酸Ⅱ、马兜铃内酰胺BⅡ、马兜铃内酰胺Ⅰ、马兜铃酸Ⅰ分别在1.241~1 240.572、1.034~1 034.056、2.109~2 108.709、1.070~1 070.378、1.064~1 064.000、2.154~2 154.022、1.086~1 085.922 ng·mL-1内线性关系良好;平均加样回收率分别为101.8%(RSD1.84%)、101.9%(RSD 2.67%)、102.2%(RSD 2.74%)、102.1%(RSD 2.13%)、101.8%(RSD 2.60%)、100.7%(RSD 0.96%)、104.1%(RSD 6.15%)。10批样品均检出马兜铃酸Ⅳa、马兜铃内酰胺Ⅰ和马兜铃酸Ⅰ等马兜铃酸类成分,含量范围分别为3.875~6.913,2.984~6.072及0.350~1.719 ng·g-1,而马兜铃酸Ⅲa、7-羟基马兜铃酸Ⅰ、马兜铃酸Ⅱ和马兜铃内酰胺BⅡ均未检出。结论 建立的同时测定7种马兜铃酸类成分的液质联用方法准确、可靠。镇脑宁胶囊中检出马兜铃酸Ⅳa、马兜铃内酰胺Ⅰ和马兜铃酸Ⅰ。其中,马兜铃酸Ⅳa、马兜铃内酰胺Ⅰ毒性较低或无明显毒性,而真正可能有毒性的是含硝基基团的马兜铃酸Ⅰ,因部分样品马兜铃酸Ⅰ含量超出限度,提示该制剂中需严格控制马兜铃酸Ⅰ的含量。

UHPLC-MS/MS测定天仙藤中5种马兜铃酸类成分

目的建立天仙藤中马兜铃酸类成分的液质联用检测分析方法。方法采用Agilent SB-C_(18)(2.1 mm×50 mm,1.8μm)色谱柱,以乙腈-体积分数0.1%-甲酸溶液为流动相梯度洗脱,流速0.3 mL·min^(-1),以多反应监测模式,建立了同时测定天仙藤中马兜铃内酰胺AⅡ(ALAⅡ)、马兜铃酸Ⅳa(AAⅣa)、马兜铃内酰胺FⅠ(ALFⅠ)、马兜铃内酰胺Ⅰ(ALⅠ)和马兜铃酸Ⅰ(AAⅠ)共5种马兜铃酸类成分的液质联用检测方法。结果ALAⅡ、AAⅣa、ALFⅠ、ALⅠ和AAⅠ分别在1.12~22.34、258.60~10344.10、0.98~19.52、11.64~232.85、90.70~2267.41 ng·mL^(-1)内线性关系良好;平均加样回收率分别为100.9%(相对标准偏差RSD 4.53%)、105.2%(RSD 4.83%)、102.6%(RSD 8.54%)、104.6%(RSD 3.64%)、114.6%(RSD 3.50%)。一共9批样品,其中有4批均检出上述5种马兜铃酸类成分;4批样品均检出除ALFⅠ外的其余4种马兜铃酸类成分;1批样品未检出AAI,检出其余4种马兜铃酸类成分。结论上述建立的同时测定2种马兜铃酸和3种马兜铃内酰胺成分的液质联用方法经验证准确、可靠,能够用于马兜铃酸类成分的检测与分析。

朱砂莲中马兜铃酸类成分的UPLC-QTOF-MS/MS定性与定量分析

目的:建立朱砂莲块根中马兜铃酸类成分的定性与定量测定方法。方法:采用超高效液相色谱-四极杆飞行时间串联质谱法(UPLC-QTOF-MS/MS)对朱砂莲块根进行定性与定量分析,检测条件ACQUITY UPLC-BEH C18色谱柱(2.1 mm×100 mm,1.7μm),以0.1%甲酸水溶液(A)-乙腈(B)为流动相梯度洗脱(0~1 min,10%B;1~9 min,10%~30%B;9~11 min,30%~50%B;11~15 min,50%~90%B),流速0.45 mL·min^(-1),柱温35℃,检测波长250 nm;电喷雾电离源(ESI),正离子模式检测。同时,建立了21批朱砂莲样品中马兜铃酸类成分的UPLC指纹图谱,根据指纹图谱分析结果,测定了不同产地和不同采收期朱砂莲样品中5个马兜铃酸类成分的含量。结果:结合文献信息和质谱数据,一共鉴定了朱砂莲中17个马兜铃酸类化合物,包括8个马兜铃酸,7个马兜铃内酰胺和2个4,5-二羰基阿朴菲类生物碱。UPLC指纹图谱中指认了10个共有峰,分别为朱砂莲苷,马兜铃内酰胺Ⅰa-N-β-D-葡萄糖苷,马兜铃酸Ⅳa-O-β-D-葡萄糖苷,马兜铃内酰胺Ⅲa-N-β-D-葡萄糖苷,马兜铃内酰胺Ⅰ-N-β-D-葡萄糖苷,马兜铃酸C,马兜铃酸D,马兜铃酸Ⅱ,马兜铃内酰胺Ⅰ,马兜铃酸Ⅰ。定量分析结果显示,马兜铃酸Ⅰ,Ⅱ,C,D及马兜铃内酰胺Ⅰ在线性范围内呈良好的线性关系,精密度、稳定性、重复性试验的RSD均<3.0%,加样回收率范围在97.06%~101.84%(RSD<3.0%)。21批朱砂莲中马兜铃酸Ⅰ,马兜铃酸Ⅱ,马兜铃酸C,马兜铃酸D,马兜铃内酰胺Ⅰ的质量分数范围分别为0.938 6~3.567 5,1.377 6~3.688 1,0.056 3~0.527 7,0.108 8~0.305 5,0.021 0~0.081 7 mg·g-1。结论:朱砂莲中马兜铃酸类成分的含量存在一定差异,马兜铃酸Ⅰ和Ⅱ的含量要高于其他马兜铃酸类成分。建立的分析方法快速简便、准确可靠,可为朱砂莲的质量控制与评价提供参考。

9种含马兜铃酸类毒性物质中药材中马兜铃酸类成分的定性与定量分析

探究并明确含马兜铃酸类毒性物质药材中马兜铃酸类成分的种类、数量及含量,以进一步确保此类药材及其相关产品的使用安全。本研究选取了朱砂莲、杜衡、关木通、马兜铃、青木香、天仙藤、寻骨风、广防己和细辛9种含马兜铃酸类毒性物质的中药材,采用高效液相色谱-四极杆飞行时间质谱仪(HPLC-Q-TOF-MS)结合高效液相色谱-二极管阵列检测定性分析9种药材中的马兜铃酸类成分。选用Agilent ZORBAX SB-Aq色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm)分离,以乙腈-0.2%乙酸水为流动相,梯度洗脱,质谱使用ESI正离子模式,分析马兜铃酸Ⅰ、Ⅱ、Ⅲa、Ⅳa、Ⅶa,马兜铃内酰胺Ⅰ、Ⅱ7个对照品的质谱电离规律,并利用此规律对9种药材样品中筛选出的紫外光谱图与7个对照品光谱相似的成分进行结构解析。应用高效液相色谱紫外检测法(HPLC-UV)对鉴定出的马兜铃酸类成分采用外标法进行定量分析,检测波长为254 nm。结果显示:从9种药材中共筛选和鉴定出22个马兜铃酸类成分,包括11个马兜铃酸和11个马兜铃内酰胺。马兜铃酸类成分的种类在朱砂莲和青木香药材中最多,有15种,其次为马兜铃和关木通,为14种,成分的总量在朱砂莲和关木通中最高,在8.91~13.40 mg·g^(-1)之间;在杜衡中最少,只有2种成分,总量在0.10 mg·g^(-1)以下。本研究系统性地筛选和明确了含马兜铃酸类毒性物质中药材中马兜铃酸类成分的种类、数量及含量,为后续此类药材的网络毒性分析和体外毒性实验,以及其中马兜铃酸类成分在质量标准中的安全性控制提供了有价值的依据。

配伍减低关木通中马兜铃酸A溶出量的研究

目的通过反相高效液相色谱法观察传统复方导赤散及其拆方与关木通药液中马兜铃酸A的溶出量,探讨复方配伍与马兜铃酸A溶出量的相关性。方法以C18柱(250 mm×4.6 mm,5μm)为色谱柱,以甲醇-水-冰乙酸(67∶32∶1)为流动相,检测波长315 nm。结果复方药液中马兜铃酸A溶出量明显低于单味关木通药液41%以上;而含有关木通+竹叶各组马兜铃酸A的溶出量均低,其中关木通+竹叶组较单味药关木通降低了62%。结论传统复方导赤散配伍形式确有减低其马兜铃酸A溶出量的作用,且竹叶配伍作用最为显著。

论含马兜铃酸中药的风险评估、安全用药与科学监管——马兜铃酸种类不同毒性各异,检控马兜铃酸Ⅰ/Ⅱ是关键

含马兜铃酸中药的安全性备受国内外关注,是临床使用和药品监管面临的重大难题。马兜铃酸类化合物(aristolo-chic acid analogues, AAAs)种类繁多,已报道的约有178种,按结构类型主要分为马兜铃酸类(aristolochic acids, AAs)和马兜铃内酰胺类(aristololactams, ALs)。AAAs种类不同,毒性差异很大:AA-Ⅰ的肾脏毒性和致癌性较强,AA-Ⅱ毒性低于AA-Ⅰ,而AA-Ⅳa、AA-Ⅰa无明显毒性。马兜铃科不同品种所含的AAAs种类和含量差异很大,有的品种如细辛、天仙藤所含的主要为无明显毒性的AAAs(如AA-Ⅳa)。复方制剂中AAAs含量与药味占比以及制备工艺等有关,有的制剂中AA-Ⅰ含量很低或测不出。因此笔者提出“AAAs种类不同,毒性各异,并非所有AAAs都有肾毒性和致癌性。含AAAs中药的毒性不应一概而论,检控AA-Ⅰ和AA-Ⅱ是关键”的学术观点。该文提出对含AAAs中药,不应因噎废食,应加强中药AAAs种类与含量的调研分析以及毒理学研究,制定AA-Ⅰ和AA-Ⅱ的限量标准,合理用药以及科学监管的建议。

鱼腥草中抑制环氧合酶的活性成分

鱼腥草 Houttuynia cordata Thunb.的地上部分用作传统中药,可清热解毒、消炎,尤其用于呼吸道疾病和皮肤病。曾报道从中分离出黄酮、脂肪酸、挥发油、苯甲酰胺、马兜铃酸类、4,5-二氧阿朴菲生物碱及吡啶衍生物。近年有报道鱼腥草蒸汽蒸馏液具有杀病毒作用。