111例马兜铃酸肾病调查分析

目的分析含有马兜铃酸成分的药物引起马兜铃酸肾病的临床特点和规律。方法回顾性研究111例服用含马兜铃酸成分的药物致肾损害患者的临床资料,分析马兜铃酸肾病的临床特点、服药及治疗方法等。结果111例患者中,女性多于男性(2.58∶1),大于50岁的101例(90.99%);年龄(63.70±11.67)岁;平均用药时间(8.08±6.94)年;涉及冠心苏合丸和龙胆泻肝丸共106例(95.50%);血肌酐升高108例,尿素氮升高106例,血红蛋白降低103例,多见低比重尿、轻中度蛋白尿和潜血;B超检查示肾脏均不同程度受损。肾脏病理活检为肾小管损害。多数患者起病隐匿,进展程度不一,与年龄、服药时间不成正比,临床上肾功能呈进行性损害,多数不可逆、预后较差。结论肾损害患者个体差异较大,肾损伤与服用马兜铃酸药物时间长短、剂量不平行;马兜铃酸肾病进展迅速,且停止服用含马兜铃酸药物后病情依然进展。加强药物警戒工作,实施早期的诊断和有效的干预,有助于减少马兜铃酸肾病的发生,延缓其发展。

急性马兜铃酸肾病小鼠C-Myc和Cyclin D1的表达变化

为探索急性马兜铃酸肾病(Aristolochic Acid Nephropathy, AAN)过程中细胞损伤后的再生与修复,本实验将40只KM小鼠分为5组:对照组、AAI暴露2、4、6、8天组,AAI组小鼠以5 mg/kg/2d AAI灌胃模拟AAN,使各组小鼠AAI累积剂量分别为5、10、15、20 mg/kg。分别于AAI暴露2、4、6、8天处死,观察肾脏病理学改变,并进行免疫组化染色观察C-myc和Cyclin D1蛋白表达情况。结果显示,与对照组相比,AAI组小鼠C-myc于第2天开始下降,第4天、6天、8天上升;Cyclin D1于AAI暴露第2天、4天下降,第6天、8天升高。本研究可得出结论暴露于AAI的小鼠C-myc和Cyclin D1蛋白表达随AAI累积剂量增加呈“先降后升”趋势。

倒心盾翅藤抗炎活性部位对马兜铃酸肾病大鼠肾脏的保护作用

目的筛选倒心盾翅藤抗炎活性成分,考察其对马兜铃酸肾病大鼠肾脏的保护作用。方法采用CCK-8法评价倒心盾翅藤各个极性部位对RAW2647细胞的毒性,确定适宜的给药剂量。利用脂多糖(LPS)诱导RAW2647细胞复制炎症模型,给予药物干预后,Griess法检测NO水平,筛选出具有抗炎活性的部位。采用灌胃关木通水提液的方法复制大鼠马兜铃酸肾病模型,给予不同剂量倒心盾翅藤提取物(相当于生药15、30、60 g/kg)干预后,BCA法检测大鼠24 h尿蛋白量,ELISA法检测血清白介素-6(IL-6)、白介素-1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平,HE染色观察肾组织病理变化,Western blot法检测肾组织p-p38 MAPK、p-NF-κB p65蛋白表达。结果倒心盾翅藤二氯甲烷部位在125~200μg/mL质量浓度范围内对RAW2647未产生细胞毒性。25、50、100μg/mL二氯甲烷部位能抑制LPS诱导RAW2647细胞释放NO(P<005,P<001)。倒心盾翅藤二氯甲烷部位各剂量组均降低马兜铃酸肾病大鼠24 h尿蛋白量和血清IL-6、IL-1β、TNF-α水平(P<001),减轻肾脏病变程度,下调p-p38、p-p65蛋白表达(P<001)。结论倒心盾翅藤二氯甲烷部位具有抗炎作用,可下调p38 MAPK/NF-κB p65信号通路蛋白表达,抑制马兜铃酸肾病过程中的炎症反应,对肾脏发挥保护作用。

肥大细胞与慢性马兜铃酸肾病间质纤维化关系的初步探讨

目的:初步探讨慢性马兜铃酸肾病(CAAN)患者肾间质肥大细胞浸润与间质纤维化之间关系。方法:随机选取CAAN16例、非CAAN的慢性间质性肾炎(CIN)16例及微小病变病(MCD)11例患者肾穿刺组织作为研究对象。采用免疫组织化学、免疫荧光双重染色方法观察类胰蛋白酶(Try)染色阳性的肥大细胞(MCs)、蛋白酶活化受体-2(PAR-2)、转化生长因子-β1(TGF-β1)及Ⅰ型胶原(ColⅠ)表达的变化。结果:与MCD对照组相比,CAAN、CIN组肾间质MCs数量、肾小管上皮细胞PAR-2和TGF-β1及肾间质ColⅠ表达面积显著增加,而CAAN与CIN两组间上述指标无统计学差异;MCs数量与肾小管上皮细胞PAR-2和TGF-β1表达面积及肾间质ColⅠ表达面积呈显著正相关,肾小管上皮细胞PAR-2与TGF-β1表达面积之间也呈显著正相关;MCs数量分别与肾间质PAR-2和TGF-β1阳性细胞数量呈显著正相关,PAR-2阳性细胞数量和TGF-β1阳性细胞数量间也呈显著正相关。肾间质中Try染色阳性细胞与PAR-2或TGF-β1染色阳性细胞存在部分重叠。结论:MCs可能参与CAAN细胞外基质蓄积,推理可能与活化PAR-2,增加TGF-β1表达相关。

益肾软坚散对慢性马兜铃酸肾病大鼠模型肾间质纤维化的保护作用

目的研究中药方剂益肾软坚散能否对慢性马兜铃酸肾病(CAAN)大鼠的肾损害起到保护作用。方法雄性SD大鼠18只分为3组,每组6只。模型组予关木通浸膏水溶液间断灌胃制成CAAN动物模型,中药组在造模基础上同步予益肾软坚散水煎剂灌胃,对照组予自来水灌胃。于1、4、8、12、16周分别检测大鼠体重、24h尿蛋白定量、尿β2微球蛋白、血清肌酐(SCr);并于第16周末处死大鼠,取肾脏组织,切片做Masson染色观察肾脏病理变化;用RT-PCR及免疫组化方法检测肾组织中转化生长因子-β1(TGF-β1)、结缔组织生长因子(CTGF)、纤溶酶原激活物抑制物-1(PAI-1)、金属蛋白酶组织抑制物-1(TIMP-1)和Ⅰ型胶原(ColⅠ)mRNA及蛋白质表达。结果与对照组比较,模型组大鼠24h尿蛋白定量、尿β2微球蛋白、SCr自造模后1周出现不同程度的上升(P<0.01,P<0.05);16周时肾间质纤维化面积显著扩大(P<0.01);肾组织内TGF-β1、CTGF、PAI-1、TIMP-1及ColⅠ各指标的mRNA及蛋白质表达均显著上调(P<0.01)。中药干预后,上述上调指标除24h尿蛋白定量外均被显著抑制(P<0.01,P<0.05)。结论益肾软坚散可抑制肾间质内细胞外基质蓄积,从而改善CAAN的肾间质纤维化及肾功能。

骨髓干细胞移植治疗慢性马兜铃酸肾病大鼠的实验研究

目的:观察骨髓源性干细胞能否向慢性马兜铃酸肾病大鼠肾脏细胞分化及移植后相关生化指标的动态变化。方法:制备雌性Wistar大鼠CAAN动物模型,亚致死剂量X线照射后经尾静脉移植同系雄性大鼠骨髓干细胞,于移植后第60d处死大鼠,留取血、尿及肾组织标本。生化检测观察移植后相关生化指标的改善情况,Y染色体荧光原位杂交(Y-FISH)观察雌性受体大鼠肾脏中雄性骨髓源性干细胞的分化情况。结果:骨髓移植60d后在肾小球及肾间质中均发现Y染色体阳性的供体源性细胞,相关生化指标得到改善。结论:骨髓源性干细胞具有向慢性马兜铃酸肾病大鼠肾小球及间质细胞分化的潜能。

发酵虫草菌粉和泼尼松对急性马兜铃酸肾病大鼠肾小管Notch2／hes-1信号通路活化的影响

目的探讨发酵虫草菌粉及泼尼松对急性马兜铃酸肾病(acute aristolochic acid nephropathy,AAAN)大鼠肾小管上皮细胞Notch2/hes-1信号通路的影响。方法将50只SD大鼠随机分为正常组、模型组、发酵虫草菌粉组(CS组)、泼尼松组及CS加泼尼松组,每组10只。以马兜铃酸A纯品100mg/(kg·d)连续灌胃3天建立AAAN模型。CS组予发酵虫草菌粉5.0g/(kg·d)灌胃,泼尼松组予泼尼松0.5mg/(kg·d)灌胃,CS加泼尼松组予两药联合灌胃,连续3周。检测各组大鼠肾功能[尿素氮(BUN)、肌酐(SCr)],HE染色观察肾脏病理改变,TUNEL法检测肾小管上皮细胞凋亡,免疫组织化学法及Westernblot法检测大鼠肾组织Notch2、Hes-1蛋白表达。结果 HE染色结果显示,正常组大鼠肾组织结构正常;模型组大鼠出现肾小管坏死改变;泼尼松组、CS组及CS加泼尼松组肾小管病理明显改善。与正常组比较,模型组大鼠BUN和SCr水平、肾小管间质半定量评分、凋亡细胞比例以及Notch2、Hes-1蛋白表达均显著升高(P<0.01)。与模型组比较,CS组、泼尼松组及CS加泼尼松组上述指标均显著降低(P<0.01)。以CS加泼尼松组降低更明显(P<0.05,P<0.01)。结论 Notch2/hes-1信号通路活化可能参与AAAN肾小管上皮细胞凋亡的发生。CS及泼尼松对AAAN有肾保护作用,但联合干预疗效更佳,其机制可能与抑制肾组织Notch2/hes-1信号通路活化有关。

马兜铃酸肾病的发病机制临床特点及防治

马兜铃酸肾病是一种药物性肾损害疾病。目前含马兜铃酸(aristolochic acid,AA)的中草药引起的急、慢性肾功能损害已受到了国内外肾脏病学者的广泛关注,充分了解本病的发病机制及其临床表现,以早期诊治,对本病的预后具有极其重要的意义。尽量避免使用或规范使用含AA的中草药及中成药制剂,并坚持"中病即止"与"辨证论治"的原则,是预防马兜铃酸肾病的重要措施。

丹参对慢性马兜铃酸肾病大鼠肾损害的保护作用

目的观察丹参对慢性马兜铃酸肾损害大鼠模型的肾保护作用。方法Wistar大鼠随机分为正常对照组(Z组)、模型组(M组)及丹参低、中、高剂量组(分别为A组、B组、C组)。造模大鼠按马兜铃酸20mg·kg-·1d-1的剂量灌服关木通浸膏,1周后改为按马兜铃酸10mg·kg-·1d-1的剂量灌服,4h后丹参各组灌服不同剂量丹参溶液(分别为5、10、15g·kg-·1d-1),模型组灌服等体积生理盐水。分别于实验第12、16、20、24周留取大鼠血、尿标本,检测大鼠RBC、Hb、白细胞含量、血肌酐水平、24h尿蛋白定量及尿NAG的排泌情况。结果模型组大鼠RBC及Hb明显低于正常对照组、白细胞比例出现异常,与对照组比较Scr明显升高、24h尿蛋白及尿NAG酶的排泌增加,并随着实验进展而逐渐加重。丹参可改善上述指标的异常。结论丹参对关木通浸膏所致的慢性马兜铃酸肾损害大鼠模型具有一定的肾保护作用,可明显改善大鼠贫血状态、降低Scr,减少24h尿蛋白的排出及尿NAG酶的分泌。

缓衰方治疗慢性马兜铃酸肾病临床观察

目的:观察益气养血活血、利湿泻浊中药缓衰方在延缓慢性马兜铃酸肾病进展的临床疗效。方法:46例患者随机分为对照组(n=16)、中药组(n=30)。对治疗前后的疗效判断采用t检验,肾功能减退速度采用1/Scr与时间(月)直线斜率(b)值来进行比较。结果:对照组患者治疗后较治疗前Scr显著升高(P<0·005),缓衰方治疗前后Scr无显著性差异。治疗组和对照组b值比较有显著差异(P<0·005)。结论:饮食管理和血压控制等一般治疗不能够控制慢性马兜铃酸肾病患者肾衰竭进行性发展,中药缓衰方能够明显延缓患者肾功能进行性减退的速度。

丹酚酸B改善马兜铃酸肾病作用机制的研究

目的研究丹酚酸B对马兜铃酸肾病肾小管间质病变的防治作用机制。方法运用马兜铃酸(aristolochicacid,AA)灌胃造成马兜铃酸肾病模型,将36只大鼠随机分成3组:模型组(n=12),每日接受AA灌胃,剂量为5 mg/(kg.d);治疗组(n=12),每日接受AA灌胃[5 mg/(kg.d)]后随即接受丹酚酸B(salvianolic acid,SalB)灌胃[10 mg/(kg.d)];正常组(n=12),每日接受同体积的生理盐水灌胃。药物处理持续8周。每周称量动物体重以调整用药剂量。第2、4、6、8周收集24 h尿液标本,第8周末麻醉后摘取肾脏做病理检测,采用RT-PCR法测定肾组织基质金属蛋白酶9(MMP-9)、肾组织纤溶酶原激活物抑制物-1(PAI-1)、ITGβ-1、单核细胞趋化因子-1(MCP-1)、基质金属蛋白酶组织抑制物-1(TI MP-1)mRNA的表达。结果模型组较正常组肾间质明显增宽,间质细胞增多,胶原成分显著增加。与模型组比较,治疗组PAI-1、TI MP-1、ITGβ-1 mRNA的表达减弱,MMP-9 mRNA增加。结论自丹参中分离出的SalB对慢性马兜铃酸肾病肾小管间质性损伤有较强的抗纤维化作用。

益肾灵对抗马兜铃酸肾病肾组织TGF-β_1 TIMP-1CTGFmRNA表达的研究

目的:探讨益肾灵对马兜铃酸肾病肾组织TGF-β1、CTGF、TIMP-1mRNA表达的影响。方法:采用RT-PCR方法分析肾组织中TGF-β1、TIMP-1、CTGFmRNA表达。结果:本研究的大鼠肾组织RT-PCR检查显示,模型组大鼠组织TGF-β1、CTGF和TIMP-1mRNA表达明显上调,而益肾灵干预后上述上调指标均显著下降。这些结果提示益肾灵可能通过下调促细胞外基质(ECM)合成因子TGF-β1和CTGF及抑制ECM降解因子TIMP-1在肾脏内的表达,而减轻肾间质ECM的蓄积及纤维化。结论:马兜铃酸具有慢性肾毒性作用,本研究结果已初步证实应用益肾灵早期干预CAAN动物模型,能显著减轻肾间质ECM蓄积及纤维化,改善肾功能。该实验结果为今后临床使用中药治疗CAAN提供了初步依据。

百令胶囊加泼尼松治疗慢性马兜铃酸肾病的临床观察

目的 :探讨百令胶囊加泼尼松治疗慢性马兜铃酸肾病 (AAN)的疗效。方法 :治疗组 14例慢性AAN患者用百令胶囊加泼尼松治疗 ,治疗效果与单用泼尼松治疗组 (对照组 ) 12例比较。结果 :治疗组治疗后血Cr、尿蛋白较治疗前降低 (P <0 .0 1;P <0 .0 5 ) ,治疗组血Cr低于对照组 (P <0 .0 5 )。治疗组有效率 85 .7% ;对照组有效率 6 6 .7%。结论 :用百令胶囊加泼尼松治疗慢性AAN可降低尿蛋白 ,改善肾功能。

冬虫夏草对马兜铃酸肾病保护作用的研究

目的:观察冬虫夏草对马兜铃酸肾病大鼠的保护作用。方法:利用关木通制备马兜铃酸肾病大鼠模型,冬虫夏草(1g/d)干预8周,设对照组,于实验第1、4、8周末收集各组大鼠血、尿及肾组织标本,检测血尿素氮(尿素酶法)、血肌酐(苦味酸法)、尿NAG(比色法)、24h尿蛋白定量和β2-微球蛋白(放免法)、体重,尿渗量(冰点渗量计法)以及光镜HE、PAS染色和透射电镜观察,并应用免疫组化技术测定肾组织中Ⅲ型胶原、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、角蛋白(Keratin)和转化生长因子-β1(TGF-β1)的表达。结果:模型组大鼠BUN、Scr、尿NAG、β2-MG及白蛋白水平明显高于同期治疗组(P<0.05)和正常对照组(P<0.01);与同期治疗组和正常对照组相比,模型组大鼠肾组织Ⅲ型胶原、α-SMA和TGF-β1表达增强,角蛋白表达减弱,体重及尿渗量进行性降低(P<0.05);模型组大鼠肾组织肾小管-间质病变明显重于治疗组。结论:冬虫夏草能在马兜铃酸肾病防治中发挥肾脏保护作用。

马兜铃酸肾病的临床病理表现及治疗

马兜铃酸肾病是病人服含马兜铃酸成分的中药引起的肾脏损害 ,根据临床 -病理表现特点 ,可分为急性型、肾小管功能障碍型和慢性型。急性型临床呈急性肾衰竭 ,病理呈急性肾小管坏死 ;肾小管功能障碍型临床呈肾小管酸中毒和 (或 )Fanconi综合征 ,病理呈肾小管变性或萎缩 ;慢性型临床呈慢性进行肾衰竭 ,病理呈寡细胞性肾间质纤维化。发病机制至今不清 ,治疗无成熟方案 ,类固醇激素对此病可能具有一定疗效 ,不过仍需进一步研究。

59例马兜铃酸肾病的报道

目的:了解我院收治了马兜铃(AAN)情况,为临床提供参考。方法:对我院2004年～2007年8月引起马兜铃酸肾病的药品不良反应报表进行分析。结果:引起马兜铃酸肾病的药物为冠心苏合丸、龙胆泻肝丸,其中女性占69.49%,平均年龄为64.4岁,平均服用药物史为8年。结论:AAN多是临床滥用中药及对中药毒性认识不足而引起的肾损害,因此应遵循辩证施治的原则,掌握AAN临床特点。尽快诊治。