HPLC法测定藏药帕栗嘎不同品种及其代用品中马兜铃酸A的含量

目的:测定4种常用藏药帕栗嘎品种(藏马兜铃、Aristolochia sp.、小木通和绣球藤)中马兜铃酸A的含量,明确藏药帕栗嘎不同品种中马兜铃酸A的含量分布情况,为藏药帕栗嘎的临床安全用药提供科学依据。方法:采用高效液相色谱法(high performance liquid chromatography,HPLC),色谱柱:Thermo ODS HYPERSIL(4.6 mm×200 mm,5μm);流动相:甲醇-1.0%甲酸水溶液(70∶30);流速:1.0 mL/min;检测波长:315 nm;柱温:25℃。结果:马兜铃酸A在20~180μg有良好的线性关系;平均加样回收率为95.89%,RSD为1.26%;藏药帕栗嘎4个品种中藏马兜铃中马兜铃酸A的含量为3.5818 mg/g,Aristolochia sp.、小木通和绣球藤中未检测出马兜铃酸A。Aristolochia sp.尚无统一命名和草本考证,为本文首次提出。结论:藏马兜铃中马兜铃酸A含量较高,临床应慎用,应由功效相同而不含马兜铃酸A的“Aristolochia sp.”和毛茛科植物川木通代替。

二维Zn(Ⅱ)配位聚合物的制备及其对马兜铃酸A的荧光检测

通过两性离子有机连接子4-羧基-1-(3-羧基苄基)吡啶-1-鎓氯化物,与含N桥连配体1,2-二(吡啶-4-基)乙烯、氢氧化钠一起在溶剂热条件下与Zn^(2+)自组装,构建了一例结构新颖具有二重穿插结构的二维配位聚合物1。采用X-射线单晶衍射、粉末衍射、热重分析、固体荧光等方法对配合物1的结构进行了表征,并考察了其在荧光传感材料领域的应用潜力。实验结果表明,配合物1可荧光猝灭选择性检测马兜铃酸A,且在5.0~35.0μmol/L的低浓度范围,荧光猝灭率与马兜铃酸A浓度呈线性关系,检测限为0.022μmol/L。其在检测马兜铃酸A时,响应时间仅需60 s,且在5次循环中能够保持结构的稳定。本研究制备的配合物1具有选择性、灵敏、高效、可回收荧光检测乙醇中马兜铃酸A的性能,可作为一种荧光传感器对低浓度的马兜铃酸A实现检测。

RP-HPLC测定不同产地青木香和细辛中马兜铃酸A的含量

目的 :测定不同地区市售青木香、细辛中马兜铃酸A的含量 ,用于指导临床用药和相关研究。方法 :应用高效液相色谱法 ,选用AlltechC18色谱柱 (4.6mm× 2 5 0mm ,5 μm) ,甲醇 水 醋酸 (6 8∶32∶1)为流动相 ,流速为 1.0mL·min-1,柱温为 35℃ ,紫外检测波长为 390nm。结果 :马兜铃酸A在 0 .119～ 1.89μg有良好的线性关系 ,平均加样回收率为 10 1.8% ,RSD为 2 .0 9%。不同产地青木香中马兜铃酸A的含量在 0 .916 9～ 1.90 76mg·g-1,其中以河北安国产青木香的含量较高 (1.90 76mg·g-1) ;细辛中马兜铃酸A的含量在 0～ 35 1g·g-1,其中以吉林市售品含量较高。结论 :本方法精密度高 ,重现性好 ,可用来含马兜铃酸类中药材中马兜铃酸A的含量测定 ;含马兜铃酸的中药中以关木通中马兜铃酸A的含量最高 ,青木香中的含量约为关木通中的含量的 1/3,细辛的含量最低。

中药致肾毒性成分马兜铃酸A单抗制备及酶联免疫分析方法的建立

采用活化酯法,将马兜铃酸A分别与牛血清蛋白(BSA)和卵清蛋白(OVA)偶联,得到免疫抗原马兜铃酸A-BSA和包被抗原马兜铃酸A-OVA。利用马兜铃酸A-BSA免疫Balb/c小鼠,制得鼠单克隆抗体1A11,单抗效价为2×104;单抗为IgG1类,轻链为κ型;与其结构类似物马兜铃酸B、C和D的交叉反应率分别为2.8%,3.5%和31.2%。基于抗马兜铃酸A单克隆抗体的间接竞争酶联免疫分析方法(icELISA)的IC50为1.9μg/L,检测范围为0.5～7.5μg/L。icELISA添加回收率为86%～97%,相对标准偏差在5.2%～11.1%之间。利用所建立的icELISA测定了6个中药材和5个中成药中马兜铃酸A的含量,并用高效液相色谱法(HPLC)进行了验证,其中关木通、广防己、天仙藤、马兜铃和青木香中均检测出马兜铃酸A,而川木通和5个中成药中未检测到马兜铃酸A。结果表明:本方法可用于中药中马兜铃酸A的快速检测。

RP—HPLC法测定中药材及其制剂中马兜铃酸A的含量

目的：建立RP-HPLC法测定中药材及其制剂中马兜铃酸A的含量。方法：采用Diamonsil^TM(钻石)C18色谱柱(250mm×4．6mm，5μm)，流动相：甲醇-水-冰乙酸(79：20：1)，流速1．0mL·min-l，检测波长315nm，灵敏度0．5AUFS，进祥量20μL。结果：马兜铃酸A在0．0198-0．396μg范围内线性关系良好。回归方程为：Y＝32．96X+0．0037，r＝0．9999(n＝8)。最低检测限为0．792ng.方法的回收率及RSD分别为95．54％，0．48％；98．35％，1．0％；96．37％，1．3％。日内精密度RSD<1．5％，日间精密度RSD<2．6％。结论：本法专属性强，结果准确。可用于中药材及其制剂中马兜铃酸A的含量测定和质量控制，为临床应用及体内药物代谢动力学研究提供理论基础和实验方法。

细辛类植物中马兜铃酸A的定性及定量分析

目的:对细辛类植物中马兜铃酸 A 进行定性及定量分析。方法:采用 HPLC 法测定18份细辛属药材、7个马兜铃属药材中马兜铃酸 A 的含量。色谱柱为 HiQ-Sil C_(18)(250mm×4.6mm,5μm),流动相为甲醇-水-醋酸(60:36:4),流速为1.0mL·min^(-1),柱温20℃,检测波长316nm。同时采用 LC/MS 法对细辛中马兜铃酸 A 结构进行确认。结果:HPLC 法测定马兜铃酸 A 在0.01～0.25μg范围内具良好的线性关系(r=0.9999),平均回收率为97.5%,RSD 为1.8%。HPLC 色谱图中保留时间为9.036min 的色谱峰,经 LC/MS 确证为马兜铃酸 A。结论:HPLC 法可用于细辛类植物中马兜铃酸 A 的定性及定量测定。

液相色谱-电喷雾质谱联用测定细辛及养血清脑颗粒中马兜铃酸A

建立了反相液相色谱-电喷雾-三级四极杆质谱联用测定细辛及其制剂养血清脑颗粒中的马兜铃酸A含量的方法。本方法采用C18色谱柱，以甲醇和0．1％的甲酸水溶液（V／V）系统为流动相，选择性地测定m／z340．0〉223．0的跃迁，在20～800μg/L范围内线性良好（r=0．9991）；检出限为35Pg；精密度（RSD）为4．8％和回收率为98．1％，均较好，本方法准确、快速、简便，可用于马兜铃酸A的限量测定。

部分马兜铃科药材中马兜铃酸A的含量测定研究

目的:在已有文献报道的基础上,通过比较研究进一步优化了实验条件,建立灵敏度高、重现性好的马兜铃酸 A 含量测定方法,并对部分马兜铃科马兜铃属、细辛属的药材中马兜铃酸 A 的含量进行测定。方法:采用高效液相色谱法。色谱柱:Kromasil C_(18)柱(4.6 mm×200 mm,5 μm);流动相:0.3%碳酸铵(用稀盐酸调 pH 至7.5)-乙腈(75:25),流速:1 mL·min^(-1);检测波长:250 nm;柱温:35℃。结果:马兜铃酸 A 进样量在1.02～511 ng 范围内线性关系良好,回归方程为:Y=5.734×10~3X+1.239×10~3,r=0.9999(n=20);方法的回收率(n=18)为102.3%。结论:建立的含量测定方法准确、灵敏,专属性强、重现性好,为含马兜铃酸 A 的药材及制剂的质量控制等研究,提供了可供借鉴的实验方法;同时,检测结果也为相关马兜铃科药材的合理使用提供了参考。

RP-HPLC法测定14种中药材中马兜铃酸A的含量

目的对14种中药材中的马兜铃酸A进行含量测定。方法采用RP-HPLC法。色谱柱为Kromasil ODS柱(200 mm×4.6 mm,5μm),流动相为甲醇-体积分数为1%的冰醋酸溶液(体积比70∶30),检测波长为319 nm,流速为1.0 mL.min-1,柱温为25℃。结果14种中药材中马兜铃酸A的含量分别为:苕叶细辛0.22 mg.g-1,万源山慈菇0.18 mg.g-1,宜宾防己0.72 mg.g-1,川细辛0.58 mg.g-1,寻骨风0.52 mg.g-1,广西山慈菇0.13 mg.g-1,短尾细辛0.15 mg.g-1,淮通0.94 mg.g-1,关木通0.49 mg.g-1,广元防己3.00 mg.g-1;平昌防己、冕宁防己、穆平马兜铃、北细辛地上及地下部分中均未检出马兜铃酸A。结论应用本实验中所建立的方法对多种中药材中的马兜铃酸A进行检测,为相关药材及中成药应用提供了科学依据。

HPLC法测定养血清脑颗粒中马兜铃酸A

目的检测养血清脑颗粒中是否含有肾毒性成分马兜铃酸A.方法建立高效液相色谱法,采用Agilent Zorbax SB-C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5 μm),以甲醇-1%冰醋酸水溶液(53:47)为流动相,体积流量为1.0mL/min,检测波长为317 nm,测定20批养血清脑颗粒.结果回收率为97.7%,标准曲线为Y=2.05 X+0.205,在5.2～68 ng线性关系良好;20批养血清脑颗粒中均未检测到马兜铃酸A.结论养血清脑颗粒中不含有肾毒性成分马兜铃酸A,是一种安全的中药.

反相高效液相色谱法测定关木通及配伍中药中马兜铃酸A

为了全面、系统、深入地研究有毒中药关木通，采用乙腈-酸水系统，用反相高效液相色谱法分析关木通及其配伍中药中马兜铃酸A的含量，与文献方法相比，缩短了测定时间，并从总体上降低了分析成本。色谱条件是：C18柱，流速：1mL／min。检测波长：250nm。流动相：乙腈：（水＋冰醋酸）=58：42。该法精密度高，稳定性好，线性范围为0．07～0．42μg，回归方程为Y=5．0×10^6X-32827，相关系数r=0．9999，加样回收率为99．12％。实验结果表明，关木通与生地、当归、大黄、生甘草等中药配伍后，AAⅠ含量均有不同程度的降低，其中以关木通配伍生地组和大黄组最为明显，分别降低了57％和56％。

HPLC法检查新生颗粒中马兜铃酸A的含量

目的建立新生颗粒中马兜铃酸A的限量检查方法,以保证临床用药的安全性。方法采用高效液相色谱法,色谱柱:Phenomenex Luna C18(2)(4.6mm×250mm,5μm);流动相:甲醇-3.3%醋酸(75∶25);流速:1.0mL/min;柱温:室温(25℃);检测波长:320nm。结果马兜铃酸A在0.1092～0.9828μg范围内线性良好(r=0.9999),平均回收率为96.00%,RSD为1.43%,最低检测限为0.819ng,3批新生颗粒中均未检出马兜铃酸A。结论该方法简便,专属性强,灵敏度高,可用于新生颗粒中马兜铃酸A的限量检查。

关木通药材中马兜铃酸A的药动学研究

目的采用高效液相色谱法测定血浆中马兜铃酸A的浓度,研究小鼠灌胃给予关木通提取液后体内马兜铃酸A的药动学特点.方法采用DiamonsilTMC18色谱柱(250mm ×4.6mm,5μm),以甲醇-水-冰乙酸(72:27:1)为流动相,流速1.0mL·min-1,检测波长315nm.小鼠按马兜铃酸A 4.0mg·kg-1灌胃给予关木通提取液后,经HPLC法测定血浆药物浓度.结果马兜铃酸A在0.1098～3.66mg·L-1的浓度范围内线性关系良好(r=0.9998,n=7),最低检测浓度为0.0183mg·L-1.马兜铃酸A高、中、低3种不同浓度的平均回收率及相对标准偏差分别为97.07%(1.0%),97.10%(1.1%)和99.36%(0.8%),该法的日内和日间精密度RSD值均小于9.3%.小鼠给药后,药动学房室模型为一室模型,主要药动学参数T1/2(ka),T1/2(ke),Tmax,AUC,Cmax,CL/F(s),V/F(c)分别为:3.94,16.29,10.65min,188.88(mg/L)·min,2.84mg/L,0.038mg/kg/min/(mg/L),0.89(mg/kg)/(mg/L).结论本实验建立了关木通药材中马兜铃酸A血药浓度的HPLC测定方法,阐明了马兜铃酸A的药动学特征.

反相HPLC法测定青木香药材中马兜铃酸A的含量

青木香为马兜铃科马兜铃,Aristolochia debilis Sieb.et Zucc.的根。为解毒消肿、平肝止痛药物。马兜铃酸A是抗菌、增强机体免疫功能的主成分之一。本文用RPHPLC法对青木香及同属数种常作为青木香药用的药材进行了定性分析,并测定了马兜铃酸A的含量。

HPLC测定北细辛不同部位及穴贴定喘膏中马兜铃酸A的含量

目的测定细辛不同药用部位及其制剂中马兜铃酸A的含量。方法采用HPLC方法,测定不同来源、不同批次的细辛药材;不同药用部位及其制剂定喘穴贴膏中马兜铃酸A的含量。结果细辛地上部分粗粉中马兜铃酸A含量高于细辛根茎粗粉中马兜铃酸A含量,制剂中没有检出马兜铃酸A。结论2005年版的《中国药典》将细辛药用部位由全草改为根茎是合理的,穴贴定喘膏未检出马兜铃酸A。

UPLC法测定复方南星止痛膏中马兜铃酸A的含量

目的对复方南星止痛膏中马兜铃酸A进行检测,验证产品的临床安全性。方法通过固相萃取小柱对制剂中的马兜铃酸A进行富集,应用UPLC对其进行检测。结果在Waters UPLC的高灵敏度色谱条件下,信噪比为3∶1时马兜铃酸A的最低检出限为0.1μg;3批制剂成品及中间体中均未检出马兜铃酸A;3批细辛药材中检出微量马兜铃酸A,平均含量为1.96μg/g,推算至每克制剂中含马兜铃酸A约为0.05μg,远低于口服制剂药品中马兜铃酸A含量不得高于0.5μg/g的标准。结论以处方中细辛所含马兜铃酸A的研究数据说明,复方南星止痛膏临床应用是安全可靠的。

北细辛全草和根中马兜铃酸A的含量测定及小鼠急性毒性实验研究

目的：测定北细辛全草及根中马兜铃酸A的含量及其急性毒性。方法：马兜铃酸A的含量测定采用反相高效液相色谱法，色谱柱为phenomenex C18（4．6mm×250mm），流动相为甲醇-水-醋酸（63：36：1）。检测波长为390nm，流速1．0mL／min，柱温35℃；急性毒性试验采用小鼠灌胃给药最大给药量法。结果：HPLC法测定细辛中马兜铃酸A含量，线性范围为20．2—121．2ng，北细辛全苹及细辛根的平均回收率分剐为97．2％和98．1％；北细辛全草及根中马兜铃酸A的平均含量分刺为61．40μg／g和45．80μg/g；北细辛全草及根1g／mL水提取物给小鼠灌胃给药，LD50不能测出，耐受量大于40g／kg。结论：马兜铃酸A的含量测定法准确、可靠。重现性好，精密度高；北细辛全草中马兜铃酸A的含量高于细辛根中马兜铃酸A的含量；小鼠对北细辛全草和细辛根的水提取物具有较高的耐受性，耐受倍数相当于药典规定的临床剂量的800倍，比较安全。

HPLC法测定细辛药材中马兜铃酸A的含量

目的 建立细辛药材中马兜铃酸A的含量测定方法。方法 HPLC法测定细辛药材中马兜铃酸A的含量。采用Spherigel C18高效液相色谱柱,以甲醇-水-醋酸(60:36:4)为流动相,检测波长316 nm。结果 本方法线性关系良好(r=0.9995),平均回收率为97.7％,相对标准偏差RSD为0.50％(n=6)。结论 本方法简便,准确,回收率高,可用于细辛药材中马兜铃酸A的含量测定。