马尾松树皮提取物的抗氧化性初步研究

目的:研究马尾松树皮提取物(Pinus massoniana bark extract, PMBE)在体外不同介质中的抗氧化能力和清除活性氧自由基能力,测定不同浓度PMBE对体外培养的人体8种癌细胞株的作用。方法:用化学比色法测定PMBE体外的抗氧化和清除活性氧能力,并与天然抗氧化剂VC和VE进行比较;用四甲基偶氮唑蓝比色法(measurement oftrititaed thymidine incorporation, MTT)测定PMBE对不同癌细胞株的体外作用。结果:PMBE在体外生理盐水条件下具有较强抗氧化和清除活性氧能力,其抗氧化能力稍弱于VC,约为VE的3.5倍,对不同癌细胞株的抑制浓度和抑制程度不同。结论: PMBE是一种天然抗氧化剂和活性氧清除剂,具有抑癌潜能。

马尾松树皮提取物体外抑制人大肠癌细胞生长机理初探

为探讨马尾松树皮提取物(PMBE)体外抑制大肠癌LoVo细胞生长的作用特点和机理,通过MTT、显微镜术、凝胶电泳和流式细胞术,研究PMBE抑制LoVo细胞生长的特点,运用免疫组化和RT-PCR探究相关分子机理。结果表明:PMBE时间-剂量依赖地抑制LoVo细胞的体外生长;PMBE处理后,流式细胞检测发现LoVo细胞周期阻滞于G1或S期,同时可检测到亚二倍体峰的出现;荧光镜检和透射电镜观察可看到LoVo细胞的核皱缩、边集甚或碎裂,以及有凋亡小体形成,其基因组经过凝胶电泳呈现典型的梯形Ladder;RT-PCR和免疫组化结果显示PMBE处理可上调LoVo细胞中p53和p21基因的转录效率,并下调Bcl-2的蛋白表达量。说明PMBE通过上调p53和p21的表达量阻滞细胞周期、下调Bcl-2的表达量诱导细胞凋亡的双重机制,抑制LoVo细胞的体外生长,可供进一步探索相关信号传导通路参考。

马尾松树皮提取物对小鼠B16黑色素瘤细胞中黑色素生成抑制效果及其机制的初步研究

目的探讨马尾松树皮提取物(Pinus massoniana bark extract,PMBE)抑制小鼠B16黑色素瘤细胞中黑色素的生成效果及其分子机制。方法 10～50μg/ml的PMBE与小鼠B16黑色素瘤细胞共培养后进行各项细胞学研究:MTT法检测PMBE对细胞的毒性;以左旋多巴为底物测定PMBE对酪氨酸酶(TYR)活性的抑制作用;DCM法检测PMBE对细胞ROS的清除能力;比色法测定PMBE对细胞内黑色素生成的抑制效果以及对细胞内还原型谷胱甘肽(GSH)、氧化型谷胱甘肽(GSSG)、GSH/GSSG的影响;RT-PCR检测酪氨酸酶及其相关蛋白1(TRP-1)和2(TRP-2)在mRNA水平表达量的影响。结果 PMBE对小鼠B16黑色素瘤细胞的增殖无明显影响,并可显著减少细胞内的黑色素含量。另外,PMBE对活性氧具有很强的清除能力,同时可上调细胞内GSH/GSSG比率,从而增强细胞的还原力。PMBE还对酪氨酸酶活性表现出了一定的抑制效果,但这种抑制却并不发生在mRNA水平。结论 PMBE对小鼠B16黑色素瘤细胞内黑色素生成具有显著抑制效果并主要通过降低酪氨酸酶活性和清除活性氧来实现。

马尾松树皮提取物抗脑缺血和抗脑肿瘤作用的研究

研究马尾松树皮提取物(MPBE)抗脑缺血和抗脑肿瘤的作用。采用结扎小鼠双侧带迷走神经的颈总动脉造成急性不完全脑缺血模型,测定小鼠的存活时间,采用裸小鼠移植人脑瘤(SF763)的脑内接种模型,测定裸小鼠的生命延长率。结果表明:MPBE可明显延长急性不完全脑缺血小鼠的存活时间,MPBE与阿霉素(ADM)联合使用可明显延长脑瘤裸小鼠的生命延长率,MPBE具有一定的抗脑缺血和抗脑肿瘤的作用。

马尾松树皮提取物对四氯化碳损伤肝细胞的保护作用

目的体外探讨马尾松树皮提取物(Pinus massoniana bark extract,PMBE)对四氯化碳(CCl4)损伤人正常肝细胞(L-02)的保护作用及其对血红素加氧酶-1(heme oxygenase-1,HO-1)表达的影响。方法四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测细胞活性,细胞形态观察、荧光染色、Annexin V-FITC/PI双染法检测细胞凋亡,对细胞内丙二醛(MDA)和谷胱甘肽(GSH)含量、过氧化氢酶(CAT)和超氧化物歧化酶(SOD)活性、培养上清液中谷草转氨酶(AST)和丙谷转氨酶(ALT)水平分别进行检测,酶联免疫吸附法(ELISA)、逆转录多聚酶链反应(RT-PCR)及Western免疫印迹法检测细胞内HO-1活性、HO-1 m RNA及蛋白表达情况。结果与CCl4损伤组比较,PMBE预处理组细胞存活率、GSH含量和相关抗氧化酶类水平升高,细胞凋亡和坏死比率、MDA含量及上清液中AST和ALT活性降低,HO-1活性、HO-1 m RNA和蛋白表达水平均上调,但与CCl4损伤组无明显差异。结论 PMBE对CCl4损伤L-02细胞有保护作用,其机制可能与HO-1的表达密切相关。

马尾松树皮提取物对牙本质小管的封闭效果及其耐磨损性能的体外研究

目的观察马尾松树皮提取物(PMBE)局部短暂预处理对牙本质小管的即刻封闭效果及耐磨损性,为其防治牙本质过敏提供实验依据。方法用酸蚀法建立牙本质过敏体外模型,分别以乙醇和氟保护漆为阴性对照和阳性对照,采用80g/L PMBE乙醇溶液短暂涂布样本,并进行刷牙磨损,场发射扫描电镜观察各组样本表面和剖面形貌,测量牙本质小管口开放视野面积(ADTO)、牙本质小管口开放相对面积(PADTO)。结果乙醇空白组牙本质表面牙本质小管完全开放,剖面小管腔空虚;氟保护漆/即刻组和PMBE/即刻组牙本质小管完全/基本封闭,管腔内见涂膜或封堵物,氟保护漆/磨损各组及PMBE/磨损各组样本表面见磨痕,牙本质小管部分开口。乙醇空白组ADTO及PADTO显著高于其余各组(P<0.05)。PMBE/磨损各组和氟保护漆/磨损各组ADTO及PADTO组间比较,差异均无统计学意义(P>0.05),但均显著高于PMBE/即刻组和氟保护漆/即刻组(P<0.05)。结论 PMBE局部短暂涂布处理牙本质可获得良好的牙本质小管即刻封闭效果和一定的耐磨性。

马尾松树皮提取物预处理对根面牙本质耐酸蚀和脱矿能力的影响

目的观察马尾松树皮提取物(pinus massoniana bark extract,PMBE)预处理对根面牙本质耐酸蚀和抗脱矿能力的影响。方法制备根面牙本质块40个,并根据所用处理液的不同分为去离子蒸馏水组(deionized and distilled water,DDW)、Na F组、4%PMBE组和8%PMBE组。试件行p H循环处理8 d,测定p H循环前后牙体表面硬度差(D-value of surface microhardness,ΔSMH),观察脱矿牙本质表面形貌,酸性缓冲液中的钙离子释出率(calcium depletion rate,CDR)。结果各组p H循环前牙本质表面显微硬度无统计学差异(P>0.05)。4%PMBE组和8%PMBE组ΔSMH显著低于DDW组(P<0.05),8%PMBE组与Na F组无统计学差异(P>0.05)。各PMBE组CDR显著低于DDW组,8%PMBE组CDR显著高于Na F组,显著低于4%PMBE组(P<0.05)。DDW组牙本质表面牙本质小管完全开放,Na F组牙本质小管处基本封闭,PMBE各组牙本质小管口成梭形或狭长微裂隙。结论 PMBE能提高牙本质的耐酸蚀脱矿能力,8%PMBE溶液效果较好,具备一定的预防牙本质过敏的作用。

马尾松树皮提取物体外抑制人大肠癌细胞生长规律初探

为深入研究马尾松树皮提取物(PMBE)的抑癌生长作用,构建PMBE的动物药理模型,本研究通过细胞培养、细胞活力检测(MTT实验)及计算机模拟评估马尾松树皮提取物(PMBE)抑制体外培养人大肠癌LoVo细胞生长规律,建立了马尾松树皮提取物(PMBE)、胎牛血清(FBS)及处理时间(t)三因素对LoVo细胞生长抑制率的反应模型,利用该回归模型对三因素优化组合,同时就各因素单独效应及其互作效应进行了探讨。PMBE、FBS、t三因素适量水平搭配(0、1、0)可提高对LoVo的生长抑制效率,最高可达0.42,即三因子用量分别为140μg/mL、15%、48 h时效果最佳。系列数据分析结果表明,在体外处理细胞过程中可能存在抑制物效应报酬递减规律,且试验体系中多因素综合效应呈现随机非线性特点。该研究是统计学在医学科研设计、衡量和评价(D.M.E)领域的一次尝试,可为构建PMBE的动物药理模型确定药用剂量提供参考。

马尾松树皮提取物体外诱导人肝癌细胞凋亡的一过性检测分析

目的 研究马尾松树皮提取物 (Pinus massoniana bark extract, PMBE) 对人肝癌细胞 BEL -7402 的体外诱导凋亡作用。方法 运用“一过性细胞处理法”, 从形态、生化和分子水平检测细胞凋亡与否。结果 160μg/ml PMBE处理BEL- 7402细胞24h后, 凝胶电泳呈现DNA ladder, 荧光镜检发现“核皱缩、边集或碎裂”, 流式细胞分析可见明显“凋亡峰”。结论 PMBE能明显诱导体外培养的BEL- 7402细胞凋亡; “一过性细胞处理法”能快速鉴定“凋亡”并测定“凋亡率”, 实现了定性与定量的统一。

马尾松树皮提取物抗肿瘤作用的研究

研究马尾松树皮提取物(MPBE)体外和体内的抗肿瘤作用。采用四甲基偶氮唑蓝比色(MTT)法观察MPBE对人结肠腺癌细胞株LoVo的体外抑制作用,采用小鼠移植性肿瘤模型考察MPBE对S180荷瘤小鼠的抑瘤作用和艾氏腹水癌(EAC)小鼠的生命延长作用。结果表明:MPBE对Lo-Vo细胞的生长有较强的抑制作用,在质量浓度为500 mg/L时,MPBE对LoVo细胞作用24、48和72 h时的抑制率分别为19.83%、33.06%和58.15%;MPBE对小鼠S180肉瘤生长表现出明显的抑制作用,MPBE 50、100和200 mg/kg 3个剂量的抑瘤率分别为30.3%、37.8%和42.3%,MPBE达到200 mg/kg剂量时,反映免疫功能的胸腺指数和脾指数也明显增加;但MPBE对EAC腹水癌小鼠的生存时间没有明显的延长作用。

马尾松树皮提取物对乙醇诱导人脐静脉内皮细胞氧化损伤的保护作用

目的体外探讨马尾松树皮提取物(Pinus massoniana Bark Extracts,PMBE)对乙醇损伤人脐静脉内皮细胞(Human Umbilical Vein Endothelial Cells,HUVEC)的保护作用及PMBE是否通过调控生长分化因子15(Growth Differentiation Factors 15,GDF-15)的表达从而发挥其作用。方法 60μg/ml的PMBE与HUVEC共培养12 h后加入4%(V/V)浓度的乙醇作用12 h进行各项研究:MTT法检测细胞存活率;观察细胞形态;Annexin V-FITC/PI双染法检测细胞凋亡率;分别检测细胞内ROS水平、超氧化物含量及SOD活性,细胞培养液上清中的NO含量;RT-PCR检测细胞内GDF-15的mRNA表达及Western Blot检测细胞内GDF-15的蛋白表达情况。结果与4%乙醇组相比,PMBE能明显提高细胞存活率,降低细胞早期凋亡和坏死比例,ROS水平及超氧化物含量降低,SOD活性及培养液上清中NO含量升高,GDF-15的mRNA表达水平降低,GDF-15的蛋白表达水平降低。结论 PMBE对乙醇损伤HUVEC具有保护作用,其机制可能与影响GDF-15的表达水平相关。

马尾松树皮提取物对癌细胞内硫氧还蛋白还原酶的影响

目的探索马尾松树皮提取物(PMBE)对体外培养的人肺腺癌细胞Glc-82、肝癌细胞Bel-7402和宫颈癌细胞Hela内的硫氧还蛋白还原酶(TrxR)的抑制作用。方法运用四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法、酶联免疫吸附法(ELISA)、NADPH还原反应和DCF荧光法检测细胞存活率及癌细胞内的TrxR浓度、TrxR活性和活性氧(ROS)水平。结果 MTT和ELISA检测未见PMBE所引起的三种癌细胞内TrxR蛋白含量的明显升高;在生理条件及氧胁迫下,PMBE均可显著抑制三种癌细胞内的TrxR活性;ROS测定说明氧胁迫下PMBE不能有效降低三种癌细胞内的ROS水平。结论 PMBE能够有效抑制人体呼吸、消化和生殖系统的三种癌细胞内的TrxR活性,并降低了其对氧胁迫的耐受性。

马尾松树皮提取物对人体外癌细胞的广谱作用研究

目的 :研究马尾松树皮提取物 (Pinusmassonianabarkextract,PMBE)对体外培养人癌细胞株的作用及其广谱性 ;方法 :用四甲基偶氮唑蓝比色法 (measurementoftrititaedthymidineincorporation ,MTT) ,经四氮唑蓝染色测定PMBE处理前、后体外培养人癌细胞吸光度值的变化 ,评估其对不同癌细胞株的体外作用 ;结果 :马尾松树皮提取物对体外培养的人癌细胞有广谱抑制作用 ,但不同癌细胞对其有不同程度的浓度或剂量依赖性 ;结论 :马尾松树皮提取物可用于抗癌药物的筛选和研发。

马尾松树皮提取物对人角质细胞HaCaT的细胞毒性作用的研究

目的探讨马尾松树皮提取物(PMBE)对人表皮角质细胞株HaCaT的细胞毒性,为PMBE用于皮肤炎症的治疗打下理论基础。方法用倒置显微镜观察PMBE对细胞形态的影响;用CCK-8检测PMBE对细胞生长的抑制率;用流式细胞仪测定细胞周期。结果PMBE对HaCaT细胞株的作用具有剂量和时间的依赖关系。PMBE在12 h前各浓度对细胞形态、活性、细胞周期基本没有影响,而在24 h后表现剂量依赖关系,并呈现随机的非线性关系。结论一定浓度范围内的PMBE对细胞株HaCaT没有细胞毒副作用,可以用于表皮细胞抗炎症模型药物的筛选。

马尾松树皮提取物体外抑制人肝癌细胞BEL-7402生长的数学建模

采用三因素五水平二次通用旋转组合设计 ,研究马尾松树皮提取物 (Pinus massaniana bark extract,PMBE)、胎牛血清 (fetal bovine serum,FBS)和时间 (t)对体外培养人肝癌细胞 BEL-740 2生长的影响 ,建立了三因素对体外培养 BEL -740 2细胞生长抑制率的反应模型 ,并利用回归模型对三因素优化组合 ,同时就各因素单独效应及其互作效应进行了探讨。三因素适量搭配可提高BEL-740 2的生长抑制率 ,最高可达 0 .3 6,此时三者用量水平的最佳组合为 (PMBE,FBS,t) =(0 ,0 ,-1.682 ) ,即三因子用量分别为 160μg/ml、10 %、2 7.

马尾松树皮提取物(MPBE)抗肿瘤作用的研究报告

肿瘤是严重危害人类生命和健康的一种常见病，随着抗肿瘤药物的不断发展，肿瘤的化学治疗成为肿瘤治疗的主要方法之一，但大多数肿瘤化疗药物都存在着不同程度的毒副作用，在治疗肿瘤的同时也给机体正常组织、器官带来极大损害。因此，寻找高效无毒，能长期服用的肿瘤化疗药物及辅助药物已成为很迫切的问题。

马尾松树皮提取物体外诱导肺腺癌GLC-82细胞凋亡的机制（英文）

目的:探讨马尾松树皮提取物(Pinus massoniara bark extract,PMBE)在体外抑制肺腺癌GLC-82细胞生长的机制。方法:通过CCK-8法分析了PMBE对GLC-82细胞的生长活力影响;AO/EB染色、透射电镜和流式细胞术检测了PMBE诱导的肺腺癌细胞GLC-82的凋亡;Western blot检测PMBE处理GLC-82细胞后caspase-8、caspase-9、caspase-3、Bcl-2和Bid蛋白表达水平的变化。结果:PMBE在体外抑制肺腺癌GLC-82细胞的生长具有时间和剂量依赖性;通过荧光显微镜、透射电镜和流式细胞术证实PMBE诱导了GLC-82细胞的凋亡;细胞周期分析结果说明PMBE可以显著减少S期的GLC-82细胞;免疫杂交发现PMBE可以诱导caspase-3、caspase-8、caspase-9蛋白的激活,并下调Bcl-2和Bid蛋白的表达。结论:PMBE可能通过激活caspase-8从而激活Bid蛋白,进一步激活caspase-9来诱导肺腺癌GLC-82细胞的凋亡。

马尾松树皮提取物对顺铂所致体外人胚肾细胞毒性的保护作用

目的:体外探讨马尾松树皮提取物(PMBE)对顺铂所致肾毒性的保护作用,并初步探究其作用机制。方法:体外培养人胚肾细胞HEK293,用四甲基偶氮噻唑蓝(MTT)方法分别检测PMBE、顺铂对HEK293细胞生长的影响,以及PMBE对顺铂所致HEK293细胞毒性的保护作用;并检测各组细胞内的活性氧(ROS)、丙二醛(MDA)和谷胱甘肽(GSH)含量,以及过氧化氢酶(CAT)、超氧化物歧化酶(SOD)和硫氧还蛋白酶(TrxR)的活性。结果:PMBE低浓度下促进HEK293细胞生长,较高浓度下对细胞产生轻微毒性;顺铂抑制HEK293细胞生长,使细胞内ROS,MDA含量升高,GSH含量降低,同时降低SOD,CAT和TrxR酶活性;加入PMBE预保护后,在一定范围内降低顺铂对HEK293细胞的损伤,降低ROS,MDA含量,升高GSH含量,以及提高SOD,CAT和TrxR酶活性。结论:一定浓度的PMBE对顺铂所致人胚肾细胞的毒性有保护作用,其机制可能与PMBE的抗氧化性密切相关。

马尾松树皮和葡萄籽提取物对牙本质耐酸脱矿作用影响的比较研究

目的:评价马尾松树皮提取物(PMBE)和葡萄籽提取物(GSE)对根面牙本质耐酸蚀脱矿作用的影响。方法:表面一半被覆盖的根面牙本质块40个,被随机分为4组(n=10),分别用去离子蒸馏水(DDW)溶液、0.1%NaF溶液、12%PMBE溶液和12%GSE溶液作为实验溶液,进行为期8 d的pH循环(实验溶液,酸性缓冲液和中性缓冲液)。显微CT测定各组未脱矿侧和脱矿侧牙本质的矿物密度(dentin mineral density,DMD),场发射扫描电镜观察各组pH循环后牙本质表面显微形貌。结果:牙本质的矿物密度显示DDW组脱矿侧和未脱矿侧牙本质矿物密度差(ΔDMD)198.64±59.97,NaF组为45.94±24.21,PMBE组为90.23±28.77,GSE组为105.07±29.53。PMBE组和GSE组ΔDMD均高于NaF组(P<0.05),低于DDW组(P<0.05),两者相互之间无显著差异(P>0.05)。扫描电镜见DDW组牙本质表面牙本质小管完全开放,NaF组牙本质小管基本封闭,PMBE组和GSE组牙本质小管口成梭形或狭长微裂隙开口。结论:PMBE和GSE均能提高牙本质的耐酸蚀脱矿作用。

马尾松树皮提取物预防apoE基因敲除小鼠肝脏脂肪变性

目的探究马尾松树皮提取物(Pinus massoniana bark extract, PMBE)对载脂蛋白E(ApoE)基因敲除小鼠肝脏脂肪变性的影响。方法给8只ApoE KO雄性小鼠每天口服PMBE(30 mg/kg)2周,然后喂养高胆固醇及高脂饮食8周后,与普通饮食(NC)组及高脂饮食(HCD)组进行对比,取各组小鼠肝脏组织进行油红染色及Real-time PCR试验,检测脂质代谢相关基因的表达。结果经PMBE治疗后的小鼠肝细胞中脂质沉积减少,肝脏脂质含量减低;随后检测脂质代谢相关基因,发现PMBE通过减少脂质合成和增加脂解作用显著抑制了肝脏脂肪的蓄积。结论 PMBE可以预防肝脏脂肪变性的发生和发展。