马来沉香组培快繁技术研究

以马来沉香半木质化茎段为外植体开展组织培养的研究结果表明,马来沉香适宜的初代培养基为1/2MS+6-BA0.7 mg/L+NAA0.1 mg/L,继代培养基为1/2MS+6-BA0.1 mg/L+NAA0.1mg/L,生根培养基为1/2MS+IBA0.3 mg/L+NAA 2.0 mg/L培养3天后移入1/2MS培养基中继续培养。增值系数为2.5倍,生根率为77.19%。

不同施肥方法对马来沉香和土沉香苗期根系生长的影响

以珍贵树种马来沉香、土沉香1年生播种苗木为材料进行试验,研究指数施肥、平均施肥对2种沉香苗期根系生长动态及对N的响应特征。结果表明,经氮素处理的马来沉香、土沉香的根系生物量、根系长度、根系表面积、根系平均直径、根体积等指标均显著高于对照处理(P<0.05)。经指数施肥处理的苗木根系生长及各形态指标均高于平均施肥处理。同一时期在相同施肥处理方式下,马来沉香苗根系生长及根系形态指标值均高于土沉香。洛伦兹模型对不同施肥方法处理下马来沉香、土沉香苗木生长指标与根系生物量进行拟合,具有较高的R2(0.95—0.99)和较低的RSMD(0.538—2.352);抛物面模型对不同施肥方法处理下马来沉香、土沉香苗木生长指标与比根长进行拟合,具有较高的R2(0.92—0.99)和较低的RSMD(3.218—6.692)。

不同浓度指数施肥方法下马来沉香与土沉香苗期需肥规律

设置每株施N 0、1000、2000、3000、4000、5000 mg的6个氮素水平处理,进行珍贵树种马来沉香与土沉香苗期指数施肥试验,探讨不同氮素供应水平对其苗期生长、叶片养分含量以及根系形态指标的影响,旨在揭示马来沉香与土沉香苗期的氮素需求特征,确定其适宜施氮量。结果表明,马来沉香与土沉香苗期的地径、苗高以及生物量随着氮素供应水平的增加而增大,当每株施氮量大于3000 mg后其生长和生物量趋于稳定;施氮处理为3000mg/plant时的马来沉香与土沉香根系各生长和形态指标均显著大于其他处理;运用临界浓度法确定出马来沉香苗期叶片氮、磷、钾含量的临界值分别为35.55、1.75、17.99 g/kg,最适含量范围分别为35.55～53.11、1.75～2.73、17.99～26.63 g/kg;土沉香苗期叶片氮、磷、钾含量的临界值分别为37.78、3.08、18.89 g/kg,最适含量范围分别为37.78～58.56、3.08～4.44、18.89～29.28 g/kg。综合3种养分的最适含量范围,推断出马来沉香和土沉香苗期的最适施氮量均为3000 mg/plant。

马来沉香组织培养技术研究

以马来沉香茎段为外植体,分别对外植体的消毒、启动培养、增殖培养、壮苗培养、生根培养、炼苗移栽环节进行研究,着重探索马来沉香组织培养技术各个环节的最佳培养基配方,为马来沉香的工厂化育苗提供技术指导。结果表明:马来沉香最佳消毒方法是用0.1%升汞消毒4～5min;启动率最高的培养基配方是1/2MS+6-BA 0.2mg·L-1+NAA 0.1mg·L-1+蔗糖30g·L-1+琼脂5.8g·L-1,启动率达70.5%;增殖系数最高的培养基是1/2MS+0.1mg·L-16-BA+25g·L-1蔗糖+5.8g·L-1琼脂,增殖系数达2.9;最佳壮苗培养基是1/2MS+30g·L-1蔗糖+5.8g·L-1琼脂;最佳生根培养基为1/2MS+NAA 5.0mg·L-1+20g·L-1糖+6g·L-1琼脂,培养2d后移入1/2MS培养基继续培养,生根率为83%;马来沉香移栽较难成活,在泥炭土∶黄泥土(2∶1)的基质上成活率最高,移栽成活率65%。

微波结合真菌发酵液辅助水蒸气蒸馏法提取马来沉香挥发油的工艺优化

目的采用正交试验设计优化微波结合内生真菌发酵液浸泡辅助水蒸气蒸馏法提取马来沉香挥发油的提取工艺。方法对真菌发酵液浸泡时间、料液比及微波时间3个因素进行考察,将不同工艺所得挥发油的乙醚萃取液进行GC-MS分析,以总峰面积和倍半萜、芳香族类化合物的总峰面积作为综合指标,优化最佳工艺条件。结果真菌发酵液浸泡时间对沉香挥发油提取工艺具有显著影响,最佳工艺参数为发酵液浸泡4 d,料液比1∶8,微波时间对提取没有影响。结论真菌发酵液浸泡辅助水蒸气蒸馏法可用于沉香挥发油的提取。

应用分子生物学方法鉴定马来沉香

DNA条形码技术是利用基因组中一段短的标准序列进行物种鉴定的新技术。本研究对截获的一批非法入境木材样品的ITS1及TrnL-TrnF序列进行PCR扩增和测序。将测序结果与Gen Bank中的同源序列进行比对分析,发现未知样品与马来沉香（Aquilaria malaccensis）的序列相似性最高,达到99%~99.7%,遗传距离最小,为0.00~0.01。用邻接（NJ）法构建ITS1和TrnL-TrnF序列的系统进化树,未知样品均与马来沉香聚为一枝,bootstrap values分别为77%和100%。上述结果表明,未知样品为马来沉香,可利用ITS1和TrnL-TrnF从分子水平区分马来沉香与其他混伪种。

N素指数施肥对沉香苗期光合生理特性的影响

设置每株0、1000、2000、3000、4000、5000mg6个施肥量处理(编号为Ⅰ～Ⅵ),进行珍贵树种马来沉香与土沉香苗期N素指数施肥试验,探究不同N素供应水平对其苗期生长、光合生理特性的影响。结果表明:施入N素对马来沉香、土沉香生长及光合特性有着显著影响。地径、苗高以及生物量随着N素浓度增加而增大,至N施用量每株>3000mg后其生长表现和生物量趋于稳定。马来沉香(1995.33cm2)与土沉香(1366.57cm2)处理Ⅳ整株叶面积最大,在苗期生长季内的比叶质量变化趋势是生长初期和末期低,而中期比较高,马来沉香对照(处理Ⅰ)与土沉香指数施肥处理Ⅰ～Ⅴ的比叶质量季节变化曲线是双峰式。马来沉香与土沉香指数施肥处理Ⅳ(3000mg/株)的光合能力最大。