鸡马立克氏病火鸡疱疹病毒间接免疫荧光检测方法的建立与比较

为建立鸡马立克氏病火鸡疱疹病毒(MDV HVT)的间接免疫荧光方法,将MDV HVT病毒接种96孔细胞板培养(CEF),72 h后用鸡抗马立克氏病病毒阳性血清作为一抗和兔抗鸡荧光抗体作为二抗,对反应条件进行优化,建立了间接免疫荧光方法(IFA)。并与经典的马立克蚀斑计数方法进行病毒滴度的测定比较,运用统计学方法分析,P小于0.05,相关系数为0.995,说明两种方法相关性很好,两种方法均可用于马立克氏病病毒的滴度测定。IFA方法较蚀斑计数方法操作简便快捷,可代替蚀斑计数方法用于马立克氏病活疫苗的病毒含量的初步测定,同时为2025年版《中国兽药典》马立克氏病活疫苗增加IFA鉴别检验方法积累实验数据。

胸腺制剂对鸡马立克氏病疫苗免疫增强作用的研究

将一日龄ＳＰＦ来航鸡分成４组，饲养在隔离器中。第１组１日龄接种ＭＤ疫苗，同时皮下注射０．５ｍＬ胸腺制剂；第２组１日龄接种ＭＤ疫苗时不加免疫增强剂；第３组、第４组均不接种ＭＤ疫苗，也不注射免疫增强剂。第１、２、３组于１３日龄时用ＢＪＭＤＶ－１强毒株攻毒。结果显示：第１组、第２组、第３组分别于攻毒后２８、２４、１７ｄ开始出现死亡，第４组没有死亡。第１组的攻毒保护率为４０．０％，比第２组保护率１５．０％有明显提高。此外，于１１、２８、５６日龄时检测了外周血液中Ｔ淋巴细胞百分率。２８日龄和５６日龄时第１组的外周血Ｔ淋巴细胞活性高于第２组。试验结果表明胸腺制剂对鸡马立克氏病疫苗有免疫增强作用。

马立克氏病疫苗免疫增强剂对雏鸡血液T淋巴细胞数量的影响

观察了马立克氏病 (MD)疫苗免疫增强剂配合火鸡疱疹病毒 (HVT)疫苗免疫雏鸡后外周血清ANAE+ T淋巴细胞数量的变化。结果表明 ,MD疫苗免疫增强剂不但可促进外周血液ANAE+ T淋巴细胞总数的增多 。

鸡马立克氏病疫苗免疫增强剂的研究 Ⅰ、免疫增强剂对火鸡疱疹病毒(HVT)疫苗蚀斑保护试验

将自行研制的免疫增强剂与鸡马立克氏病火鸡疱疹病毒(HVT,Fc—126株)活疫苗联合使用。结果表明该免疫增强剂能显著提高HVT疫苗的保护率和HVT苗的活力,同时能提高机体T、B淋巴细胞免疫功能。联合使用的结果,经实践证明能更有效地控制鸡马立克氏病的发生。

鸡马立克氏病疫苗免疫增强剂对机体T淋巴细胞免疫功能影响的研究

辽宁省益康生物制品厂研制的鸡马立克氏病疫苗免疫增强剂(MMZ)与鸡马立克氏病火鸡疱疹病毒活疫苗(HVT)同时免疫1日龄雏鸡后 ,可显著地提高机体T淋巴细胞免疫功能 ,增强疫苗的免疫效果 ,应用MMZ +HVT免疫组与疫苗免疫组 ,对照组的T淋巴细胞阳性率( %)有显著差异(p<0.05)。

血清1型马立克氏病病毒单克隆抗体的制备及其特异性鉴定

为制备血清1型马立克氏病病毒(Marek’s disease virus,MDV)单克隆抗体,以超速离心浓缩的血清1型MDV CVI988/Rispens毒株免疫BALB/c小鼠,应用杂交瘤技术制备单克隆抗体。通过亚克隆、间接ELISA和间接免疫荧光(Indirect immunofluorescence assay,IFA)筛选,获得3株分泌特异性抗血清1型MDV单克隆抗体的杂交瘤细胞系,分别命名为4D9、1C5和1F10,并对其进行特异性分析。间接ELISA结果显示,4D9、1C5和1F10制备的腹水ELISA效价分别达5.1×10^(4)、82×10^(5)、4.1×10^(5),可用于后续建立ELISA检测方法;IFA结果显示,4D9、1C5和1F10制备的腹水与不同血清1型MDV毒株具有良好的反应性,效价可分别达1∶12800、1∶25600和1∶12800,与血清3型MDV毒株和其他常见禽源病毒均没有交叉反应,特异性良好;亚型检测结果显示,4D9抗体为IgG2a/κ型,1C5抗体为IgG2b/κ型、1F10抗体为IgG1/κ型;应用1C5建立的IFA方法能检出至少5PFU CVI988/Rispens毒株感染,适用于血清1型MDV的检测。综上,制备的单克隆抗体可用于血清1型MDV的检测,为MDV致病机制研究及诊断试剂研发提供基础。

马立克氏病疫苗保护与免疫增强复合剂的安全性、攻毒保护率及现场应用试验

对自行研制的马立克氏病疫苗保护与免疫增强复合剂进行了安全性、攻毒保护率及现场应用试验。结果表明,该复合剂应用于1日龄SPF雏鸡安全可靠;与鸡马立克氏病火鸡疱疹病毒(HVT)疫苗联合应用,免疫1日龄SPF雏鸡可使其有效抵抗马立克氏病病毒强毒攻击;该复合剂在2℃～8℃下保存4年后仍然有效;其现场应用效果明显,可确实提高HVT疫苗的免疫效果。

鸡马立克氏病的诊断方法与防控建议

马立克氏病是鸡最常见的淋巴组织增生性疾病,其特征是形成外周神经及其他器官中的单核细胞浸润和肿瘤。鸡马立克氏病是由疱疹病毒引起的,具有高度传染性,其致病性与其他鸡淋巴肿瘤疾病不同。鸡马立克病的发病率和死亡率高,危害大,常继发鸡病原体,是一种急性传染病,马立克氏病破坏法氏囊、胸腺、脾脏等免疫器官,引起强烈的免疫抑制,并影响各种疫苗的预防效果。病鸡是鸡马立克氏病主要传染源,一旦感染可迅速在鸡群中散播,造成严重的经济损失,因此可以通过实施合理的马立克病诊断和监测方法,积极推广有效的综合防治措施,进一步降低马立克病对鸡造成的经济损失。本文就鸡马立克病给养禽业造成的损失,对鸡马立克病的病因、流行特点、诊断方法以及防控措施等进行了详细论述,以期为防治鸡马立克氏病提供积极有效的方案。

马立克氏病疫苗保护与免疫增强复合剂对火鸡疱疹病毒疫苗蚀斑保护率及保存期试验

就本厂研制的马立克氏病疫苗保护与免疫增强复合剂对火鸡疱疹病毒疫苗蚀斑的保护率及保存期进行了试验。结果表明,用该复合剂配合马立克氏病火鸡疱疹病毒疫苗稀释剂可明显提高对疫苗蚀斑的保护率;该复合剂在2℃～4℃条件下保存4年后,仍具有很好的效果。

一例鸡马立克氏病的诊治报告

鸡马立克氏病也被称为“鸡麻痹病”,由马立克氏病毒引起的传染性疾病,主要侵害鸡的淋巴组织、神经系统和内脏器官,还可引起鸡的免疫抑制。该病传染性强、病死率高,是危害养鸡业的严重传染病之一。目前尚无特效药物治疗鸡马立克氏病,但可以使用一些辅助药物如止痛药、抗炎药等缓解症状,同时加强饲养管理、提高鸡的抵抗力、减少应激因素,降低发病率。本文将临洮县一例鸡马立克氏病的诊治情况总结成文,以供大家参考。

鸡马立克氏病的病因和防控措施

马立克氏病(MD)是由马立克氏疱疹病毒(MDV)引起的一种病毒性传染病,该病分布范围广,在全世界养禽的国家几乎都有发生,给世界养禽业带来严重的危害。鸡、鹌鹑、山鸡等都可以感染MDV,但是鸡的易感性最强,对鸡群造成的危害最大。本文详细介绍了鸡马立克氏病的发病原因和防控措施,以期为做好该病的防控提供技术参考。

复方中草药对马立克氏病蛋鸡生产性能及血清生化指标的影响

为探究复方中草药对蛋鸡场马立克氏病鸡血清生化指标的影响,本试验挑选80只马立克氏病确诊鸡,随机分为四组,即对照组、试验Ⅰ、Ⅱ和Ⅲ组,分别给予0、100、200和300 mg/kg复方中草药制剂治疗。结果表明:与对照组相比,(1)试验Ⅰ、Ⅱ和Ⅲ组终测体重、平均日增重和平均日耗料量显著升高(P<0.05),产蛋率显著升高(P<0.05),料蛋比显著降低(P<0.05),马立克氏病鸡死亡率显著降低(P<0.05);(2)试验Ⅰ、Ⅱ和Ⅲ组的球蛋白、总蛋白和甘油三酯含量显著升高(P<0.05),谷丙转氨酶和谷草转氨酶显著降低(P<0.05)。综上所述,复方中草药可以有效改善马立克氏病蛋鸡的生产性能和血清生化指标,对马立克氏病有显著的治疗效果,且在本试验条件下复方中草药的最佳剂量为300 mg/kg。

一例湘黄鸡马立克氏病的诊治

衡南县某湘黄鸡场暴发了以运动失调、两腿呈“劈叉”姿势、翅膀一侧或两侧下垂、扭头或仰头、拉黄白色或黄绿色稀粪等为主要特征的疾病,发病死亡率达27.7%。经病理剖检、实验室检测,结合临床症状,确诊为马立克氏病感染。通过采取综合防疫措施使疫病得到控制。

鸡马立克氏病的流行特点及预防措施

鸡马立克氏病是由疱疹病毒感染引发的一种以外周神经、性腺、虹膜以及各脏器、皮肤等组织出现增生的传染性疾病。该病可在鸡群中广泛传播,具有较强的传染性,且致死率较高,主要为害4周龄以内的雏鸡,被感染的鸡会表现出渐进性消瘦、精神沉郁、神经症状等,严重影响鸡的正常生长,甚至导致大批量死亡。为避免养殖户因鸡马立克氏病造成严重的经济损失,笔者根据多年养鸡经验,综合分析了该病的流行特点及临床症状,并总结了一套预防方法,为养殖户预防鸡马立克氏病提供参考。

马立克氏病疫苗保护与免疫增强复合剂的研究

本项研究通过科学组方 ,成功地研制出了鸡马立克氏病疫苗保护与免疫增强复合剂。用该复合剂稀释鸡马立克氏病火鸡疱疹病毒活疫苗 (HVT)较原稀释液 (SPG)能提高活疫苗效价 3 0 %以上 ;与马立克氏病火鸡疱疹病毒活疫苗同时免疫 1日龄雏鸡能显著提高免疫鸡的细胞免疫水平 (T淋巴细胞数 ,P <0 0 1 )和体液免疫水平 (B淋巴细胞数、血清中和抗体水平 ,P <0 0 5 ) ,提高免疫接种鸡的攻毒保护率 (P <0 0 5 )。

鸡马立克氏病疫苗鸡胚免疫技术的应用

鸡胚免疫技术特指在孵化后期对鸡胚进行免疫接种,使得雏鸡一出生便获得主动免疫的技术。作为一种肿瘤性疾病,鸡马立克氏病(Marek’sdisease,MD)可引起鸡淋巴增生、各种器官和肌肤发生肿瘤病灶等。近年来,随着鸡养殖行业规模化、集约化的发展,鸡群饲养密度的不断增加,鸡马立克氏病的发生概率逐年攀升。此外,该病广泛流行于全世界,传染性强,危害大,与亚洲鸡瘟和传染性法氏囊病被列为阻碍养鸡行业发展的三大疾病,严重影响着我国养鸡业的健康发展。目前,对鸡马立克氏病尚无有效的治疗药物,主要依靠疫苗接种防治此病,故实现鸡马立克氏病的有效免疫具有重要意义。本文详细介绍鸡马立克氏病的特点及综合防控措施,系统剖析鸡胚免疫技术的优缺点及其在各个领域的应用情况,旨在为相关从业人员提供参考。

鸡马立克氏病三价活疫苗剂量配比和免疫剂量的研究

用马立克氏病病毒BJMDV-1株分别攻击由CVI988/B5、HCV2/B5和FC126/B5毒株组成的,剂量配比不相同的马立克氏病(MD)三价活疫苗免疫的鸡群,结果表明MD三价活疫苗中CVI988/B5、HCV2/B5及FC126/B5毒株的合适配比为2:1:2。按照此剂量配比制备的MD三价活疫苗,用RB1B超强毒株进行攻毒,当RB1B攻毒对照组MD阳性率为85.71%时,MD三价活疫苗的半数保护剂量(PD50)均数为111PFU/只,95%置信区间为585～53PFU/只的范围内,并确定MD三价活疫苗的免疫剂量为2500PFU/只。用该剂量对鸡进行MD三价活疫苗免疫,可使鸡体产生抗RB1B超强毒株攻击的坚强免疫力。

鸡马立克氏病防控技术研究进展

鸡马立克氏病是危害养禽业最为严重的免疫抑制与肿瘤病,也是能用疫苗免疫的肿瘤病。本文针对最近五年我国鸡马立克氏病的流行变异、免疫防控与未来发展进行总结分析,以期为国内家禽养殖业、生物制品行业提供参考。

西咪替丁对鸡马立克氏病疫苗免疫的增强作用

1日龄黄羽鸡雏，皮下注射火鸡疱疹病毒（HVT）冻干疫苗，同时应用10、100mg／（kgBW·d）西咪替丁，10 mg／（kgBW·d）左旋咪唑，连用3d，空白对照组不用药。测定外周血T淋巴细胞转化和血清抗HVT抗体滴度。结果表明10mg／（kgBW·d）西咪替丁用药后7～28d，100mg／（kgBW·d）西咪替丁用药后14～35d，鸡外周血T淋巴细胞转化比空白对照组明显升高；10mg／（kgBW·d）左旋咪唑用药后14～28d，鸡外周血T淋巴细胞转化也比空白对照组明显升高。10～100 mg／（kgBW·d）西咪替丁用药后7～28d，鸡血清抗HVT抗体滴度明显高于空白对照组；10mg／（kgBW·d）左旋咪唑用药后 7～14d，鸡血清抗HVT抗体滴度也比空白对照组明显升高。

一例鸡马立克氏病的诊断及其病毒Meq基因序列分析

为确定四川省乐山市某蛋鸡场病鸡的发病原因,该试验采用临床剖检、PCR方法对发病鸡进行诊断,并对病毒Meq基因全序列进行PCR扩增、测序和序列分析。剖检结果为病鸡心脏、肝脏和脾脏表面均有白色结节,PCR鉴定结果为马立克氏病病毒(Marek’s disease virus,MDV)阳性。MDV Meq基因全序列长度均为1020bp,核苷酸和氨基酸同源性分别为99.6%~99.9%和98.8%~100%,与MDV参考序列的核苷酸和氨基酸同源性分别为98.4%~99.8%和95.9%~99.4%。4个Meq测序序列存在4个新的氨基酸突变位点,均具有D80Y、V115A、T139A、P176R和P217A氨基酸突变位点,符合MDV强毒株的序列特征。系统发育树显示4株乐山市分离毒株测序序列与近年国内大部分参考毒株聚在同一分支上,亲缘关系较近,未形成明显的地理分支,乐山MDV样品132bp重复序列的拷贝数及Meq基因的变异均符合MDV强毒株的序列特征,且存在新的氨基酸突变。