Box-Behnken响应面法优选低共熔溶剂提取马蹄金总黄酮工艺

目的 优选低共熔溶剂提取马蹄金总黄酮的工艺。方法 以低共熔溶剂体系摩尔比、含水量、超声功率、超声时间为单因素变量,以马蹄金中黄酮类成分提取率为评价指标,采用Box-Behnken响应面法优选总黄酮提取工艺,并进行验证试验。结果 优选的提取工艺为低共熔溶剂氯化胆碱-乳酸(摩尔比1∶2),含水量为70%,超声(功率为180 W)提取30 min。验证试验结果显示,在此条件下的总黄酮提取率与回归模型预测值的相对误差为0.55%。结论 该优选工艺操作简便、重复性好,可用于马蹄金总黄酮的提取。

气相色谱-串联质谱法分析不同产地马蹄金挥发性成分

为探究不同产地马蹄金的挥发性成分,建立气相色谱-串联质谱法对河北、广西、四川、贵州、浙江5个产地的马蹄金样品挥发性成分进行测定,采用面积归一化法计算各成分的相对含量。称取0.5 g马蹄金样品,以乙酸乙酯为提取溶剂,冷浸2 h,低温超声提取30 min,滤液作为样品溶液。通过谱库检索,5个产地马蹄金的挥发性成分中共鉴定出有机酸、醇、烯、酯、烷烃等35种化合物,其中14种是共有成分,6种是产地特有成分,相对含量较高的挥发性成分分别为十六烷酸、亚油酸、桦木醇、α-亚麻酸、β-谷甾醇、菜油甾醇、豆甾醇,相对含量分别为27.99%、13.14%、12.91%、11.83%、11.64%、8.16%、5.28%。该方法可对马蹄金中多种挥发性成分进行定量分析,为马蹄金的质量控制和药效研究提供参考。

马蹄金愈伤组织诱导及植株再生研究

以马蹄金无菌苗的下胚轴、子叶和叶片作为外植体 ,结合不同植物生长调节剂组合和不同基本培养基 ,探讨了马蹄金离体培养的方法和影响因素。结果表明 ,不同植物生长调节剂组合的培养基对愈伤组织诱导频率有显著影响 ,以MS培养基作愈伤组织诱导的基本培养基效果较好 ,使用MS +1.0mg/L 2 ,4 -D +0 .2mg/L6 -BA或MS +1.0mg/L 2 ,4 -D +0 .2mg/LKT作为愈伤组织诱导培养基 ,对 3种外植体愈伤组织诱导的效果均较好 ,出愈率均为 10 0 % ,而且愈伤组织质地好、生长旺盛 ,再用MS +0 .1mg/L 2 ,4 -D +2 .0mg/L 6-BA +3.0mg/LAgNO3 作愈伤组织分化培养基出苗效果最佳 ,愈伤组织分化频率达 2 0 .7%。

马蹄金叶片中铜、铅含量及其对生理指标的影响

研究了草坪草马蹄金对不同污染土壤的Cu、Pb含量 .结果表明 ,马蹄金体内Cu含量 (4 4 8mg·kg-1)高于Pb含量 (2 5 5 9mg·kg-1) 两种元素在体内的分布特征是根、茎 >叶 (P <0 0 5 ) ,并随着土壤内重金属含量增加而增加 ,但富集系数呈下降趋势 ;马蹄金对Cu的富集系数 (0 784 )高于Pb的富集系数(0 4 6 5 ) .自然状态下不同程度Cu、Pb复合污染对马蹄金叶片细胞膜及细胞保护系统的影响结果表明 ,随着Cu、Pb浓度增加 ,叶片内叶绿素a、叶绿素a/b分别由 1 6 10mg·g-1FW和 4 10 0下降到 1 0 17mg·g-1FW和 2 2 99;SOD活性先升高至 10 6 4 94U·g-1FW ,随后下降至 86 2 5 8U·g-1FW ;POD活性则逐渐增加 ;

野生和栽培马蹄金抗旱性比较及其抗旱机制初探

为了鉴别野生和栽培马蹄金(Dichondra repens)的抗旱性,探讨其抗旱适应性的生理机制,对野生和栽培马蹄金进行了土壤水分胁迫处理,系统测定了野生和栽培马蹄金叶片内超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化物酶(POD)、硝酸还原酶的活性和游离脯氨酸、可溶性糖、可溶性蛋白、NO2-/NO3-含量以及总DNA片断化程度。结果表明野生和栽培马蹄金在抗旱适应性上存在显著差异。随水分胁迫强度的增加,野生马蹄金叶片内抗氧化酶活性及其升高幅度,渗透调节物质的积累量及积累速度均高于栽培马蹄金,而叶片含水量下降的程度、DNA片断化程度低于栽培马蹄金,其中野生和栽培马蹄金叶片内NO2-/NO3-含量,硝酸还原酶的活性变化差异尤其显著,野生马蹄金叶片内的NO2-/NO3-含量、硝酸还原酶的活性明显高于栽培马蹄金,二者最大含量分别相差10和2.2倍。研究结果说明了野生马蹄金对干旱环境的适应性强于栽培品种;在干旱逆境下马蹄金叶片内的NO2-/NO3-含量的变化在一定程度上可能反映了内源NO的变化,内源NO浓度的高低可能是野生和栽培马蹄金不同抗性的真正原因。

不同生长调节剂对马蹄金愈伤组织诱导的影响

马蹄金是一种优良的地被兼观赏草坪植物。采用正交设计试验法 ,研究了四种不同生长调节剂对马蹄金子叶、叶片、叶柄和下胚轴愈伤组织诱导的影响。结果表明 :生长调节剂是诱导愈伤组织的关键 ,2 ,4 D对愈伤组织诱导具有显著的影响 ,适宜于马蹄金愈伤组织诱导的培养基及生长调节剂为MS +1 .0mg/L 2 ,4 D +0 .2mg/L 6 BA +0 .2mg/LKT +1 .0mg/Lα NAA。

不同外植体对马蹄金愈伤组织诱导及分化的影响

从不同外植体的生长时间、切取方式和光照条件诸因素探讨了对草坪地被植物马蹄金Dichondrarepens愈伤组织诱导及分化的影响作用。结果表明 :下胚轴和子叶的生长时间只对愈伤组织诱导的始愈时间和生长势有影响 ,生长期越短 ,则始愈时间缩短 ,愈伤组织生长势强 ,而对出愈率、愈伤组织状态和愈伤组织分化率无明显作用 ;光照和黑暗培养只对下胚轴诱导愈伤组织的生长状态有影响而对子叶诱导愈伤组织无作用 ;外植体的不同切取方式对愈伤组织诱导的始愈时间有影响 ,经切取后可缩短始愈时间 ;仅从完整子叶离体培养诱导愈伤组织获得了再生植株 ,其分化频率为 13 9%～ 18 6 %。

不同光照强度对马蹄金叶的特征及总黄酮含量的影响

以马蹄金叶为研究对象,利用遮荫网设置光照梯度(透光率分别为:对照100%、76.19%、59.27%、38.09%),对其形态特征及总黄酮含量进行测定和分析。结果表明:(1)随着光照强度的降低,马蹄金叶片的长度、宽度及厚度均表现出先增大后减小的趋势,在76.19%透光率下达到最大值;叶柄长度随着光强的减弱而增长,叶片的形态并未发生显著变化。(2)光照强度对马蹄金叶片总黄酮含量有影响,透光率为76.19%时,马蹄金叶中总黄酮含量最高。分析表明76.19%的透光率有利于马蹄金的生长并能提高马蹄金叶中总黄酮的含量。

马蹄金草坪草对干旱胁迫的生理响应研究

为明确马蹄金（Dichondra repens Forst）对干旱胁迫的生理响应机理,采用盆栽法研究不同灌溉梯度下马蹄金草坪草叶片相对含水量、丙二醛、可溶性糖、叶绿素、游离脯氨酸的含量和超氧化物歧化酶活性的变化,探讨马蹄金草坪草的抗旱性问题,为马蹄金草坪的建植和养护管理提供依据.结果表明：干旱胁迫下马蹄金叶片相对含水量和叶绿素含量显著下降,超氧化物歧化酶活性呈先急剧增加,后又急剧下降的变化趋势,丙二醛、可溶性糖和游离脯氨酸的含量显著上升,以胁迫12～16 d下降或上升幅度最大.因此,马蹄金对干旱胁迫表现为一定的耐旱性,但干旱胁迫到一定程度（胁迫12d左右）,需对其进行浇水养护,防止其萎蔫枯黄.

草坪草马蹄金与结缕草种子萌发期抗旱性比较

通过不同浓度分子量为6 000的聚乙二醇(PEG)溶液模拟干旱的方法及不同土壤含水量下成坪速度的试验,比较了马蹄金Dichondra repens与结缕草Zoysia japonica种子萌发期抗旱性强弱。结果表明,马蹄金、结缕草的发芽势随干旱胁迫强度的增加呈下降趋势,马蹄金比结缕草更易受影响,导致出芽整齐度降低;马蹄金种子萌发期抗旱性临界值为-11 bar,结缕草为-7 bar,若以发芽率作为抗旱性衡量标准,则马蹄金种子萌发期抗旱性比结缕草强;短期的轻度土壤水分胁迫有利于马蹄金和结缕草的成坪,严重土壤水分胁迫使成坪速度明显减慢,且结缕草比马蹄金更易受影响。

光照强度对马蹄金保护酶活性和光合特性的影响

通过盆栽试验,利用遮荫网设置光照梯度(透光率分别为100%、76.19%、59.27%、38.09%),研究了光照强度对马蹄金生理指标和光合特性的影响。结果表明,随着光照强度的降低,马蹄金叶片中SOD、POD、CAT活性均逐渐增大;O2-含量和MDA含量均呈下降趋势,说明高度遮荫马蹄金叶片膜系统受到伤害;叶绿素a和叶绿素b均表现出上升的趋势,叶绿素a与叶绿素b的比值逐渐下降;光合有效辐射、净光合速率和蒸腾速率逐渐降低。光合有效辐射均呈"单峰"型,最高峰出现在13∶00。遮荫条件下T1处理蒸腾速率最大。高度遮荫不利于马蹄金的生长。

干旱胁迫下马蹄金草坪反射光谱研究

通过在不同灌水处理下马蹄金草坪干旱胁迫试验，对草坪反射光谱的变化及所对应的叶片相对含水量、叶绿素含量以及草坪外观变化进行测定。结果表明：不同灌水处理下马蹄金草坪反射光谱在可见光波段呈规律性变化。随着干旱胁迫程度的加重，其光谱反射率随土壤含水量逐渐降低而依次升高，在波峰（556mm）和波谷（679mm）处尤为明显，蓝光（400～475mm）和红光（580～700mm）范围的反射光谱增加，与叶绿素含量呈正相关。在同一灌水处理中，草坪可见光范围反射光谱随干旱的加剧而增加，且与马蹄金植株叶片相对含水量呈显著负相关，与草坪叶绿素含量则呈正相关，且叶片相对含水量与反射光谱的相关性高于叶绿素含量与反射光谱的相关性，它们之间的关系可以用直线回归方程来表示。

西南地区野生马蹄金无性繁殖特性研究

采用野生马蹄金Dichondra repens(SD200310、SD200411、GD200504、SD200304)为材料,研究了无性系构件克隆生长的时间动态、形态、空间构型等。结果表明:1)主茎增长率随时间推移而下降,空间扩展依赖源株和早生分株、叶片的贡献;2)移植植株生长和茎叶扩展之间对物质能量的需求变换,导致了无性系的生长格局及无性系构件和生物量在空间上的分配与配置差异;3)以5 cm×5 cm草皮间铺栽植在密度为D2(40 cm×40 cm)时,主茎长(22.33 cm)、叶片数(28.38片)、节数(24.76节)和节长(1.42 cm)的均值达最大值,呈最佳生长状态,为合理的建植密度;4)随密度增加,间隔子长度递减,分枝角度增加,分枝强度减小,体现了在密度影响下的可塑性变化。

马蹄金野生种与栽培种在自然降温过程中的抗寒性研究

在自然降温过程中,马蹄金Dichondrarepens的野生种与栽培种叶片内的可溶性糖、游离脯氨酸的含量、相对电导率发生明显变化。其中,脯氨酸先降低后升高;可溶性糖先上升后下降;相对电导率逐渐升高。在观测的温度范围内,野生马蹄金叶内的游离脯氨酸含量高于栽培种;可溶性糖含量上升幅度远大于栽培种;相对电导率的上升幅度低于栽培种。结果表明:马蹄金的野生种比栽培种耐寒。

西南区野生马蹄金居群生态特性及形态变异

通过野外调查和田间观测,对我国西南地区马蹄金野生居群生态特性及形态变异进行了研究,发现马蹄金不同居群外部形态存在较大变异,变异系数为14.8%￣67.5%,平均变异系数达32.1%。部分性状间存在显著或极显著相关性,相关系数最大达0.977,说明我国西南地区马蹄金野生资源具有丰富的遗传多样性。通过形态聚类分析,可将23份野生材料分为4个类群,分别是大叶高丛型、大叶矮丛型、小叶矮丛型、小叶短茎型。聚类结果与材料的地理分布基本一致。

马蹄金中铁、钙、镁、铜、锌、锰、镍的形态分析

目的:研究马蹄金全草中微量元素的存在形态。方法:采用超声波提取,电感耦合等离子发射光谱法(ICP-AES)对马蹄金不同形态中 Fe、Ca、Mg、Cu、Zn、Mn、Ni 等元素进行分析。结果:Fe 元素在马蹄金中含量最高,而 Cu 元素含量最低;Ca 的提取率最高,Fe 的提取率最低;Ca、Mg、Cu、Zn、Mn、Ni 6种元素的可溶态均大于悬浮态;且渣中的微量元素含量较高。结论:马蹄金中的微量元素是以无机态为主,多种形态共存的复杂体系。

民族药马蹄金提取物对小鼠肝损伤的保护作用

目的 :观察马蹄金提取物对四氯化碳 (CCl4)所致小鼠肝损伤的保护作用。方法 :以不同浓度不同剂量的CCl4 给予小鼠 ,造成肝损伤模型 ,分别检测在CCl4 损伤肝脏 16h ,7d ,3周后的血清酶学有关指标及对肝脏作病理学的检查。结果 :马蹄金提取物各剂量组 (3 2 .5,16.3 ,8.2 g·kg- 1)经连续灌胃给药后 ,对因CCl4 所致的血清转氨酶 (ALT、AST)的明显升高均有不同程度的降低作用 (P <0 .0 5,P <0 .0 1)。病理切片显示药物治疗组的肝损伤程度较模型组明显减轻。结论 :马蹄金提取物对CCl4 所致小鼠化学毒性的肝损伤 ,具有一定的保护作用。

镉胁迫对白三叶和马蹄金种子萌发的影响

采用不同浓度的镉处理白三叶和马蹄金种子,研究两者萌发阶段对镉胁迫的反应。结果表明:镉浓度低于5mg/L时促进了白三叶和马蹄金种子的萌发。镉浓度为10mg/L时,白三叶发芽率和活力指数开始下降,而马蹄金依然高于对照。随镉处理浓度的继续增高,两者种子发芽率和活力指数逐渐下降。两个草种相比较,在相同镉胁迫作用下,马蹄金比白三叶表现出了较强的耐镉性。

马蹄金与匍茎翦股颖光合生理生态的比较研究

研究表明，１．通过光饱和点、光补偿点、ＣＯ＿２补偿点及叶绿素ａ／ｂ比值等测定，马蹄金与匍茎剪股颖均属喜光、耐荫的Ｃ＿３植物。马蹄金对强光适应性大于匍茎翦股颖。因而在芜湖地区作为大田草坪种植，则马蹄金优于匍茎葛股颖。２．ＮａＨＳＯ＿３均有增强光合速率、加速光合产物输出、增加于物质积累及提高生物产量的效应。光呼吸抑制剂在草坪生产上大有可为。

马蹄金草坪杂草发生特点及防除方法研究

研究了马蹄金草坪杂草的发生特点及采用人工除草和复配喷施马蹄净和大杀禾,防除杂草的方法,结果表明:(1)昆明地区新建马蹄金草坪秋冬季节杂草种类共有19种,其中,发生普遍且危害严重的杂草有金荞麦、荠菜、牛膝菊、鬼针草、马唐、狗尾草和紫苏,以荠菜和金乔麦发生密度和频度最高;(2)不同除草措施的除草效果及安全性分析,人工除草,复配喷施马蹄净195g/hm2和大杀禾750mL/hm2,马蹄净240g/hm2+大杀禾825mL/hm2是较适宜马蹄金草坪杂草的防除方法,若用药量增加为复配喷施马蹄净300g/hm2+大杀禾900mL/hm2,会使马蹄金草坪出现矮化、黄化,甚至死亡等药害症状。若采用化学除草剂进行马蹄金草坪杂草防除,应本着"先试验,后推广"的原则用药,以保证用药安全。