马钱子总生物碱提取纯化工艺及抗肿瘤研究

目的:探讨马钱子总生物碱提取纯化工艺及其体外抗肿瘤研究。方法:采用氨性氯仿浸提、酸水纯化得到总生物碱,HPLC测定提取液及纯化后浓缩液中马钱子碱和士的宁的含量,以转移率为指标考察提取和纯化工艺。采用MTT法,以IC50为指标比较马钱子总生物碱的体外抗肿瘤活性。结果:采用5倍量氯仿提取5次,每次12h;1mol/L盐酸纯化1次为最佳工艺制备马钱子总生物碱,平均得率为3.49%,其中士的宁和马钱子碱分别占46.76%和26.51%。马钱子总生物碱对十种细胞的抑制效果在72h通过IC50值来比较:MGC-803>A2780>LoVo>SMMC-7721>Hela>A549>MDA-MB-231>MKN-45>BGC-823>SGC-7901,总生物碱对MGC-803,A2780细胞株的IC50分别达到了295.79ng/mL,419.07ng/mL。结论:优选的纯化工艺简便,效率高;马钱子总生物碱的抗肿瘤效果显著,值得进一步研究。

微波辅助提取马钱子中总生物碱工艺

采用微波辅助方法提取马钱子中总生物碱,并对其工艺条件进行优化。考察微波辐射功率、微波辐射时间、乙醇体积分数、液料比和微波前预浸泡时间等因素对提取效率的影响,并利用响应面法对其工艺条件进行优化。利用中心组合设计原理及响应面法分析建立二次回归模型,以微波辐射功率、微波辐射时间、乙醇体积分数为自变量,以士的宁、马钱子碱产率的综合指标为响应值,研究各因素及其交互作用对生物碱产率的影响。利用模型的响应曲面图及其等高线图,确定微波辅助提取马钱子中生物碱的最佳工艺参数:微波功率240W、微波辐射时间6.7min、液料比6:1(mL/g)、乙醇体积分数58.8%。在此条件下,士的宁、马钱子碱的提取量分别达到18.97、9.46mg/g,与理论预测值基本吻合。该结果可为马钱子中总生物碱的工业提取提供参考和依据。

马钱子总生物碱的测定及其提取条件的正交设计优选

目的建立马钱子总生物碱的RP-HPLC测定方法,探讨其提取分离的优化条件。方法以士的宁、马钱子碱为定量指标成分,通过对马钱子氨性氯仿提取、水提取、酸水提取和酸性乙醇提取等提取方法的比较与筛选,确定乙醇浓度、pH值、提取时间、溶剂用量为影响因素,并以L9(34)正交设计表安排试验。结果马钱子药材细粉加6倍量pH=5的50%乙醇提取3次,每次1h为马钱子总生物碱的最佳提取工艺。结论优选的提取条件效率高,可增加马钱子药材的利用率。

正交试验法优选马钱子总生物碱提取工艺

目的优选马钱子中士的宁与马钱子碱的提取方法与工艺。方法在单因素试验的基础上,以高效液相测定的士的宁与马钱子碱总量为指标,以乙醇浓度、乙醇用量及回流时间为影响因素,采用正交试验法优选士的宁与马钱子碱提取工艺。结果优选的最佳提取工艺为50%乙醇10倍量,回流提取3次,每次2h。结论验证实验表明该工艺合理、稳定可行。

爆压法对马钱子总生物碱的影响及急性毒性试验研究

目的 :观察爆压法对马钱子的总生物碱含量和急性毒性的影响。方法 :采用溶剂提取法提取总生物碱并测定其含量 ,用薄层层析对总生物碱中士的宁和马钱子碱进行定性分析 ,并通过小白鼠灌胃给药测定爆压品和生品的LD50 。结果 :马钱子经爆压法和砂烫法炮制后 ,总生物碱的含量下降甚微 ,与生品比较仍达 92 %～ 95 .6 % ,而爆压法与生品急性毒性比较下降了 38.3% (P <0 .0 1)。结论 :爆压法既能显著降低马钱子毒性 ,又能保证其效价不会明显下降。

野罂粟总生物碱及提取物对人淋巴细胞的遗传毒理作用

目的 :探讨野罂粟总生物碱 (TAPN)及提取物对人遗传物质的毒理效应。方法 :采用细胞培养技术 ,检测TAPN及提取物对人外周血淋巴细胞姐妹染色单体互换 (SCE)率。结果 :TAPN0 0 0 3mg及 0 0 0 5mg组与空白对照组无差异 (P >0 0 5 ) ,TAPN其他浓度组及提取物各浓度组均能诱导人淋巴细胞SCE频率升高。结论 :TAPN及提取物各浓度组与SCE之间虽存在着明显的剂量效应关系 ,但TAPN在正常使用剂量内不会引起人遗传物质的毒性效应。

骆驼蓬总生物碱提取物的质量标准研究

以骆驼蓬碱和去氢骆驼蓬碱为指标,采用薄层色谱和高效液相色谱等方法对骆驼蓬总生物碱提取物进行定性和定量质量控制。薄层色谱中供试品在与对照品相同位置上显相同颜色斑点,其它各项检测结果(如水分、灰分、浸出物、重金属检查)均符合中国药典要求。骆驼蓬碱和去氢骆驼蓬碱分别在2～200和0.8～320μg/ml浓度范围内线性关系良好,平均回收率为99.7%(RSD=1.89%)和100.7%(RSD=1.78%),日内及日间RSD小于2%。

夏天无总生物碱提取物中大孔树脂有机残留物的测定

目的:建立夏天无总生物碱提取物中7种大孔树脂有机残留物的检测方法。方法:采用毛细管柱气相色谱法进行定量分析,以DM-17及DB-5毛细管柱,程序升温,FID检测器,测定苯、甲苯、二甲苯、苯乙烯、二乙烯苯和正己烷、正庚烷7个成分的残留量。结果:经方法学考察,7种成分的线性关系良好,r=0.9988～0.9999,精密度RSD均<4.5%,回收率88%～95%,检出限均能满足测定要求。结论:所建立的方法准确可行,简便、快速,可成功地用于多种提取物中大孔树脂有机残留量的测定,结果满意。

双酯型乌头生物碱对照提取物的制备及其应用研究

目的:以定量用双酯型乌头生物碱对照提取物替代单体对照品,修订川乌含量测定方法。方法:制备定量用对照提取物,标定和协作标定,对其中的乌头碱、次乌头碱和新乌头碱含量进行赋值。采用HPLC法,流动相为乙腈和0.2%冰醋酸溶液(三乙胺调p H至6.2),梯度洗脱,检测波长235 nm;并比较使用单体对照品和对照提取物的含量测定结果。结论:定量用对照提取物可替代乌头碱等单体对照品,用于川乌药材中双酯型生物碱的含量测定。

燕麦生物碱提取物的抗氧化与降血脂作用研究

研究燕麦麸皮生物碱提取物(OBAE)对D-半乳糖诱导衰老小鼠血脂代谢和氧化应激状态的影响及其作用机理。将健康的昆明雄小鼠随机分为对照组、模型组、和低、中、高OBAE 3个剂量组。饲养7周后,测定不同剂量OBAE对小鼠血脂水平、抗氧化酶活性、脂质过氧化产物丙二醛含量及脂蛋白脂酶的表达的影响。同时还分析了提取物中生物碱和多酚的含量。结果表明,摄入OBAE后小鼠血脂水平降低,血清高密度脂蛋白增加,丙二醛的含量减少,而血清抗氧化酶活性显著增加,脂蛋白脂酶mRNA表达显著上调。对OBAE的主要抗氧化成分进行分析,燕麦生物碱的含量:627 mg/kg,总多酚的含量509 mg/kg。燕麦麸皮生物碱提取物(OBAE)具有抗氧化、降血脂生物活性,所含的燕麦生物碱、多酚是其发挥作用的主要物质基础。

超临界CO_2萃取益母草总生物碱

益母草药材经碱化后,用超临界CO_2提取总生物碱,以分光光度法测量总生物碱的含量,并与常规提取进行对比。结果表明:不经碱化的益母草中生物碱很难被超临界CO_2萃取,经碱处理后的药材再加夹带剂,可以极大地提高生物碱萃取率。在萃取压力为30MPa,萃取温度为70℃条件下进行萃取,萃取物收率达6.5％,总生物碱含量达到26.60％,比常规法高10倍。

定量用三七总皂苷对照提取物的协作定值

目的:建立定量用三七总皂苷对照提取物国家药品标准物质。方法:照《中国药典》2010年版一部三七总皂苷项下方法,以三七皂苷Rd、人参皂苷Rg1、人参皂苷Re、人参皂苷Rb1、人参皂苷Rd为指标,评价提取物备选原料的均匀性;5个实验室进行协作标定。结果:备选原料均匀性良好;对协作标定的测定结果进行统计分析确定了5种成分的标示值。结论:通过协作标定赋值,建立了首批定量用三七总皂苷对照提取物国家药品标准物质。

兰州化物所发明从甘肃棘豆中提取总生物碱提取物的制备工艺

中国科学院兰州化学物理研究所中科院西北特色植物资源化学重点实验室药物工艺标准研究组发明了一种从甘肃棘豆中提取总生物碱提取物的制备工艺，5月28日获悉该项技术获得国家发明专利授权（从甘肃棘豆中提取总生物碱提取物的制备工艺，专利号ZL200910117752．5）。

甘肃棘豆中提取总生物碱工艺获专利

近日，从甘肃棘豆中提取总生物碱提取物的制备工艺，获得国家发明专利授权，该发明由中国科学院兰州化学物理研究所、中科院西北特色植物资源化学重点实验室药物工艺标准研究组完成。该发明以甘肃棘豆为原料，经提取、浓缩、酸化、阳离子柱交换吸附后，依次用水和含水醇液冲洗后用碱性醇溶液洗脱，收集碱性乙醇洗脱液浓缩干燥后得到。该发明制备的总生物碱提取物产率高总生物碱，提取成本低，工艺简单，制备过程安全，整个提取工艺适合于工业化生产。

骆驼蓬总生物碱中骆驼蓬碱、去氢骆驼蓬碱及其代谢产物大鼠体内药代动力学研究

目的研究骆驼蓬总生物碱中骆驼蓬碱、去氢骆驼蓬碱及其活性代谢产物骆驼蓬醇和骆驼蓬酚在大鼠体内的药代动力学特征。方法口服骆驼蓬总生物碱(140 mg/kg)及静脉注射骆驼蓬碱与去氢骆驼蓬碱的混合溶液(均为3.3 mg/kg),采集不同时间点的血浆,采用UPLC-MS/MS法测定大鼠血浆中骆驼蓬碱、去氢骆驼蓬碱、骆驼蓬醇、骆驼蓬酚的血药浓度,并计算药代动力学参数。结果灌胃和静脉给药后,在血浆中检测到骆驼蓬碱、去氢骆驼蓬碱、骆驼蓬醇和骆驼蓬酚,但骆驼蓬酚的血药浓度在24 h时未下降而未能计算药动参数。静注给药后,骆驼蓬碱、去氢骆驼蓬碱和骆驼蓬醇的t1/2e分别为2.554、3.116、1.899 h,MRT分别为1.700、1.311、1.880 h,AUC0-t为373.1、2033.0、8.914 ng·h/mL。口服总生物碱后骆驼蓬碱、去氢骆驼蓬碱和骆驼蓬醇的Cmax分别为347.6、184.5、32.7 ng/mL,Tmax分别为3.200、1.150、0.300 h,t1/2e分别为6.994、5.625、21.912 h,MRT分别为8.588、9.791、27.780 h,AUC0-t为2 755.5、1 202.8、129.8 ng·h/mL。口服总生物碱后骆驼蓬碱和去氢骆驼蓬碱的绝对生物利用度分别为63.22%和4.96%。结论口服总生物碱后骆驼蓬碱和去氢骆驼蓬碱均可迅速吸收并迅速代谢,骆驼蓬碱与去氢骆驼蓬碱相比较,具有更高的生物利用度,代谢产物骆驼蓬醇和骆驼蓬酚与原型骆驼蓬碱和去氢骆驼蓬碱相比较,消除速率相对较慢。此外,静注给药后,体内去氢骆驼蓬碱的初始血药浓度明显高于骆驼蓬碱。

对照提取物法测定银杏叶制剂中总黄酮醇苷的含量

目的建立对照提取物法测定银杏叶制剂中总黄酮醇苷的含量,研究对照提取物法在中成药多组分含量测定中的可行性。方法采用Ultimate 3000 UPLC色谱仪,Thermo Scientific Acclaim RSLC120 C_(18)色谱柱(2.1 mm×100 mm,2.2μm),流动相:甲醇-0.4%磷酸(50∶50),柱温30℃,流速0.3m L·min^(-1),检测波长360 nm。采用自制银杏叶提取物,测定银杏制剂中槲皮素、山柰素和异鼠李素的含量,并与外标法测定结果进行比较。结果槲皮素在7.08~141.6 ng,山柰素在5.22~104.4 ng,异鼠李素在1.10~22.0 ng与峰面积线性关系良好,平均回收率分别为99.4%、99.1%、98.2%。结论对照提取物测定法与外标法测定结果差异无统计学意义,具有精密度高,稳定性、重复性好等优点,可以用于银杏叶制剂的质量控制,并为药品质量生产提供一定依据,同时验证了对照提取物在银杏叶制剂中应用的可行性。

银杏叶总内酯对照提取物在银杏叶含量测定中的应用

目的探讨选择银杏叶总内酯对照提取物替代单体成分对照品测定银杏叶中萜内酯类成分含量的可行性。方法以定值的银杏叶总内酯对照提取物为对照,采用高效液相-蒸发光散射检测(HPLC-ELSD)法,色谱柱为Diamonsil C18(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相为甲醇-水,梯度洗脱,流速为1.0 m L·min^(-1),ELSD检测器:漂移管温度105℃;氮气(N2):3.0 L·min-1。结果银杏内酯A、银杏内酯B、银杏内酯C、白果内酯的进样量与峰面积分别在0.735~5.879μg(r=0.999 6)、0.404~6.060μg(r=0.999 6)、0.296~4.439μg(r=0.999 6)、1.001~6.006μg(r=0.999 7)范围内呈良好的对数线性关系;平均回收率分别为95.5%,97.4%,99.3%,100.4%,RSD依次分别为4.0%,4.5%,5.0%,2.1%。结论银杏叶总内酯对照提取物可以替代相应的单体对照品用于银杏叶中萜内酯类成分的定量测定。

定量用银杏叶总内酯对照提取物的量值溯源

目的制备定量用银杏叶总内酯对照提取物药品标准物质。方法建立高效液相色谱(HPLC)法,以白果内酯、银杏内酯A、银杏内酯B、银杏内酯C为指标,考察银杏叶总内酯对照提取物的均匀性和稳定性,并组织3家实验室进行协作定值。结果银杏叶总内酯对照提取物中白果内酯、银杏内酯A、银杏内酯B、银杏内酯C均匀性和稳定性的RSD均≤2.0%;对外标法量值溯源的结果进行统计分析,确定了4种成分的标示含量:白果内酯为39.54%,银杏内酯A为29.03%,银杏内酯B为15.96%,银杏内酯C为11.69%。结论制备的定量用银杏叶总内酯对照提取物可作为药品标准物质。

黄芩总黄酮提取物的HPLC-MS/MS分析

目的:探讨应用液相色谱-质谱联用技术鉴定黄芩总黄酮提取物各组分的方法。方法:选用Discovery C_(18)柱,以甲醇-水-甲酸(40:60:0.025)为流动相,经紫外(波长为335 nm)检测后,在电喷雾串联质谱负离子扫描方式下,对HPLC-UV图谱中各色谱峰进行一级和二级质谱分析。结果:经与对照品相比较,鉴定了提取物中4个已知的黄酮类化合物,推断了3个未知黄酮苷类化合物可能的结构。结论:该方法可用于快速分析鉴别天然产物提取物中已知和未知化合物的结构。

瑞香狼毒总黄酮提取物的抗肿瘤作用

目的: 研究瑞香狼毒总黄酮提取物的抗肿瘤作用。方法:体外抗肿瘤活性研究采用MTT比色法和集落形成法测定,靶细胞采用人胃癌细胞SGC- 790 1、人肝癌细胞BEL- 74 0 2和人白血病细胞HL- 6 0 ;通过提取物对小鼠的移植性肿瘤S180和H2 2生长的影响来评价体内抗肿瘤作用。结果:瑞香狼毒总黄酮提取物对体外培养的肿瘤细胞有较强的抑制作用,体外抗肿瘤活性高于长春新碱;瑞香狼毒总黄酮提取物急性毒性较小,对小鼠移植性肿瘤S180和H2 2的生长也有显著的抑制作用,并和剂量正相关,高剂量组对小鼠移植性肿瘤S180的抑制率为4 5 . 6 4 % ,H2 2的为4 7 .5 9% ,与阳性对照组环磷酰胺的抑制率接近。结论:瑞香狼毒总黄酮提取物具有较强的体内和体外抗肿瘤作用。