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以马铃薯ND2 mRNA为内对照双重RT-PCR法检测马铃薯纺锤块茎类病毒
被引量:
4
1
作者
马恢
谢晓亮
+2 位作者
尹江
温春秀
吴志明
《园艺学报》
CAS
CSCD
北大核心
2007年第5期1213-1216,共4页
根据马铃薯纺锤块茎类病毒(PSTVd)基因序列设计特异引物,采用反转录聚合酶链式反应(RT-PCR)技术进行PSTVd检测研究。为避免由于提取的RNA降解或者RT-PCR反应质量不高所造成的假阴性问题,在检测过程中引入马铃薯线粒体NADH脱氢酶ND2亚基...
根据马铃薯纺锤块茎类病毒(PSTVd)基因序列设计特异引物,采用反转录聚合酶链式反应(RT-PCR)技术进行PSTVd检测研究。为避免由于提取的RNA降解或者RT-PCR反应质量不高所造成的假阴性问题,在检测过程中引入马铃薯线粒体NADH脱氢酶ND2亚基基因mRNA为内对照,该内对照的一个引物跨越了该基因内含子区域,只对剪接后的mRNA进行特异扩增而不扩增其本身DNA。利用内对照引物和PSTVd特异引物进行双重RT-PCR检测,分别扩增出190 bp的内对照基因特异片段和360 bp的PSTVd特异条带,与预期引物设计大小一致。引入的内对照可以较好地监控PSTVd的RT-PCR检测过程。
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关键词
马铃薯
马铃薯
纺锤块茎类病毒
双重RT-PCR
马铃薯线粒体
NADH
ND2
MRNA
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职称材料
题名
以马铃薯ND2 mRNA为内对照双重RT-PCR法检测马铃薯纺锤块茎类病毒
被引量:
4
1
作者
马恢
谢晓亮
尹江
温春秀
吴志明
机构
河北省高寒作物研究所
河北省农林科学院经济作物研究所
出处
《园艺学报》
CAS
CSCD
北大核心
2007年第5期1213-1216,共4页
基金
河北省科技攻关项目(04225505)
文摘
根据马铃薯纺锤块茎类病毒(PSTVd)基因序列设计特异引物,采用反转录聚合酶链式反应(RT-PCR)技术进行PSTVd检测研究。为避免由于提取的RNA降解或者RT-PCR反应质量不高所造成的假阴性问题,在检测过程中引入马铃薯线粒体NADH脱氢酶ND2亚基基因mRNA为内对照,该内对照的一个引物跨越了该基因内含子区域,只对剪接后的mRNA进行特异扩增而不扩增其本身DNA。利用内对照引物和PSTVd特异引物进行双重RT-PCR检测,分别扩增出190 bp的内对照基因特异片段和360 bp的PSTVd特异条带,与预期引物设计大小一致。引入的内对照可以较好地监控PSTVd的RT-PCR检测过程。
关键词
马铃薯
马铃薯
纺锤块茎类病毒
双重RT-PCR
马铃薯线粒体
NADH
ND2
MRNA
Keywords
Potato
Potato spindle tuber viroid
Duplex RT-PCR
Potato NADH ND2 subunit mRNA
分类号
S532 [农业科学—作物学]
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题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
以马铃薯ND2 mRNA为内对照双重RT-PCR法检测马铃薯纺锤块茎类病毒
马恢
谢晓亮
尹江
温春秀
吴志明
《园艺学报》
CAS
CSCD
北大核心
2007
4
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