不同品种(系)马铃薯休眠块茎顶端和茎端芽眼组织马铃薯Y病毒含量分析

马铃薯Y病毒(Potato virus Y,PVY)是马铃薯生产中较常见的病毒之一,马铃薯病毒的检测是生产中保障马铃薯品质和产量的重要基础,收获后批量检测是进行种薯质量评价的主要依据之一。研究针对‘56-2’‘Ivory Russet’‘Clearwater Russet’‘龙薯14号’‘龙薯3号’‘龙薯15号’‘龙育201401-70’‘龙薯7号’‘克新23号’和‘克新28号’马铃薯品种(系)休眠块茎样品,采用TRIzol法提取马铃薯休眠块茎顶端和茎端芽眼组织的总RNA,经qRT-PCR和RT-PCR检测分析,比较块茎的顶端与茎端芽眼组织PVY含量分布的情况。结果表明,上述供试材料的休眠块茎茎端芽眼组织PVY浓度均高于顶端芽眼组织,能够精准的检测到病毒的存在;对‘Ivory Russet’品种的休眠块茎选取100个带病样品通过TRIzol法提取顶端与茎端的总RNA,采用4合1的方法合样后进行PVY RT-PCR检测,所有处理的顶端芽眼组织检测条带亮度低于茎端芽眼组织。可见,马铃薯休眠块茎茎端芽眼组织取样能够更加精准的检测出PVY。研究结果为马铃薯种薯收获后PVY的检测及合理取样提供了科学依据。

马铃薯Y病毒(PVY)对晚疫病(Phytophthora infestans)的影响

在温室条件下，以脱毒马铃薯为试材，研究了PVY对晚疫病的影响。结果表明：PVY汁液接种脱毒马铃薯28d后，用晚疫病菌接种，其孢子囊悬浮液浓度为1．0×104个·mL-1时，PVY对晚疫病的抑制作用最明显；马铃薯植株体内PVY的浓度与晚疫病的发病率、病斑大小及病情指数呈负相关。说明马铃薯感染PVY后诱导了植株对晚疫病的抗性，不同因子影响降低了马铃薯感Y病毒叶片对晚疫病菌的感病性。

马铃薯Y病毒蚜传辅助成分介导PVX/PVY协生作用

构建了马铃薯Y病毒中国株系 (PVY C)蚜传辅助成分 (HC Pro)基因的正义、反义和缺失三种植物表达载体 ,通过农杆菌介导法转化烟草品种NC89。Southernblot分析表明 ,HC Pro基因及其突变体已经整合到烟草染色体中 ,Westernblot分析证明 ,正义HC Pro基因及其缺失突变体在转基因烟草中有表达产物。攻毒试验结果证明 ,转正义HC Pro基因及其缺失突变体不仅能够提高T1转基因烟草中PVY C的病毒积累和致病性 ,而且对异源病毒PVX具有同样的作用 ,而转反义HC Pro基因烟草对PVY C和PVX的致病性无影响。因此PVY CHC

烟草马铃薯Y病毒病(PVY)的研究现状与防治对策

评述了烟草马铃薯Y病毒病(PVY)的国内外研究现状和发生情况。同时对我国及安徽省近年来该病的流行原因进行了分析,并提出了相应的防治对策。

基于烟草蚜传病毒病的黄瓜花叶病(CMV)和马铃薯Y病毒病(PVY) LAMP检测体系研究

本文对基于烟草蚜传病毒病的黄瓜花叶病(CMV)和马铃薯Y病毒病(PVY),在优化LAMP体系、LAMP反应的最佳体系、LAMP产物的检测、LAMP灵敏性检测、田间样品的检测等几个方面进行了研究。结果表明:LAMP体系Mg2+的最佳浓度为6 mM,dNTPs的最佳浓度为1.2 mM;LAMP的最佳反应条件为反应温度63℃、反应时间为40 min;CMV和PVY的阳性LAMP产物显示为绿色,阴性LAMP产物显示为橘黄色;检测方法的灵敏度在DNA水平上可达到10~3 ng/μL;田间采集样品随机检测表明,建立的LAMP检测体系准确可靠。

烟草马铃薯Y病毒病与气象因子的相关性

为了明确烟草马铃薯Y病毒病发生的适宜气候条件,依据云南昭通市昭阳区2009—2011年的病情观测数据及其同步气候观测资料,分析了气象因子对烟草马铃薯Y病毒病发生的影响。结果表明:气温、降水、日照时数与烟草马铃薯Y病毒病发生初期、盛期及其发病株率、病情指数密切相关,其发病株率、病情指数与气温、降水量均呈正相关,与日照呈负相关,在气温高、降水多、日照少的气候条件下,容易导致烟草马铃薯Y病毒病的发生蔓延。

烟草马铃薯Y病毒病的发生原因与防治对策

烟草马铃薯Y病毒病 (PVY)近年来在安徽省的发生与危害日益严重 ,目前已成为安徽烟区最主要的病毒病。本文分析了安徽烟区近年来烟草马铃薯Y病毒病的发生特点及流行原因 。

马铃薯Y病毒与介体蚜虫传毒的关系研究进展

对蚜虫的传毒特性、影响传毒效率的因素、传毒机制、蚜虫传播与马铃薯Y病毒病发生流行的关系、蚜虫带毒的检测方法、治蚜与防病的关系等方面的研究进展进行了综述。

烤烟马铃薯Y病毒病(PVY)防治技术

介绍了牛场坝乡2006—2009年烟草马铃薯Y病毒的发生特点、传播途径、发病条件,并结合该地区的实际情况,提出综合防治技术,以为该病的防治提供参考。

烟草上马铃薯Y病毒的RT-PCR检测

本文根据已报道的 PVY CP基因序列 ,设计合成了 2套扩增 PVY CP基因全序列和中间部分序列的寡核苷酸引物 ,用两套程序分别对马铃薯 Y病毒普通株系 (PVYO)和马铃薯 Y病毒坏死株系 (PVYN) CP基因进行 RT- PCR扩增 ,结果分别得到了与预期大小一致的 80 4和 30 1bp片段 ,健康植株对照中未扩增到任何产物 ,建立了 RT- PCR检测烟草上马铃薯 Y病毒的程序。

烟草马铃薯Y病毒病的发生与综合防治

近年来,烟草马铃薯Y病毒病已成为湖南烟区危害最为严重的病害之一。从症状表现、侵染循环和发病规律3个方面对其进行了概括,并提出综合防治措施。

马铃薯Y病毒对不同马铃薯品种的致病力

为明确不同马铃薯Y病毒(PVY)株系对马铃薯的影响及危害,采用PVYN:O、PVYN-Wi、PVYNTN-NW(SYRⅠ)和PVYNTN-NW(SYRⅡ)株系分离物人工侵染马铃薯,并通过透射电子显微镜观察经PVY侵染后马铃薯植株细胞的超微结构。结果表明,敏感品种更适用于PVY病毒致病力鉴定,敏感品种‘克新13’和‘克新18’对PVY不同分离物的反应强烈,差异显著,而‘兴加2号’对4个PVY分离株均表现耐病,虽然细胞内均出现叶绿体变形、单层膜小囊泡和典型的风轮状内含体,但症状只表现为不同程度的花叶。同时,发现PVYN-Wi致病力较弱,侵染后,4个马铃薯品种均出现花叶症状,细胞内部产生多膜结构、风轮状内含体,引起敏感品种‘克新13’和‘克新18’细胞变形、叶绿体变形和髓鞘样结构;PVYNTN-NW致病力最强,感病的‘克新13’和‘克新18’植株受害症状明显加重,且植株早衰、细胞破坏严重,有些死亡较快的植株甚至未产生特征性内含体结构;PVYN:O致病力中等,植株受害症状和超微结构变化也介于PVYN-Wi和PVYNTN-NW之间。不同马铃薯品种对PVY病毒的感病程度有较大差异,‘兴加2号’为耐病品种。

烟草种质资源抗马铃薯Y病毒病鉴定方法比较

便于年度间和研究者之间比较的抗病性鉴定方法,是筛选抗性稳定的抗病资源的基础。通过温室内人工接种,优化了烟草种质资源抗马铃薯Y病毒病的抗性鉴定方法。病情指数、相对病情指数、相对抗性指数、病情发展曲线下面积四种评价方法的比较结果表明,相对病情指数可直观反映品种的抗性,便于年度间和研究者之间的结果比较。高压喷枪摩擦接种和蚜虫饲毒接种的鉴定结果基本一致。温室人工摩擦接种鉴定结果表明:NC55和NC102表现为高抗、VirginiaSCR(VSCR)和TI245表现为抗病,CV91和Oxford207表现为中抗、台烟6号表现为中感、NC297和云烟97表现为感病、Coker176表现为高感。抗病亲本NC55、VSCR与感病优良亲本F1组合均表现感病或高感,表明NC55和VSCR抗源的抗性为隐性遗传。

烤烟与小麦套作和地膜覆盖对烤烟马铃薯Y病毒病发病率的影响

为了探索烤烟马铃薯Y病毒病(PVY)的有效防控措施,于2007～2008年在贵州省瓮安县分别对小麦与烤烟套作和地膜覆盖2种不同的栽培方式下的烤烟PVY发病率和病情指数进行研究。结果表明,烤烟与小麦套作能极显著降低烤烟的PVY发病率,与双行小麦双行烟相比,双行小麦单行烟栽培方式对防治烤烟PVY效果更好;地膜覆盖栽培较常规露地栽培能显著降低烤烟的PVY发病率。小麦与烤烟套作和地膜覆盖是防治烤烟PVY的有效手段,值得大面积推广。

马铃薯Y病毒病检测方法及防治策略研究进展

简要阐述了马铃薯Y病毒病的检测方法以及防治技术,总结了马铃薯Y病毒病在检测技术方面的研究状况和防治马铃薯Y病毒病的策略分析,归纳了国标中马铃薯Y病毒病鉴定方法的信息和近年来防治马铃薯Y病毒病的药剂使用状况。马铃薯Y病毒病的检测需在分子生物学基础上寻找捷径,探索多种检测方式相结合的运用,防治马铃薯Y病毒病需秉承以防为主、防治结合的绿色环保理念,有针对性提出运用物理、化学以及生物学等多学科交叉融合的新型防治体系。

烟草马铃薯Y病毒病流行规律的初步研究

根据1996～2002年有关气象因素的数据,建立了气温、降水量与PVY病情指数的相关方程.选用几种模型对PVY的流行规律进行拟合检验,确定Gompertz模型为短期流行过程的最优拟合方程,并建立了流行速率与有翅蚜量关系的模型.根据田间病情调查的结果,初步得出模拟病害近距离传播的时空动态模型.

病毒诱导的基因沉默防控烟草马铃薯Y病毒病研究

【背景】病毒诱导的基因沉默(virus-induced gene silencing,VIGS)是植物抗病毒侵染的一种自然机制。【方法】以马铃薯Y病毒(Potato virus Y,PVY)脉坏死株系(PVYN)的外壳蛋白(coat protein,CP)基因为靶向序列,构建烟草脆裂病毒(Tobacco rattle virus,TRV)介导的基因沉默表达载体pTRV2-CP,转化农杆菌GV3101后,与pTRV1-GV3101混合成TRV::CP(OD6000.4~0.6)喷施处理剪叶后的烟苗,测定其侵染效率。人工接种PVY于对照及TRV::CP处理的烟苗,RT-qPCR检测、表型观察和小区试验评价TRV介导的VIGS体系对PVY侵染的沉默效果。【结果】①与TRV::00相比,接种PVY 35 d时,TRV::CP处理的烟株中PVY累积量减少了72.8%;②VIGS表达载体45 d内能有效表达;③温室盆栽和田间小区试验TRV::CP处理对PVY防治效果分别达到85.12%和73.08%。【结论】研究建立的VIGS体系能够沉默PVY CP基因的表达,有效防治烟草马铃薯Y病毒病,为PVY的防治提供了新的方法。

基于全基因序列的中国北方3省(区)马铃薯Y病毒遗传多样性分析

本研究以马铃薯Y病毒(PVY)全基因组为基础,分析吉林、黑龙江和内蒙古3省(区)PVY群体遗传多样性和群体分化,并评估突变、重组、选择等遗传力所起的作用。根据已报道的PVY全基因序列保守区设计4对引物,采用片段重叠法对来自内蒙古和吉林的24个PVY分离物全基因序列进行测定,并联合NCBI中已登录的9个黑龙江分离物全基因组序列进行遗传多样性参数评估、群体分化检验和分子变异等分析。结果显示,我国北方3省(区)PVY群体遗传多样性高,其中内蒙古和黑龙江PVY群体遗传多样性高于吉林群体,并且3个群体之间呈现一定程度的遗传分化。分子变异分析发现在PVY基因组中存在1786个变异位点,表明我国北方3省(区)PVY群体变异程度较高,并且这种高变异度有85.54%来自各个马铃薯种植区内PVY个体的遗传变异。重组分析和系统发育分析发现,我国北方3省(区)PVY群体中重组株系占比高达90.3%,并具有明显的株系多样性,表明PVY重组株系已成为我国北方3省(区)马铃薯种植区的流行株系。选择压力分析显示,使用FEL和IFEL法分别检测出501个和315个净化压力选择位点,这表明3省(区)PVY群体受净化选择压力为主。以上结果表明,中国北方3省(区)PVY群体遗传多样性高,突变、重组和自然选择都对遗传多样性和群体分化存在一定影响。

河南烟草马铃薯Y病毒体外特性及其与CMV,TMV的相互作用研究

用生物学方法研究了河南烟草马铃薯Y病毒(PVY)的体外特性.结果表明,河南PVY的稀释限点为10-6～10-7,致死温度为70～75℃,体外存活期为4～6d,在PVY与CMV,TMV相互作用的研究中发现混合侵染的症状比单独侵染严重,且表现症状不同.