马鹿角蛋白酶解物的抗氧化、抗疲劳和免疫活性

目的:以复合蛋白酶与风味蛋白酶双酶解的马鹿角蛋白酶解物和马鹿角蛋白作为受试样品,研究样品的抗氧化、抗疲劳和免疫调节功能。方法:采用邻苯三酚自氧化法、水杨酸比色法和总还原力测定法,研究酶解物体外抗氧化的功能;通过测定酶解物灌胃小鼠的血清中超氧化物歧化酶(SOD)活性和丙二醛(MDA)含量,分析其体内抗氧化功能;通过小鼠负重游泳、血乳酸、肝糖原测定研究酶解物的抗疲劳功能;通过ConA诱导的小鼠脾淋巴细胞转化实验及小鼠碳廓清实验研究酶解物对小鼠免疫功能的影响。结果:马鹿角蛋白酶解物对羟自由基(·OH)、超氧阴离子自由基(O2-.)均有清除能力,且高于同等质量浓度的马鹿角蛋白,总还原力与马鹿角蛋白相比也有提高;可提高小鼠血清SOD活性,降低其血清MDA含量,并明显延长小鼠负重游泳时间、降低血乳酸值和增加肝糖原含量;可显著增强小鼠的免疫功能。结论:马鹿角蛋白酶解物具有抗氧化、抗疲劳和提高免疫功能的作用,活性明显优于马鹿角蛋白。

马鹿角及梅花鹿角脱盘中无机元素分析与评价

目的分析鹿角中的无机元素,为鹿角药材质量控制提供参考。方法采用微波消解样品,电感耦合等离子体-原子发射光谱法(ICP-AES)分析不同产地马鹿角及不同年龄梅花鹿角脱盘中共计29种无机元素。结果在所有样品中均检测到了21种元素,包括Ca、P、K、Na、Mg等5种人体必需宏量元素,Fe、Cu、Zn、Mn、Cr、Se、Ni、Mo、Si、Sr等10种人体必需微量元素;未检测到Sn、As、Co、B、Hg、V、Ti、Zr等8种元素。相关性分析显示有多种元素间呈显著或极显著正相关。马鹿角不同部位无机元素组成相似,2个不同产地马鹿角中同种元素的平均含有量差异较大。除部分元素外,不同年龄梅花鹿角脱盘样品中各元素的量差异不大。结论研究结果为鹿角药材的质量控制及其资源综合开发与利用提供了科学依据。

新疆马鹿角提取物对成骨细胞MC3T3-E1增殖、分化和矿化的影响

目的研究新疆马鹿角提取物对体外培养成骨细胞株MC3T3-E1细胞增殖、分化和矿化的影响。方法以MC3T3-E1细胞作为药物筛选模型,用MTT法测定不同浓度的新疆马鹿角提取物促细胞增殖作用,采用碱性磷酸酶活性测定和骨钙素含有量检测,观察不同浓度的新疆马鹿角提取物促细胞分化作用,以Von kossa钙化染色法观察新疆马鹿角提取物溶液对MC3T3-E1细胞钙化能力的影响。结果 MTT检测结果表明5×102、5×101、5μg/mL新疆马鹿角提取物溶液在24、48、72 h均可促进MC3T3-E1细胞增殖,且呈时间依赖性。ALP检测结果表明5×102、5×101μg/mL新疆马鹿角提取物溶液在24、48、72 h可提高MC3T3-E1细胞内ALP的活性。BGP检测结果表明5×102、5×101μg/mL新疆马鹿角提取物溶液在8、12 d可促进MC3T3-E1细胞内BGP的合成和分泌。Von kossa染色钙化面积百分比结果表明3组新疆马鹿角提取物溶液与对照组比较无明显区别。结论 新疆马鹿角提取物可促进成骨细胞株MC3T3-E1的增殖和分化能力。

蓇密钙片与马鹿角多肽对成骨细胞增殖分化的研究

目的观察蓇密钙片及马鹿角多肽对鼠胚成骨细胞MC3T3-E1的增殖分化作用及细胞内OPG、RANKL mRNA的表达。方法采用MEM(10%FBS)培养液培养细胞,细胞计数法描绘成骨细胞生长曲线;MTT法检测蓇密钙片(0、50、100、500、1000μg/ml)、马鹿角多肽(0、5、50、500μg/ml)和钙尔奇D对照组对鼠胚成骨细胞MC3T3-E1增殖的作用;蓇密钙片(0、50、100、500、1000μg/ml)、马鹿角多肽(0、5、50、500μg/ml)和钙尔奇D对照组干预鼠胚成骨细胞MC3T3-E1 72 h后,比色法检测细胞内碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)的含量,RT-PCR法检测骨保护蛋白(osteoprotegerin,OPG)、核因子КB激活受体配体(receptor activator of NK-КB ligand,RANKL)mRNA的表达。结果蓇密钙片及马鹿角多肽作用于MC3T3-E1成骨细胞72 h后,可促进其增殖,OD值增加(P<0.05),增加ALP的含量,促进OPG mRNA表达,同时抑制RANKL mRNA表达。结论蓇密钙片及马鹿角多肽促进MC3T3-E1成骨细胞增殖分化,可能与促进成骨细胞OPG mRNA表达、抑制RANKL mRNA表达有关,从而促进骨形成,抑制骨吸收。

马鹿角蛋白酶解工艺研究

以马鹿角蛋白为原料,以水解度为指标,利用酶解的方法制备马鹿角多肽。通过单因素试验,从复合蛋白酶、风味蛋白酶和中性蛋白酶中选出酶解效果较好的复合蛋白酶和风味蛋白酶。以pH、酶解时间、酶解温度和加酶量4因素,通过正交试验,优化复合蛋白酶和风味蛋白酶的最佳酶解条件。结果表明,复合蛋白酶单酶酶解最佳条件是pH 7.0、酶解时间4h、酶解温度55℃、加酶量6 500U/g;风味蛋白酶单酶酶解最佳条件是pH 7.0、酶解时间3h、酶解温度45℃、加酶量750U/g。依据酶解最佳条件,先加入复合蛋白酶再加入风味蛋白酶进行双酶解,可获得最佳的马鹿角蛋白双酶解结果,酶解度为53.77%。

细胞膜片复合3D打印马鹿角粉/丝素蛋白/聚乙烯醇支架对羊下颌骨缺损的修复效果

目的探讨细胞膜片复合马鹿角粉/丝素蛋白/聚乙烯醇支架修复下颌骨极限性骨缺损的效果。方法通过3D打印制备马鹿角粉/丝素蛋白/聚乙烯醇支架及纳米级羟基磷灰石/丝素蛋白/聚乙烯醇支架,采用全骨髓培养法制备阿勒泰大尾羊髂骨骨髓血细胞膜片;按观察时间1、2、3个月分别建立阿勒泰大尾羊双侧下颌骨极限性缺损模型4只,实验组为细胞膜片包裹马鹿角粉/丝素蛋白/聚乙烯醇支架,对照组为细胞膜片包裹纳米级羟基磷灰石/丝素蛋白/聚乙烯醇支架,阴性对照组为细胞膜片包裹无支架的凝胶海绵;按动物双侧下颌骨缺损区自身对照的方法分别植入包裹细胞膜的支架或包裹细胞膜的凝胶海绵。在支架材料植入后第1、2、3个月末处死实验动物,拍摄锥形束CT(cone beamCT,CBCT)、取组织行石蜡切片HE染色观察,评价不同支架材料的骨再生效果与支架的降解。结果扫描电镜结果显示:两组支架孔隙规则,连续性好,孔径及孔隙率比较均无差别(P>0.05)。CBCT结果显示,术后3个月实验组对骨缺损的修复效果明显优于对照组,且支架降解速率与骨组织修复速率较为匹配,缺损中央骨密度高于对照组,与正常骨组织接近。实验组在各时间点的骨缺损区中央骨密度计量均高于对照组、阴性对照组,且差异具有统计学意义(P<0.05)。HE染色结果显示:实验组成骨细胞较为活跃,有较多新生毛细血管及骨小梁形成,同时支架材料的吸收多于对照组。结论细胞膜片复合马鹿角粉/丝素蛋白/聚乙烯醇支架能够促进临界骨缺损的修复,其降解性与骨组织愈合速率较为匹配,有望成为修复骨缺损的新方法。

骨髓间充质干细胞膜片复合3D打印马鹿角粉/丝素蛋白/聚乙烯醇支架的体内成骨

背景:马鹿角粉是一种生物相容性及机械性能良好的组织工程骨材料。采用细胞膜片技术、3D打印技术构建组织工程骨,可实现极限骨缺损的个性化治疗。目的:探讨骨髓间充质干细胞膜片复合3D打印马鹿角粉/丝素蛋白/聚乙烯醇骨支架修复羊下颌骨极限缺损的能力及成骨效果。方法:全骨髓法培养羊骨髓间充质干细胞,采用细胞膜片技术及3D打印技术构建骨髓间充质干细胞膜片复合3D打印马鹿角粉/丝素蛋白/聚乙烯醇支架的组织工程骨。取12只新疆阿勒泰大尾羊,随机分为术后1,2,3个月组,每组4只,于双侧下颌骨制备20 mm×3 mm×5 mm骨缺损,每组2只羊一侧植入细胞膜片复合3D打印鹿角粉/丝素蛋白/聚乙烯醇支架,另一侧植入细胞膜片复合明胶海绵,每组另外2只羊,一侧植入细胞膜片复合纳米羟基磷灰石/丝素蛋白/聚乙烯醇支架,另一侧植入细胞膜片复合明胶海绵。植入1,2,3个月末处死实验动物,取下颌骨标本进行大体观察、锥形束CT、组织学观察及RT-PCR检测相关成骨指标。结果与结论:①锥形束CT观察:第1,2个月末,细胞膜片复合马鹿角粉/丝素蛋白/聚乙烯醇组骨缺损区呈稀薄云雾状,支架吸收较多,细胞膜片复合纳米羟基磷灰石/丝素蛋白/聚乙烯醇组吸收相对较少;第3个月末,细胞膜片复合马鹿角粉/丝素蛋白/聚乙烯醇组有大量的新骨形成,密度接近周围骨质,但细胞膜片复合纳米羟基磷灰石/丝素蛋白/聚乙烯醇组骨缺损区未长满,骨密度较低。细胞膜片复合明胶海绵组3个月内变化均不明显,均没有新骨生成;②组织学观察:第3个月末,与其他两组相比,细胞膜片复合马鹿角粉/丝素蛋白/聚乙烯醇组支架材料吸收较多,可见骨小梁排列规则及成熟板状骨,细胞膜片复合纳米羟基磷灰石/丝素蛋白/聚乙烯醇组也有少量新骨形成,细胞膜片复合明胶海绵组3个月内变化均不明显;③RT-PCR检测:细胞膜片复合马鹿角粉/丝素蛋白/聚乙烯醇组骨桥蛋白、骨钙蛋白、Ⅰ型胶原的mRNA表达水平均高于其他两组,在第3个月时成骨基因的表达量达到最高;④结果表明,骨髓间充质干细胞膜片复合3D打印马鹿角粉/丝素蛋白/聚乙烯醇支架的组织工程骨能够修复羊下颌骨极限骨缺损,可满足羊颌骨实验性缺损的修复重建。

新疆马鹿角提取物对MC3T3-E1成骨细胞RANKL/OPG mRNA表达的影响

目的研究新疆马鹿角提取物对MC3T3-E1成骨细胞核因子-kβ受体活化因子配体(RANKL)/护骨素(OPG)mRNA表达的影响。方法体外培养MC3T3-E1成骨细胞,分别加入含不同剂量新疆马鹿角提取物的培养液,72 h后分别提取细胞总RNA,用RT-PCR方法检测RANKL/OPG mRNA表达。结果培养72 h后RANKL/OPG mRNA表达的灰度值(0.312±0.0710),与对照组(2.017±0.1320)比较,新疆马鹿角提取物呈浓度依赖性降低RANKL mRNA的表达,增加OPG mRNA的表达,各剂量组RANKL/OPG mRNA吸光度比值降低。结论新疆马鹿角提取物可能通过调节成骨细胞RANKL/OPG的基因表达,而抑制破骨细胞介导的骨吸收。

马鹿角对秀丽隐杆线虫衰老的影响及抗氧化机制研究

目的:探究马鹿角水提物对秀丽隐杆线虫衰老的影响及可能的抗氧化作用机制。方法:将秀丽隐杆线虫随机分为正常对照组和鹿角水提物1 mg/ml组。观察马鹿角水提物处理后野生型线虫(N2)和突变体线虫(eat-2、daf-2、clk-1)氧化应激条件下存活时间以及野生型线虫(N2)的运动能力、生殖能力和寿命,通过qPCR测定相关抗氧化基因的表达水平。结果:与空白对照组比较,马鹿角水提物1 mg/ml组线虫(N2、eat-2、daf-2)氧化应激条件下的存活时间明显延长(P<0.05或P<0.01),野生型线虫(N2)的运动能力和生殖能力明显提高(P<0.05),但线粒体信号通路突变体线虫clk-1氧化应激条件下的存活时间和寿命无显著差异(P>0.01),N2线虫基因gst-4、gst-7、sod-3和hsp16.2表达水平显著增高(P<0.01)。结论:马鹿角水提物具有显著的体内抗氧化生物活性,能够延缓线虫衰老,其作用机理可能为通过激活线粒体信号通路,上调相关抗氧化基因表达水平,增强线虫抗氧化应激能力,延缓线虫衰老。

麋鹿角与鹿角的生药学比较

目的:为开发利用麋鹿角这一宝贵的药材资源而提供一定的科学依据。方法:以鹿角(梅花鹿角和马鹿角)作对照品,将麋鹿角与鹿角分别从原动物、性状和内含氨基酸、微量元素及胆固醇等方面作比较性的研究。结果:纠正了某些典籍关于麋鹿1年换角2次和角呈二回分枝之错误记载;发现麋鹿角所含总氨基酸和人体必需氨基酸的含量介于两种鹿角之间,其所含人体必需微量元素比两种鹿角都高,胆固醇的含量亦介于两种鹿角之间,含量均极低,对人体绝无害处。结论:本研究除对麋鹿角的生药性状鉴定提供了可靠的依据外,更重要的是发现麋鹿角的医疗保健作用可能与鹿角相当,甚至还优于鹿角,颇有开发利用前景,值得引起重视。

用紫外分光光度法鉴别4种鹿角

采用紫外分光光度法对东北产梅花鹿角、马鹿角、驼鹿角和狍角进行了鉴定。结果表明，４种角的同种溶剂提取的紫外导数光谱中驼鹿角的７０％乙醇提取物和狍角的乙醚提取物在２８０～２９０ｎｍ间有特别显著的最大吸收峰，具有鉴定意义。

鹿角的品种

注意：目前国内人工饲养的鹿,多用于生产鹿茸,无鹿角商品,故商品鹿角来源于野生鹿,其次为鹿角脱盘。我国野生梅花鹿极少,故商品中所见鹿角基本多为马鹿的角。鹿角,为常用中药。系鹿科动物马鹿和梅花鹿的雄鹿已长成骨化的角或锯茸后翌年春季脱落的角茎（在春季自然脱落的角,质量最优）。分别习称＂马鹿角＂＂梅花鹿角＂。

动物格斗拾趣

大自然里生存着成千上万种动物,在同种动物之间,常常为争夺异性、巢穴、地盘而互相格斗。金鸡相斗金鸡又名锦鸡,是我国的特产珍贵鸟类。每年春暖花开时正是金鸡的繁殖季节,此时,雄鸡一见雌鸡便奔上前去,先是绕着"对象"转圈,然后站在雌鸡的对面,展开橙棕色的披肩和背上的绿色羽毛。

走私赛加羚羊角案例

赛加羚羊是一种神奇的野生动物,现存2个亚种。其中俄罗斯亚种在第一次世界大战结束时仅剩1000只,至二战结束时恢复到9万只,到20世纪60年代上升到130万只以上,但目前又下降到10万只左右。在我国已经灭绝的可能是赛加羚羊蒙古亚种,该亚种在蒙古国的现存野生种群估计只有数百头。导致赛加羚羊野生种群大幅变动的原因很多,首当其冲的应该是赛加羚羊对气候变化的适应性较差。

在米尔其克草原护边——斯卡克的故事

斯卡克,是农五师八十七团米尔其克草原上深受人们尊敬的一位哈萨克族长者。草原上的哈萨克族人常常围坐在一起,用"阿肯弹唱"这种古老的艺术形式,传颂他的故事。寻访斯卡克米尔其克是蒙古语,意为"青色的草原"。这片铺展在阿拉套山脚下的大草甸比博乐垦区其他地方要冷许多,尽管草色还没有完全衰退,但山上刚刚降下的一场大雪已经积聚了足够的寒气,让草原提早进入了冬天。