Krüppel样因子4和驱动蛋白家族20A在胃癌组织的表达及其临床意义

目的探讨Krüppel样因子4(KLF4)和驱动蛋白家族20A(KIF20A)在胃癌组织的表达水平及两者与胃癌临床病理参数的关系.方法收集69例胃癌患者胃癌组织标本,采用免疫组织化学法检测其胃癌癌组织及对应癌旁组织中KLF4和KIF20A表达水平,并结合临床资料进行分析.结果KLF4在胃癌癌组织的表达率明显低于对应癌旁组织(43.48%比78.26%,t=17.524,P<0.01),KLF4表达水平与胃癌组织学分化程度、TNM分期、淋巴结转移明显相关(t=4.261、4.653、6.104,P<0.05);KIF20A在胃癌癌组织的表达率明显高于对应癌旁组织(66.67%比20.29%,t=30.195,P<0.01),KIF20A表达水平与胃癌TNM分期、淋巴结转移明显相关(t=6.048、4.246,P<0.05).结论KLF4在胃癌组织中低表达、KIF20A在胃癌组织中高表达,KLF4和KIF20A可能参与胃癌的发生发展过程.

驱动蛋白家族20A和星形胶质细胞上调基因-1蛋白在肝癌组织的表达及其临床意义

目的探讨驱动蛋白家族20A(KIF20A)和星形细胞上调基因-1(AEG-1)与原发性肝癌(PLC)临床病理特征关系。方法采用免疫组织化学法检测2011年2月~2019年8月广东医科大学附属医院收治69例PLC、33例肝硬化和17例正常肝组织中KIF20A和AEG-1表达,各组间比较采用χ2检验。结果KIF20A在正常肝组织、肝硬化组织与PLC组织中的阳性表达率分别为5.88%(1/17)、33.33%(11/33)、73.91%(51/69),两两之间比较差异有统计学意义(t=4.635、26.407、15.422,P<0.05),KIF20A表达水平与PLC血管浸润和TNM分期明显相关(t=6.067、7.753,P<0.05);AEG-1在正常肝组织、肝硬化组织与PLC组织中的阳性表达率分别为11.76%(2/17)、42.42%(14/33)、72.46%(50/69),两两之间比较差异有统计学意义(t=4.847、21.022、8.618,P<0.05),AEG-1表达水平与PLC血管浸润、肿瘤大小、TNM分期明显相关(t=4.804、6.355、6.355,P<0.05)。结论检测KIF20A和AEG-1有助于评估PLC患者病情。

驱动蛋白超家族20A在恶性肿瘤发生和发展中的作用研究进展

驱动蛋白超家族(KIF)20A是新近发现的KIF成员之一,主要参与细胞有丝分裂过程中的染色体分离、纺锤体装配、胞质分离和轴突物质运输等过程。研究发现,在众多肿瘤组织中KIF20A处于高表达状态,沉默或抑制KIF20A的肿瘤细胞系多表现为细胞增殖减弱甚至发生细胞凋亡,说明KIF20A的过表达与肿瘤的发生、发展密切相关。本文就KIF20A与多种恶性肿瘤发生发展的研究进展进行综述。

驱动蛋白家族成员20A对结直肠癌恶性增殖和化疗耐受的影响

目的:探讨驱动蛋白家族成员20A(KIF20A)对结直肠癌(CRC)恶性行为和化疗耐受的影响及其机制。方法:12例CRC及配对正常肠黏膜组织样本获自南方医科大学南方医院病理科。免疫组化、Western blot和RT-qPCR分析CRC组织和癌旁组织中KIF20A表达水平。KIF20A短发夹RNA(sh-KIF20A)转染或KIF20A过表达慢病毒(LV-KIF20A)感染CRC细胞。将RKO或LOVO细胞分为MOCK组(未转染的RKO或LOVO细胞)、LV-NC组(对照慢病毒感染RKO或LOVO细胞)和LV-KIF20A组(LV-KIF20A感染RKO或LOVO细胞);将HCT-116细胞分为MOCK组(未转染的HCT-116细胞)、sh-NC组(对照shRNA转染HCT-116细胞)和sh-KIF20A组(sh-KIF20A转染HCT-116细胞)。CCK-8和集落形成实验检测细胞活力和集落形成能力;流式细胞术检测细胞凋亡;Western blot检测凋亡相关蛋白cleaved caspase-3、Bax和Bcl-2及JAK2/STAT3信号通路相关蛋白的表达。免疫组化检测化疗敏感的CRC组织和化疗不敏感CRC组织中KIF20A和p-STAT3蛋白水平。将LV-NC或LV-KIF20A感染的RKO细胞接种于BALB/c裸鼠右侧皮下(每组5只),检测KIF20A对肿瘤体内生长的影响。结果:KIF20A在CRC组织及细胞中显著上调(P<0.05)。敲减KIF20A抑制CRC细胞的活力和集落形成能力,而过表达KIF20A则促进CRC细胞活力和集落形成能力。在5-氟尿嘧啶处理下,敲减KIF20A促进cleaved caspase-3和Bax表达,抑制Bcl-2表达,促进细胞凋亡;而过表达KIF20A会抑制cleaved caspase-3和Bax表达,促进Bcl-2表达,抑制细胞凋亡。机制研究表明,过表达KIF20A可上调p-JAK2和p-STAT3水平并激活JAK2/STAT3通路,KIF20A沉默可下调p-JAK2和p-STAT3水平。沉默STAT3可逆转由KIF20A过表达引起的细胞增殖能力提高和凋亡减少。与化疗敏感的CRC组织相比,KIF20A和pSTAT3在化疗不敏感的CRC组织中表达水平更高。体内实验表明,KIF20A过表达促进CRC肿瘤生长(P<0.05)。结论:KIF20A通过激活JAK2/STAT3信号通路调节CRC的恶性增殖及化疗耐受。

KIF20A在肿瘤中的作用及调控机制研究

驱动蛋白家族成员20A(KIF20A)是驱动蛋白家族的一员,在有丝分裂过程中负责运输染色体,在细胞分裂中发挥重要作用。现有研究已经证明,KIF20A在多种肿瘤中呈过表达,因此被视为一种极具潜力的肿瘤治疗靶点。KIF20A的高表达与较差的总生存期密切相关。本文首先概述了KIF20A的结构和功能,随后总结了KIF20A在肿瘤中的表达情况及其调控肿瘤的相关机制,最后介绍近年来与KIF20A相关的临床试验结果。这些发现对于肿瘤的临床诊疗具有重要的启示意义。

铁死亡抑制因子KIF20A对食管癌细胞生物学行为及铁死亡的影响

目的探讨驱动蛋白家族成员20A(KIF20A)在食管鳞状细胞癌(esophageal squamous cell carcinoma,ESCC)中的表达及对Eca109细胞生物学行为和铁死亡的影响。方法通过生物信息学分析预测KIF20A在ESCC中的表达。构建KIF20A敲低/过表达Eca109细胞系,实验分组:对照组,KIF20A敲低组,KIF20A过表达组。通过CCK-8法,Transwell侵袭实验,细胞划痕实验检测KIF20A对Eca109细胞增殖,迁移能力的影响。采用RAS选择性致死化合物3(RSL3)诱导建立铁死亡应激模型,检测谷胱甘肽(glutathione,GSH),丙二醛(malondialdehyde,MDA)含量。结果和对照组比较,KIF20A敲低组细胞增殖活力降低(P<0.05),KIF20A过表达组细胞增殖活力增加(P<0.05)。与对照组比较,KIF20A敲低组细胞侵袭及迁移能力降低(P<0.05),KIF20过表达组细胞侵袭及迁移能力增加(P<0.05)。RSL3诱导处理后,KIF20A敲低组细胞裂解液中GSH含量低于对照组(P<0.05),MDA含量高于对照组(P<0.05);KIF20A过表达组细胞结果与之相反。结论KIF20A在ESCC中高表达,其在Eca109细胞中发挥着促进增殖、侵袭、迁移及抑制铁死亡的作用。

FOXM1通过调节KIF20A介导巨噬细胞M2极化对食管鳞状细胞癌细胞的作用

目的 探究叉头转录因子(FOX)M1和驱动蛋白家族(KIF)20A对食管鳞状细胞癌细胞的作用及其可能的作用机制。方法 体外培养正常食管上皮细胞(Het-1A)、人食管鳞状细胞癌细胞(KYSE70)和人急性单核细胞白血病细胞(THP-1)。佛波酯(PMA)诱导THP-1细胞产生M0巨噬细胞。将M0巨噬细胞与KYSE70细胞共培养以获得肿瘤相关巨噬细胞(TAM),收集共培养上清液处理KYSE70细胞,分为空白对照组(不进行转染)、si-NC组(转染si-NC)、si-FOXM1组(转染si-FOXM1)、si-NC+oe-NC组(转染si-NC和oe-NC)、si-FOXM1+oe-NC组(转染si-FOXM1和oe-NC)、si-NC+oe-KIF20A组(转染si-NC和oe-KIF20A)、si-FOXM1+oe-KIF20A组(转染si-FOXM1和oe-KIF20A),荧光素酶报告实验和染色质免疫沉淀(ChIP)-PCR实验检测FOXM1对KIF20A的转录调控作用;实时荧光定量(qRT)-PCR和Western印迹检测FOXM1、KIF20A、精氨酸(Arg)-1、白细胞介素(IL)-10、E-钙黏蛋白(cadherin)和N-cadherin表达;流式细胞术检测TAM细胞中CD68^(+)/CD206^(+)细胞率;EdU实验检测细胞增殖;CCK-8检测细胞活力;Transwell实验检测细胞迁移和侵袭。结果 与Het-1A组相比,KYSE70组细胞中FOXM1和KIF20A表达明显升高(P<0.001)。FOXM1通过靶向结合KIF20A启动子区域调节KIF20A表达。与si-NC+oe-NC组相比,si-FOXM1+oe-NC组TAM细胞中CD68^(+)/CD206^(+)细胞率、Arg-1和IL-10蛋白表达明显降低(P<0.05),si-NC+oe-KIF20A组变化明显升高(P<0.05);与si-FOXM1+oe-NC组相比,si-FOXM1+oe-KIF20A组TAM细胞中CD68^(+)/CD206^(+)细胞率、Arg-1和IL-10蛋白表达明显升高(P<0.05)。用共培养上清液处理KYSE70细胞,与空白对照组相比,TAM组KYSE70细胞活力、增殖、迁移、侵袭和EMT能力受到明显促进(P<0.05);与si-NC+oe-NC+TAM组相比,si-FOXM1+oe-NC+TAM组KYSE70细胞活力、增殖、迁移、侵袭和EMT能力明显抑制,而si-NC+oe-KIF20A+TAM组明显促进(P<0.05);与si-FOXM1+oe-NC+TAM组相比,si-FOXM1+oe-KIF20A+TAM组KYSE70细胞活力、增殖、迁移、侵袭和EMT能力受到明显促进(P<0.05)。结论 FOXM1通过上调KIF20A表达促进巨噬细胞M2极化从而促进KYSE70细胞增殖和转移。

过/降表达KIF20A的宫颈癌细胞迁移、侵袭、上皮—间质转化能力变化及其分子机制

目的观察过/降表达KIF20A的宫颈癌细胞迁移、侵袭、上皮—间质转化(EMT)能力的变化,并探讨其可能的分子机制。方法培养人宫颈永生化鳞状细胞系ECT及人宫颈癌细胞系C33A、MS751、Hela、SiHa、CasKi,以RT-qPCR法检测细胞中KIF20A mRNA表达水平。选取KIF20A表达量最高的CasKi细胞并分为对照组和敲降组,分别转染sh-NC、sh-KIF20A;选取KIF20A表达量最低的Hela细胞分为对照组和过表达组,分别转染Vector、KIF20AOE。应用划痕实验和Transwell小室实验分别测定四组细胞迁移和侵袭能力,Western blotting法检测四组细胞中EMT相关蛋白Vimentin、E-cadherin;利用细胞组分分离实验结合Western blotting法检测两组Hela细胞细胞质膜及细胞核中的β-catenin,免疫共沉淀实验结合Western blotting法检测两组Hela细胞中β-catenin免疫共沉淀的Ecadherin蛋白水平。结果划痕12、24、48 h时,CasKi细胞中敲降组划痕愈合率均低于对照组,Hela细胞中过表达组划痕愈合率均高于对照组(P均<0.05)。CasKi细胞中敲降组细胞迁移数少于对照组,Hela细胞中过表达组细胞迁移数多于对照组(P均<0.05)。CasKi细胞中,敲降组细胞中Vimentin蛋白表达量低于对照组,E-cadherin蛋白表达量高于对照组(P均<0.05);Hela细胞中,过表达组Vimentin蛋白表达量高于对照组,E-cadherin蛋白表达量低于(P均<0.05)。过表达组细胞膜中β-catenin蛋白表达量高于对照组,细胞核中β-catenin蛋白表达量低于对照组(P均<0.05)。与对照组比较,过表达组β-catenin免疫共沉淀的E-cadherin蛋白表达量减少(P<0.05)。结论过表达KIF20A能促进宫颈癌细胞迁移、侵袭,诱导EMT相关蛋白Vimentin表达并抑制E-cadherin表达;降表达KIF20A后,作用与之相反。该调控作用可能与KIF20A抑制E-cadherin/β-catenin复合物形成来诱导β-catenin激活有关。

miR-655-3p靶向KIF20A抑制人肺腺癌细胞系A549迁移及侵袭

目的探讨miR-655-3p靶向驱动蛋白家族成员20A(KIF20A)对肺腺癌细胞增殖、迁移及侵袭的影响。方法RT-qPCR检测人肺腺癌细胞系H460、A549、HCC-2935、H1299细胞中miR-655-3p的表达;取对数增殖期的A549细胞,分为:空白组、miR-NC组、miR-655-3p mimics组、si-NC组、si-KIF20A组、miR-655-3p mimics+OE-NC组、miR-655-3p mimics+OE-KIF20A组,RT-qPCR检测miR-655-3p表达;Western blot检测KIF20A、基质金属蛋白酶2(MMP-2)、MMP-9及RAS/丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)通路相关蛋白表达;CCK-8法检测细胞增殖;Transwell小室法检测细胞迁移与侵袭;双荧光素酶报告基因实验验证miR-655-3p与KIF20A的关系。结果miR-655-3p在人肺腺癌细胞系中低表达,且在A549细胞中的表达量最低;过表达miR-655-3p或沉默KIF20A均能抑制A549细胞增殖、迁移、侵袭及MMP-2、MMP-9、磷酸化细胞外调节蛋白激酶1/2(p-ERK1/2)、磷酸化脂酰肌醇3激酶(p-PI3K)、磷酸化蛋白激酶B(p-AKT)蛋白表达(P<0.05);miR-655-3p靶向负调控KIF20A表达,上调KIF20A可抑制过表达miR-655-3p对A549细胞增殖、迁移、侵袭及RAS/MAPK通路相关蛋白的影响。结论过表达miR-655-3p可靶向下调KIF20A,抑制肺腺癌细胞增殖、迁移与侵袭,该机制可能与抑制RAS/MAPK通路有关。

KIF20A在宫颈炎、宫颈鳞状上皮内瘤变、宫颈鳞状细胞癌中的表达及临床意义

目的分析驱动蛋白家族成员20A(KIF20A)在宫颈炎、宫颈鳞状上皮内瘤变(CIN)、宫颈鳞状细胞癌(CSCC)中的表达及临床意义。方法回顾性收集2015年1月至2018年2月于徐州医科大学附属宿迁医院就诊的CSCC患者40例、CIN患者40例、宫颈炎患者20例的临床资料,均保存良好的石蜡标本。KIF20A蛋白采用免疫组织化学法进行检测,比较3组KIF20A蛋白阳性表达率;Kaplan-Meier法分析KIF20A表达与CSCC生存预后的关系。结果宫颈炎、CIN、CSCC组织中KIF20A的阳性率分别为10.00%、42.50%、70.00%,逐步提高,差异有统计学意义(P<0.05)。浸润深度≥1/3层、发生盆腔淋巴结转移、FIGO分期为ⅡB+Ⅲ期的CSCC患者KIF20A阳性表达率高于浸润深度<1/3层、未发生盆腔淋巴结转移、FIGO分期为Ⅰ+ⅡA期的CSCC患者,差异均有统计学意义(P<0.05)。Kaplan-Meier法分析显示,KIF20A阴性表达的CSCC患者5年生存率为67.86%(19/28),高于KIF20A阳性表达患者[58.33%(7/12)],差异有统计学意义(χ^(2)=5.559,P<0.05)。结论KIF20A蛋白在宫颈炎、CIN组织、CSCC组织中的阳性率逐步提高,可能参与CSCC的发生与发展,其表达与CSCC患者预后有关。