驱动蛋白KIF14与有丝分裂及肿瘤关系的研究进展

驱动蛋白KIF14是一种马达蛋白,依靠ATP水解酶的活性,向微管正极末端运动。在细胞内,KIF14参与物质运输、纤毛发生和细胞有丝分裂等过程。近年来的研究表明,在细胞质分裂的不同阶段KIF14通过与多种蛋白质相互作用来调控有丝分裂的进程。KIF14的表达异常会导致细胞有丝分裂失常,造成细胞基因组不稳定,而基因组的不稳定是导致肿瘤发生的重要原因。KIF14与多种肿瘤的发生发展密切相关,并且与肿瘤细胞的迁移、侵袭和对药物的敏感性有关,其已成为肿瘤早期诊断、治疗和预后评估的潜在靶点,因此,开发靶向KIF14的抑制剂,将为肿瘤的临床治疗提供新药物。

miR-186-5p靶向驱动蛋白分子14诱导髓母细胞瘤Daoy细胞凋亡的机制研究

目的 研究miR-186-5p靶向驱动蛋白分子14(KIF14)诱导髓母细胞瘤Daoy细胞凋亡的机制。方法 以实时荧光定量逆转录聚合酶链反应(qRT-PCR)法检测正常星形胶质NHA细胞和髓母细胞瘤D283、Daoy、D341细胞中miR-186-5p的表达水平。将髓母细胞瘤Daoy细胞分成对照组、miR-NC组(转染mimics control)、miR-186-5p组(转染miR-186-5p mimics)、anti-miR-NC组(转染inhibitor control)、anti-miR-186-5p组(转染miR-186-5p inhibitor)、miR-186-5p+Vector组(共转染miR-186-5p mimics和阴性对照载体)、miR-186-5p+KIF14组(共转染miR-186-5p mimics和KIF14过表达载体)、Vector组(转染阴性对照载体)、KIF14组(转染KIF14过表达载体)。以细胞计数法-8(CCK-8)法检测增殖情况,以流式细胞术检测细胞凋亡情况,以蛋白质印迹(Western blot)法检测KIF14、B细胞淋巴瘤-2(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)的表达水平。荧光素酶报告系统鉴定miR-186-5p和KIF14的靶向关系。结果 对照组、miR-NC组、miR-186-5p组、miR-186-5p+Vector组、miR-186-5p+KIF14组的细胞增殖活性(OD值)分别为0.68±0.07,0.65±0.08,0.36±0.04,0.35±0.05和0.46±0.03,凋亡率分别为(3.26±0.54)%,(3.18±0.36)%,(11.54±1.47)%,(10.95±1.28)%和(5.63±0.62)%,Bax蛋白表达量分别为0.57±0.05,0.56±0.09,0.88±0.08,0.90±0.11和0.70±0.08,Bcl-2蛋白表达量分别为0.66±0.07,0.64±0.06,0.45±0.04,0.42±0.05和0.53±0.03,对照组、miR-NC组的上述指标与miR-186-5p组比,miR-186-5p+Vector组的上述指标与miR-186-5p+KIF14组比,差异均有统计学意义(均P<0.05)。miR-NC组、miR-186-5p组、anti-miR-NC组、anti-miR-186-5p组细胞中KIF14蛋白表达量为0.75±0.08,0.26±0.05,0.78±0.09和1.25±0.13,miR-NC组与miR-186-5p组比,anti-miR-NC组与anti-miR-186-5p组比,差异均有统计学意义(均P<0.05)。miR-186-5p和KIF14为靶向关系。结论 miR-186-5p靶向抑制KIF14表达诱导髓母细胞瘤Daoy细胞凋亡。