驴乳清蛋白通过抑制MAPK和NF-κB信号通路缓解对乙酰氨基酚诱导的小鼠急性肝损伤

为了探讨驴乳清蛋白(DWP)补充对对乙酰氨基酚(APAP)诱导小鼠急性肝损伤(ALI)的保护作用及潜在的分子机制,本试验将6周龄雄性C57BL/6J小鼠随机分为6个组(n=6)。正常对照组(Control组)和APAP诱导肝损伤组(APAP组)小鼠每天灌服0.3 mL生理盐水,DWP对照组(DWP组)小鼠每天灌服400 mg/(kg•bw)DWP,DWP低、中、高剂量组(L、M、H组)小鼠每天分别灌服100、200和400 mg/(kg•bw)DWP,连续7 d。末次给药24 h后,除Control组和DWP组外,其余各组小鼠经腹腔注射300 mg/(kg•bw)APAP,16 h后收集各组小鼠血清和肝脏组织样品。苏木素-伊红(H.E.)染色观察小鼠肝脏组织学变化,试剂盒检测血清谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)水平,酶联免疫吸附试验(ELISA)检测小鼠肝脏细胞因子含量,免疫印迹(Western blot)方法检测核转录因子-κB(NF-κB)p65和有丝分裂原活化蛋白激酶(MAPK)相关信号分子,包括细胞外调节激酶(ERK)、Jun N-端激酶(JNK)、p38的磷酸化水平。结果显示,与APAP组相比,H组小鼠血清ALT、AST水平和肝脏病理组织学评分极显著降低(P<0.01),肝脏组织中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-6(IL-6)含量显著降低(P<0.05),NF-κB p65和p38蛋白的磷酸化水平显著降低(P<0.05),ERK和JNK蛋白的磷酸化水平极其显著降低(P<0.001)。结果表明,DWP可能通过抑制MAPK和NF-κB信号通路,进而缓解APAP诱导的小鼠急性肝损伤和炎症反应。

计算机模拟酶解制备驴乳清蛋白抗氧化肽的研究

本文选用驴乳清蛋白为原材料,以DPPH自由基清除率为指标,利用计算机模拟酶解驴乳清蛋白,筛选出能够产生抗氧化活性肽的最适蛋白水解酶,以pH、酶解温度、酶底比(质量比)为自变量,采用Design-Expert V8.0.6设计响应面试验,确定以α-胰凝乳蛋白酶酶解驴乳清蛋白制备抗氧化肽的最佳工艺条件。结果表明在底物浓度4%,酶解时间4 h的条件下,当温度达到39℃,pH 8,酶底比4%时得到的酶解肽抗氧化活性最强,10 mg/mL驴乳清蛋白酶解肽的DPPH自由基清除率最高可达46.23%。