驴骨胶原肽制备方法的初步建立及分子量检测

旨在建立驴骨胶原肽的制备方法,并对其分子量进行检测。以牛血清白蛋白为对照品,建立多肽含量和OD650 nm值的标准曲线方程;模拟人工胃液、肠液环境,以驴骨胶原肽一级、二级酶解产物多肽含量为评价指标,在筛选胃蛋白酶和胰蛋白酶最佳酶解时间和加酶量的基础上,采用二级生物酶解技术制备驴骨胶原肽;应用SDS-PAGE法对制备的驴骨胶原肽的分子量进行检测。结果表明,建立的多肽含量和OD650 nm值标准曲线方程为:y=0.1639x-0.1496,R2=0.9989;应用胃蛋白酶进行一级酶解驴骨胶原肽的最适反应条件为:pH值在2.5~3.0,加酶量2.0%、酶解时间2.0 h;应用胰蛋白酶进行二级酶解驴骨胶原肽的最适反应条件为:pH值在7.5~8.0,加酶量2.0%、酶解时间2.5 h;经SDS-PAGE法检测,根据上述最适反应条件制备的驴骨胶原肽的分子量在10 kDa左右。研究结果为开发适合人体吸收分子量的驴骨胶原肽原料以及后续产品的研发提供了技术参考。

驴骨胶原蛋白肽对骨质疏松大鼠的改善作用

为探究驴骨胶原蛋白肽(Donkey bone collagen peptide,DBCP)对骨质疏松大鼠的改善作用。以健康的雌性SD大鼠为研究对象,切除卵巢构建骨质疏松模型后,以不同分子量的DBCP(<1 kDa、1~3 kDa、>3 kDa)作为受试样品,并分别设置高低(4%、2%)两个剂量组,饲喂12周后测定各组的功效评价指标(脏器、血清及骨指标等)。结果表明:不同分子量的DBCP各剂量组均不会明显影响大鼠的肝肾功能;三种分子量DBCP高剂量组(4%)能很好地抑制去卵巢后由于代谢失衡引起的碱性磷酸酶和肿瘤坏死因子指标的升高;<1 kDa和1~3 kDa DBCP能有效地提升骨质疏松大鼠体内的钙、磷水平,并可使去卵巢大鼠骨密度恢复至正常水平。综合可得,DBCP对骨质疏松症状具有一定的改善作用,且无明显副作用,可作为安全的营养补充剂长期服用。