老年性骨质疏松症的骨保护素-NK-κB受体激活因子-RANK配体作用机制及影响因素研究进展

老年性骨质疏松症属于骨质疏松症(OP)Ⅱ型,常见于65岁以上且骨骼呈低转化者[1].OP是一类以骨密度降低及骨结构改变导致脆性骨折风险增加为特征的疾病,病因认为与骨吸收破骨细胞的形成增多和活性增强、成骨细胞的形成减少和活性降低有关系[2].本文围绕骨保护素(OPG)-NF-κB受体激活因子(RANK)-RANK配体(RANKL)与老年性OP的关系及影响因素的研究进展进行了综述,旨在为明确老年性OP的病因及发生机制提供参考.

补骨脂素干预大鼠成骨细胞骨保护素/核因子κB受体激活因子配体mRNA的表达

背景:补骨脂素有促进大鼠成骨细胞增殖与分化的作用,但其作用机制尚不明确。目的:探讨补骨脂素对大鼠成骨细胞中骨保护素(osteoporogeterin,OPG)和核因子κB受体激活因子配体(receptor activ atornuclear factor kappa b ligand,RANKL)mRNA表达的影响。方法:取第3代生长状况良好的出生24h内的SD大鼠成骨细胞,补骨脂素组加入1×10-7mol/L的补骨脂素,雌二醇组加入1×10-7mol/L的雌二醇,对照组正常培养。给药72h后提取细胞总RNA,RT-PCR方法分析细胞OPG/RANKLmRNA的表达。结果与结论:与对照组比较,补骨脂素组和雌二醇组OPGmRNA的表达均明显增加(P<0.05),而RANKL mRNA的表达明显下降(P<0.05),但补骨脂素组成骨细胞OPG mRNA的表达较雌二醇组弱(P<0.05),VOPG/VRANKL比值也较雌二醇组小(P<0.05)。说明补骨脂素可能通过增加成骨细胞OPG的表达,抑制RANKL的表达来抑制破骨细胞的分化和成熟,从而抑制骨吸收,达到防治骨质疏松症的目的,但作用不如雌二醇明显。

补骨脂素对成骨细胞核因子-κB受体激活配体和骨保护素表达的影响

目的研究补骨脂素(psoralen,PSO)对体外培养的小鼠成骨细胞(OB)分化及核因子-κB受体激活配体(receptor activator of nuclearfactor-κB ligand,RANKL)和骨保护素(osteoprotegerin,OPG)表达的影响。方法取第1代BALB/c小鼠颅盖骨成骨细胞,将PSO以0.1、1、10μmol/L3种浓度分别加入新生大鼠颅骨成骨细胞培养液中,MTT法观察各组药物对成骨细胞的增殖作用并绘制细胞生长曲线;用PNPP法测定成骨细胞内碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)活性;RT-PCR法检测成骨细胞OPG和RANKL的转录水平。结果细胞生长曲线显示各组成骨细胞数量均随时间延长而增加,中、高浓度PSO能显著提高成骨细胞的ALP活性,促进OPG、RANKL的表达(P<0.05),OPG/RANKL升高(P<0.05)。结论低浓度PSO(0.1μmol/L)对骨更新作用不明显,而中、高浓度PSO(1、10μmol/L)能通过上调OPG、RANKL mRNA表达及OPG/RANKL比例,促进成骨细胞的生成功能,增强骨更新。

巴戟天多糖对去卵巢大鼠核因子-κB受体激活因子配体和骨保护素表达的影响

目的观察巴戟天多糖对去卵巢大鼠骨组织核因子-κB受体激活因子配体(RANKL)和骨保护素(OPG)mRNA表达的影响。方法成年雌性SD大鼠30只,随机分为假手术组、模型组、巴戟天多糖组,采用摘取双侧卵巢法建立骨质疏松模型,造模2 w后开始给药,给药3个月后观察各组大鼠骨密度(BMD),骨钙、骨磷含量,RANKL、OPG mRNA的表达水平。结果给药3个月后巴戟天多糖组能显著提高去卵巢大鼠的BMD和骨钙、磷的含量,上调OPG mRNA表达,下调RANKL mRNA表达,使RANKL/OPG值下降。结论巴戟天多糖对去卵巢所致的大鼠骨质疏松具有良好的防治作用,其机制可能与调控RANKL和OPG mRNA的表达,降低RANKL/OPG值有关。

抗风湿颗粒对胶原诱导关节炎大鼠骨保护素、核因子-κB受体激活因子配体和巨噬细胞集落刺激因子表达的影响

目的:观察抗风湿颗粒(Kangfengshi Granules,KFSG)对胶原诱导关节炎大鼠骨组织中骨保护素(osteoprotegerin,OPG)、核因子-κB受体激活因子配体(receptor activator of nuclear factor-κB ligand,RANKL)和巨噬细胞集落刺激因子(macrophage colony stimulating factor,M-CSF)mRNA表达的影响,探讨KFSG治疗类风湿关节炎(rheumatoid arthritis,RA)的作用机制。方法:40只SD大鼠随机分为正常对照组、模型组、环孢菌素A(cyclosporine A,CsA)治疗组和KFSG治疗组。除正常对照组外,其余各组大鼠予以皮下注射Ⅱ型胶原诱导关节炎模型。治疗4周后,采用实时定量PCR技术检测各组大鼠骨组织中OPG、RANKL和M-CSF mRNA的表达水平。结果:造模大鼠90%出现关节炎症状。治疗4周后,模型组、CsA治疗组和KFSG治疗组与正常对照组比较,RANKL mRNA和M-CSF mRNA的表达增高,OPGmRNA的表达降低,RANKL mRNA/OPG mRNA比值亦增高,差异均有统计学意义。KFSG治疗组与模型组比较,OPG mRNA的表达水平上调,M-CSF mRNA的表达水平下调,RANKL mRNA/OPG mRNA比值下降,差异均有统计学意义。结论:KFSG治疗RA骨质破坏的分子机制可能与其上调OPG mRNA的表达、下调M-CSF mRNA的表达及降低RANKL mRNA/OPG mRNA比值有关。

p38MAPK抑制对成骨细胞核因子-κB受体激活配体和骨保护素表达的影响

目的观察p38MAPK信号转导通路在成骨细胞分化及核因子-κB受体激活配体(receptor activator of nuclear factor-κBligand,RANKL)和骨保护素(osteoprotegerin,OPG)表达中的作用。方法取第1继代BALB/c小鼠颅盖骨成骨细胞,药物刺激组分别加入10-8mol/L 17β-雌二醇和10-7mol/L雷洛昔芬;含阻断剂组预先添加5μmol/L SB202190阻断p38MAPK通路后,再加17β-雌二醇或雷洛昔芬。72 h后用PNPP法测定成骨细胞内碱性磷酸酶(alkaliphosphatase,ALP)活性;RT-PCR法检测成骨细胞ALP、OPG和RANKL的转录水平。结果17β-雌二醇和雷洛昔芬能够促进成骨细胞分化,促进OPG、RANKL的表达(P<0.05),OPG/RANKL无明显变化(P>0.05);阻断p38MAPK信号转导通路后,成骨细胞分化受抑,OPG、RANKL的表达和OPG/RANKL降低(P<0.05)。结论p38MAPK抑制可干扰体外培养成骨细胞分化,抑制RANKL和OPG的过度表达。

佐剂性关节炎大鼠骨密度及血清骨保护素和核因子-κB受体激活因子配体的变化

目的:观察佐剂性关节炎大鼠的骨密度、血清骨保护素(OPG)及核因子-κB受体激活因子配体(RANKL)的表达。方法:将30只SD大鼠随机均分为正常对照组、模型1组、模型2组,除正常对照组外,其余大鼠均制成佐剂性关节炎模型。造模后第21天处死模型1组,第28天处死正常对照组和模型2组。以双能X线吸收测定法测量整体右侧胫骨和距胫骨远端约1cm兴趣区检测骨密度;ELISA方法检测血清OPG、RANKL的表达。结果:模型1组大鼠兴趣区的骨密度明显低于正常对照组(P<0.01);模型2组大鼠兴趣区的骨密度均较模型1组和正常对照组显著降低(P<0.01);3组大鼠整体右侧胫骨骨密度值差异无统计学意义(P>0.05)。模型1组、模型2组血清OPG、RANKL表达及OPG/RANKL比值与正常对照组差异均有统计学意义(P<0.01)。同时模型1组与模型2组血清OPG、RANKL表达及OPG/RANKL比值差异亦均有统计学意义(P<0.01)。结论:佐剂性关节炎大鼠胫骨远端骨丢失的发生在整体胫骨之前。造模后第21天和第28天的OPG表达降低,RANKL表达升高,OPG/RANKL比值降低。

甲状旁腺激素对人牙囊前体细胞核因子κB受体激活因子配体和骨保护素mRNA表达的影响

目的:研究不同浓度、不同作用时间的甲状旁腺激素(Parathyroid Hormone,PTH)对体外培养的人牙囊前体细胞表达核因子κB受体激活因子配体(receptor activator of nuclear factor kappa-B ligand,RANKL)和骨保护素(osteoprotegerin,OPG)mRNA的影响。方法:原代培养和纯化人牙囊前体细胞,取生长状况良好的第3～5代人牙囊前体细胞,与不同浓度(0.1、1、10、100 ng/mL)重组人PTH共孵育,分别用RT-PCR检测不同浓度PTH作用2 h和100 ng/mL PTH作用不同时间点人牙囊前体细胞RANKL、OPG的mRNA表达,以GAPDH作为内参,进行灰度值比较。结果:随着PTH浓度(0.1、1、10、100 ng/mL)和PTH作用时间(2、4、8 h)的增加,人牙囊前体细胞RANKL mRNA的表达逐渐增高,OPG mRNA的表达逐渐降低。不同浓度组间和不同时间之间相比,RANKL和OPG mRNA表达量均有显著性差异(P<0.05)。结论:PTH可增强体外培养的人牙囊前体细胞RANKL mRNA的表达,降低OPG mRNA的表达。

骨质疏松分子生物学研究专家共识

骨质疏松分子生物学研究在骨代谢分子信号通路、骨质疏松易感基因、骨质疏松相关蛋白、骨质疏松靶向治疗等方向取得了很大进展。核因子κB受体活化因子/核因子κB受体活化因子配体/骨保护素(RANK/RANKL/OPG)信号通路、核因子κB受体活化因子(NF-κB)信号通路、丝裂原活化蛋白激酶/细胞外调节蛋白激酶(MAPK/ERK)信号通路、巨噬细胞集落刺激因子(M-CSF)信号通路、钙离子(Ca^(2+))信号通路、酪氨酸激酶、蛋白激酶B(Src、Akt)信号通路、蛋白激酶C(PKC)信号通路等骨代谢重要通路,维生素D受体(VDR)基因、低密度脂蛋白相关蛋白5(LRP5)基因、亚甲基四氢叶酸还原酶(MTHFR)基因、雌激素受体(ER)基因等易感基因,载脂蛋白E(Apo E)、Klotho蛋白(Klotho)、骨形态发生蛋白(BMP)、骨涎蛋白(BSP)等相关蛋白,以直接或间接的方式参与调控骨代谢,作用重叠相互联系,互为结果,已在本专业领域达成共识。

糖皮质激素诱导的亮氨酸拉链蛋白与多发性骨髓瘤骨病发展的关系

目的:研究糖皮质激素诱发的亮氨酸拉链蛋白(glucocorticoid induced leucine zipper,GILZ)在多发性骨髓瘤(MM)骨病发展中的作用。方法:收集MM患者抗凝血11例,利用密度梯度离心法获取外周血单个核细胞(PBMCs),并将PBMCs分为地塞米松(DEX)干预组及空白对照组,相同条件培养48h。采用逆转录-酶联聚合反应(RT-PCR)法检测各组PBMCs中GILZ mRNA的表达;ELISA检测核因子κB受体激活剂配体(RANKL)及骨保护素(OPG)的表达。结果:在10-7 mol/L DEX刺激下,DEX刺激组MM患者PBMCs的GILZmRNA表达水平高于空白对照组(P<0.05);DEX刺激组OPG的表达量高于对照组(P<0.05),而RANKL的表达量诱导组与空白对照组相比差异无统计学意义(P>0.05)。结论:糖皮质激素可有效上调GILZ基因表达;GILZ的高表达可以调节MM患者RANKL及OPG的平衡,具有改善溶骨性损害的作用。

骨金散血清对糖皮质致激素骨质疏松大鼠成骨细胞OPG、RANKL mRNA表达的影响

目的探讨含中药骨金散血清对糖皮质致激素骨质疏松大鼠成骨细胞OPG/RANKL系统的影响。方法 3.5月龄雄性SD大鼠50只,随机分为正常对照组、模型组、阿仑膦酸钠治疗组、骨金散低剂量组和骨金散高剂量组。观察骨金散对各组大鼠股骨骨密度的影响。体外培养大鼠成骨细胞,观察含药血清对成骨细胞的增殖和OPGmRNA、RANKLmRNA的表达的影响。结果与正常对照组相比,模型组和其他各组大鼠骨密度明显降低(P<0.01),低剂量和高剂量组大鼠骨密度高于模型组(P<0.01)。与模型组比较,骨金散低剂量组和高剂量组血清可促进成骨细胞的增殖(P<0.05),升高OPG mRNA表达(P<0.01),降低RANKL mRNA的表达(P<0.01),OPGmRNA/RANKLmRNA比值升高(P<0.01)。结论中药骨金散能使糖皮质激素所致骨质疏松大鼠骨密度增高,其治疗骨质疏松的机制可能与促进成骨细胞增殖,影响成骨细胞OPG/RANKL系统,发挥抑制破骨细胞的骨吸收作用有关。

瘦素对小鼠成骨细胞MC3T3-E1增殖及OPG/RANKL mRNA表达的影响

目的初步探讨瘦素对小鼠成骨细胞MC3T3-E1细胞增殖及骨保护蛋白、核因子κB激活受体配体mRNA表达的影响。方法以小鼠成骨细胞MC3T3-E1为体外实验模型,用MTT法检测瘦素作用MC3T3-E1细胞后的增殖情况,RT-PCR方法检测OPG、RANKL mRNA表达。结果瘦素(10、20、40、80和160ng.mL-1)作用于MC3T3-E1细胞24h后,可促进其增殖,OD值显著增加(P<0.01),增加骨保护蛋白mRNA表达,同时降低核因子κB激活受体配体mRNA表达,且呈浓度依赖性。结论瘦素促进MC3T3-E1细胞增殖,同时通过调节骨保护蛋白mRNA和核因子κB激活受体配体mRNA的表达,从而促进骨形成,抑制骨吸收。

miR-26a在血管钙化中的作用机制

目的探讨血管钙化过程中miR-26a表达差异及其作用机制。方法通过体内和体外实验构建血管钙化模型,利用分子生物学、病理生物学及细胞生物学检测方法,验证血管钙化过程中miR-26a表达差异及可能作用机制。结果与模型组和mimic NC组相比较,miR-26a mimic组碱性磷酸酶活性显著降低(P<0.05)。而inhibitor NC组和miR-26a inhibitor组碱性磷酸酶无显著变化(P>0.05)。与mimic NC组比较,miR-26a mimic组miR-26a、骨保护素(OPG)表达水平显著升高(P<0.05),而骨桥蛋白(OPN)、骨形态发生蛋白(BMP)-2和胶原蛋白(Collagen)Ⅱ表达水平显著降低(P<0.05)。与inhibitor NC组比较,miR-26a inhibitor组miR-26a、OPG、OPN、BMP-2和CollagenⅡ表达水平无显著差异(P>0.05)。结论miR-26a在血管钙化中的作用机制可能与OPG/核因子κB受体激活剂(RANK)/细胞核因子κB受体活化因子配体(RANKL)信号通路有关。

大气颗粒物PM2.5对老年雄性大鼠骨代谢的影响

目的观察大气细颗粒物PM2.5对老年雄性大鼠骨密度、骨小梁结构的影响,及对核因子κ受体激活剂Β配体(RANKL)/骨保护素(OPG)表达的作用,探讨PM2.5对老年大鼠骨代谢的影响。方法采用雾霾仓暴露系统,按照随机数字表法将20只19月龄老年SD雄性大鼠分为清洁组和PM2.5组,每组10只。将其分别饲养于清洁仓和雾霾仓,每周监测体重,12周后,取材留取股骨组织,检测大鼠骨密度。苏木精-伊红(HE)染色观察骨组织形态;提取骨髓中的mRNA,应用Real-time PCR检测RANKL/OPG的表达情况。结果两组体重随着时间的延长呈现稳定的增高,但两组体重比较,差异无统计学意义(P>0.05)。HE结果显示,与清洁组比较,PM2.5组松质骨部位的骨小梁减少,排列稀疏、部分断裂。与清洁组比较,PM2.5组骨密度、骨小梁数量、骨小梁面积和骨小梁面积百分比均明显下降,差异均有统计学意义(P<0.05或P<0.01)。Real-time PCR结果显示,与清洁组比较,PM2.5组骨髓中的OPG mRNA含量降低,而RANKL mRNA含量增高,差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论长期暴露于PM2.5中有可能通过增加成骨细胞RANKL表达并降低OPG表达,增加破骨细胞活性,进而降低骨密度和骨小梁,加重老年大鼠骨质疏松。

基于OPG/RANKL信号轴探讨二至丸治疗绝经后骨质疏松的作用机制

目的:探讨二至丸治疗绝经后骨质疏松模型鼠的作用机制。方法:将108只雌性SD鼠随机分为假手术(Sham)组、模型(PMOP)组、雌激素治疗(E_(2))组、二至丸低剂量治疗(EZW-L)组、二至丸中剂量治疗(EZW-M)组、二至丸高剂量治疗(EZW-H)组,每组18只。E_(2)组接受E_(2)针剂皮下注射,EZW-L组、EZW-M组、EZW-H组分别予以6 g/kg、9 g/kg、12 g/kg混悬液灌胃,Sham组与PMOP组均予以1 mL生理盐水灌胃,均干预12周。检测各组大鼠右侧股骨头骨密度(BMD)、股骨生物力学/病理变化以及骨代谢血清标志物BALP、TRACP-5b、Cath-K、OPG、RANK、RANKL的水平变化。结果:药物干预12周后,与PMOP组比较,EZW-M组、E_(2)组、EZW-H组的BMD、弹性模量、最大载荷、BV/TV、Tb.Th、Joint、血清骨代谢标志物BALP、TRACP-5b、Cath-K的蛋白表达均显著增高(均P<0.05),FLAW显著降低(P<0.05);HE染色显示PMOP组骨组织出现明显病理改变,E_(2)组和EZW-H组疏松病理现象改善明显。POMP组、EZW-L组、EZW-M组股骨中OPG蛋白含量较Sham组、E_(2)组、EZW-H组明显下降;RANK、RANKL蛋白含量升高。与PMOP组比较,EZW-M组的OPG/RANKL比值显著增高(P<0.05),RANK/RANKL比值显著降低(P<0.05),E_(2)组、EZW-H组的OPG/RANKL比值显著增高(P<0.01),E_(2)组、EZW-H组的RANK/RANKL比值显著降低(P<0.01)。结论:二至丸可改善骨质疏松,其作用机制可能是OPG骨保护素重组蛋白/核因子κB受体激活物配体/RANKL信号轴抑制破骨细胞成熟分化实现的。

艾拉莫德基于AMPK/RANKL-OPG通路对类风湿关节炎大鼠骨破坏的干预效果

目的分析艾拉莫德基于腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)/核因子(FN)-κB受体激活配体(RANKL)-骨保护素(OPG)通路对类风湿关节炎大鼠骨破坏的干预效果。方法选取50只Wistar雌性大鼠,10只为空白组,另外40只建立类风湿关节炎模型,建模成功后分为模型组、AMPK激动剂组、甲氨蝶呤组、艾拉莫德组各10只,空白组、模型组注射相同剂量生理盐水,AMPK激动剂组给予0.5 mg/kg AICAR皮下注射;艾拉莫德组灌服10 mg/kg艾拉莫德;甲氨蝶呤组灌服0.5 mg/kg甲氨蝶呤。结果与空白组相比,模型组、AMPK激动剂组、甲氨蝶呤组、艾拉莫德组踝关节直径,白细胞介素(IL)-1、IL-17、IL-6、肿瘤坏死因子(TNF)-α、抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)水平和p-AMPK、RANKL、TRAP mRNA及蛋白表达量升高,OPG mRNA及蛋白表达量降低,有统计学差异(P<0.05);与模型组相比,AMPK激动剂组、甲氨蝶呤组、艾拉莫德组踝关节直径、IL-1、IL-17、IL-6、TNF-α、TRAP水平和p-AMPK、RANKL、TRAP mRNA及蛋白表达量降低,OPG mRNA及蛋白表达量升高,有统计学差异(P<0.05);与AMPK激动剂组相比,甲氨蝶呤组、艾拉莫德组踝关节直径、IL-1、IL-17、IL-6、TNF-α、TRAP水平和p-AMPK、RANKL、TRAP mRNA及蛋白表达量降低,OPG mRNA及蛋白表达量升高,且艾拉莫德组踝关节直径、IL-1、IL-17、IL-6、TNF-α、TRAP水平和p-AMPK、RANKL、TRAP mRNA及蛋白表达量最低,OPG mRNA及蛋白表达量最高,均有统计学差异(均P<0.05)。结论艾拉莫德可以通过调控AMPK/RANKL-OPG信号通路,改善大鼠炎症因子,抑制破骨细胞分化和骨破坏的发生。

葛根素对人成骨样MG-63细胞OPG、RANKL表达的调节作用

【目的】观察葛根素对人成骨样MG-63细胞骨吸收调节因子骨保护素(osteoprotegerin,OPG)、NF-κB激活受体配体(receptor activator of nuclear factor kappa-B ligand,RANKL)表达的调节作用,并初步探讨对其可能的作用机制。【方法】选择兼有两种雌激素受体(estrogen receptor,ER)亚型表达的人成骨样MG-63细胞为研究模型,采用RT-PCR及Western blotting技术,检测OPG/RANKL的mRNA和蛋白的表达水平;采用RNA干扰技术特异性的将ERα、ERβ基因沉默,从而检测葛根素是否通过ERα和ERβ介导发挥作用。【结果】葛根素可显著上调成骨细胞OPG mRNA和蛋白的表达水平,下调RANKL mRNA和蛋白的表达水平。ER阻断剂ICI 182,780可完全阻断葛根素诱导的OPG表达水平增高,部分阻断了葛根素对RANKL表达的下调作用。利用RNA干扰技术构建ERα/ERβ不同表达状态的细胞株,结果显示:与对照组MG-63+葛根素、对照组MG-63/scrambled shRNA+葛根素相比,葛根素对MG-63/ERαshRNA和MG-63/ERβshRNA细胞OPG、RANKL的mRNA和蛋白水平的影响无显著性差异。【结论】葛根素显著上调MG-63细胞中OPG的mRNA及蛋白表达水平,同时下调RANKL的mRNA及蛋白表达水平,该作用可经ERα和ERβ共同介导。

独活寄生汤联合艾灸疗法治疗RA的效果及对患者血清MMP-3、RANKL、OPG水平的影响

目的:分析用独活寄生汤联合艾灸疗法治疗类风湿关节炎(RA)的效果及对患者血清骨保护素(OPG)、核因子-κB受体激活剂配体(RANKL)、基质金属蛋白酶-3(MMMP-3)水平的影响。方法:选择2020年1月至12月绵阳市中心医院收治的62例RA患者作为试验对象。按照随机数表法将其分为对照组(n=31)和观察组(n=31)。用独活寄生汤对对照组患者进行治疗,用独活寄生汤联合艾灸疗法对观察组患者进行治疗,然后比较两组患者的疗效、临床症状评分及血清OPG、RANKL、MMMP-3的水平。结果:观察组患者治疗的总有效率高于对照组患者,差异有统计学意义(P<0.05)。治疗3个月后,观察组患者的关节肿胀评分、关节晨僵评分和关节疼痛评分均低于对照组患者,差异有统计学意义(P<0.05)。治疗3个月后,观察组患者血清OPG的水平高于对照组患者,其血清RANKL和MMMP-3的水平均低于对照组患者,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:用独活寄生汤联合艾灸疗法治疗RA的效果显著,能有效减轻患者的临床症状,改善其血清MMP-3、RANKL、OPG的水平。

三骨汤对骨转移癌OPG和RANKL表达的调节作用

目的:研究评价三骨汤对骨转移癌OPG和RANKL表达的调节作用。方法:雌性SD大鼠左后肢胫骨的骨髓腔内接种乳腺癌MRMT-1细胞以制成乳腺癌骨转移模型。给予三骨汤治疗,以唑来膦酸为阳性对照。对胫骨标本用影像学方法进行评分,抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)染色计数破骨细胞,免疫组化法检测OPG、RANKL表达并计算两者比值。结果:与模型组比较,中药组影像学评分改善趋势;TRAP(+)破骨细胞数量显著性减少(P<0.05),OPG表达极显著性增高(P<0.01),RANKL/OPG比值呈降低趋势。结论:三骨汤可有效抑制破骨细胞激活,减轻骨转移所致的溶骨性骨质破坏,其作用机制与促进OPG表达有关。

左归丸调节β2AR介导的RANKL/OPG信号通路改善去卵巢大鼠骨量和显微结构水平

目的:探讨左归丸治疗绝经后骨质疏松症的分子机制之一是通过对β2-肾上腺素能受体(β2AR)介导的核转录因子-κB受体激活因子配体(RANKL)/骨保护素(OPG)信号通路的调节。方法:通过去卵巢法建立骨质疏松模型,将40只雌性SPF级SD大鼠随机分为模型组、假手术组、雌二醇(50μg·kg-1·d-1)组、左归丸低、高剂量(2. 3,4. 6 g·kg-1)组。采用酶联免疫吸附实验检测血清骨转换标志物;显微CT对右侧股骨远端骨密度水平和骨小梁微结构进行测量和分析;实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)和蛋白免疫印迹法(Western blot)检测胫骨和下丘脑组织中β2AR,OPG,RANK mRNA和蛋白表达水平。结果:与模型组比较,左归丸可显著降低大鼠血清中Ⅰ型胶原交联羧基端肽(β-CTX)水平(P <0. 01),增加骨特异性碱性磷酸酶(BALP)水平(P <0. 01),减少卵巢摘除诱导引起的大鼠骨量丢失,改善股骨远端骨小梁显微结构水平。同时,左归丸高、低剂量组均能显著上调胫骨组织中OPG mRNA和蛋白表达(P <0. 01),下调下丘脑组织β2AR mRNA和蛋白表达水平(P <0. 01),同时也能显著下调胫骨组织中RANKL mRNA和蛋白表达水平(P <0. 01)。结论:左归丸改善围绝经期综合症,增加骨量和改善骨小梁显微结构水平的分子机制可能与对β2AR介导的RANKL/OPG信号通路的调节有关。