三种方法制备兔膝骨关节炎模型的结果分析

目的:寻找一种稳定、方便、快捷的膝骨关节炎(Knee Osteoarthritis,KOA)模型制备方法,用以研究KOA的病理机制及防治手段,并为后期科研提供相应理论依据。方法:将24只新西兰大白兔随机分为手术组、制动组、木瓜蛋白酶组、空白组,每组6只。对比模型组(手术组、制动组、木瓜蛋白酶组)家兔造模后与空白组Pelletier评分、Mankin’s评分以及血清及关节液中炎性因子[白细胞介素(Interleukin,IL)-1β、IL-6、肿瘤坏死因子(Tumor Necrosis Factor,TNF)-α]的含量水平。结果(:1)大体观察模型组实验兔均出现不同程度的关节僵硬、肿胀,股四头肌萎缩,解剖膝关节均可见股骨内外髁软骨颜色变灰白,软骨面光泽度降低,软骨面有不同程度粗糙、糜烂、溃疡形成,关节周缘骨刺形成;(2)模型组Pelletier评分、Mankin’s评分、血清及关节液中IL-1β、IL-6、TNF-α的含量均高于空白组(P<0.01),模型组与空白组的差异具有统计学意义(P<0.05);(3)关节腔内注射木瓜蛋白酶制备兔KOA模型更方便快捷,短期内效果更佳,木瓜蛋白酶组血清及关节液中IL-1β、IL-6、TNF-α含量高于手术组、制动组(P<0.05),木瓜蛋白酶组与手术组、制动组的差异具有统计学意义(P<0.05);(4)手术、关节制动制备较为复杂并存在较多局限性,如手术感染,重新固定等问题,但可以反映真实状况下KOA的发生发展情况。结论:不同造模方法各有优缺点,现阶段仍未有系统且全面的定论。因此,应根据不同造模方法的优缺点结合后续研究来选择合适的动物疾病模型。

胡椒根提取物对大鼠骨关节炎模型的治疗作用

目的对比研究胡椒根两种提取物对大鼠骨关节炎模型的治疗作用。方法建立关节内注射木瓜蛋白酶诱发骨关节炎模型,分别通过设立高、低剂量组、模型组及阳性对照组等多个组别,研究造模4周中两种提取物各个剂量组对大鼠体质量、膝关节直径、关节腔表面状态、及血清中肿瘤坏死因子α(TNF-α),白细胞介素1β(IL-1β)、白细胞介素6(IL-6)的影响。结果所有造模动物在实验2周时体质量增长较空白对照组有较大程度减轻(P<0.05)。除醇提物低剂量组外,膝关节直径变化量与模型组比较,差异均具有统计学意义(P<0.05)。在血清TNF-α、IL-1B、Ⅱ-6炎症因子测定中,挥发油高剂量组、醇提物高剂量组与空白对照组比较,差异不具有统计学意义(P>0.05),但醇提物高剂量组数值多显示出边缘显著现象(P接近0.05)。结论胡椒根两种提取物在本次试验中所用剂量对骨关节炎模型均有一定程度改善作用,但挥发油提取物高剂量组效果较好。

基于“腠理开阖”理论的黑膏药对寒凝血瘀证膝骨关节炎模型家兔血管反应性研究

目的:通过寒凝血瘀证膝骨关节炎模型家兔的血管反应性研究,评价黑膏药促“腠理开阖”的作用机制。方法:选用寒凉刺激与药物诱导结合技术制备寒凝血瘀证膝骨关节炎家兔模型,采用彩色多普勒超声技术并辅以血液流变学指标,密切观察家兔膝周动脉网(股动脉下段、膝上外侧动脉和膝下外侧动脉)血管效应,考察0~15 d三个厂家狗皮膏(厂家一组、厂家二组和厂家三组)与黑膏药基质(基质组)对膝周动脉网的管径、血流速度及血液流变学指标的影响。结果:15 d治疗周期后,厂家一组、厂家二组、厂家三组和基质组家兔股动脉下段、膝上外侧动脉和膝下外侧动脉血管管径均有增加,流速均有提高,全血黏度、红细胞聚集指数均呈现降低趋势,红细胞变形指数呈现升高趋势。结论:黑膏药基质与狗皮膏均表现出显著的诱发膝周动脉网血管效应的作用,提示在促进“腠理开阖”方面,黑膏药基质同样起到了关键作用。

独活寄生汤干预食蟹猴自发性膝骨关节炎模型炎症的作用

背景:Meta分析显示:独活寄生汤可改善膝骨关节炎患者的临床症状,缓解患者的疼痛,但具体的作用机制与途径还不十分清楚。目的:进一步验证独活寄生汤药物治疗食蟹猴自发性膝骨关节炎模型疗效。方法:自然条件下,从12只食蟹猴选取清洁级青年型(年龄3-5岁)6只食蟹猴为正常组,老年型(年龄≥20岁)食蟹猴建立自发性膝骨关节炎模型6只为模型组;再将老年型食蟹猴随机分为模型对照组和干预组,干预组采用独活寄生汤进行干预,对比两组间全血白细胞计数、C-反应蛋白、血沉,以及关节液性状和肿瘤坏死因子α的表达变化。结果与结论:(1)老年型食蟹猴自发性膝骨关节炎模型会出现典型与人类相似的骨关节炎相关指标的改变;(2)独活寄生汤干预可下调肿瘤坏死因子α的表达,降低全血白细胞水平、C-反应蛋白,干预前后差异有统计学意义;(3)结果说明,老年型食蟹猴自发性膝骨关节炎模型是一个能有效模拟人类自发性膝骨关节炎发生发展的动物模型,独活寄生汤干预可能通过抑制肿瘤坏死因子α的表达,降低关节软骨的炎症因子水平,从而缓解膝骨关节炎病程,产生治疗作用;全血白细胞水平、C-反应蛋白可作为疗效判断的重要参考指标。

食蟹猴自发性膝骨关节炎模型的中药干预实验

目的分析独活寄生汤干预对食蟹猴自发性膝骨关节炎(KOA)模型炎症调节的作用,为进一步药物治疗的疗效检验及安全性评估提供可靠保证。方法选取清洁级青年型和老年型食蟹猴各6只,对食蟹猴自发性KOA模型进行评价;将老年型食蟹猴随机分为干预组和空白对照组,采用独活寄生汤进行干预,对比两组全血白细胞、C反应蛋白、红细胞沉降率及关节液性状和肿瘤坏死因子(TNF)-α含量的表达变化。结果老年型食蟹猴自发性KOA模型会出现典型与人类相似的骨关节炎相关指标改变。独活寄生汤干预可下调TNF-α表达,降低全血白细胞、C反应蛋白水平,干预前后差异有统计学意义(P<0. 05)。结论老年型食蟹猴自发性KOA模型能有效模拟人类自发性KOA发生发展;独活寄生汤干预可能通过抑制TNF-α的表达,降低关节软骨的炎症因子水平,从而缓解KOA病程,产生治疗作用;全血白细胞、C反应蛋白可作为疗效判断的重要参考指标。

基于网络药理学和分子对接研究高山金莲花素对颞下颌关节骨关节炎细胞模型的作用机制

目的运用网络药理学与分子对接方法探讨高山金莲花素(alpinumisoflavone,AIF)对颞下颌关节骨关节炎(temporomandibular joint osteoarthritis,TMJOA)细胞模型的作用机制,为AIF治疗TMJOA提供研究基础。方法运用GeneCards、OMIM、DisGeNET和PharmGKB数据库获取TMJOA疾病靶点,PharmMapper和HERB获取AIF作用靶点,取化合物与疾病交集靶点上传至STRING数据库得到关键靶点后做GO和KEGG富集分析,分子对接评估相关信号通路中关键靶点。获得医院伦理委员会的审批,提取3周龄SD大鼠髁突软骨细胞。CCK8检测AIF对髁突软骨细胞的毒性。用10 ng/mL白细胞介素⁃1β(interleukin 1β,IL⁃1β)诱导髁突软骨细胞24 h构建TMJOA细胞模型。实验分为3组,其中,对照组:DMEM培养基培养髁突软骨细胞48 h;IL⁃1β组(TMJOA细胞模型):预使用DMEM培养基培养髁突软骨细胞24 h后,保留原培养基的情况下加入IL⁃1β使终浓度达10 ng/mL继续培养24 h;IL⁃1β+10μmol/L AIF组:预使用含10μmol/L AIF的DMEM培养基培养髁突软骨细胞24 h,保留原培养基情况下加入IL⁃1β使终浓度达10 ng/mL继续培养24 h,流式细胞术检测AIF对TM⁃JOA细胞模型中的髁突软骨细胞凋亡的影响。进一步,实验分为对照组、IL⁃1β组、IL⁃1β+10μmol/L AIF组和IL⁃1β+30μmol/L AIF组共4组,其中,IL⁃1β+30μmol/L AIF组:预使用含30μmol/L AIF的DMEM培养基培养24 h,保留原培养基情况下加入IL⁃1β使终浓度达10 ng/mL继续培养24 h;其余3组方法同前。以qPCR与Western blot分别检测AIF对TMJOA细胞模型中与细胞凋亡相关的B淋巴细胞瘤2(B⁃cell leukemia/lymphoma⁃2,Bcl2)、天冬氨酸特异的半胱氨酸蛋白酶3(cysteinyl aspartate specific protease 3,Caspase⁃3)及基质降解相关的解聚蛋白样金属蛋白酶4(a disintegrin and metalloproteinase with thrombospondin motifs 4,ADAMTS4)、基质金属蛋白酶3(matrix metalloproteinase 3,MMP3)和基质金属蛋白酶13(matrix metalloproteinase 13,MMP13)mRNA和蛋白的表达。结果PharmMapper与HERB数据库检索得到AIF化合物靶点300个,GeneCards、OMIM、DisGeNET和PharmGKB数据库检索得到TMJOA疾病靶点378个,将化合物与疾病靶点交集得33个潜在靶点,将其上传至STRING数据库得31个关键靶点,主要与细胞凋亡和细胞外基质降解相关。这一过程可能涉及丝裂原活化蛋白激酶(mitogen⁃activated protein kinase,MAPK)、雌激素及肿瘤坏死因子(tumor necrosis factor,TNF)等信号通路。分子对接结果表明AIF与MAPK和雌激素信号通路中的关键靶点细胞外信号调节激酶1/2(extracellular sig⁃nal⁃regulated kinase 1/2,ERK1/2)和雌激素受体基因1/2(estrogen receptor gene 1/2,ESR1/2)具有较好的结合活性。CCK8结果表明AIF对髁突软骨细胞无明显细胞毒性。与IL⁃1β组相比,IL⁃1β+10μmol/L AIF组中AIF可抑制髁突软骨细胞凋亡;与IL⁃1β组相比,IL⁃1β+10μmol/L AIF组和IL⁃1β+30μmol/L AIF组中AIF可上调Bcl2和下调Caspase⁃3 mRNA和蛋白表达,抑制ADAMTS4、MMP3和MMP13 mRNA和蛋白表达。结论AIF可通过上调Bcl2与下调Caspase⁃3 mRNA和蛋白表达抑制TMJOA细胞模型中髁突软骨细胞凋亡,同时抑制由IL⁃1β诱导的细胞外基质降解,延缓TMJOA进展。

地榆皂苷Ⅰ对大鼠膝骨关节炎的作用机制研究

目的研究地榆皂苷Ⅰ对大鼠膝骨关节炎的作用机制。方法选择SD雄性乳鼠8只,提取乳鼠软骨细胞,采用CCK-8实验检测细胞增殖率以确定最佳药物浓度。将软骨细胞随机分为对照组、炎症组和治疗组,对照组在完全培养基中进行培养,炎症组在含有10μg/mL白细胞介素-1β(IL-1β)的培养基中培养,治疗组在含有10μg/mL IL-1β和最佳浓度地榆皂苷Ⅰ的培养基中培养。采用Calcein-AM/PI染色观察各组软骨细胞生长情况。采用实时荧光定量聚合酶链式反应(RT-qPCR)检测各组软骨细胞中白细胞介素-6(IL-6)、基质金属蛋白酶13(MMP13)mRNA相对表达量。取8周龄左右的SD雄性大鼠24只随机分为对照组、炎症组和治疗组,每组8只,对炎症组和治疗组建立骨关节炎模型,建模完成4周后,炎症组和对照组的关节腔内注射等体积生理盐水,治疗组的关节腔内注射100μL最佳浓度的地榆皂苷Ⅰ溶液,1次/周,连续给药4周。采用HE染色和番红O-固绿染色观察各组膝关节组织结构。采用免疫组化染色观察各组膝关节组织中IL-6、MMP13蛋白表达情况。结果CCK-8实验结果显示,各实验浓度均未表现明显细胞毒性,当地榆皂苷Ⅰ的浓度为20 mg/L时,软骨细胞增殖率最高。Calcein-AM/PI染色结果显示,炎症组和治疗组细胞增殖率低于对照组,治疗组细胞增殖率高于炎症组,差异有统计学意义(P<0.05)。RT-qPCR检测结果显示,炎症组和治疗组IL-6、MMP13 mRNA相对表达量高于对照组,治疗组IL-6、MMP13 mRNA相对表达量低于炎症组,差异有统计学意义(P<0.05)。HE染色和番红O-固绿染色结果显示,对照组的膝关节组织结构比炎症组和治疗组完整,与炎症组相比,治疗组膝关节组织损伤有所减轻。免疫组化染色结果显示,炎症组IL-6、MMP13蛋白表达水平最高,治疗组IL-6、MMP13蛋白表达水平高于对照组。结论地榆皂苷Ⅰ可通过维持软骨细胞活力、降低炎症因子的释放以及减少软骨细胞外基质(ECM)的降解发挥抗炎作用,对膝骨关节炎有一定的药用潜力。

实验兔膝骨关节炎模型的建立及鉴定

目的探讨过伸位制动法建立兔膝骨关节炎模型及鉴定。方法用管型石膏过伸位制动兔膝骨关节,分别于造模4、6、8周后将兔处死对关节腔软骨及滑膜进行大体观察、骨关节炎分期、HE染色及ELISA检查血清及关节液中白介素(IL)-1、一氧化氮(NO)的表达。结果大体观察显示骨关节炎模型组在4、6、8周后出现不同程度关节囊僵硬、关节腔变窄,软骨缺损,滑膜硬化、炎症改变,骨刺形成;根据骨关节炎改良Mankin's评分标准,骨关节炎造模4周后为早期骨关节炎,6周为中期骨关节炎,8周为晚期骨关节炎;HE染色见软骨结构改变、缺损,细胞分散、减少;骨关节炎模型组Pelletier评分、改良Mankin's评分4、6、8周均高于对照组(P均<0.01),且骨关节炎模型组4、6、8周比较差异均有统计学意义(P均<0.05)。骨关节炎模型组4、6、8周血清、关节液中IL-1、NO水平明显高于对照组(P均<0.01),且骨关节炎模型组4、6、8周比较差异均有统计学意义(P均<0.05)。结论过伸位制动法建立兔膝骨关节炎模型,能准确复制不同阶段骨关节炎模型,反映其特征性表现,为相关研究及临床干预提供参考依据。

马骨关节炎模型关节液中相关生物指标变化的研究

为了研究马骨关节炎发病机理,试验将13匹蒙古马分成两组,试验组8匹(用两性霉素B诱导并建立马骨关节炎模型),对照组5匹,每周采集1次关节液,直至第9周,用ELISA方法检测关节液中前列腺素E2(PGE_2)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、基质金属蛋白酶-2(MMP-2)、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)的含量。结果表明:试验组关节液中MMP-2、MMP-9、TNF-α和PGE_2的含量有增加的趋势,其中MMP-9、PGE_2在发病初期就显著上升。说明在骨关节炎过程中,关节液中MMP-2、MMP-9、PGE_2、TNF-α都呈上升趋势,这些促炎因子的增加会促进蛋白酶的分泌和软骨的降解。

戊巴比妥钠腹腔注射复合利多卡因局部浸润麻醉在大鼠膝关节骨关节炎模型制作中的应用

目的观察戊巴比妥钠腹腔注射复合利多卡因局部浸润麻醉在制作大鼠膝关节骨关节炎(OA)模型的效果。方法将20只雄性SD大鼠随机均分为两组,采用前交叉韧带切断术制作大鼠膝关节OA模型。联合麻醉组采用戊巴比妥腹腔注射及局部利多卡因浸润;腹腔麻醉组采用单纯腹腔注射戊巴比妥钠方式麻醉。观察两组术中戊巴比妥用量及手术时间。结果联合麻醉组戊巴比妥用量(29.3±5.9)mg/kg,明显小于腹腔麻醉组的(37.0±8.9)mg/kg(P<0.05);手术时间(44.9±7.4)min,也明显短于联合麻醉组的(52.1±7.4)min(P<0.05)。结论联合麻醉可减少麻醉药物用量,改善麻醉效果,有利于大鼠膝关节OA模型的顺利制作。

关节软骨与软骨下骨改变在不同骨关节炎动物模型中的特点

目的 探讨不同骨关节炎(osteoarthritis,OA)动物模型中软骨下骨和关节软骨的病理改变特征。方法 采用三种SD大鼠骨关节炎模型,将24只6月龄雌性大鼠随机分为4组:假手术对照组(Sham,n=6),前交叉韧带切除手术组(ACLT,n=6),木瓜蛋白酶关节腔注射组(Papain,n=6),以及卵巢切除术组(OVX,n=6)。造模后8周取膝关节,胫骨平台行Micro-CT扫描分析,关节软骨行甲苯胺蓝染色、Mankin评分,比较软骨下骨和关节软骨改变情况。结果 造模操作后8周,不同OA模型的软骨破坏程度有所不同。ACLT和Papain组软骨破坏比较严重,OVX组软骨变化较轻。所有OA模型中的软骨下松质骨均发生改变,OVX组相对于Sham对照组,软骨下骨微结构显著疏松,而ACLT组与Papain组相对于Sham对照组,软骨下骨微结构没有显著改变,但相对于OVX组,有显著性差异。三种OA模型的软骨下骨板厚度都较Sham组减少。结论 三种动物模型软骨下骨和关节软骨都发生明显病理改变,并且改变有所不同。不同OA模型代表不同病理,预示着软骨下骨所发挥的作用有所不同,这为进一步研究不同类型OA发生发展的机制,以及将软骨下骨作为OA治疗的可能靶点提供了更多的依据。

Ⅵ型胶原在正常软骨和骨关节炎软骨中的空间分布

目的探究骨关节炎软骨中Ⅵ型胶原空间分布的变化规律。方法应用Hartley豚鼠自发性骨关节炎模型(模型组)和健康豚鼠(对照组),取膝关节软骨做冷冻切片,进行Ⅵ型胶原免疫荧光染色,利用Delta-Vision Elite成像系统和Imaris软件进行断层扫描、3D重建和定量分析,比较两组软骨细胞体积、Ⅵ型胶原厚度与体积的差异。结果正常软骨中,薄层Ⅵ型胶原层均匀包裹软骨细胞,各层细胞外Ⅵ型胶原层厚度无统计学差异(P>0.05),体积随细胞深度增加而增加(P<0.01);骨关节炎软骨中,Ⅵ型胶原体积减小(P<0.01)且空间分布不规则,移行层呈蜂窝状或出现空洞,放射层中呈点、片状弥散分布,且在细胞周基质外出现散在的Ⅵ型胶原。结论在骨关节炎软骨中,Ⅵ型胶原体积减少,不完全包裹软骨细胞,出现蜂窝、空洞和弥散分布的现象,这种改变可能是软骨细胞变性的诱因之一。

马钱子总碱对兔膝骨关节炎模型软骨损伤修复作用及机制

目的探讨马钱子总碱对兔膝骨Hulth-Telhag关节炎模型的作用及机制。方法新西兰兔随机分为正常对照组,模型组,假手术组,马钱子总碱高、中、低剂量组,玻璃酸钠组,每组8只。除正常对照组外,其余各组均以Hulth-Telhag方法造模。造模8周后,马钱子总碱高、中、低剂量组分别给予兔每个膝关节腔注射0.3、0.2、0.1mL马钱子总碱注射液,玻璃酸钠组给予兔每个膝关节腔注射0.2mL玻璃酸钠,每周2次,连续用药5周。正常对照组、模型组及假手术组常规饲养,无其他特殊处理。停药1周后光镜观察关节软骨病理改变和Mankin′s评分,血液流变仪检测全血黏度(低切、中切、高切)及血浆黏度,ELISA检测关节液NO、SOD、过氧化脂质(LPO)及尿液吡啶酚(PYD)含量。结果与正常对照组比较,模型组Mankin′s评分、全血黏度、血浆黏度、NO、LPO及PYD升高(P<0.05),SOD降低(P<0.05)。与模型组比较,马钱子总碱高、中剂量组及玻璃酸钠组Mankin′s评分降低(P<0.05);各给药组全血黏度、血浆黏度、NO、LPO及PYD降低(P<0.05),SOD升高(P<0.05)。马钱子总碱中剂量组较低剂量组中、高切变率全血黏度、SOD升高(P<0.05),NO、LPO及PYD降低(P<0.05);马钱子总碱高剂量组较中剂量组全血黏度、血浆黏度升高(P<0.05),NO、LPO及PYD降低(P<0.05),SOD升高(P<0.05)。与玻璃酸钠组比较,马钱子总碱低剂量组Mankin′s评分、NO、LPO及PYD升高(P<0.05),SOD降低(P<0.05);马钱子总碱中剂量组Mankin′s评分、SOD降低(P<0.05),NO、LPO及PYD升高(P<0.05);马钱子总碱高剂量组Mankin′s评分、全血黏度及血浆黏度升高(P<0.05)。结论马钱子总碱对骨关节炎的软骨损伤具有修复作用,其机制主要与通过SOD途径抑制NO介导的软骨细胞凋亡有关,还与改善软骨代谢有关。

骨吸收抑制剂降钙素对骨关节炎大鼠软骨组织形态及蛋白多糖的影响

背景:近年来有报道指出降钙素在临床上治疗骨关节炎有较好的临床疗效,但关于其对骨关节炎的作用机制却少有报道。目的:观察降钙素对实验性骨关节炎模型大鼠软骨组织形态及蛋白多糖的影响。方法:将30只SD大鼠随机均分为3组,模型组与给药组均切断右肢前交叉韧带制作骨关节炎模型,假手术组仅打开关节腔,不做韧带切断,给药组于造模后成功后第2天开始皮下注射降钙素15 IU/(kg·d),模型组与假手术组均皮下注射等量生理盐水,连续给药6周。造模后10周,观察各组大鼠胫骨关节面,X射线检查股骨远端和内外侧踝软骨下骨骨密度,苏木精-伊红染色观察骨组织形态,甲胺苯蓝染色观察软骨组织中蛋白多糖含量。结果与结论:假手术组大鼠胫骨关节面光滑,有光泽;模型组大鼠胫骨关节面无光泽,关节软骨暗红色,有较大溃疡面形成;给药组大鼠软骨面无光泽,局部溃疡,表面粗糙不平。与假手术组比较,模型组内外侧踝软骨下骨骨密度、骨体积、骨小梁数目升高(P<0.05),骨小梁分离度及蛋白多糖含量降低(P<0.05);给药组内外侧踝软骨下骨骨密度、骨体积、骨小梁数目低于模型组(P<0.05),骨小梁分离度及蛋白多糖含量高于模型组(P<0.05)。表明降钙素对骨关节炎大鼠软骨有较好的保护作用,并能促进骨组织分泌蛋白多糖。

大鼠滑膜组织中S100A12、IL-1β、Galectin-3与早期膝骨关节炎相关性研究

目的检测早期膝骨关节炎大鼠滑膜组织中的S100A12、IL-1β、Galectin-3水平表达,探讨大鼠滑膜组织中三种炎性细胞因子与早期膝骨关节炎相关性的研究。方法 28只成年雄性Wistar大鼠,随机数字表法分成对照组、实验组。实验组大鼠采用左膝关节腔内注射木瓜蛋白酶诱导早期膝骨关节炎;对照组大鼠相同方法及部位注射等量生理盐水。分别于造模成功后第1、28天提取大鼠滑膜组织,采用免疫组化法和酶联免疫吸附法检测滑膜组织中的S100A12、IL-1β、Galectin-3水平表达。结果①实验组造模成功后第1天检测S100A12、IL-1β、Galectin-3水平表达均明显高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);②实验组造模成功后第28天检测S100A12、IL-1β水平表达均高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05),但Galectin-3水平表达仍较明显,差异有统计学意义(P<0.05)。结论滑膜组织中S100A12、IL-1β、Galectin-3三种炎性细胞因子均与早期膝骨关节炎密切相关,为临床早期诊断膝骨关节炎提供理论依据,同时明确Galectin-3在早期膝骨关节炎病情进展中的持续表达。

去势大鼠劳损性膝骨关节炎新模型的建立

目的:通过模拟女性膝骨关节炎的主要病因,建立新动物模型,为进一步研究该病的机制奠定基础。方法:24只8月龄雌性SD大鼠随机分为空白对照组、假手术对照组和去卵巢组3组:去卵巢组大鼠行双侧卵巢切除术,假手术对照组切除卵巢周围脂肪组织,3组大鼠术后开展动物跑台运动训练。7周后处死,取膝关节及血清行组织学及免疫学分析。结果:去卵巢组大鼠膝关节呈现中度软骨损伤,与空白对照组比较,去卵巢组血清中iNOS浓度显著升高,(P<0.05)、SOD浓度显著下降(P<0.05);与假手术对照组比较,iNOS浓度升高程度更明显。结论:大鼠双侧卵巢切除后行疲劳运动创建的去势大鼠劳损性膝骨关节炎新模型稳定性高,符合临床更年期女性的骨关节炎病理,值得推广。

一种新的半月板切断导致小鼠骨关节炎方法的建立

目的建立一种创面小、操作简单且重复性高的半月板切断术诱发小鼠骨关节炎的手术方法。方法小鼠膝关节内侧皮肤剪开暴露术野,剪断内侧副韧带形成一个小切口,切断半月板上下缘的关节囊暴露内侧的半月板,从切口处进针,将内侧半月板用改造过的胰岛素注射笔针头钩出并剪断,缝合肌肉及皮肤。结果番红O染色结果表明,与对照侧关节相比,术后1周,全部手术侧关节表面开始发生磨损,关节软骨胞外基质蛋白聚糖减少;随着时间延长,手术侧关节表面磨损范围逐步扩大,关节软骨胞外基质蛋白聚糖丢失程度明显加剧,直至软骨下骨暴露于关节腔中。手术侧Mankin分值显著高于对照侧,且随术后时间延长手术侧Mankin分值逐步稳定递增。结论建立了一种新的半月板切断术,可简便、可靠地诱导小鼠发生骨关节炎。

SD大鼠膝前交叉韧带切断后骨关节的变化

[目的]探索骨关节炎(osteoarthritis,OA)模型的病理改变。[方法]切断SD大鼠右侧膝关节前交叉韧带(ACLT),自然喂养,于术后3、7、14、28、56 d处死大鼠,取左右全膝,观察全膝形态改变、膝关节X线影像学改变、关节滑膜ED1和软骨结构改变。[结果]术后3、7 d滑膜单克隆抗体ED1阳性渗出性细胞明显增多;第7 d出现早期软骨损害:软骨基质减少,表层带软骨细胞死亡数量减少及软骨细胞肿胀,表层带纤维化等改变;28d后肉眼观察可见全膝形态明显改变,膝关节骨密度增高及滑膜纤维化增生等后期病理变化。[结论]SD大鼠前交叉韧带切断能反映骨关节炎(OA)的病理变化,是较理想的骨关节炎(OA)动物模型。