TiO_2纳米管对MC3T3-E1前成骨细胞骨功能基因表达变化的影响

目的:研究阳极氧化TiO2纳米管对MC3T3-E1前成骨细胞骨功能基因表达变化的影响。方法:采用阳极氧化法在钛基底表面制备TiO2纳米管,扫描电镜观察其表面微结构,肌动蛋白染色研究细胞在材料表面的粘附生长情况,Real-time PCR技术系统分析材料对细胞骨功能基因表达的影响规律。结果:MC3T3-E1前成骨细胞在TiO2纳米管表面比光滑钛有更大的伸展面积,培养1周后,TiO2纳米管提高了细胞骨功能基因碱性磷酸酶、骨桥蛋白和骨钙蛋白的表达水平(P<0.05),培养2周后,骨功能基因表达水平与对照组之间没统计学差异。结论:TiO2纳米管可以促进MC3T3-E1前成骨细胞肌动蛋白组装,同时可以提高细胞骨功能基因的早期表达水平。

楮实子含药血清对成骨细胞功能的影响

目的 研究楮实子对体外培养的成骨细胞增殖、分化及其功能的影响,为楮实子在骨代谢疾病中的应用提供实验依据。方法 采用酶消化法培养大鼠成骨细胞,MTT比色法检测不同浓度(5%、10%和20%)楮实子含药血清对细胞增殖的影响,并据此选择最佳浓度进行后续实验;以AKP试剂盒检测成骨细胞AKP活性、以茜素红染色检测成骨细胞形成矿化结节数量;Western blot法检测成骨细胞功能指标基因如成骨细胞特异性转录因子(osterix,OSX)、I型胶原(collagen type I, Coll-I)、碱性磷酸酶(alkaline phosphatase, ALP)、骨桥蛋白(osteopontin, OPN)、骨保护素(osteoprotegerin, OPG)和骨钙素(osteocalcin, OCN)等蛋白的表达水平。结果 楮实子含药血清可显著促进成骨细胞增殖(P<0.01)、提高AKP分泌水平(P<0.01)、促进矿化结节形成(P <0.01),并显著上调OSX、Coll-I、ALP、OPN和OPG等成骨功能指标相关基因的蛋白表达(P<0.05)。结论 楮实子含药血清能提高成骨细胞功能,具有较好的促成骨活性。

纳米天然珍珠质/Ⅰ型胶原复合支架组成结构及成骨活性的研究

目的:检测纳米天然珍珠质/Ⅰ型胶原复合支架的组成结构及成骨活性。方法:应用大体观察、扫描电镜观察、X线衍射分析、孔隙率测定的方法对纳米珍珠质/Ⅰ型胶原复合支架进行组成结构分析;将MC3T3-E1前成骨细胞接种在复合支架上进行培养,观察细胞在支架上的生长情况,MTS测定细胞增殖率,Western-Blotting,RT-PCR检测成骨分化前期碱性磷酸酶(ALP)及成骨分化晚期胶原蛋白(COL-1)的表达.将复合支架植入兔颅骨缺损模型,分别在2、4、8、12周常规组织切片观察新骨生成。结果:纳米珍珠质/Ⅰ型胶原支架呈多孔状结构,具有91.6%的孔隙率,平均200um左右的孔径,MC3T3-E1细胞在复合支架表面生长良好,细胞增殖率,ALP,COL-1表达水平性明显提高。纳米珍珠质/I型胶原复合支架在4周左右出现明显新骨生成,8周新生骨完全修复骨缺损。讨论:纳米珍珠质/Ⅰ型胶原复合支架在本实验的检测中具有适宜的组成和结构,在体内外实验中均表现出很好的成骨活性。结论:纳米珍珠质/Ⅰ型胶原复合支架是新型的高成骨活性支架。