梅花鹿茸快速生长及骨化期相关差异表达蛋白分析

采用同位素标记相对定量(iTRAQ)技术、超高效液相色谱-质谱联用技术和生物信息学分析方法对东北梅花鹿快速生长期(60 d)与骨化期鹿茸(90 d)进行比较蛋白质组学研究,共鉴定出127种差异蛋白。与骨化期鹿茸比较,快速生长期鹿茸中显著上调的差异蛋白80种,显著下调差异蛋白47种,这些差异表达蛋白主要分布在细胞外基质、核小体、珠蛋白-血红蛋白复合物、肌动蛋白丝、内质网-高尔基中隔室、内质网官腔及核内膜等部位。快速生长期鹿茸显著上调的差异蛋白主要是参与血氧运输、神经生长和再生、软骨和骨组织发育及ATP合成的功能蛋白,而显著下调的差异蛋白主要为参与软骨内骨化过程的功能蛋白,这些蛋白在鹿茸不同生长时期表达量的变化与鹿茸的快速生长和骨化进程密切相关。本研究为系统揭示鹿茸快速生长及骨化的分子机制提供了基础数据,同时对研究鹿茸的药效物质基础及临床应用具有重要的指导意义。

骨化期梅花鹿鹿茸转录组测序及生物信息学分析

应用转录组测序技术对骨化期梅花鹿鹿茸进行测序及生物信息学分析,对鹿茸骨化生长基因结构以及分子机理进行探讨。采用改良的Trizol法提取骨化期鹿茸总RNA,采用Illumina/Solexa高通量转录组测序技术进行测序,应用Soapdenovo软件进行序列的从头到尾组装获得Unigenes序列数据,将Unigenes序列与蛋白数据库Nr、Swiss-Prot和COG进行BLASTX比对、GO功能注释。在功能分类分析基础上,将数据库中的Unigenes序列按照表达量(RPKM值)从高到低进行排序,筛选高表达的软骨内骨化基因。结果表明,应用Soapdenovo软件进行序列组装拼接,最终获得62 533个Unigenes,平均长度为675 nt。有32 431个(51.86%)Unigenes比对到Nr数据库,12 376个Unigenes归类到52个GO功能类别中,9 979个Unigenes归类到25个COG功能类别中。筛选出与鹿茸软骨内骨化密切相关的高表达基因30个。本文应用Illumina/Solexa高通量转录组测序技术,成功建立了梅花鹿鹿茸骨化时期转录组数据库。

α-骨化醇对CKD4-5期未透析患者蛋白尿的影响

为了观察α-骨化醇对CKD4-5期未透析患者蛋白尿的影响,对2010年5月～2012年5月在我院就诊的87例CKD4-5期未透析、未肾移植患者进行研究,将其服用α-骨化醇组(S-Alf)和未服用α-骨化醇组(N-Alf),回顾分析α-骨化醇对24小时尿蛋白的影响。结果显示:与治疗前相比,接受α-骨化醇治疗6月后,患者24小时尿蛋白定量减少了13%(P<0.05),全段甲状旁腺激素(iPTH)下降了11%(P<0.05)。因此,α-骨化醇能够减少CKD4-5期未透析患者蛋白尿,发挥保护肾脏的作用。