牙龈卟啉菌脂多糖诱生的IL-1、TNF和PGE的骨吸收活性

牙龈卟啉菌脂多糖（Ｐｇ－ＬＰＳ）作用于人外周血单个核细胞或人牙龈组织细胞后，能诱导此等细胞分别产生ＩＬ－１、ＴＮＦ和ＰＧＥ。经原子吸收光谱分析后证实，所诱生的ＩＬ－１、ＴＮＦ和ＰＧＥ均具有使大鼠头盖骨脱钙的作用，消炎痛未能阻断该骨吸收活性。ＰＧＥ的骨吸收活性最强，ＩＬ－１和ＴＮＦ的骨吸收活性相似。Ｐｇ－ＬＰＳ也能直接作用于大鼠头盖骨，使钙离子释放量明显增加，但该活性能被消炎痛所阻断。研究结果表明，Ｐｇ－ＬＰＳ可直接或间接地通过ＩＬ－１、ＴＮＦ和ＰＧＥ等发挥强大的骨吸收作用。

La^3＋对破骨细胞样细胞的形成和骨吸收活性的影响

通过抗酒石酸酸性磷酸酯酶TRAP阳性多核细胞计数和用显微摄影结合计算机图像分析测定骨吸收造成的陷窝数目及表面积，评价了La^3+对1，25-二羟基维生素D3诱导兔骨髓细胞分人形成破骨细胞样细胞及其骨吸收活性的影响，用倒置相差显微镜观察了破骨细胞样细胞及其骨吸收陷窝的形成和形态学特性；结果表明，与对照组比较，浓度为1．00×10^-8mol·L^-1的La^3+对破骨细胞样细胞的形成有明显的促进作用(P<0．01)，然而高浓度的La^3+(1．00×10^-5，1．00×10^-6和1．00×10^-7mol·L^-1)对破骨细胞样细胞的形成没有影响(P>0．05)；浓度为1．00×10^-8mol·L^-1的La^3+也能增加骨吸收陷窝数目及表面积(P<0．01)，然而高浓度的La^3+(1．00×10^-5，1．00×10^-6和1．00×10^-7mol·L^-1)能剂量依赖性的抑制破骨细胞样细胞的骨吸收活性(P<0．01)，所得结果提示La^3+对破骨细胞样细胞的形成和骨吸收活性是促进还是抑制作用依赖其浓度。

8-异戊烯基柑橘素抑制骨髓细胞向破骨细胞分化及骨吸收活性

研究8-异戊烯基柑橘素(8-prenylnaringenin,8-PNG)对骨髓细胞向破骨细胞分化及骨吸收活性的影响。从出生24 h内的青紫兰兔四肢骨髓中分离培养破骨细胞,加入8-PNG(1×10 7、1×10 6和1×10 5mol.L 1),以1×10 7mol.L 117β-雌二醇(17β-estradiol,E2)作为阳性对照。培养5天后进行TRAP染色和TRAP活性检测,7天后进行甲苯胺蓝染色和骨吸收陷窝数量与面积的分析。分别于加药后2、4、8、12、24、36及48 h进行AnnexinV染色,观察破骨细胞凋亡情况;于12、24和36 h提取总RNA,用real-time RT-PCR法检测TRAP(tartrate-resistant acid phosphatase)和CTSK(cathepsin K)的基因表达水平。结果显示,8-PNG(1×10 6和1×10 5mol.L 1)组的TRAP染色阳性细胞即破骨细胞数量明显低于空白对照组(P<0.01),但只有8-PNG(1×10 5mol.L 1)组显著低于E2组(P<0.05);TRAP活性的变化呈相同趋势;骨陷窝数和面积的计量结果亦呈相似变化趋势;E2组使破骨细胞的凋亡高峰大大提前,且凋亡数量最多,其次为8-PNG(1×10 5mol.L 1)组,8-PNG(1×10 7mol.L 1)组与空白对照组比较无差异。8-PNG(1×10 7、1×10 6和1×10 5mol.L 1)可显著抑制TRAP和CTSK的基因表达,且呈剂量依赖性。结果表明,8-PNG能抑制骨髓细胞向破骨细胞分化,并能抑制破骨细胞的骨吸收活性,其机制与诱导破骨细胞凋亡和抑制骨吸收关键酶的基因表达与活性有关。

牙龈卟啉菌表面相关物质的提取、纯化及骨吸收和免疫特性研究

目的 :通过对牙龈卟啉菌Pg表面相关物质 (SAM)的提取、纯化 ,研究其潜在的骨吸收活性 ,以揭示pg的SAM在牙周病过程中的致病作用。方法 :1)细菌培养。 2 )SAM粗品的制备。Sephacryl-S2 0 0凝胶过滤、冻干、纯化。3)DEAE -Sephacel阴离子交换层析。 4 )SAM介导的小鼠颅骨吸收试验。结果 :1)细菌培养得到冻干的细菌 4 .1g。2 )分离SAM得到粗品 0 .16g。Sephacryl -S2 0 0凝胶过滤纯化SAM粗品 ,冻干后得到较纯的SAM约为 0 .0 2 2 1g。DEAE -Sephacel阴离子交换层析进一步纯化SAM获得SAM纯品 3mg。 3)纯化的SAM骨吸收活性鉴定。骨吸收作用可通过体外小鼠颅骨培养基中Ca2 + 浓度的增加而间接证实。SAM的骨吸收活性随着浓度的增加而增加 ,与对照组相比 ,P <0 .0 5。SAM具有免疫原性。结论 :SAM在骨吸收方面具有极大的潜能。

氟对大鼠破骨细胞基质金属蛋白酶-9的影响

目的 观察氟对大鼠破骨细胞分泌的基质金属蛋白酶 - 9(MMP- 9)的影响。方法 采用 westernblot技术观察染氟大鼠股骨干骺端 MMP- 9的表达 ;应用免疫组织化学方法观察氟对体外培养的破骨细胞MMP- 9的表达的影响。结果 染氟大鼠股骨干骺端 MMP- 9的蛋白表达增高 ;氟可使体外培养的破骨细胞MMP- 9的蛋白表达增高。结论 氟通过提高破骨细胞的 MMP- 9的表达而致破骨性骨吸收活性增强。

氟化物对成骨细胞OPGL mRNA和M-CSF mRNA表达的影响

目的 探讨氟对成骨细胞的骨保护蛋白配体 (OPGL)mRNA和巨噬细胞集落刺激因子 (M CSF)mR NA表达的影响。方法 应用酶消化法分离小鼠乳鼠成骨细胞 ,取第 3代成骨细胞 ,加入不同浓度的氟 6h ,提取细胞总RNA ,通过逆转录 聚合酶链式反应 (RT PCR)方法 ,观察成骨细胞分泌的OPGL和M CSF表达的变化。结果 在氟的作用下 ,成骨细胞的OPGLmRNA和M CSFmRNA的表达呈上升趋势 ,但未达到统计学差异水平。结论 氟有可能通过上调OPGL和M CSF的表达 。

护骨素的研究进展

护骨素是近年发现的肿瘤坏死因子家族的新成员具有犯制破骨细胞分化及骨吸收活性的一种分泌型糖蛋白。护骨素与其护骨素配基之间竞争性结合机制是调控破骨细胞分化、增殖、凋亡及发挥重作用过程中最重要的信号通路,是雌激素调节破骨细胞生成和抗骨吸收的作用途径之一。对其研究将促进因破骨细胞活性增强导致骨吸收、骨破坏为特点的疾病的病因、预防和治疗等研究的深入。

骨保护素对鸭胚破骨细胞分化与活化的影响

为研究骨保护素(Osteoprogerin,OPG)对体外培养鸭胚破骨细胞(Osteoclast,OC)分化与活化的影响,收集23日胚龄鸭胚骨髓细胞,体外培养过程中分组加入0 ng/mL(A组)、30 ng/mL(B组)、100 ng/mL(C组)OPG进行处理。通过抗酒石酸酸性磷酸酶染色(Tartrate-resistant acid phosphatase,TRAP),骨吸收陷窝分析技术,检测TRAP阳性细胞数量及OC的骨吸收活性。结果显示,3个试验组TRAP阳性细胞数、OC的骨吸收活性均在OPG处理7 d后达到最高水平。与A组相比,OPG处理组OC数目及其骨吸收活性均显著减弱(P<0.05),每个时间段骨吸收陷窝净增长面积与OC数目变化趋势一致。表明OPG能够抑制OC细胞前体分化,促进成熟OC发生凋亡,抑制成熟OC的骨吸收活性。

针刺治疗绝经后骨质疏松症的机制研究进展

绝经后骨质疏松症是由于绝经期女性雌激素迅速下降,破骨细胞的骨吸收活性大大增加,而成骨细胞活性却未相应增加,导致骨吸收超过骨形成[1]。我国骨质疏松症患者已超过7 000万,50岁以上人群患病率女性为20.7%,男性为14.4%[2]。绝经后女性骨质疏松症的发病率是未绝经女性的2~3倍[3]。临床上,绝经后骨质疏松症不仅会引起全身性疼痛、驼背甚至脆性骨折,同时可能伴失眠、潮热或盗汗等症状。在绝经后骨质疏松症患病率逐年增加的背景下,出于对药物安全性及不良反应的考虑,药物疗法有一定的限制性[4]。临床常用药阿仑磷酸钠、雷洛昔芬、特立帕肽及雷尼酸锶等[5],可能会增加胃肠道的不适,引起头晕、恶心甚至抑郁。

第三代双磷酸酯YM529可能是非小细胞肺癌的另一个治疗选择

YM529是一种新发现的含氮双磷酸酯，属于第三代双磷酸酯（BP），其抗骨吸收活性比pamidronate高100倍（第二代BP）。因此YM529被用于治疗骨质疏松和高钙血症。近来的研究表明，YM529等第三代BP在体内和／或体外存在着对多种肿瘤的拮抗作用。KoshimuneR等观察了YM529对非小细胞肺癌的作用，并发表于2007年1月的BMC Cancer上。