绵羊骨形态发生蛋白受体-1B基因研究进展

绵羊繁殖性能在绵羊产业中有着重要意义,除通过一些技术手段(如同期发情、人工授精、超数排卵等)之外,在目前已知的关于能够提高绵羊繁殖力的16个基因共20个突变体当中,以骨形态发生蛋白受体-1B(bone morphogenetic protein receptor type-1B,BMPR-1B)基因对绵羊繁殖力的影响最大。BMPR-1B基因是世界上第一个被发现的多羔主效基因,其编码区的A746G突变导致蛋白质序列中第249位的谷氨酰胺被置换为精氨酸(Q249R),最终能够引起绵羊排卵数和产羔数增加。作者介绍了绵羊多羔主效基因BMPR-1B及其突变体FecB(A746G)的发现与结构,简述了该基因分子方面的作用机理,对BMP/Smad信号通路的调控以及与绵羊繁殖之间的联系,并简单分析了FecB突变后对绵羊卵巢、卵泡等组织细胞功能,激素调节和相关基因表达的影响。进一步加深对BMPR-1B基因的了解,为研究人员探明该基因诱使绵羊等动物提高产羔数的调控机制,相关配体、调控因子和上下游信号蛋白的影响以及加快哺乳动物高效育种繁殖、扩大种群规模和多胎品系的建立,增加养殖人员的经济收入等提供一些参考和帮助。

血清BMP-9、PGC-1α、BSAP水平与创伤性骨折延迟愈合的关系

目的 探讨血清骨形态发生蛋白-9(BMP-9)、过氧化物酶体增殖物激活受体γ共激活因子-1α(PGC-1α)、骨特异性碱性磷酸酶(BSAP)水平与创伤性骨折延迟愈合的关系。方法 选取创伤性骨折术后延迟愈合患者71例为延迟愈合组,按1∶1病例对照形式选取创伤性骨折术后正常愈合患者71例为正常愈合组。采用酶联免疫吸附法检测血清BMP-9、PGC-1α、BSAP。采用多因素Logistic回归分析影响创伤性骨折愈合的因素,采用受试者工作特征(ROC)曲线分析血清BMP-9、PGC-1α、BSAP水平对创伤性骨折延迟愈合的预测价值。结果 与正常愈合组比较,延迟愈合组血清BMP-9、PGC-1α、BSAP水平降低(P均<0.05)。多因素Logistic回归分析显示,年龄增加(OR=1.097,95%CI:1.020~1.180)、糖尿病(OR=2.121,95%CI:1.078~4.173)、骨质疏松症(OR=3.933,95%CI:1.242~12.451)为影响创伤性骨折愈合的独立危险因素,BMP-9(OR=0.950,95%CI:0.919~0.981)、PGC-1α(OR=0.969,95%CI:0.954~0.983)、BSAP(OR=0.837,95%CI:0.750~0.935)升高为独立保护因素(P均<0.05)。ROC曲线分析显示,血清BMP-9、PGC-1α、BSAP水平联合预测创伤性骨折延迟愈合的曲线下面积为0.928,大于BMP-9、PGC-1α、BSAP单独预测的0.778、0.791、0.788(P均<0.05)。结论 血清BMP-9、PGC-1α、BSAP水平降低与创伤性骨折术后延迟愈合密切相关,血清BMP-9、PGC-1α、BSAP水平联合对创伤性骨折术后延迟愈合有较高的预测价值。

血清TXNIP、sTREM-1、BMP-7水平变化与原发性肾病综合征患者疾病转归的关系

目的 探讨血清硫氧还蛋白相互作用蛋白(TXNIP)、可溶性髓系细胞触发受体-1(sTREM-1)、骨形态发生蛋白-7(BMP-7)水平变化与原发性肾病综合征(PNS)患者疾病转归的相关性。方法 选取医院2019年4月至2022年4月收治的91例PNS患者为研究组,同期91例健康体检者为对照组,比较两组入院时血清TXNIP、sTREM-1、BMP-7、肾功能指标[尿素氮(BUN)、血肌酐(Scr)、尿酸(UA)]水平,分析血清各指标水平与肾功能的相关性;比较复发和未复发患者(入院时、治疗3个月、6个月后)血清各指标水平;分析治疗后血清各指标水平联合预测PNS患者复发的价值,分析各指标不同水平患者复发危险度。结果 入院时研究组血清TXNIP、sTREM-1高于对照组,血清BMP-7低于对照组(P<0.05);入院时研究组血清BUN、Scr、UA高于对照组(P<0.05);入院时血清TXNIP、sTREM-1水平与BUN、Scr、UA水平均呈正相关,血清BMP-7水平与BUN、Scr、UA水平均呈负相关(P<0.05);入院时、治疗3个月、6个月后复发患者血清TXNIP、sTREM-1水平高于未复发患者,BMP-7水平低于未复发患者(P<0.05);治疗3、6个月后血清各指标联合预测PNS患者复发价值大于单独预测;治疗3、6个月后血清各指标高水平患者复发危险度是低水平的1.906、2.114、0.581倍/2.571、3.222、0.480倍。结论 血清TXNIP、sTREM-1、BMP-7水平与PNS患者病情程度密切相关,可作为评估PNS病情转归的有效指标。

新生儿呼吸窘迫综合征患儿血清HMGB1、RAGE、BMP-7表达及与肺部超声评分的相关性

目的 分析新生儿呼吸窘迫综合征(NRDS)患儿血清高迁移率族蛋白1(HMGB1)、晚期糖基化终末产物受体(RAGE)、骨形态发生蛋白-7(BMP-7)表达及与肺部超声评分的相关性。方法 选择2018年6月至2023年6月收治的100例NRDS患儿纳入观察组,同期选择100例健康新生儿纳入对照组,均进行血清HMGB1、RAGE、BMP-7检测和肺部超声检查及评分。根据NRDS患儿肺部超声评分将其分为低评分组(评分<12分)、中评分组(评分12~24分)及高评分组(评分>24分)。比较两组研究对象的血清HMGB1、RAGE、BMP-7水平和肺部超声评分;比较不同肺部超声评分患儿的血清HMGB1、RAGE、BMP-7水平;分析观察组中血清HMGB1、RAGE、BMP-7表达与肺部超声评分的相关性。结果 观察组的血清HMGB1、RAGE及BMP-7水平及肺部超声评分高于对照组(P<0.05)。肺部超声显示低评分组47例,中评分组33例,高评分组20例;低评分组的血清HMGB1、RAGE及BMP-7水平低于中评分组和高评分组(P<0.05);中评分组的血清HMGB1、RAGE及BMP-7水平低于高评分组(P<0.05)。Spearman相关性分析结果显示,血清HMGB1、RAGE、BMP-7表达与肺部超声评分呈正相关(P<0.05)。结论 NRDS患儿血清HMGB1、RAGE、BMP-7表达及肺部超声评分均会明显增高,血清HMGB1、RAGE、BMP-7表达与肺部超声评分呈正相关。

瘢痕疙瘩及正常皮肤中骨形态发生蛋白7、Gremlin、血管内皮生长因子、高迁移率族蛋白B1的表达

背景:瘢痕疙瘩的发生是创伤修复的纤维化过程,多种纤维化相关细胞因子参与其发生发展。骨形态发生蛋白7、Gremlin与高迁移率族蛋白B1在其他器官纤维化中发挥重要作用,而在瘢痕疙瘩组织中的研究少见报道。目的:分析骨形态发生蛋白7、Gremlin(骨形成蛋白拮抗剂家族成员)、血管内皮生长因子与高迁移率族蛋白B1在瘢痕疙瘩发病机制中的作用和意义。方法:采用免疫组织化学方法及Wsetern Blot法检测骨形态发生蛋白7、Gremlin、血管内皮生长因子与高迁移率族蛋白B1在20例瘢痕疙瘩组织和20例正常皮肤组织中的分布及蛋白水平的表达,并对瘢痕疙瘩组织中骨形态发生蛋白7与Gremlin、血管内皮生长因子与高迁移率族蛋白B1的表达情况进行相关性分析。结果与结论:与正常皮肤组织相比,Gremlin、血管内皮生长因子与高迁移率族蛋白B1在瘢痕疙瘩组织中表达呈显著性上调(P<0.01),而骨形态发生蛋白7的表达呈显著性下调(P<0.01),Gremlin与骨形态发生蛋白7在瘢痕疙瘩中的表达呈显著性负相关(r=-0.539,P<0.05)。血管内皮生长因子与高迁移率族蛋白B1在瘢痕疙瘩中的表达呈显著性正相关(r=0.560,P<0.05)。说明Gremlin的过度表达和骨形态发生蛋白7的表达下调,以及高迁移率族蛋白B1与血管内皮生长因子的高表达可能共同参与了瘢痕疙瘩的纤维化病理过程。

激活蛋白-1在骨代谢相关信号通路中的作用研究进展

激活蛋白-1(AP-1)是调节细胞增殖、分化和凋亡的关键转录因子。AP-1可通过调控成骨细胞和破骨细胞的增殖、分化和凋亡,参与骨骼生长的生理及病理过程。近年来研究发现,AP-1作为核因子-κB受体活化因子配体/核因子-κB受体活化因子信号通路的重要转录因子,主要通过核因子-κB和Jun氨基末端激酶、细胞外信号调节激酶和p38信号通路调节破骨细胞形成,参与骨代谢过程,其与骨质疏松、骨肿瘤等代谢性骨疾病的发生发展相关,这为代谢性骨疾病提供了新的治疗靶点。本文就AP-1在骨代谢相关信号通路的作用研究进展作一综述。

基于AMPK/sirt1/RANKL/OPG通路研究补阳还五汤促进骨质疏松性骨折大鼠愈合的机制

目的基于AMP活化蛋白激酶(AMPK)/沉默信息调节因子(sirt)1/核转录因子(NF)-κB受体活化蛋白配体(RANKL)/骨保护素(OPG)信号通路,探究补阳还五汤促进骨质疏松性骨折大鼠骨折愈合的机制。方法将大鼠随机分成假手术组、模型组、补阳还五汤低剂量组(6.25 g/kg)、补阳还五汤中剂量组(12.50 g/kg)和补阳还五汤高剂量组(25.00 g/kg)。除假手术组外,其余组均构建骨质疏松性骨折模型,并给予相应剂量药物干预。检测大鼠骨密度(BMD)值、骨折愈合评分及骨痂体积;自动生化分析仪测定血清碱性磷酸酶(ALP)、骨钙素、钙和磷水平;酶联免疫吸附试验(ELISA)检测股骨组织中的丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)水平;苏木素-伊红(HE)染色观察各组大鼠骨痂组织的病理形态;Western印迹检测股骨组织中AMPK/sirt1/RANKL/OPG通路蛋白表达。结果与假手术组相比,模型组骨痂骨小梁分布稀疏,成骨细胞大量减少且有纤维组织生成,骨痂体积、血清中ALP、骨钙素、钙和磷水平及股骨组织中MDA水平、RANKL蛋白水平显著升高(P<0.05),BMD值、骨折愈合评分、骨组织中SOD和GSH-Px水平和AMPK、sirt1、OPG蛋白水平显著降低(P<0.05)。与模型组相比,补阳还五汤低、中、高剂量组骨痂骨小梁分布较为密集,成骨细胞增加,骨痂体积、血清中ALP、骨钙素、钙和磷水平及股骨组织中MDA水平、RANKL蛋白水平显著降低(P<0.05),BMD值、骨折愈合评分、骨组织中SOD和GSH-Px水平和AMPK、sirt1、OPG蛋白水平显著升高(P<0.05)。结论补阳还五汤可能通过抑制氧化应激反应,调节AMPK/sirt1/RANKL/OPG通路,发挥对骨质疏松骨折大鼠的治疗作用。

MicroRNA-195-5p调节Bmpr1α表达对骨髓间充质干细胞成脂分化的影响

目的探讨miR-195-5p在补肾方含药血清干预大鼠原代骨髓间充质干细胞(bone mesenchymal stem cell,BM SC)中的表达及其对成脂分化的影响。方法体外贴壁法原代培养的大鼠BM SC细胞经流式细胞术、CD44和CD34免疫荧光染色鉴定后,与椎间盘软骨细胞和成骨细胞一起采用荧光定量RT-PCR方法检测细胞中rno-miR-195-5p的表达情况;采用荧光素酶报告基因实验验证骨形态发生蛋白受体-1α(Bmpr1α)是否为rno-miR-195-5p的靶基因,采用Western印迹法和油红O染色检测rno-miR-195-5p对Bmpr1α表达和BMSC成脂分化的影响。结果流式细胞术与免疫荧光分析显示所培养细胞具备BMSC特征。rno-miR-195-5p在补肾方含药血清干预的原代BM SC中表达明显升高(P<0.01),且在分化完成的软骨细胞和成骨细胞中高表达。双荧光素酶报告实验与Western印迹法证实Bmpr1α是rno-miR-195-5p的靶基因。转染rno-miR-195-5p mimics上调BM SC中rno-miR-195-5p可抑制Bmpr1α的表达(P<0.05),降低成脂分化能力;而转染rno-miR-195-5p inhibitor可显著增加BM SC中Bmpr1α的表达(P<0.01),增强成脂分化能力。结论补肾方含药血清干预BMSC上调rno-miR-195-5p,通过降低其靶基因Bmpr1α的表达而降低BMSC的成脂分化,改善骨质疏松症状。

香青兰总黄酮通过调控TGF-β/BMP信号通路对肺动脉高压大鼠的保护作用

目的 通过野百合碱诱导的肺动脉高压(PH)大鼠模型,探讨香青兰总黄酮(DMTF)对PH大鼠的保护作用及作用机制。方法 建立野百合碱诱导的PH大鼠模型,采用超声法检测大鼠心脏功能,观察肺的病理变化并评估PH的发展状态以及肺血管重构程度。使用ELISA法检测血清相关指标,评价DMTF抗炎、抗氧化应激能力;使用Western blot法检测BMPR2、TGF-β1、Smad1/5/8、p-Smad1/5/8、Smad2/3和p-Smad2/3的蛋白表达。通过低氧诱导肺动脉平滑肌细胞(PASMCs)增殖模型,并用CCK-8法检测细胞增殖能力;使用流式细胞术检测细胞周期及凋亡,并采用Western blot法检测BMPR2、TGF-β1、Smad1/5/8、p-Smad1/5/8、Smad2/3和p-Smad2/3的蛋白表达。结果 心脏超声和病理检查结果显示,PH大鼠平均肺动脉压力(mPAP)显著升高,血管壁增厚,α-SMA表达增加,血清中ET-1、IL-1β、IL-6、TNF-α和MDA含量升高,SOD、GSH-Px和NO含量降低(P <0.05)。DMTF药物干预后降低mPAP,并减轻或延缓肺动脉血管重构;升高血清SOD、GSH-Px和NO含量,降低ET-1、IL-1β、IL-6、TNF-α和MDA含量;下调PH大鼠肺组织中TGF-β1、p-Smad2/3蛋白的表达,并上调BMPR2、p-Smad1/5/8蛋白的表达(P <0.05)。CCK-8和流式细胞术结果显示DMTF抑制了低氧诱导的PASMCs过度增殖,并下调TGF-β1、p-Smad2/3蛋白的表达,上调BMPR2、p-Smad1/5/8蛋白的表达(P <0.05)。结论 DMTF可降低肺动脉压,改善肺血管重构,对PH大鼠具有一定的保护作用,其机制可能与抑制炎症反应、减轻氧化应激反应和调节TGF-β/BMP信号通路有关。

BMPR1b-siRNA对人骨髓间充质干细胞成骨分化及Smads通路的影响

目的探讨BMPR1b对人骨髓间充质干细胞成骨分化及Smads通路的影响。方法构建BMPR1b特异性siRNA质粒,利用脂质体Lipo fectamineTM2000将BMPR1b-siRNA质粒转入hBMSCs,采用实时荧光定量PCR检测BMPR1b表达水平。利用四甲基偶氮唑蓝实验检测hBMSCs细胞增殖活性和碱性磷酸酶活性,茜素红染色鉴定hBMSCs成骨分化能力。利用实时荧光定量PCR及Western blot法检测成骨标志基因ALP、骨钙素、骨桥蛋白、Smads通路关键基因Smad1、Smad4水平。结果成功分离培养hBMSCs细胞。干扰组BMPR1b mRNA表达水平明显低于阴性对照组及空白组,差异有统计学意义(P<0.05),阴性对照组与空白组BMPR1b mRNA表达水平比较,差异无统计学意义(P>0.05)。MTT实验结果显示,沉默BMPR1b后,可明显抑制hBMSCs生长与增殖。沉默BMPR1b后可下调hBMSCs细胞ALP活性。茜素红染色结果显示,沉默BMPR1b后可明显降低hBMSCs细胞钙化程度。qRT-PCR及Western blot结果显示,沉默BMPR1b后可明显下调ALP、骨钙素、骨桥蛋白表达,下调Smad1、Smad4表达。结论沉默BMPR1b后可明显抑制hBMSCs细胞成骨分化,推测其机制可能与抑制Smads通路有关。

骨形态发生蛋白-7对大鼠脑缺血再灌注损伤的保护作用

目的:探讨骨形态发生蛋白-7(130ne morphogenetic protein-7,BMP-7)对大鼠脑缺血再灌注损伤的保护作用及其可能的作用机制。方法:采用线栓法建立大脑局灶性脑缺血再罐注损伤模型,按照随机数字表法将Wistar大鼠随机分为假手术组、模型组、BMP-7治疗组。在缺血2 h再灌注24 h后对各组进行神经功能评分。采用原位末端标记法(TUNEL法)检测皮质区神经细胞凋亡,采用实时定量-聚合酶链反应(RT-PCR)和蛋白质印迹法(Western b10tting)分别检测皮层区凋亡活化因子-1(apoptotic protease activating factor-1,Apaf-1)和Bcl-2/腺病毒E1 B 1 9kDa相互作用蛋白3(Bcl-2/adenovirus E1B 19 kDa interacting protein 3,BNIP3)的mRNA及蛋白的表达。结果:与模型组相比,BMP-7治疗组大鼠神经功能评分明显降低,TUNEL阳性细胞数减少,缺血侧皮层Apaf-1和BNIP3的mRNA和蛋白表达均降低。结论:BMP-7可能通过下调Apaf-1和BNIP3的表达抑制神经细胞凋亡,从而减轻脑缺血再灌注损伤。

新生儿呼吸窘迫综合征患儿血清IL-6、HMGB1、BMP-7水平与病情严重程度及预后的关系

目的 探讨新生儿呼吸窘迫综合征(NRDS)患儿血清白细胞介素-6(IL-6)、高迁移率族蛋白B1(HMGB1)、骨形态发生蛋白-7(BMP-7)水平与病情严重程度及预后的关系。方法 选取2017年5月至2021年4月该院100例NRDS患儿作为观察组,另选取同期60例未患NRDS的新生儿作为对照组。比较两组血清IL-6、HMGB1、BMP-7水平,分析血清IL-6、HMGB1、BMP-7水平与病情严重程度的关系,比较不同预后患儿临床资料及血清IL-6、HMGB1、BMP-7水平,分析血清IL-6、HMGB1、BMP-7水平与NRDS患儿预后的关系,绘制受试者工作特征(ROC)曲线,评价血清IL-6、HMGB1、BMP-7水平对NRDS患儿预后的预测价值,分析血清IL-6水平与HMGB1、BMP-7的相关性。结果 观察组血清IL-6、HMGB1、BMP-7水平高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);NRDS患儿血清IL-6、HMGB1、BMP-7水平与病情严重程度呈正相关(P<0.05);死亡患儿血清IL-6、HMGB1、BMP-7水平高于生存患儿,差异有统计学意义(P<0.05);Logistic回归分析结果发现,血清IL-6、HMGB1、BMP-7均为NRDS患儿预后的独立危险因素(P<0.05);绘制血清IL-6、HMGB1、BMP-7水平预测NRDS患儿预后的ROC曲线,结果显示血清IL-6、HMGB1、BMP-7水平预测NRDS患儿预后的曲线下面积(AUC)分别为0.761、0.837、0.713,应用Logistic二元回归拟合,构建各指标联合预测的AUC,结果显示,3项联合预测的AUC为0.884。NRDS患儿血清IL-6水平与HMGB1、BMP-7水平呈正相关(P<0.05)。结论 NRDS患儿血清IL-6、HMGB1、BMP-7水平明显升高,且其水平与患儿病情严重程度及预后有关,可作为临床评估NRDS患儿病情严重程度及预后的参考指标。

骨形态发生蛋白-7在E.coli中的可溶性表达

骨形态发生蛋白-7(BMP-7)属于转化生长因子(TGF-β)家族中的成员,有很强的骨诱导作用.为了获得可溶性的rhBMP-7,利用SOE-PCR法获得链球菌G蛋白B1域(GB1)目的基因,构建GB1、连接肽、6His-tag、EKsite(Asp-Asp-Asp-Asp-Lys)和BMP-7融合表达型载体,转化E.coliBL21(DE3).工程菌在28℃下经0.1mmol/L IPTG诱导后,可获得表观分子量约为28kD的以可溶形式表达的GB1-BMP-7融合蛋白.

重组人骨保护素联合替硝唑治疗牙周炎小鼠的疗效及与血清RANKL、MCP-1水平的相关性研究

目的:探究重组人骨保护素联合替硝唑治疗牙周炎小鼠的疗效及对血清RANKL、MCP-1水平的影响。方法:80只SPF级清洁的小鼠随机分为4组,各20只,模型组、替硝唑组和重组人骨保护素组使用Kimura等报道的方法建模,替硝唑组小鼠接受替硝唑灌胃,重组人骨保护素组在替硝唑组的基础上在牙周袋间隙注入重组人骨保护素治疗。观察并记录四组小鼠牙周变化情况,并进行牙龈评级。苏木精-伊红(HE)染色法显观察上皮组织形态。使用酶联免疫吸附法检测血清中IL-4、IL-6、RANKL和MCP-1水平。结果:干预后模型组出现严重炎症反应,包括红肿、出血以及深牙周袋,牙齿明显松动,替硝唑组和重组人骨保护素组小鼠基本恢复,并且重组人骨保护素组小鼠牙龈评级优于替硝唑组和模型组(P<0.05)。HE染色结果显示干预后模型组组织出现水肿、血管扩张以及大量的炎性浸润,替硝唑组和重组人骨保护素组小鼠的上皮结构完整且排列较为紧密、有序。干预后替硝唑组和重组人骨保护素组的IL-4显著高于模型组而IL-6显著低于模型组(P<0.05),并且干预后重组人骨保护素组IL-4显著高于替硝唑组而IL-6显著低于替硝唑组(P<0.05)。干预后替硝唑组和重组人骨保护素组均显著降低,重组人骨保护素组RAKNL和MCP-1显著低于模型组(P>0.05)。结论:重组人骨保护素联合替硝唑对牙周炎小鼠的牙龈和牙齿具有更好的治疗效果,并且可以降低血清中RAKNL和MCP-1水平,抑制骨吸收,保护牙齿。

酪蛋白激酶2相互作用蛋白1对人牙周膜干细胞成骨分化能力的影响

目的探讨酪蛋白激酶2相互作用蛋白1(casein kinase 2 interacting protein-1,CKIP-1)对人牙周膜干细胞(human periodontal ligament stem cells,hPDLSCs)成骨分化能力的影响。方法收集正常人牙周膜组织,通过组织块培养法分离培养hPDLSCs,将P4代细胞分为空白对照组、阴性对照组(感染对照载体)、CKIP-1 siRNA慢病毒组(感染CKIP-1 siRNA慢病毒)以及CKIP-1组(感染CKIP-1过表达慢病毒)。对各组细胞进行成骨诱导培养21 d,茜素红染色观察细胞矿化结节形成情况,并用分光光度计法对矿化结节进行定量分析,同时利用qPCR技术检测各组Runt相关转录因子2(Runt-related transcription factor 2,Runx2)、碱性磷酸酶(alka-line phosphatase,ALP)、骨钙素(osteocalcin,OCN)、核因子κB受体活化因子配体(receptor activator of nuclear factor kappa-B ligand,RANKL)等,以及骨形态发生蛋白(bone morphogenetic protein,BMP)信号通路成骨相关调控因子的转录水平。结果阴性对照组与空白对照组各指标间无统计学差异(P>0.05);与阴性对照组比较,CKIP-1 siRNA慢病毒组出现更多的矿化结节(P<0.05),矿化沉积量明显增多(P<0.05),Runx2、ALP、OCN、RANKL等,以及BMP信号通路的转录水平不同程度升高(P<0.05)。结论CKIP-1下调可促进hP-DLSCs成骨分化能力,这与成骨相关调控因子转录水平有关。

ACVR2B、BMPR1A和BMPR1B基因多态性与母猪繁殖性能的相关分析

为研究转化生长因子-β(TGF-β)通路中激活素A受体2B(ACVR2B)、骨形态发生蛋白受体1A(BMPR1A)和骨形态发生蛋白受体1B(BMPR1B)基因多态性对母猪繁殖性能的影响,选用大白和长白母猪为试验对象,采用DNA混池测序对猪ACVR2B、BMPR1A和BMPR1B基因多态位点进行筛选,利用GenoPlexs;基于多重PCR的靶向测序基因型分型技术对候选SNPs进行分型,并与经产母猪繁殖性能进行关联性分析。结果显示:ACVR2B基因筛到2个单碱基突变和1个缺失多态,分别为g.23259668T>C、g.23260159(delG)和g.23260324C>T,命名为P1、P2和P3;BMPR1A基因g.87887024-87887026(delTGG)筛到1个缺失多态,命名为P4;BMPR1B基因筛到5个单碱基突变,g.124593852G>A、g.124561254G>C、g.124561098C>T、g.124546851A>G和g.124542062T>C,分别命名为P5、P6、P7、P8和P9。关联结果显示:ACVR2A基因的P1、P2和P3这3个位点完全连锁遗传,与长白母猪出生活仔数和校正21日龄窝重显著相关(P<0.05),与大白母猪校正21日龄窝重显著相关(P<0.05);BMPR1A基因P4位点与长白母猪出生窝重显著相关(P<0.05);BMPR1B基因P5位点与长白母猪总产仔数极显著相关(P<0.01),与出生活仔数显著相关(P<0.05),与大白母猪出生窝重显著相关(P<0.05);P6位点与长白母猪总产仔数显著相关(P<0.05),与大白母猪出生活仔数显著相关(P<0.05);P9位点与大白母猪出生窝重极显著相关(P<0.01),与校正21日龄窝重显著相关(P<0.05)。联合基因型显示:P6-P7的联合基因型与大白母猪出生活仔数和出生窝重显著相关(P<0.05),CGCT组合基因型为优势基因型;P8-P9的联合基因型与大白母猪出生活仔数、出生窝重和校正21日龄窝重显著相关(P<0.05),GGTC组合基因型为出生活仔数和出生窝重的优势基因型,GGCC组合基因型为校正21日龄窝重的优势基因。结论:本研究筛选的9个位点对母猪的繁殖性能存在影响,可作为潜在的遗传标记,为猪分子育种提供参考,并推测BMPR1B基因可作为母猪产仔性能的主效基因。

Toll样受体4／核转录因子-κB信号转导通路介导趋化素样因子-1在骨代谢过程中的影响

目的观察趋化素样因子-1（CKLF-1）对骨代谢过程的影响，探讨Toll样受体4／核转录因子-κB（TLR4／NF—κB）信号转导通路在此过程中的作用机制。方法将C57BL／6小鼠骨髓内单个核细胞培养，给予不同浓度的趋化素样因子-1进行诱导后随机分组，分别运用反转录一聚合酶链反应（RT-PCR）和Western blot法检测各组细胞TLR4、骨保护素（OPG）、细胞间黏附分子-1（ICAM-1）、核因子KB抑制蛋白-α抗体（IKB-α）的表达；用酶联免疫吸附试验（ELISA）法测定培养的细胞上清液中自细胞介素-6（IL-6）的表达，比较各组指标表达变化。结果与正常对照组相比，CKLF-1可随着浓度（1×10^-7、1×10^-6和1×10^-5mol／L）升高，上调TLR4 mRNA的表达水平（P〈0．05），且CKLF-1不同浓度组之间相互比较，TLR4 mRNA的表达水平均差异有统计学意义（P〈0．05），浓度为1×10^-5mol／L的CKLF-1组上调幅度最为显著；经不同浓度CKLF-1诱导后，增加ICAM-1蛋白表达水平分别为112．50±10．01、173．60±15．82及191．90±20．23（P〈0．05）；下调IKB-α蛋白表达水平分别为0．68±0．05、0．59±0．05及0．51±0．05（P〈0．05）；下调OPG的蛋白表达水平分别为0．88±0．07、0．75±0．07及0．63±0．07（P〈0．05）；升高IL-6表达水平分别为（3．73±0．35）ng／L、（4．32±0．40）及（6．51±0．40）ng／L（P〈0．05）；且CKLF-1不同浓度组之间相互比较，ICAM-1、IL-6、IKB-α和OPG的表达水平差异有统计学意义（P〈0．05），当CKLF-1浓度为1×10^-5mol／L时效果最为明显。结论CKLF-1可调节TLR4 mRNA、ICAM-1、OPG、IKB—α的蛋白表达和IL-6的表达，其对骨代谢的影响可能与促炎反应和激活TLR4／NF—κB信号转导通路相关。

牙周-正畸结合治疗对重度牙周炎患者龈沟液MMP-2、IL-1β及RANKL/OPG水平的影响

目的:探讨牙周-正畸结合治疗对重度牙周炎患者龈沟液基质金属蛋白酶-2(MMP-2)、白介素-1β(IL-1β)、核因子κB受体活化因子配体/骨保护素(RANKL/OPG)水平的影响。方法:选取2018年6月-2020年6月笔者医院诊治的重度牙周炎患者72例,以随机抽签法按1:1比例分为研究组和对照组,每组36例。对照组采取牙周组织再生术治疗,研究组采取牙周-正畸结合治疗。对比两组临床疗效、治疗前后牙周指标[牙龈指数(GI)、探诊深度(PD)、龈沟出血指数(SBI)、菌斑指数(PLI)、临床附着丧失(CAL)]水平、牙齿松动度、邻接点至牙槽骨嵴间距离(BC-CP)、龈乳头高度(PH)、患牙前牙覆盖情况及龈沟液MMP-2、IL-1β、RANKL/OPG水平。结果:研究组总有效率(91.67%)高于对照组(72.22%),差异有统计学意义(P<0.05);与治疗前相比,两组治疗后GI、PD、SBI、PLI、CAL水平均明显降低,且研究组低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);两组治疗后牙齿松动度均低于治疗前,且研究组低于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05);两组治疗后BC-CP、PH水平均高于治疗前,且研究组高于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05);与治疗前对比,两组治疗后前牙覆盖程度均得到明显改善,且研究组优于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05);两组治疗后龈沟液MMP-2、IL-1β、RANKL/OPG水平均明显降低,且研究组低于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:牙周-正畸结合治疗能显著改善重度牙周炎患者切牙区美学效果,且能进一步下调龈沟液MMP-2、IL-1β及RANKL/OPG水平,是治疗重度牙周炎的有效方法。

RANKL/OPG、MIP-1α、TSLP对口腔正畸治疗中牙周病的诊断价值

目的探究核因子κB受体活化因子配体(RANKL)/骨保护蛋白(OPG)、单核细胞炎性蛋白-1α(MIP-1α)、胸腺基质淋巴细胞生成素(TSLP)对口腔正畸治疗中牙周病的诊断价值。方法选取郑州大学附属郑州中心医院口腔科2017年3月至2020年3月牙周病正畸治疗患者24例为A组,牙周正常的30例正畸患者作为B组,比较两组患者在正畸治疗过程中1,3,6个月龈沟液中RANKL/OPG、MIP-1α、TSLP水平、牙周指标:菌斑指数(PLI)、牙龈指数(GI),分析各龈沟液指标对牙周病的诊断价值。结果正畸治疗1、3个月后龈沟液中RANKL/OPG、MIP-1α、TSLP及PLI、GI水平组间比较,牙周患者组>正常组,差异有统计学意义(P<0.05);正畸治疗3个月后龈沟液中RANKL/OPG、MIP-1α、TSLP与PLI、GI呈正相关(P<0.05);正畸治疗3个月后龈沟液中RANKL/OPG、MIP-1α、TSLP联合诊断牙周病的AUC最大,为0.907。结论龈沟液中RANKL/OPG、MIP-1α、TSLP联合可为临床诊断口腔正畸治疗中牙周病提供科学指导。

骨质疏松分子生物学研究专家共识

骨质疏松分子生物学研究在骨代谢分子信号通路、骨质疏松易感基因、骨质疏松相关蛋白、骨质疏松靶向治疗等方向取得了很大进展。核因子κB受体活化因子/核因子κB受体活化因子配体/骨保护素(RANK/RANKL/OPG)信号通路、核因子κB受体活化因子(NF-κB)信号通路、丝裂原活化蛋白激酶/细胞外调节蛋白激酶(MAPK/ERK)信号通路、巨噬细胞集落刺激因子(M-CSF)信号通路、钙离子(Ca^(2+))信号通路、酪氨酸激酶、蛋白激酶B(Src、Akt)信号通路、蛋白激酶C(PKC)信号通路等骨代谢重要通路,维生素D受体(VDR)基因、低密度脂蛋白相关蛋白5(LRP5)基因、亚甲基四氢叶酸还原酶(MTHFR)基因、雌激素受体(ER)基因等易感基因,载脂蛋白E(Apo E)、Klotho蛋白(Klotho)、骨形态发生蛋白(BMP)、骨涎蛋白(BSP)等相关蛋白,以直接或间接的方式参与调控骨代谢,作用重叠相互联系,互为结果,已在本专业领域达成共识。