骨形态生成蛋白-4与17β-雌二醇诱导MBA-1细胞分化的研究

目的探讨BMP-4与17β-雌二醇诱导MBA-1细胞分化的作用。方法用骨形态生成蛋白-4(BMP-4)诱导MBA-1细胞15～22d后进行HE染色观察细胞形态,用1型胶原染色、矿化结节染色鉴定成骨细胞功能;用BMP-4及17β-雌二醇干预MBA-1细胞后,用RT-PCR检测骨钙素的变化。结果①MBA-1细胞可向成骨细胞或脂肪细胞分化;②在无BMP-4或17β-雌二醇干预的情况下,MBA-1细胞在自身分化成熟过程中伴有骨钙素的表达增加;③经BMP-4与17β-雌二醇干预后,MBA-1细胞骨钙素的表达明显增加。结论MBA-1细胞可能具有多系分化潜能,BMP-4与17β-雌二醇可上调其骨钙素表达,诱导MBA-1细胞向成骨细胞方向分化。

BMP-4与17β-雌二醇对MBA-1细胞护骨素表达的影响

目的探讨骨形态生成蛋白-4(BMP-4)与17β-雌二醇对小鼠骨髓基质细胞株MBA-1细胞护骨素表达的影响。方法用BMP-4及17β-雌二醇干预MBA-1细胞后,用RT-PCR和Western印迹检测护骨素表达的变化。结果在无BMP-4或17β-雌二醇干预的情况下,MBA-1细胞在自身分化成熟过程中伴有护骨素的表达增加;经BMP-4与17β-雌二醇干预后可上调MBA-1细胞护骨素表达增加。结论BMP-4与17β-雌二醇可上调MBA-1细胞护骨素表达,从而诱导MBA-1细胞向成骨细胞方向分化。

泌乳素腺瘤组织中BMP-4的表达及意义

目的研究骨形态生成蛋白4(BMP-4)在泌乳素(PRL)腺瘤发生发展中的作用。方法PRL腺瘤标本37份,选取10份进行原代培养,用5、10、20、50、100 ng/ml的BMP-4对PRL腺瘤细胞诱导培养,观察细胞形态,放射免疫法测定PRL水平;用免疫组化和原位杂交技术检测37份PRL腺瘤及8份正常垂体组织中BMP-4 mR-NA、BMP-4蛋白的表达水平。结果BMP-4 5 ng/ml可促进PRL分泌,20 ng/ml达最大效应,50 ng/ml时促分泌作用开始下降,100 ng/ml时细胞开始凋亡;PRL腺瘤组织中BMP-4 mRNA、BMP-4蛋白表达水平与腺瘤侵袭性呈正相关(r=0.885,P<0.01)。结论BMP-4可能是PRL腺瘤发病机制中重要的一环;可作为判断PRL腺瘤增殖、侵袭性的一个重要指标。

BMP-4和Ki-67在泌乳素腺瘤中的表达及临床意义

目的探讨骨形态生成蛋白4(BMP-4)和细胞核增殖相关抗原(Ki-67)在泌乳素(PRL)腺瘤中的表达及与腺瘤侵袭性的关系.方法应用免疫组织化学和原位杂交技术检测 35例PRL腺瘤及8例正常垂体组织中BMP-4mRNA、BMP-4和Ki-67蛋白的表达水平,并对三者的表达水平的关系进行统计分析.结果 8例正常垂体组织的BMP-4和Ki-67表达均阴性;35例PRL腺瘤中,BMP-4mRNA、BMP-4表达水平与PRL腺瘤的侵袭性呈正相关 (r=0.885,P＜0.01);Ki-67在2～3级与0～1级的表达水平有显著性差异(P＜0.05),但 BMP-4mRNA、BMP-4的表达较Ki-67更具灵敏性(P＜0.05).结论 BMP-4在PRL腺瘤中呈特异性高表达,且与PRL腺瘤侵袭性呈正相关.

BMP-4及其拮抗剂对PRL腺瘤细胞分泌、增殖和凋亡的影响

目的研究骨形态生成蛋白4(BMP-4)及其拮抗剂Noggin对PRL腺瘤细胞分泌、增殖和凋亡的影响。方法用不同浓度的BMP-4和Noggin对原代培养的PRL腺瘤细胞进行干预,观察不同时间的细胞形态,测量PRL的浓度。以免疫细胞化学、Western blot及RT-PCR检测BMP-4蛋白和BMP-4mRNA在PRL腺瘤细胞的表达,甲基噻唑基四唑(MTT)法计算Noggin对PRL腺瘤细胞生长的半最大抑制浓度(IC50)值,透射电镜,流式细胞仪观察检测Noggin处理后的细胞形态和周期改变,计算凋亡率。结果 5ng/ml的BMP-4培养基可促进PRL腺瘤细胞分泌,最大效应浓度为20ng/m·l MTT法测定IC50值为18μg/m·l 加入Noggin后;免疫细胞化学,Western blot显示,与对照组相比,作用后24hPRL腺瘤细胞表达BMP-4无明显差异,但作用48h和72h的表达显著降低(P<0.05),RT-PCR示Noggin作用24h,48h和72h后BMP-4mRNA基因扩增条带亮度逐渐减弱,电镜观察显示。Noggin作用24h、48h后PRL腺瘤细胞形态无明显改变,72h时可见典型的凋亡细胞。结论 BMP-4在一定浓度范围内呈剂量依赖性地促进PRL腺瘤细胞生长,增殖与分泌。