骨形成蛋白-15基因研究进展

骨形成蛋白-15(BMP-15)是属于转移生长因子-β超家族生长因子的一种分泌型信号分子,仅在卵母细胞中特异性表达,具有促进卵泡生长,阻止黄体早熟的作用。开展对BMP-15基因的研究将有助于人们从基因角度阐明不育或多胎的形成和发展机制,对医学和畜牧业等领域将产生积极的影响。从BMP基因控制排卵数的机制入手,总结BMP-15基因的研究进展。

生长分化因子-9和骨形成蛋白-15基因的研究进展

生长分化因子-9(GDF-9)和骨形成蛋白-15(BMP-15)属于转化生长因子β超家族成员,由卵母细胞分泌,是卵泡发育过程中重要的旁分泌因子,能调控卵泡细胞间的相互作用,促进卵泡发育。近年研究发现,GDF-9和BMP-15基因的异常与雌性生育力、临床疾病如多囊卵巢综合征(PCOS)、卵巢早衰(POF)、卵巢高反应等有关。就GDF-9和BMP-15的基因结构、生物学作用及其基因多态性和基因突变方面的研究进展作一综述。

控制性超促排卵周期多囊卵巢综合征患者生长分化因子-9和骨形成蛋白-15的初步研究

目的:探讨控制性超促排卵(COH)周期多囊卵巢综合征(PCOS)患者卵巢颗粒细胞生长分化因子-9(GDF-9)、骨形成蛋白-15(BMP-15)的表达及其与体外受精-胚胎移植(IVF-ET)治疗结局的关系。方法:选择接受IVF-ET治疗的PCOS患者45例,同期输卵管因素不孕患者103例作为对照组。应用免疫组织化学、Real-time PCR技术检测患者卵巢颗粒细胞GDF-9、BMP-15蛋白和mRNA的表达,并分析与IVF-ET的临床结局关系。结果:GDF-9、BMP-15蛋白在PCOS组和对照组患者卵巢颗粒细胞胞质均呈阳性表达,PCOS患者颗粒细胞GDF-9 mRNA、BMP-15 mRNA的表达水平低于对照组,差异有统计学意义(P<0.01)。多元线性回归分析显示,颗粒细胞GDF-9 mRNA、BMP-15 mRNA表达水平与优质胚胎数呈正相关关系(P<0.05)。临床妊娠组的颗粒细胞GDF-9mRNA、BMP-15 mRNA表达水平高于未妊娠组(P<0.05)。结论:COH周期PCOS患者颗粒细胞GDF-9 mRNA、BMP-15 mRNA表达水平可能与胚胎发育潜能存在相关性。

卵母细胞分泌的生长分化因子-9和骨形成蛋白-15与卵母细胞发育潜能的关系

目的:探讨卵母细胞分泌的生长分化因子-9(GDF-9)和骨形成蛋白-15(BMP-15)与卵母细胞发育潜能的关系。方法:收集因输卵管性不孕接受IVF-ET治疗患者的卵泡,每侧卵巢穿刺取卵时首先选择一个直径≥18 mm卵泡抽吸,对卵母细胞进行成熟度分型,并观察其受精、卵裂及胚胎评分情况。受精后按是否形成优质胚胎将将卵泡分为优质卵母细胞组和非优质卵母细胞组,采用Western blotting方法检测比较各组卵泡液中GDF-9和BMP-15的含量。结果:①优质卵母细胞组的GDF-9蛋白相对含量为2.498±0.133,非优质卵母细胞组为1.305±0.406,差异有统计学意义(P=0.008)。②优质卵母细胞组的BMP-15蛋白相对含量为3.379±0.482,非优质卵母细胞组为1.336±0.214,差异有统计学意义(P=0.003)。结论:在优质卵母细胞组卵泡液中GDF-9和BMP-15水平均较高,提示人卵泡液中GDF-9、BMP-15水平可以反映卵母细胞的发育潜能,GDF-9、BMP-15水平可以作为评价卵母细胞质量的指标。

生长分化因子-9和骨形成蛋白-15与控制性超排卵周期卵巢反应的相关性研究

目的探讨人卵巢颗粒细胞生长分化因子-9(GDF-9)、骨形成蛋白-15(BMP-15)的表达与控制性超排卵(COH)过程中卵巢反应的关系。方法对147例因输卵管性不孕或男性不育接受IVF/ICSI治疗的患者,采用GnRH-a黄体期长方案COH,收集患者卵巢颗粒细胞,用Real-time PCR法检测颗粒细胞GDF-9、BMP-15mRNA表达,分析与卵巢反应性的关系。结果卵巢颗粒细胞GDF-9mRNA表达值高反应组>正常反应组>低反应组;BMP-15mRNA表达值低反应组高于高反应和正常反应组;获卵数与GDF-9mRNA表达值呈正相关(r=0.662),与BMP-15mRNA表达值呈负相关(r=-0.218);Logistic回归分析显示,年龄、AFC和GDF-9mRNA表达值,是卵巢高反应的主要影响因素(OR=2.57,0.11,0.39)。结论卵巢颗粒细胞的GDF-9、BMP-15表达,可能与COH卵巢反应性相关。

生长分化因子-9和骨形成蛋白-15对多囊卵巢综合征患者卵丘细胞凋亡的影响

目的探讨控制性超促排卵(COH)周期多囊卵巢综合征(PCOS)患者生长分化因子-9(GDF-9)、骨形成蛋白-15(BMP-15)的表达对卵丘细胞凋亡的影响。方法收集本院行卵胞质内单精子注射(ICSI)治疗的PCOS组(n=30)和对照组(n=60)患者的卵丘细胞。TUNEL法及流式细胞术检测卵丘细胞凋亡;免疫组织化学方法检测卵丘细胞GDF-9、BMP-15蛋白表达,运用Motic Med 6.0数码医学图像分析系统对染色强度定量分析;Real-time PCR技术检测卵丘细胞GDF-9、BMP-15、B细胞淋巴瘤/白血病-2(BCL)-2、BCL-2相关X蛋白(BAX)mRNA表达。结果 PCOS组穿刺卵泡数、获卵数高于对照组(P<0.01);PCOS组卵丘细胞凋亡率高于对照组(P<0.05);GDF-9、BMP-15蛋白在PCOS组和对照组卵丘细胞胞质中均呈阳性表达;PCOS患者卵丘细胞GDF-9、BMP-15、BCL-2、BAX mRNA的表达低于对照组(P<0.05),BAX/BCL-2比值高于对照组(P<0.05)。Pearson相关分析结果显示PCOS患者GDF-9、BMP-15与BCL-2 mRNA表达呈正相关,与BAX mRNA的表达呈负相关。结论 PCOS患者卵丘细胞GDF-9、BMP-15异常表达可能是卵丘细胞凋亡增加的原因之一。

单卵母细胞对应的卵丘颗粒细胞中生长分化因子-9和骨形成蛋白-15的表达水平与胚胎发育潜能的研究

目的评估单卵母细胞对应的卵丘颗粒细胞中GDF9和BMP15的m RNA表达水平对卵母细胞发育潜能的影响。方法采用长方案治疗25例ICSI助孕的女性,取卵当天收集180份单卵母细胞对应的卵丘颗粒细胞,随后提取卵丘颗粒细胞的m RNA,进行实时荧光定量分析,对GDF9和BMP15 m RNA基因表达水平采用独立样本t检验分析。结果常规长方案CCs 180份,因卵子与收集的卵丘颗粒细胞是一一对应的,根据卵子受精情况将CCs分为正常受精组CCs 129份,异常受精组CCs 51份;正常受精组根据第3日胚胎卵裂情况分为优质卵裂胚形成组CCs 58份,非优质卵裂胚形成组CCs71份;非优质卵裂胚继续培养,根据第5日形成囊胚情况,分为优质囊胚形成组CCs 25份,非优质囊胚形成组CCs 46份。GDF9和BMP15 m RNA基因表达水平与正常受精率,优质胚胎率显著相关。正常受精组GDF9和BMP15 m RNA基因表达水平显著高于非正常受精组(P<0.01),优质胚胎组显著高于非优质胚胎组(P<0.01)。结论单卵母细胞对应的卵丘颗粒细胞中GDF9和BMP15 m RNA基因表达水平与正常受精率,优质胚胎率和优质囊胚形成率呈显著正相关,提示其可以作为预测卵母细胞的发育潜能的指标。

多囊卵巢综合征患者卵丘细胞凋亡与骨形成蛋白及生长分化因子表达的关系

目的分析多囊卵巢综合征患者卵丘细胞凋亡与骨形成蛋白-15(BMP-15)和生长分化因子9(GDF-9)表达的关系。方法回顾性选取2016年6月至2017年12月间在云南省第二人民医院行卵细胞质内单精子注射的多囊卵巢综合征患者60例为研究组,非多囊卵巢综合征行卵细胞质内单精子注射的患者120例为对照组。比较两组患者的基础内分泌情况和控制性超促排卵周期内分泌情况。收集两组患者的卵丘细胞,免疫组化检测BMP-15、GDF-9蛋白表达; TUNEL法检测卵丘细胞凋亡情况; RT-PCR检测BMP-15、GDF-9及凋亡相关因子BAX、BCL-2 mRNA的表达及其相关性。结果研究组患者基础黄体生成素、基础孕酮明显高于对照组,差异有统计学意义(P <0. 05);研究组患者尿促性素用量明显低于对照组,穿刺卵泡数、获卵数明显高于对照组,差异有统计学意义(P <0. 05)。免疫组化显示,研究组BMP-15、GDF-9蛋白表达水平明显低于对照组,差异有统计学意义(P <0. 05)。研究组卵丘细胞凋亡率明显高于对照组,差异有统计学意义(P <0. 05)。研究组卵丘细胞凋亡相关因子BAX、BCL-2、BMP-15、GDF-9mRNA相对表达量明显低于对照组,BAX/BCL-2比值明显高于对照组,差异有统计学意义(P <0. 05)。Pearson分析显示,对照组BMP-15、GDF-9 mRNA表达水平与BCL-2 mRNA呈正相关(P <0. 05); BMP-15、GDF-9 mRNA表达水平与BAX mRNA无明显相关性(P> 0. 05)。研究组BMP-15、GDF-9 mRNA表达水平与BCL-2 mRNA呈正相关(P <0. 01);与BAX mRNA呈负相关(P <0. 01)。结论多囊卵巢综合征患者卵丘细胞BMP-15、GDF-9表达下调引发凋亡相关因子BAX、BCL-2异常表达可能是卵丘细胞凋亡率增加的原因之一。

中药补肾调经方对体外受精-胚胎移植超排卵周期妊娠结局及骨形成蛋白(BMP)-15的影响

目的:探讨中药补肾调经方对提高IVF-ET超排卵周期所获卵和胚胎质量的作用及其机制。方法:将70例因输卵管因素行IVF-ET的患者随机分为中药+控制性超排卵(实验组,n=35)和单纯控制性超排卵组(对照组,n=35),应用Western blotting法测定取卵日成熟卵泡卵泡液中骨形成蛋白-15(bone morphogenetic protein-15,BMP-15)的含量;用RT-PCR法检测颗粒细胞中BMP-15 mRNA的表达;并比较组间的获卵数、受精率、优质胚胎率及妊娠率等。结果:实验组卵泡液中BMP-15mRNA水平及颗粒细胞中BMP-15 mRNA的表达均显著高于对照组(P<0.05);实验组的临床妊娠率(71.42%)显著高于对照组(48.57%)(P<0.05)。结论:补肾调经方可以提高IVF-ET妊娠率,其作用机制可能与调控卵泡液和颗粒细胞BMP-15水平有关。