血清骨形成蛋白-4水平与异位骨化的关系研究

目的:探讨血清骨形成蛋白-4水平与异位骨化发生的关系,为异位骨化的临床预防提供相应的理论依据。方法:选择2007年12月至2009年1月入院的外伤患者145例,按创伤类型分为3组:单纯脑外伤患者57例,纳入A组;单纯四肢骨折患者48例,纳入B组;脑外伤合并四肢骨折患者40例,纳入C组。入院后根据患者创伤类型予以治疗,并于伤后0.5 d、3 d、15 d、30 d经肘静脉采血测定患者血清骨形成蛋白-4含量。治疗后14～16个月随访时对患者肩、肘、髋、膝关节进行X线检查,然后按患者是否出现异位骨化分为2组:发生异位骨化者纳入Ⅰ组,未发生异位骨化者纳入Ⅱ组。比较A、B、C组患者的异位骨化发生情况,并对各测量时间点的血清骨形成蛋白-4含量进行分析。结果:①异位骨化发生情况。145例患者中发生异位骨化者17例(Ⅰ组),未发生异位骨化者128例(Ⅱ组);A、B、C组患者异位骨化发生率比较,差异有统计学意义(χ2=8.131,P=0.017),进一步两两比较(调整检验水准:a'=0.017):A组异位骨化率大于B组(χ2=6.430,P=0.011),其余各组间比较,差异无统计学意义(A组与C组比较:χ2=3.303,P=0.069;B组与C组比较:χ2=0.044,P=0.834)。②A、B、C组患者血清骨形成蛋白-4含量。不同时间点血清骨形成蛋白-4含量不同(F=41.753,P=0.000):A组0.5 d时含量与3 d时含量比较,差异无统计学意义(t=-0.479,P=0.633),15 d时含量高于3 d和30 d时含量(t=7.134,P=0.000;t=7.338,P=0.000);B组各时间点血清骨形成蛋白-4含量比较,差异无统计学意义(F=0.510,P=0.678);C组0.5 d时含量与3 d时含量比较,差异无统计学意义(t=-0.767,P=0.446),15 d时含量大于3 d和30 d时含量(t=5.725,P=0.000;t=4.326,P=0.000)。3组间血清骨形成蛋白-4含量总体有差别(F=122.299,P=0.000),进一步比较显示:0.5 d时A组含量大于B组和C组(t=5.391,P=0.000;t=5.567,P=0.000);3 d时A组含量大于B组和C组(t=4.678,P=0.000;t=3.848,P=0.000);15 d时A组含量大于B组和C组(t=12.007,P=0.000;t=6.561,P=0.000),B组含量小于C组(t=-7.591,P=0.000);30 d时A组含量大于B组和C组(t=7.094,P=0.000;t=3.581,P=0.000;),B组含量小于C组(t=-3.753,P=0.000)。时间和分组因素存在交互作用(F=18.404,P=0.000)。③Ⅰ、Ⅱ组患者血清骨形成蛋白-4含量。不同时间点血清骨形成蛋白-4含量不同(F=40.910,P=0.000)。Ⅰ组0.5 d时含量与3 d时含量比较,差异无统计学意义(t=-0.335,P=0.740),15 d时含量大于3 d和30 d时含量(t=4.586,P=0.000;t=3.796,P=0.000);Ⅱ组0.5 d时含量小于3 d时含量(t=-0.898,P=0.000),15 d时含量大于3 d和30 d时含量(t=7.106,P=0.000;t=7.750,P=0.000)。2组间血清骨形成蛋白-4含量总体有差别(F=69.398,P=0.000),Ⅰ组各时间点含量均高于Ⅱ组(t=5.027,P=0.000;t=3.124,P=0.006;t=5.080,P=0.000;t=6.100,P=0.000)。时间和分组因素存在交互作用(F=8.735,P=0.000)。结论:血清骨形成蛋白-4含量升高可能是脑外伤患者发生异位骨化的原因之一,适度控制脑外伤患者伤后血清骨形成蛋白-4含量可能会降低其异位骨化的发生率。

益肾填精、补钙壮骨中药复方对骨形成蛋白-4诱导成骨信号转导机制的调控作用

目的研究益肾填精、补钙壮骨中药复方对骨形成蛋白-4(BMP-4)诱导成骨信号转导机制的调控作用。方法将雌性Wistar大鼠随机分为7组:正常组、模型空白组、牡蛎钙补肾中药复方低剂量组、牡蛎钙补肾中药复方中剂量组、牡蛎钙补肾中药复方高剂量组、骨疏康颗粒组、牡蛎碳酸钙咀嚼片组。采用切除大鼠双侧卵巢的方法复制绝经后骨质疏松症模型,应用益肾填精、补钙壮骨中药复方防治12周后进行取材及实验指标检测:用双能X线骨密度仪检测股骨骨密度;用逆转录多聚酶链反应(RT-PCR)检测大鼠骨组织BMP-4和Smad5、6 mRNA表达。结果与模型空白组比较,中药复方各剂量组股骨骨密度显著升高(P<0.01);骨组织BMP-4、Smad5 mRNA表达水平明显升高(P<0.01),Smad6 mRNA表达水平明显降低(P<0.01)。结论益肾填精、补钙壮骨中药复方可明显上调BMP-4和Smad5 mRNA表达,下调Smad6 mRNA表达。

牡蛎钙补肾中药复方对骨形成蛋白-4诱导成骨信号转导机制的调控作用

目的:研究牡蛎钙补肾中药复方对骨形成蛋白-4(BMP-4)诱导成骨信号转导机制的调控作用。方法:采用切除大鼠双侧卵巢的方法复制绝经后骨质疏松症模型,应用牡蛎钙补肾中药复方进行防治,同时用骨疏康颗粒剂、牡蛎碳酸钙咀嚼片作为阳性对照,正常大鼠作为标准对照,模型大鼠作为模型空白对照。中药防治12周后进行取材及实验指标检测:用双能X线骨密度仪检测离体股骨骨密度;用W estern杂交法检测骨组织BMP-4和Sm ad5、6蛋白表达。结果:与模型空白组比较,牡蛎钙补肾中药复方各剂量组股骨骨密度显著升高(P<0.01);骨组织BMP-4、Sm ad5蛋白表达水平明显升高(P<0.01),Sm ad6蛋白表达水平明显降低(P<0.01)。结论:牡蛎钙补肾中药复方可明显上调BMP-4和Sm ad5蛋白表达,下调Sm ad6蛋白表达,这可能是其防治骨质疏松症的重要机制之一。

短期高浓度氟对小鼠磨牙成釉细胞形态及骨形成蛋白-4表达的影响

目的:通过研究短期高浓度氟对小鼠磨牙成釉细胞形态及骨形成蛋白-4(bone morphogenetic protein-4,BMP-4)表达的影响,探讨氟牙症形成的可能机制。方法:选择4d龄的ICR小鼠共32只,随机分为2组,每组16只,再分实验动物和对照动物各半。实验动物单次腹腔注射剂量分别为10mg/kg和20mg/kg的NaF,对照动物单次腹腔注射等剂量的NaCl,注射量均为10μl/g。24h后处死动物。采用HE染色、免疫组化染色观察高浓度氟对小鼠磨牙不同分化阶段成釉细胞形态及BMP-4的表达,采用SPSS13.0软件对数据进行分析。结果:分泌早、晚期和过渡期的成釉细胞对短期暴露高浓度F-敏感,实验动物分泌晚期和过渡期的成釉细胞中BMP-4的表达明显弱于对照动物,差异有统计学意义(P<0.01),而成熟期成釉细胞未见明显变化。结论:短期高浓度氟可抑制BMP-4在分泌晚期和过渡期成釉细胞中的表达,影响釉质发育。

骨形成蛋白-4对小鼠诱导性多能干细胞牙向分化能力的影响

目的:探讨骨形成蛋白-4(BMP4,bone morphogenetic protein-4)对小鼠诱导性多能干细胞(iPS,induced pluripotent stem cell)牙向分化能力的影响。方法:成釉细胞无血清条件培养液(ASF-CM)中分别加入BMP4(ASF-BMP4)和Noggin(ASF-Noggin),定向诱导小鼠iPS细胞向牙源性细胞转化,观察诱导后细胞形态改变,细胞免疫荧光及RT-PCR检测AMBN、AMGN、CK14、DMP-1、DSPP的表达。结果:免疫荧光染色结果显示:iPS细胞经ASF-BMP4诱导后AMBN、AMGN、CK14、DMP-1、DSPP表达阳性。RT-PCR结果显示:诱导iPS细胞14d后,与ASF-CM组相比,ASF-BMP4组AMBN、DMP-1、DSPP表达显著增高,ASF-Noggin组AMBN、DMP-1、DSPP表达明显降低。结论:BMP4能促进小鼠iPS细胞向成釉细胞谱系和成牙本质细胞谱系分化,而Noggin抑制iPS细胞的分化。

骨质疏松大鼠的骨形成蛋白-4诱导成骨信号转导机制变化

目的观察骨形成蛋白4(BMP-4)及其信号转导蛋白(Smad)5、6在去卵巢大鼠骨组织中的表达。方法采用切除大鼠双侧卵巢法复制骨质疏松模型,术后94d,用双能X线骨密度仪检测骨密度;用Western印迹法检测骨组织中BMP-4和Smad5、6蛋白表达水平。结果与正常组比较,模型空白组大鼠股骨骨密度显著下降(P<0.01);BMP-4和Smad5蛋白表达水平显著降低(P<0.01),Smad6蛋白表达水平明显升高(P<0.01)。结论骨组织中BMP-4、Smad5蛋白表达水平的下降和Smad6蛋白表达水平的升高,可能是骨质疏松发生的重要机制之一。

人骨形成蛋白-4和人骨形成蛋白-7在毕赤酵母中的共表达

利用人骨形成蛋白-4(hBM P 4)与人骨形成蛋白-7(hBM P 7)的成熟肽cDNA片段制备转基因毕赤酵母菌株,实现了hBM P 4与hBM P 7在巴斯德毕赤酵母细胞中的共表达.W estern-b lotting分析表明,表达产物含有hBM P 4与hBM P 7,片段大小分别为26 kD和17 kD,均为单体蛋白.

重组人骨形成蛋白-4的大规模制备

含有能够高表达重组人骨形成蛋白成熟肽(recombinant human bone morphogenetic protein 4 mature peptide,rhBMP- 4m)质粒的工程菌株,导入15 L NBS发酵罐中进行恒溶氧高密度发酵和诱导表达,测定发酵菌液OD600值为30．8。离心收集菌体, PAGE电泳后光密度扫描表明hBMP-4m占细菌总蛋白量的42％。悬浮所收集的菌体,裂菌,洗涤4次后的包涵体中hBMP-4m占蛋白量的83．2％。预先取少量样品进行探索实验后,全部包涵体用8 mol尿素缓冲液溶解,上SP-Sepharose FF阳离子柱,以0.35 mol NaCl洗脱,获得纯度为96％的hBMP-4m。其收获量为1．34g/L发酵液;收得率为36．4％。结果表明:使用这套工艺流程大规模制备hBMP-4m,能够得到较好的收得率、较高的收获量和纯度。

骨硬化蛋白和骨形成蛋白-4在诊断异位骨化中的临床意义

目的观察骨硬化蛋白和骨形成蛋白-4在诊断外伤患者异位骨化中的临床意义。方法选择2015年1月至2017年6月就诊的外伤患者104例,按照受伤类型分为单纯脑外伤组(41例),脑外伤合并四肢骨折组(28例)和单纯四肢骨折组(35例)。根据骨折是否异位骨化分为异位骨化组(12例)和非异位骨化组(92例)。观察各组在不同时间点的硬化蛋白和骨形成蛋白-4水平的变化,与是否骨化之间的关系,两指标之间的相关性,两指标在诊断异位骨化的灵敏度和特异性。结果脑外伤合并四肢骨折和单纯四肢骨折患者血清骨硬化蛋白水平明显高于单纯脑外伤组(P <0. 01),而单纯四肢骨折组骨硬化蛋白水平明显高于脑外伤合并四肢骨折组(P <0. 01),骨硬化蛋白水平异位骨化组明显低于无异位骨化组(P <0. 01),3 d、15 d和30 d间比较,15 d水平最高(P <0. 01);脑外伤合并四肢骨折和单纯四肢骨折患者血清骨形成蛋白-4明显低于单纯脑外伤组(P <0. 01),而单纯四肢骨折组明显低于脑外伤合并四肢骨折组(P <0. 01),骨形成蛋白-4异位骨化组明显高于无异位骨化组(P <0. 01),在3 d、15 d和30 d间比较,15 d水平最高(P <0. 01)。伤后15 d血清骨硬化蛋白与骨形成蛋白-4之间呈负相关(r=-0. 509,P <0. 01)。伤后15 d骨硬化蛋白的最佳截断值为179. 49 ng/L,灵敏度为100%,特异性为90. 20%,AUC为0. 976;骨形成蛋白的最佳截距为273. 69 ng/L,灵敏度为100%,特异性为98. 91%,AUC为0. 998。两指标在诊断骨异位骨化形成方面差异无统计学意义(P> 0. 05)。结论骨硬化蛋白和骨形成蛋白-4在诊断异位骨化具有较高的特异性和灵敏度,值得在临床推广。

人重组骨形成蛋白-4与人重组胰岛素样生长因子-Ⅰ联合应用对大鼠成骨细胞的影响

目的探讨人重组骨形成蛋白-4(recombinant human bone morphogenetic protein-4,rhBMP-4)与人重组胰岛素样生长因子-Ⅰ(recombinant human insulin-like growth factor-Ⅰ,rhIGF-Ⅰ)联合应用对大鼠成骨细胞生长增殖及分化能力的影响。方法取大鼠颅盖骨组织块,采用改良组织块混合酶消化法培养成骨细胞,将第四代成骨细胞与10 ng/mL rhBMP-4(rhBMP-4组)、10 ng/mL rhIGF-Ⅰ(rhIGF-Ⅰ组)、10 ng/mL rhBMP-4加10ng/mLrhIGF-Ⅰ(联合组)、无血清低糖培养基(对照组)共同培养3 d,用噻唑蓝法测定细胞的增殖情况,用碱性磷酸酶试剂盒检测细胞碱性磷酸酶的活性,用羟脯氨酸试剂盒检测成骨细胞分泌Ⅰ型胶原的量。结果第3天时,4组促进大鼠成骨细胞增殖能力测定的光密度值差异具有统计学意义(F=4.080,P=0.016),碱性磷酸酶活性差异具有统计学意义(F=4.070,P=0.016),成骨细胞分泌Ⅰ型胶原的差异具有统计学意义(F=3.204,P=0.038);与对照组相比,rhBMP-4组,rhIGF-Ⅰ组及联合组,都可增强成骨细胞的增殖分化能力,但rhBMP-4和rhIGF-Ⅰ联合应用不比单独应用的作用强。结论 rhBMP-4与rhIGF-Ⅰ联合应用,不能协同促进大鼠成骨细胞增殖及分化能力。

同源盒蛋白Msx1在骨形成蛋白-4成骨效应中的作用

目的:研究同源盒蛋白Msx1在骨形成蛋白-4(bone morphogenetic protein-4,BMP-4)成骨效应中的作用,并探讨Msx1与BMP-4的调控关系。方法:体外培养成纤维细胞C2C12,BMP-4处理C2C12细胞24h和36h后,用携带Msx1基因的腺病毒转染C2C12细胞,过度表达同源盒蛋白Msx1,4d后检测细胞中碱性磷酸酶(alkalinephosphatase,ALP)的活性,单独用BMP-4处理组和BMP-4连同空白腺病毒组为对照组,未用BMP-4处理组为阴性对照组。结果:在BMP-4处理24h后,Msx1腺病毒转染的细胞ALP活性非常低,而BMP-4处理36h后,Msx1腺病毒转染的细胞显示强ALP活性,单独用BMP-4处理和BMP-4连同空白腺病毒处理的细胞同样显示强ALP活性。结论:同源盒蛋白Msx1能抑制BMP-4的成骨效应,且具有一定的时段特性。

在肠缺血再灌注下骨形成蛋白-4下调IL-7/IL-7R信号促进肠上皮间淋巴细胞凋亡的研究

目的探讨小鼠小肠在肠缺血再灌注(I/R)条件下骨形成蛋白(BMP-4)通过下调IL-7/IL-7R信号通路促进IELs凋亡的机制。方法建立小鼠小肠I/R损伤模型,随机分为手术组(I/R组)、假手术组(Sham组),每组各16只,免疫荧光检测IECs中IL-7蛋白和流式细胞术检测IELs中IL-7受体(CD127)及STAT5蛋白磷酸化水平变化;外源性BMP-4蛋白刺激IEC-6培养6小时后,Western blot检测IEC-6中IL-7蛋白表达变化;分离培养正常小鼠IELs,分别加入外源性BMP-4蛋白及BMP4拮抗剂NOGGIN蛋白刺激,流式细胞术观察BMP4对IELs中IL-7受体(CD127)及STAT5蛋白磷酸化变化;分离培养正常小鼠IELs,分别加入外源性BMP-4蛋白及IL-7蛋白刺激,观察IELs凋亡率的变化。结果在I/R刺激下,IECs中IL-7蛋白表达I/R组较Sham组明显减少(P<0.05);IELs中IL-7受体(CD127)及STAT5蛋白磷酸化水平均较Sham组表达减少(P<0.05);体外培养实验发现:IECs中IL-7蛋白表达在BMP-4刺激下明显减少,IELs单独培养给予BMP4蛋白刺激后CD127及P-STAT5较Sham组减少(P<0.05);给予BMP特异性拮抗剂RNOGGIN可逆转BMP对IL-7/IL-7R信号通路的抑制作用;BMP-4促进IELs的凋亡率增加(P<0.05),给予外源性IL-7蛋白刺激后,有效的抑制IELs的凋亡率增加(P<0.05),BMP-4抑制IL-7对IELs的增殖作用,促进IELs的凋亡。结论小肠在I/R条件下,肠上皮细胞中BMP-4蛋白抑制IL-7/IL-7R信号通路,使IELs的保护性细胞因子减少,从而促进IELs的凋亡率增加,进一步加重肠免疫屏障损伤。

骨形成蛋白-4在人类胶质瘤中的研究现状

胶质瘤是常见的癌症之一,由于胶质瘤中存在胶质瘤干细胞,导致胶质瘤对化学疗法和放射性疗法有抗药性。在体外实验时观察到BMP4可以诱导胶质瘤干细胞分化成星形胶质瘤细胞,减少胶质瘤干细胞的数量,降低胶质瘤的抗药性。本篇综述就从BMP4信号通路以及BMP4蛋白的角度综合叙述对胶质瘤的靶向治疗作用,为胶质瘤的治疗提供新的思路。

血清骨形成蛋白-4在乙型病毒性肝炎及其慢性化进程中的临床意义

目的探讨血清骨形成蛋白-4(BMP-4)与慢性乙型病毒性肝炎(乙肝)、乙肝肝功能衰竭(肝衰竭)、乙肝肝硬化、乙肝肝癌的相关性为判断疾病病程提供依据。方法本研究共纳入慢性乙肝患者135例乙肝肝衰竭患者36例乙肝后肝硬化患者70例,乙肝相关性肝癌患者34例和健康对照者25例,应用酶联免疫吸附法(ELISA)检测患者和健康对照者的血清BMP-4水平,结合肝脏穿刺病理学结果及血常规、肝功能、血甲胎蛋白(AFP)及影像学等常规检测进行统计分析并比较患者治疗前后各项指标变化。结果乙肝肝衰竭组、肝硬化组、肝癌组的总胆红素(TBIL)、白蛋白与健康对照组差异均有统计学意义(均P <0.05)。乙肝肝衰竭组、肝硬化组和肝癌组中血清BMP-4水平均低于健康对照组(均P <0.05)。BMP-4用以诊断乙肝相关性肝癌的曲线下面积为0.878,乙肝相关性肝衰竭的曲线下面积为0.941乙肝后肝硬化的曲线下面积为0.842。随着肝脏炎症级别的增加血清BMP-4水平随之下降(P<0.05)。根据"巴塞罗那分期法"将肝癌患者分作A、B、C、D四个不同组A级、B级、C级组血清BMP-4水逐渐降低(P<0.05)。结论血清BMP-4检测为一种无创性血清学指标,可用以判断慢性乙肝、乙肝肝硬化及相关性肝癌病情严重程度,可作为肝脏疾病重症化评估的一项指标,有助于准确判断肝脏功能、肝纤维化进程以及疾病预后的评估。

重组人骨形成蛋白-4对人成骨样细胞MG-63增殖分化的影响

目的:探讨重组人骨形成蛋白-4(rhBMP-4)对人成骨样细胞MG-63的增殖分化的影响。方法:人成骨样细胞系MG-63用含10%胎牛血清的DMEM高糖培养基培养在5%CO2、37℃培养箱中,rhBMP-4诱导后用MTT比色法测定细胞增殖,用PNP比色法测定细胞碱性磷酸酶活性,羟脯氨酸测定试剂盒测定细胞羟脯氨酸含量。结果:5、10、20 ng/mL的rhBMP-4均能诱导MG-63细胞的增殖(P<0.05),且呈浓度及时间依赖性;10 ng/mL rhBMP-4能增强MG-63细胞的碱性磷酸酶活性及Ⅰ型胶原的分泌(P<0.05)。结论:rhBMP-4能诱导人成骨样细胞MG-63的增殖及分化。

类风湿关节炎合并间质性肺病患者血清中转化生长因子-β骨形成蛋白-4检测及其意义

目的探讨类风湿关节炎（RA）合并间质性肺病（ILD）患者的临床特点和转化生长因子（TGF）-β1、骨形成蛋白（BMP）-4在血清中的水平。方法入选28例RA-ILD患者、32例单纯RA患者和20名健康对照，RA-ILD组进一步分为早期组（16例）和中晚期组（12例），酶联免疫吸附试验（ELISA）法测定血清中TGF-β1、BMP-4水平，并分析血清TGF-β1、BMP-4水平与实验室指标的相关性。采用t检验、单因素方差分析及Spearman相关分析法进行数据分析。结果与单纯RA患者相比，RA-ILD组患者初次发生关节炎时年龄较大，关节功能优于单纯RA组患者，血清类风湿因子（RF）滴度高（P〈0．05，P〈0．05，P〈0．01），出现肺间质病变时间为2-6年，平均（3．0±1．2）年。TGF-β1水平在RA-ILD组稍增高，但3组相比差异无统计学意义（P〉0．05）。早期RA-ILD组患者TGF-β1血清水平明显增高，与中晚期RA．ILD组及单纯RA组、健康对照组相比较差异均有统计学意义（P＜0．01）。RA-ILD组患者BMP-4水平低于单纯RA组及健康对照组，差异有统计学意义（P〈0．05），且早期RA-ILD组患者BMP-4水平显著下降，与中晚期RA-ILD组及单纯RA组、健康对照组相比较差异均有统计学意义（P〈0．05）。血清BMP-4水平与TGF-β1水平之间无相关性（p〉0．05），血清TGF-β1、BMP-4水平与实验室指标红细胞沉降率、C反应蛋白、RF、抗环瓜氨酸肽（CCP）抗体等均无明显相关性（P均〉O．05）。结论在早期RA-ILD患者中血清TGF-β1水平增高，BMP-4水平减低，二者可能参与了RA患者ILD的发生。

牡蛎钙补肾中药血清对骨形成蛋白-4诱导成骨信号转导机制的调控作用

目的:用血清药理学方法研究牡蛎钙补肾中药血清对离体大鼠成骨细胞中骨形成蛋白-4诱导成骨信号转导机制的调控作用。方法:采用多次胶原酶消化法获得足够数量的成骨细胞(OB),用改良钙钴法测定碱性磷酸酶(ALP)活性以鉴定OB。用含药血清进行细胞培养48h后,用逆转录多聚酶链反应技术(RT-PCR)检测各组OB中BMP-4和Smad5、6mRNA表达。结果:与模型空白组比较,牡蛎钙补肾中药组可明显上调OB中BMP-4和Smad5 mRNA表达,下调Smad6mRNA表达。结论:牡蛎钙补肾中药血清可以提高OB中BMP-4和Smad5基因表达、降低Smad6基因表达,这可能是其防治骨质疏松症的重要机制之一。

骨形成蛋白-4基因多态性与绝经后妇女2型糖尿病伴骨质疏松症的相关性研究

目的探讨上海地区绝经后2型糖尿病(T2DM)和骨质疏松症(OP)妇女的骨形成蛋白-4(BMP-4)基因多态性的分布及其与骨密度(BMD)、骨代谢、糖代谢的关系。方法选取上海地区无亲缘关系的绝经后汉族妇女485例,其中OP组(A组)120例、T2DM组(B组)108例、T2DM合并OP组(C组)130例、健康老年对照组(D组)127例。检测股骨颈、L2～4 BMD、血清骨碱性磷酸酶(BALP)、抗酒石酸酸性磷酸酶-5b(TRACP-5b)、血浆糖化血红蛋白(HbA1c)和空腹血浆葡萄糖(FPG)。检测BMP-4基因多态性,比较各个临床指标与BMP-4基因型的相关性。结果在A组和C组中,股骨颈BMD、L2～4 BMD hh型低于HH型,差异有统计学意义(P值均为0.000),经年龄、绝经年限、BMI校正后比较仍有统计学意义(P值均为0.000),hh型低于Hh型,差异有统计学意义(P值均为0.000),经年龄、绝经年限、BMI校正后比较仍有统计学意义(P值均为0.000),HH型与Hh型相比无统计学意义(P>0.05),经年龄、绝经年限、BMI校正后比较仍无统计学意义(P>0.05)。结论在上海地区绝经后汉族女性OP患者中,BMP-4基因型h等位基因纯合子可能与低骨量有关。

缺血再灌注条件下肠上皮细胞来源的骨形成蛋白-4促进肠上皮间淋巴细胞凋亡的研究

目的探讨小鼠小肠在缺血再灌注（I／R）条件下，肠上皮细胞（IECs）来源的骨形成蛋白-4（BMP-4）促进肠上皮间淋巴细胞（IELs）凋亡及其机制。方法（1）分离正常小鼠IELs，采用反转录-聚合酶链反应（RT-PCR）验证IELs中是否存在BMP受体及经典信号Smad蛋白分子表达。（2）建立小鼠小肠I／R损伤模型，随机分为手术组（I／R）和假手术组（Sham），苏木素-伊红（HE）染色观察肠黏膜绒毛变化；检测IECs中BMP-4蛋白和IELs中BMP受体及Smad磷酸化蛋白变化。（3）分离培养正常小鼠IEk，分别加入外源性BMP-4蛋白及BMP-4拮抗剂NOGGIN蛋白刺激，观察BMP-4对IELs中P—Smad1／5表达变化和IELs凋亡的影响。结果正常IELs中存在BMP受体[骨形成蛋白IA受体（BMPRIA）、骨形成蛋白IB受体（BMPRIB）]及N—Smad（Smad1、Smad5、Smad8）蛋白的表达，I／R组肠黏膜损伤与IECs中BMP-4表达较Sham组明显增加；在I／R刺激下，IELs中BMP受体和磷酸化Smad1／5（P—Smad1／5）均较Sham组表达增加[BMPRIA：（12．66±4．89）％，BMPRIB：（16．70±5．06）％，P—Smad1／5：（44．10±10．10）％，P〈0．05]；体外培养实验发现：IELs单独培养给予BMP-4刺激后P—Smad较空白对照组增加[（29．10±9．09）％，P〈0．05]和IELs的凋亡率较空白对照组增加[（20．30±5．43）％，P〈0．05]，NOGGIN可拈抗BMP-4诱导的Smad磷酸化和IELs凋亡率的增加。结论小肠在I／R条件下，肠上皮细胞中BMP-4蛋白分泌表达增加，通过与IELs上的BMP受体结合，进而激活IELs内的Smad信号通路途径促进IEk的凋亡，从而加重肠屏障损伤。

激活素A和骨形成蛋白-4诱导人羊膜上皮细胞转分化为心肌样细胞的实验研究

近年来羊膜上皮细胞(AECs)被认为是心肌细胞移植较好的种子细胞之一。研究表明,激活素A(ActivinA)和骨形成蛋白-4(BMP-4)能够诱导人胚胎干细胞向心肌细胞分化。本研究通过体外分离、培养并鉴定人AEC后,采用Activin A和BMP-4作为诱导剂,观察它们能否诱导AEC向心肌样细胞转分化。应用定量RT-PCR、Western blot、免疫细胞化学等方法来检测基因及蛋白表达变化。结果显示,人AEC能够表达上皮细胞特异性蛋白角蛋白19(CK19)。经Activin A和BMP-4共同诱导培养14d后,AEC心肌特异性转录因子Nkx2.5和特异性结构蛋白α-actinin的mRNA表达水平明显升高,同时α-actinin的蛋白表达水平亦明显增加。本实验提示,ActivinA和BMP-4在体外能够诱导人AEC向心肌样细胞转分化,同时该诱导方法可能成为诱导AEC向心肌样细胞转分化的一个新方法。