骨形成蛋白10成熟肽在大肠杆菌中的表达纯化及活性分析

目的:以生物制备骨形成蛋白10(BMP10)为目标,研究BMP10成熟肽在大肠杆菌中的表达及活性。方法:以人源BMP10成熟肽基因为模板,PCR获得N端带有组氨酸标签(6×His)的融合基因6×His-m BMP10,构建p ET28a/m BMP10表达载体;热击转染大肠杆菌BL21(DE3)菌株,卡那霉素抗性筛选获得重组表达菌株BL21/p ET28a-6×His-m BMP10,IPTG诱导表达后利用SDS-PAGE电泳、Western印迹对蛋白进行分析;超声波破碎菌体,收集包涵体,镍柱亲和层析纯化获得电泳纯目的蛋白;透析复性后,非还原SDS-PAGE检验目标蛋白的二聚体形成;通过体外细胞实验检测蛋白活性。结果:纯化得到纯度90%以上的m BMP10,复性后二聚体得率约为40%;活性实验测得P19细胞的Smad6蛋白表达上调3倍左右。结论:通过大肠杆菌表达体系获得具有生物活性的BMP10,为后续作用机理研究奠定了实验基础。

持续性心房颤动病人临床特征与BMP10变化及其危险因素

目的:研究持续性心房颤动病人的临床特征及骨形态形成蛋白10(BMP10)变化,并进行危险因素分析。方法:本研究以2019年8月—2020年8月住院诊治的老年心房颤动病人为研究对象,根据心房颤动类型分为持续性心房颤动组(92例)和阵发性心房颤动组(88例)。收集病人基本临床资料,接受超声心动图检查,酶联免疫吸附法(ELISA)检测血清BMP10含量。并针对病人临床资料及发病危险因素进行分析。结果:相较于阵发性心房颤动组,持续性心房颤动组年龄偏高,病程偏长,冠心病和瓣膜病比例更高,左心房内径明显增加,血清BMP10含量明显偏高(P均<0.05)。心功能分级及持续性心房颤动临床特征与BMP10之间存在显著相关性;多因素Logistic回归分析显示,持续性心房颤动的危险因素为BMP10、年龄、左心房内径(P<0.05);受试者工作特征(ROC)曲线下面积:年龄0.922[95%CI(0.871,0.972)]、左心房内径0.720[95%CI(0.619,0.812)]、BMP100.936[95%CI(0.887,0.984)],P均<0.05。结论:持续性心房颤动病人血清BMP10水平相较于阵发性心房颤动病人呈高表达,其临床特征与BMP10表达水平具有明显相关性,BMP10可能是阵发性心房颤动转变为持续性心房颤动的危险因素,有希望成为监测心房颤动疾病进展的有效指标。