骨形成蛋白7通过激活I型受体BMPR1A、BMPR1B抑制肺大细胞癌NCI-H460细胞的增殖

背景与目的已有的研究发现骨形成蛋白7(bone morphogenetic protein7,BMP7)具有抑制和促进多种肿瘤发生发展的双重作用,但其对肺癌细胞增殖的影响及其具体机制尚不明确。本实验首先检测了外源性BMP7对肺癌细胞增殖的影响,然后通过在肺癌细胞系中阻断不同的I型受体,观察其对BMP7生物学作用的影响,以探讨不同的I型受体在BMP7信号传导过程中的作用。方法应用RT-PCR及MTT方法分别检测4种非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)细胞系和人支气管上皮细胞系(HBE)中BMP7I型受体的表达情况及外源性BMP7对肺癌细胞增殖能力的影响,并联合运用抗体阻断的方法阻断NCI-H460细胞中内源性I型抗体,采用MTT法检测BMP7对NCI-H460细胞增殖的影响,分析不同的I型受体在BMP7信号传导过程中的作用。结果NCI-H460细胞系中三种I型受体均有表达。外源性BMP7抑制了肺大细胞癌NCI-H460细胞的增殖(P=0.002)。运用特异性抗体阻断NCI-H460细胞内源性BMPR1A、BMPR1B、BMPR1A+BMPR1B后BMP7对NCI-H460增殖的抑制作用明显减弱(P=0.003,P=0.014,P<0.001),而阻断ACVR1A后BMP7对NCI-H460增殖的抑制作用无明显变化(P=0.074)。结论BMP7通过激活BMPR1A、BM-PR1B两种I型受体抑制NCI-H460细胞的增殖。

骨形成蛋白Ⅰ型受体A在雄激素源性脱发中的表达意义

目的:探讨骨形成蛋白Ⅰ型受体(BMPR-Ⅰ)A在正常人及雄激素源性脱发(androgenetic alopecia,AGA)患者头皮毛囊中的表达及其意义。方法:采用Westetn blot、免疫组化及RT-PCR分析8例AGA患者额顶部脱发区与枕部非脱发区毛囊及11例正常人头皮毛囊中BMPR-ⅠA蛋白及基因水平表达差异;毛囊分组培养,观察双氢睾酮(dihydrotestosterone,DHT)10^(-9)mol/L对BMPR-ⅠA表达及毛囊生长的影响。结果:各组头皮毛囊均可见BMPR-ⅠA阳性染色。与正常毛囊相比,AGA患者脱发区毛囊阳性染色A值降低(P<0.05)。Western blot结果显示,AGA患者头顶部毛囊BMPR-ⅠA含量较正常人下调,目的蛋白与内参灰度比由1.733±0.058下调为0.396±0.036(P<0.05);AGA枕部毛囊目的蛋白与内参灰度比值为1.574±0.039,与正常人组差异无统计学意义。毛囊培养DHT组与生理盐水对照组相比,目的蛋白与内参灰度比由3.441±0.172下降为0.367±0.026(P<0.05)。RT-PCR结果示,AGA脱发区毛囊BMPR-ⅠAmRNA下调为正常组的53%(P<0.05),AGA枕部无明显下调;毛囊培养DHT组下调为对照组的13%(P<0.05)。结论:AGA脱发区毛囊与DHT组毛囊BMPR-ⅠA表达均降低,提示BMPR-ⅠA表达下降部分是由DHT升高引起;DHT可引起的毛囊生长减慢及退行性变;BMPR-ⅠA表达下降可能是DHT升高的直接作用或者是AGA生长期与退行期毛囊比例下降的代偿机制;其参与AGA发病可能与毛干及内根鞘形成障碍引起毛发脱落有关。