骨成形蛋白7拮抗转化生长因子β1致肾小管上皮细胞细胞外基质分泌的作用

目的:观察骨成形蛋白7(BMP-7)拮抗转化生长因子β1(TGF-β1)诱导人肾小管上皮细胞(HK-2)细胞外基质(ECM)分泌作用,并对相关信号通路进行研究,对BMP-7抗纤维化机制进行深入探讨。方法:将不同浓度BMP-7预处理HK-2细胞,随后予以5ng/mlTGF-β1刺激,利用荧光实时定量PCR和Western印迹检测ECM表达、利用Western印迹和凝胶迁移滞后实验(EMSA)检测相关信号通路蛋白表达。结果:荧光实时定量PCR和Western印迹结果表明,BMP-7可以浓度依赖方式下调TGF-β1刺激后HK-2细胞I型胶原,III型胶原,纤维连接蛋白在mRNA和蛋白水平表达。TGF-β1可促进HK-2细胞Smad2、Smad3磷酸化。但TGF-β1上调的Smad2、Smad3磷酸化可被BMP-7抑制,差异有统计学意义(P<0.05和P<0.01)。EMSA结果表明,BMP-7则可抑制TGF-β1上调的NF-κB活性。结论:BMP-7可通过抑制Smad2/3磷酸化、抑制NF-κB的DNA结合活性达到阻断TGF-β1诱导HK-2分泌ECM的效应。

依那普利对大鼠肾间质损害中骨成形蛋白-7及其受体表达的影响

目的研究血管紧张素转化酶抑制剂(ACEI)依那普利对单侧输尿管梗阻大鼠肾组织骨成形蛋白-7(BMP-7)及其受体BMPR-Ⅱ、ALK-2、ALK-3、ALK-6表达的影响。方法采用单侧输尿管梗阻(UUO)大鼠模型,治疗组于造模前24h-造模后7d以依那普利10mg/(kg.d)灌胃,另设假手术组为正常对照,造模7天后,应用免疫组织化学法观察肾脏BMP-7、TGF-β1蛋白表达,半定量RT-PCR法检测肾脏BMP-7及其受体BMPR-Ⅱ、ALK-2、ALK-3、ALK-6mRNA表达水平。结果与假手术对照组相比,UUO大鼠肾脏BMP-7及其受体BMPR-Ⅱ、ALK-2和ALK-3mRNA表达明显减少,TGF-β1蛋白表达明显增高,而给予依那普利治疗后能够显著上调BMP-7及其受体BMPR-Ⅱ、ALK-2和ALK-3的表达,下调TGF-β1的表达,减轻肾间质纤维化。结论依那普利可显著上调BMP-7及其受体表达,减轻梗阻肾间质纤维化,这一作用可能与抑制TGF-β1的致纤维化活性有关。

骨成形蛋白-7在大鼠肾小管间质损害中的作用

目的观察单侧输尿管梗阻(UUO)大鼠中骨成形蛋白-7(BMP-7)在肾小管间质中的表达部位、动态变化及其与肾小管间质损害的关系。方法60只Wistar大鼠随机分为正常大鼠组、假手术组和单侧输尿管梗阻组,分别于术后1d、3d、7d、14d处死。采用RT-PCR方法检测BMP-7mRNA、TGF-β1.mRNA表达水平,免疫组化方法检测肾小管间质中BMP-7、TGF-β1、α-SMA的蛋白定位、表达及其与输尿管梗阻后肾小管间质损害的关系。结果与对照组相比,BMP-7mRNA于术后第1天即出现表达下降并随梗阻时间延长递减;而TGF-β1mRNA则随梗阻时间延长而递增(P均<0.05)。BMP-7蛋白在对照组中高度表达,主要分布在肾小管及肾间质,肾小球内基本无表达。在梗阻组随着肾间质损害的加重,BMP-7蛋白表达呈进行性下降,第14天表达量最弱,几乎没有明显的阳性表达,而TGF-β1、α-SMA蛋白表达则逐渐增加(P均<0.01)。BMP-7与TGF-β1蛋白表达阳性面积成显著负相关(r=-0.875,P<0.05)。BMP-7与α-SMA蛋白表达阳性面积亦成显著负相关(r=-0.843,P<0.05)。结论BMP-7于肾小管间质病变早期即出现表达下调,早于肾间质纤维化的出现,其表达量与肾间质TGF-β1、α-SMA表达负相关且随间质病变进展进行性下降。BMP-7表达下调可能参与介导肾小管间质损害的发生发展。

骨形成蛋白-7对人肾小管上皮细胞株HK-2凋亡的影响

研究不同浓度的骨成形蛋白 7(BMP 7)对人近曲小管上皮细胞株HK 2凋亡的影响并初步探讨其可能的机制。应用Hoechst 332 5 8荧光染色、DNA电泳检测凋亡细胞的形态学和生化改变 ,流式细胞仪定量检测细胞的凋亡率 ,并观察凋亡特异性蛋白酶Caspase 3活性变化的情况。结果显示 ,HK 2细胞加入 1 0ng/mlTGF β处理 2 4h后 ,可明显抑制细胞生长并诱导细胞凋亡 ,呈现明显的凋亡形态学改变 ,胞核或核质内可见浓度致密的颗粒状荧光 ,DNA电泳呈现典型的“梯形条带” ,而预先加入 5 0ng/ml、 1 0 0ng/mlBMP 7共处理 2 4h后 ,可减轻TGF β对细胞的抑制作用 ,凋亡细胞亦减少 ,Caspase 3蛋白酶活性明显下降 ,细胞凋亡率下降。提示BMP 7对人肾小管上皮细胞凋亡的具有抑制作用 。

BMP-7介导补肾助阳中药与脑损伤促进创伤性骨折愈合的机制研究

探究骨成形蛋白-7(BMP-7)介导补肾助阳中药与脑损伤促进创伤性骨折愈合的机制。方法 回顾性分析2020年7月-2021年10月我院收治的150例创伤性长骨骨折患者的临床资料,依据患者是否存在脑损伤分为伴有脑损伤(FT)组100例及不伴有脑损伤(Fr)组50例,其中FT组中依据治疗方法不同分为中药组(术后行补肾助阳中药辅助治疗)55例及无辅助组(术后不采用辅助治疗)45例,另选择同期健康体检的志愿者50例入对照组。对比各组临床疗效、骨折愈合情况及不同时点BMP-7水平。结果 Fr组总有效率均高于无辅助组及中药组,且中药组高于无辅助组(P<0.05);无辅助组Lane-Sandhu骨痂评分、关节功能评分均低于中药组及Fr组,骨折愈合时间长于中药组及Fr组(P<0.05);相比于对照组,中药组、无辅助组、Fr组术前、术后7d、14d、21d、28d、2个月、4个月BMP-7水平均较高(P<0.05)。结论 补肾助阳中药与脑损伤均可通过调节创伤性骨折患者BMP-7水平促进骨痂形成,有助于骨折端的恢复,提升骨愈合质量,对骨折愈合的分子生物学机制具有重要意义。

肥胖孕妇血清BMP-7及胰岛素抵抗水平的研究

目的探讨肥胖孕妇血清BMP-7（人骨成形蛋白7）和胰岛素抵抗水平的变化及意义。方法选取妊娠期肥胖孕妇22例，正常妊娠孕妇122例，测定空腹血清BMP-7、空腹血糖、空腹胰岛素（FINs），计算胰岛素抵抗指数（HOMA-IR）。结果妊娠期肥胖组血清BMP-7含量平均值1619．61±633．23ng／L，正常妊娠组血清BMP-7含量平均值1472．05±1196．18ng／L；妊娠期肥胖组血清BMP-7水平明显高于正常妊娠组（P〈0．05）；妊娠期肥胖组胰岛素抵抗指数平均值2．30±1．21，正常妊娠组胰岛素抵抗指数平均值1．80±1．41，两组之间的差异有统计学意义（P〈0．05）；分析结果显示，空腹血清BMP-7水平与FINS呈正相关（P〈0．05）。结论妊娠期肥胖组孕妇血清BMP-7水平的升高，可能参与了妊娠期糖尿病病理性胰岛素抵抗的发生。

曲尼司特对马兜铃酸肾病大鼠肾纤维化防治作用的初步研究

目的观察曲尼司特干预治疗对马兜铃酸肾病大鼠肾纤维化防治作用,以探讨其可能的机制。方法雄性SD大鼠24只,随机分为4组。对照组予灌服饮用水10mL.kg-1.d-1,模型组、曲尼司特治疗组及安博维治疗组均予关木通水煎剂灌胃共12周建立马兜铃酸肾病模型。12周时观察各组大鼠血红蛋白(Hb)、肌酐(Cr)、转化生长因子β1(TGF-β1)、肝细胞生长因子(HGF)和原位杂交骨成形蛋白7(BMP-7)的表达。结果曲尼司特能延缓血红蛋白降低及血清肌酐(Scr)上升;减轻肾小管上皮细胞空泡变性、小管萎缩及间质纤维化;曲尼司特能下调马兜铃酸肾病大鼠肾组织中的TGF-β1,上调HGF、BMP-7的表达。结论曲尼司特可能通过下调马兜铃酸肾病大鼠肾组织中TGF-β1,上调HGF、BMP-7的表达以抑制肾小管上皮细胞表型转分化,从而减轻肾纤维化,发挥其肾脏保护作用。

曲尼司特对马兜铃酸肾病大鼠肾脏保护作用的实验研究

目的:观察曲尼司特干预治疗对马兜铃酸肾病大鼠肾脏保护作用,以探讨其可能的机制。方法:雄性SD大鼠24只,随机分为4组。对照组予灌服饮用水10mL/kg.d,模型组、曲尼司特治疗组及安博维组治疗组均予关木通水煎剂灌胃共12周建立马兜铃酸肾病模型。12周时观察各组大鼠血红蛋白(Hb)、肌酐(Crea)、肝细胞生长因子(HGF)和原位杂交Smad-6、骨成形蛋白7(BMP7)的表达。结果:曲尼司特能延缓血红蛋白降低及血Scr上升;减轻肾小管上皮细胞空泡变性、小管萎缩及间质纤维化;曲尼司特能上调马兜铃酸肾病大鼠肾组织中的HGF、Smad-6、BMP-7的表达。结论:曲尼司特可能通过上调马兜铃酸肾病大鼠肾组织中HGF、Smad-6、BMP-7的表达以抑制肾小管上皮细胞表型转分化,从而减轻肾脏病理损害,发挥其肾脏保护作用。

雷公藤甲素对T2DM大鼠肾小管-间质损伤的保护作用

目的:观察雷公藤甲素(Triptolide,TP)对2型糖尿病(T2DM)大鼠肾小管-间质骨形态发生蛋白-7(BMP-7)、结缔组织生长因子(CTGF)、转化生长因子-β1(TGF-β1)表达的影响及保护作用。方法:Wistar大鼠50只,随机分为正常组(NC组)、模型组(DM组)和观察组(TP组)。DM及TP组大鼠均采用高脂高糖联合小剂量STZ建立T2DM模型。模型成功后,TP组大鼠给予TP 200μg.kg-1.d-1灌胃。结果:治疗8周后,与NC组比较,DM组及TP组大鼠肾重/体重(KW/BW)、空腹血糖(FBG)、尿白蛋白(UAL)及CTGF、TGF-β1mRNA蛋白的表达、ED-1阳性细胞数均明显增多(P<0.05,0.01),TP组低于DM组(P<0.05,0.01);肾组织BMP-7mRNA及蛋白表达下调(P<0.01),TP组高于DM组(P<0.05)。相关分析表明,尿蛋白与BMP-7 mRNA存在负相关,与CTGF、TGF-β1mRNA存在正相关;肾小管-间质内ED-1阳性细胞数与TGF-β1的表达明显相关;TGF-β1与CTGF的表达呈正相关,而与BMP-7存在负相关(均P<0.01);萎缩肾小管比例及间质纤维化均与TGF-β1、CTGF表达明显正相关,与BMP-7负相关(均P<0.05)。结论:TP对T2DM大鼠肾小管-间质损害具有明显的保护作用,其机制可能与下调CTGF、TGF-β1及部分恢复BMP-7的表达有关。

表达持续活化型ALK3抑制大鼠肝星状细胞活化

背景肝纤维化与肝星状细胞(hepatic stellate cells, HSCs)上皮细胞间充质转化(epithelial mesenchymal transformation,EMT)相关, TGF-β1在其中起着重要的作用,而BMP7能够拮抗TGF-β1,目前主要研究的是TGF-β/BMPs-Smad信号通路, ALK3属于BMPs的持续活化Ⅰ型受体,在肝纤维化分子研究机制中较少运用.目的观察大鼠HSCs中稳定表达持续活化型ALK3时Sma d1磷酸化及纤维化相关基因E-cadherin、α-SMA、col1A2等表达情况,探讨BMP-7信号转导在肝纤维化发生发展过程中拮抗TGF-β1信号及其抗肝纤维化机制.方法建立体外培养大鼠HSCs (HSC-T6)持续活化型ALK3的稳定表达细胞株, MTT检测细胞的增殖;RT-PCR检测col1A2等相关分子mRNA水平;Western blotting检测Samd1、E-cadherin、α-SMA、col1A2蛋白表达和Smad1磷酸化;显微镜下观察细胞形态.结果稳定表达持续活化型ALK3的HSC-T6细胞增殖受到抑制, Smad1磷酸化显著升高,α-SMA, col1A2表达下调, E-cadherin表达上调.结论BMP-7信号转导通过增强Samd1的磷酸化而拮抗TGF-β1致纤维化作用,抑制大鼠HSCs的活化.

肾脏细胞外基质代谢的调控

细胞外基质(ECM)对细胞粘附、增殖及表型转换均起重要作用。体内有多种因子及酶能调节ECM合成及降解,使其处于动态平衡,一旦失衡出现合成增强和(或)降解受阻即能致ECM蓄积,在肾脏即引起肾小球硬化及肾间质纤维化。本文就与肾脏ECM代谢调控有关的转化生长因子-β、结缔组织生长因子、骨成形蛋白-7、纤溶酶原激活物抑制剂、基质金属蛋白酶及金属蛋白酶组织抑制剂等的研究进展作一综述。