添加大型海藻龙须菜对中肋骨条藻赤潮的影响

江蓠属大型海藻具有产氧强及高效吸收营养盐的特点,可用来缓冲赤潮消亡、 崩溃造成的生态影响．本文的研究是在已发生骨条藻赤潮的系统中添加龙须菜,调节 及缓冲赤潮系统的生态脆弱性．结果表明,水体中2kg/m3密度的龙须菜可以较好地 供应氧及稳定pH,并大量吸收营养盐及控制水体中的异养细菌的剧增,此外,该密度 龙须菜的添加还能促进介质中单一微藻种群的改变,使得系统中的优势微藻种类的 增加和丰度的下降．

长江口海区一次骨条藻赤潮发生过程的多元分析

就长江口海区一次骨条藻 (Skeletonemacostatum)赤潮发生过程 (1990年 6月 9～ 15日 )的环境因子与赤潮生物量数据 ,运用SAS软件 ,进行多元统计分析。结果表明 :赤潮发展与维持期的环境因子呈相似性 ;赤潮消亡时 ,水域环境因子向正常水平恢复。相关、变量聚类及主成分分析三种方法求得的结果基本一致 :影响本次赤潮形成的重要因子是气压、水温、盐度、pH、NO-3 N、PO3-4 P与Fe。逐步回归分析确定了盐度、PO3 -4 P与Fe是本次赤潮形成的主导因子 ,同时建立了赤潮的线性判别函数。选择长江口另外一次骨条藻赤潮发生过程(1990年 8月 11～ 2 2日 )的环境因子数据进行赤潮判别 。

南海大鹏湾盐田海域骨条藻数量的多元分析

1990年及1991年3月30日一5月30日，在南海大鹏湾盐田海域设点测定骨条藻数量及各环境要素，以逐步回归、主成分分析及判别分析的方法，分析该海区骨条藻数量与环境因子的关系。结果表明，骨条藻数量与环境因子中的DO，Chl．c，Si（OH）4，PO4，N的关系密切；1990年4，5月与1991年4，5月骨条藻数量差异与该期间环境因子值差异显著有关;初步提出用三维主成分分析图及判别分析方程作为盐田海域骨条藻赤潮预报的方法。

温度、光照和盐度对2株曼氏骨条藻生长及脂肪酸组成的影响

研究温度、光照、盐度对2株曼氏骨条藻（Skeletonema munzelii）SM-1、SM-2生长、总脂含量及脂肪酸组成的影响,以确定其生长及油脂、多不饱和脂肪酸积累的最适生态条件。在实验室智能光照培养箱内不充气培养控制条件下,采用单因子试验分别研究了不同温度（10、15、20、25和30℃）、光照强度（20、40、60、80、100和120μmol/m2·s）、盐度（10、15、20、25、30、35和40）对2株藻的生长、总脂含量及脂肪酸组成的影响。结果表明：不同温度、光照强度及盐度对2株藻的生长、总脂及脂肪酸含量影响均有显著影响（P〈0.05）。藻株SM-1生长的最适温度为25℃,最适光强60μmol/m2·s,最适盐度30,而低温（10~15℃）,低光照（20μmol/m2·s）,低盐度（盐度15）更有利于总脂及PUFA的积累。SM-2生长的最适温度为20℃,最适光强60μmol/m2·s,最适盐度30,而低温（10~15℃）,低光照（20μmol/m2·s）更有利于其总脂及PUFA的积累,低盐（盐度15）则更有利于PUFA的积累。因此在实际生产中,2株藻可先在最适条件下培养以增加生物量,后转至利于PUFA积累的条件下提高PUFA产量。

骨条藻的种类与基因多样性研究进展

骨条藻属(Skeletonema Greville)是一种在全球近岸海域广泛分布的广温广盐性浮游硅藻,为赤潮引发种．文中就骨条藻形态学分类和分子生物学方面的工作进展进行介绍．各种骨条藻种类之间的形态学差异非常细微,在准确鉴定上具有一定的难度．目前,结合形态学方法和分子生物学方法,国际上该属的分类记录种达到12种今生种和9种化石种,而我国已报道了4种今生种．骨条藻中克隆并已定序的基因或靶序列有:脱氧核糖核酸聚合酶(pol)、谷氨酰氨合成酶(gln)、岩藻黄素叶绿素a/c蛋白复合体(fop)、硝酸还原酶(nat)、16 SrDNA和骨条藻特异性死亡蛋白(ScDSP)等．这些工作为更好地认识骨条藻,有效地防治该藻引发的赤潮灾害提供了很好的研究基础．

厦门港骨条藻属的记述

对在厦门港采到的中肋骨条藻(Skeletorema costalum),江河骨条藻(S.potamo),曼氏骨条藻(S.muazelii)和热带骨条藻(S.tropicum)进行分类研究。

长江口骨条藻属(Skeletonema)种类多样性及其形态(英文)

利用光镜和扫描电镜(SEM)观察对长江口骨条藻属种类进行观察,共发现两种已有种:中肋骨条藻Skeletonema costatum(Greville)Cleve,玛氏骨条藻Skeletonema marinoi Sarno et Zingone.中肋骨条藻细胞直径为6.3～15.1μm,贯壳轴长度为7.7～11μm;玛氏骨条藻细胞直径为4.6～11.2μm,贯壳轴长度为11.7～12.2μm.中肋骨条藻在各个季节均有发现,玛氏骨条藻仅出现在春季.

不同氮源对骨条藻生长的影响

适合骨条藻生长的尿素质量浓度为20 mg/L,在100 mg/L时效果极差;氯化铵的适合质量浓度也是20 mg/L,60 mg/L时骨条藻会死亡很多;硝酸钠组骨条藻普遍长势都好,但利用率不太高,在50 mg/L长势最好,但效果不理想,也不经济。培养骨条藻以氯化铵效果最好,适宜质量浓度约为20 mg/L。

关于骨条藻培养技术的初步研究

中肋骨条藻是一种广温,广盐性藻类,是对虾蚤状幼体的优良饵料之一,但较难培养。根据生产需要,笔者从1985年开始研究骨条藻培养方面的有关技术问题,现将试验研究情况报道如下:

基于玛氏骨条藻转录组的细胞死亡相关功能基因解析

本研究以玛氏骨条藻(Skeletonema marinoi)转录组信息为基础,发现玛氏骨条藻中存在26个与细胞死亡相关的酶以及37个编码这些酶的基因。这些编码基因的序列比对结果表明,其与假微型海链藻(Thalassiosira pseudonana)和大洋海链藻(Thalassiosira oceanica)的同源基因具有较高的一致性。对这些样品进行数字基因表达谱的差异基因分析,获得了不同生长时期时与细胞死亡过程有关的编码基因的差异表达数据。结果发现,在稳定期和衰亡期,与抗氧化胁迫作用相关的关键酶(如过氧化物酶5、铜锌超氧化物歧化酶)、与RNA的加工与降解过程有关的功能基因(如多核糖核苷酸核苷转移酶、5’~3’核糖核酸外切酶2)以及细胞死亡特异蛋白的基因表达量显著高于指数期。本论文主要是通过对转录组数据进行分析得到基因转录组水平差异表达结果,为蛋白水平研究提供一种可能性变化趋势和潜在数据依据,同时为以后研究提供数据基础及研究方向。本研究也为进一步探讨硅藻的细胞死亡机制奠定了基础,也为深入理解赤潮的消亡过程提供了新的视角。

不同粒径与浓度的清洁疏浚物对骨条藻生长的影响

采用室内模拟试验,研究了不同粒径、不同浓度的悬浮清洁疏浚物对骨条藻（Skeletonema sp.）生长的影响。结果表明,在96 h的试验周期里,0~16、16~63、63~88μm粒径范围的清洁疏浚物对骨条藻生长的影响极显著（P〈0.01）,而88~125μm粒径范围清洁疏浚物培养液中10 mg/L浓度组对骨条藻生长影响不显著（P〉0.05）。在相同浓度清洁疏浚物培养液中,粒径越小,对骨条藻生长影响越大;在相同粒径清洁疏浚物培养液中,浓度越高,对骨条藻生长影响越大。0~16μm粒径清洁疏浚物对骨条藻生长的96 h-EC50为2 507 mg/L,88~125μm粒径清洁疏浚物对骨条藻生长的96 h-EC50为7 645 mg/L,随着清洁疏浚物粒径范围的变大,对骨条藻生长的抑制作用逐渐减小。本试验用疏浚物为清洁疏浚物,不用考虑疏浚物本身析出的污染成分对骨条藻生长的影响,而其可能通过遮光效应引起的藻细胞光合作用减弱是对骨条藻生长产生影响的主要限制因子。

基于玛氏骨条藻转录组的脂肪酸合成途径分析

本研究利用Illumina Hiseq2000对不同生长时期的玛氏骨条藻(Skeletonema marinoi)进行转录组测序,得到的转录本通过NR、NT、Swiss-Prot和KOG数据库进行功能分类,通过GO和KEGG数据库进行相关代谢途径分析和基因差异表达分析,在此基础上构建了S.marinoi的脂肪酸生物合成途径,发现共存在26种酶和蛋白对应的33个编码基因,对这33个基因序列进行比对发现其与假微型海链藻(Thalassiosira pseudonana)的同源性较高。在该代谢通路中,S.marinoi在不同生长时期出现显著差异表达的基因有15个。与指数期相比,柠檬酸裂解酶和长链酰基-CoA合成酶(Comp14198_c0)的编码基因在稳定期和衰亡期出现显著下调表达,而柠檬酸合酶的编码基因仅在稳定期出现显著下调表达。与之相反的是,以乙酰-CoA羧化酶编码基因为代表的12个编码基因在稳定期和衰亡期均出现了显著上调。通过分析,初步推测S.marinoi在稳定期的脂肪酸合成能力高于指数期。这些信息为海洋微藻脂肪酸生物合成途径的研究提供了理论基础,有助于对S.marinoi进行基因改造,提高脂肪酸的合成量。同时,又能为赤潮的防治提供新的思路。

不同氮源对骨条藻光合活性、生长和中性脂积累的影响

研究了硝酸钠、氯化铵和尿素作为单一氮源对骨条藻的光合活性、生长及中性脂积累的影响.结果表明:最适合骨条藻生长的氮源是氯化铵,其次是尿素,最后是硝酸钠,3种氮源的最适浓度均为4.4×10-4mol/L,光合活性的结果与藻的生长基本一致.3种氮源各浓度梯度的中性脂积累量最大值基本都出现在第7天(培养时间为8d),与藻的生长不是同步关系.最适合骨条藻中性脂积累的氮源是氯化铵,最适浓度为8.8×10-6mol/L,其最高油脂含量为31.07%.硝酸钠组的最高油脂含量为28.46%,略高于尿素组的最高油脂含量27.99%,但尿素组最适合中性脂积累的氮源浓度为1.8×10-5mol/L,低于硝酸钠组的最适氮源浓度1.8×10-4mol/L.在高接种量的条件下,骨条藻油脂总量的高低与百分含量的高低是基本一致的.

实时荧光定量PCR分析中不同铁浓度处理下玛氏骨条藻内参基因的筛选

实时荧光定量PCR(qRT-PCR)是定量分析基因表达的常用方法,选择合适的内参基因对准确分析目的基因表达水平至关重要。本研究以不同铁浓度培养条件下的玛氏骨条藻为材料,定量分析Cytb、EF-1α、HPRT、UBC、GAPDH、β-actin以及β-tubulin 7个内参基因的表达情况,并利用GeNorm、NormFinder和BestKeeper软件对这些内参基因的稳定性进行综合评价。结果表明,Cytb和EF-1α的表达稳定性较好,EF-1α+Cytb组合的稳定性最佳,是玛氏骨条藻基因表达研究的理想内参基因,而其他基因的表达稳定性较差,不适合作为内参基因。本研究为玛氏骨条藻基因表达研究过程中内参基因的选择提供了方法学上的依据。

骨条藻的保种方法及大面积培养技术

骨条藻(Skeletonema costatum)繁殖速度快,营养充足,是虾蟹幼体最适宜的单细胞饵料之一。但由于使用一般单细胞藻保种的常规方法,保种量少,操作方法麻烦,又不易迅速大面积繁殖起来。笔者几年来采用半干冷冻法保存骨条藻种,进行大面积培养,取得较好的生产效果。现将其保种方法及培养技术介绍如下,供育苗生产者参考。

骨条藻属硅藻的分类、生态及生理研究进展

骨条藻属(Skeletonema)是全球分布的广温广盐性浮游硅藻,常见于沿海河口和海洋中,近年来也常出现在一些淡水环境中。骨条藻属硅藻可作饵料、生产生物柴油的原料、治疗癌症的候选药,也是一类可引发赤潮的藻类。该文综述了骨条藻属硅藻在系统分类学、生态学、生理学方面的研究进展,并对其发展方向进行了展望。

骨条藻的工厂化培养

本文主要探讨骨条藻(skeletonema costatum)的原种分离、纯化,营养盐的配制及其工厂化培养方法。

骨条藻生产性培育池亚硝酸态氮含量的变化及其藻液的处理

骨条藻是投喂对虾溞状幼体的优质饵料,在骨条藻的培育过程中,由于施肥和骨条藻生理代谢的结果,使藻液含有较多量的有毒物质,其中亚硝酸态氮素含量的变化是比较明显的。然而 NO_2-N 对对虾幼体的毒性是比较大的,因此掌握骨条藻培育池水NO_2-N 含量的变化规律,在投喂之前严格处理藻液则可以有效地避免 NO_2-N 对虾苗的毒性,提高溞状幼体期虾苗的成活率。笔者于1988～1989年先后在深圳、湛江、海康等地骨条藻生产性培育中,对其生产性池NO_2-N 的含量变化进行了多方面的测定,现将其结果报告于后。