骨松益骨方调控Beclin 1/Bcl-2对去卵巢大鼠骨细胞凋亡和自噬的影响

目的探讨骨松益骨方(GSYG)对去卵巢(OVX)大鼠骨质疏松的作用以及对Beclin 1/Bcl-2介导的骨细胞凋亡与自噬的影响。方法将大鼠随机分成假手术组(Sham)、模型组(Model)、GSYG低、中、高剂量组[1.25、2.5、5 g/(kg·d)]。通过ELISA检测大鼠血清中P1NP和β-CTX的水平;Micro-CT测定股骨骨密度以及微结构的变化;HE染色检查骨组织的形态学变化;TUNEL染色观察骨细胞凋亡;免疫组化观察骨组织中LC3的变化;Western blot法检测大鼠胫骨近端Bcl2、Bax、cleaved caspase-3、cleaved PARP、LC3、Beclin1的表达变化;免疫共沉淀法检测Beclin1和Bcl-2的相互作用。结果与模型组相比,GSYG中、高剂量组的P1NP和β-CTX水平显著降低(P<0.01);GSYG各剂量组骨的微结构明显改善(P<0.01);骨小梁明显增多;骨细胞凋亡明显减少(P<0.01);Bcl-2的表达显著升高(P<0.01),Bax表达显著降低(P<0.05或P<0.01),GSYG高剂量组中的cleaved caspase-3、cleaved PARP的蛋白表达显著降低(P<0.01),GSYG中、高剂量组的LC3-Ⅱ/Ⅰ的比值与Beclin1蛋白表达显著升高(P<0.01);免疫组化染色显示,与模型组相比GSYG各剂量组LC3蛋白显著增加(P<0.05或P<0.01);免疫共沉淀的结果提示,模型组Beclin1和Bcl-2相互作用较强,而GSYG高剂量组中两者结合均减少。结论GSYG对OVX大鼠的骨质疏松发展有抑制作用,其机制与其调控Beclin 1/Bcl-2介导的凋亡与自噬有关。

骨松益骨方消补兼施治疗肾虚血瘀型绝经后骨质疏松症的组方分析

骨松益骨方作为医院协定方用于治疗肾虚血瘀型绝经后骨质疏松症,经多年临床及动物实验表明其对绝经后骨质疏松症疗效显著。探讨骨松益骨方的组方特点,以期从中医学理论角度阐释其作用机制,为中医药治疗肾虚血瘀型骨质疏松症提供思路。在中医药理论指导下,结合君臣佐使的组方原则对方中8味中药进行功效分析,结果发现,骨松益骨方组方合理精当,选药简约质朴,为融合消补兼施为一体的中药复方,具有补肾健脾、养血活血、强筋壮骨、通络止痛的功效。骨松益骨方消补兼施治疗肾虚血瘀型绝经后骨质疏松症体现了治本为主、标本兼治的中医治疗原则,临床取得了较好疗效。

骨松益骨方联合阿仑膦酸钠治疗脾肾气虚血瘀型原发性骨质疏松症的疗效观察

目的:观察骨松益骨方联用阿仑膦酸钠治疗脾肾气虚血瘀型原发性骨质疏松症的疗效。方法:将186例脾肾气虚血瘀型原发性骨质疏松症患者随机分为3组,包括骨松益骨方组63例、阿仑膦酸钠组61例和联用组62例,治疗6个月后,观察3组治疗前后的骨密度、疼痛症状评分、骨代谢指标及脆性骨折发生率的改善情况。结果:治疗前后比较,3组均能有效防止骨密度下降;骨痛症状有不同程度的改善;骨吸收得到显著抑制;脆性骨折发生率也明显降低(P<0.05)。联用组与单用组相比,联用组的各项指标均优于骨松益骨方组和阿仑膦酸钠组(P<0.05)。结论:骨松益骨方和阿仑膦酸钠均可改善脾肾气虚血瘀型原发性骨质疏松症患者的疼痛症状,提高骨密度,降低骨转换,联用效果更佳。

基于肠道菌群及其代谢物探析骨松益骨方抗绝经后骨质疏松症

绝经后卵巢功能衰竭引起的雌激素缺失是绝经后骨质疏松症(postmenopausal osteoporosis,PMOP)的诱发因素,而且雌激素缺乏也会诱发肠道菌群失调,最终促使骨的吸收及破骨细胞的激活。肠道菌群紊乱易引起肠道上皮细胞屏障功能损伤,使有害代谢物可以顺利透过肠道屏障入血,诱发机体T细胞免疫反应,生成大量促破骨细胞生成因子,促使破骨细胞激活及骨的吸收,引发骨质疏松。中药复方具有多组分、多靶点、多层次、见效快等特点,在调节肠道菌群方面优势突出,对维持肠道内有益菌和有害菌的平衡起重要作用。骨松益骨方由当归、淫羊藿、杜仲、黄芪等组成,方中黄芪、党参、当归等皆可促进肠道益生菌的增长、抑制有害菌的增殖,从而调节肠道菌群的组成。

基于PI3K/Akt信号通路的骨松益骨方对去势大鼠的骨保护作用

目的基于网络药理学和动物实验探究骨松益骨方(黄芪、党参、当归等组成)治疗绝经后骨质疏松症(postmenopausal osteoporosis,PMOP)的机制。方法通过TCMSP分析平台收集骨松益骨方活性成分、对应靶点;GeneCards、TTD等数据库收集疾病靶点;运用R语言将共同靶点取交集,绘制韦恩图;STRING数据库构建蛋白质互作网络;最后对所得共同靶点进行GO功能富集、KEGG通路富集。动物实验采用去卵巢SD大鼠动物模型,骨松益骨方灌胃12周,HE染色观察骨组织形态变化,分别采用qRT-PCR和Western Blot法检测胫骨近端骨组织中PI3K和Akt mRNA和蛋白质的表达。结果获得骨松益骨方治疗绝经后骨质疏松症的91个活性成分、70个药物与疾病共有靶点;GO富集分析主要包含DNA结合转录激活剂活性、RNA聚合酶Ⅱ特异性,泛素蛋白连接酶结合等生物功能;KEGG通路主要包括PI3K/Akt信号通路、肿瘤坏死因子信号通路、细胞凋亡等相关通路。动物实验表明骨松益骨方组骨组织形态明显改善,PI3K、Akt mRNA及蛋白的表达水平均明显升高(P<0.01)。结论骨松益骨方可能通过多通路、多靶点改善骨微结构,可能通过激活PI3K/Akt信号通路提高骨小梁数量、厚度,降低骨小梁分离程度,从而发挥抗绝经后骨质疏松作用。

益肾活血法对原发性骨质疏松症患者骨密度、骨代谢及脆性骨折发生率的影响

目的观察益肾活血法治疗原发性骨质疏松症(OP)的临床疗效。方法 240例原发性OP患者随机分为实验组150例和对照组90例,实验组中肾阳虚血瘀证、肾阴虚血瘀证、脾肾亏虚血瘀证各50例,分别服用骨松强骨方、骨松健骨方、骨松益骨方;对照组中肾阳虚血瘀证、肾阴虚血瘀证、脾肾亏虚血瘀证各30例,均服用仙灵骨葆胶囊。两组均治疗12周,随访至48周。检测治疗前后两组患者骨密度、血清骨特异性碱性磷酸酶(BALP)和Ⅰ型胶原交联C端肽(β-CTX)水平,观察治疗前和治疗后48周时脆性骨折发生率的情况。结果实验组肾阳虚血瘀证、脾肾亏虚血瘀证骨密度疗效总有效率分别为83.33%、89.8%,明显高于对照组的50.00%、37.93%(P<0.05)。实验组肾阳虚血瘀证、肾阴虚血瘀证、脾肾亏虚血瘀证治疗后β-CTX水平、脆性骨折发生率较治疗前均明显下降(P<0.05或P<0.01);并且实验组肾阳虚血瘀证、脾肾亏虚血瘀证与同证型对照组治疗后比较,β-CTX、脆性骨折发生率下降更明显(P<0.05或P<0.01)。结论益肾活血法可有效抑制原发性OP患者骨吸收,防止骨密度下降,降低脆性骨折发生率。