左归丸对骨质疏松症大鼠GPR48、ATF4、BSP表达影响的实验研究

目的:通过研究摘除卵巢致肾虚骨质疏松症大鼠血清中GPR48、ATF4、BSP的蛋白表达,探讨摘除卵巢致肾虚骨质疏松症的病理机制,并研究左归丸防治疗效及其作用机制。方法:摘除雌性大鼠双侧卵巢的方法复制肾虚骨质疏松症模型,采用具有补肾作用的左归丸对实验大鼠治疗12周,以盖天力片作为阳性对照组,正常大鼠、假手术组作为标准对照组,模型大鼠作为空白对照组,用ELISA法检测肾虚骨质疏松症大鼠血清GPR48、ATF4、BSP的蛋白表达。结果:ELISA方法检测表明:正常大鼠血清中存在GPR48、ATF4、BSP的蛋白表达。模空组大鼠血清中GPR48、ATF4、BSP的蛋白表达水平有明显的下降。左归丸组、盖天力组用药12周后,与模空组相比较,左归丸组可显著上调血清中GPR48、ATF4、BSP的蛋白表达水平。结论:1正常大鼠血清中存在GPR48、ATF4、BSP的蛋白表达;2血清中GPR48、ATF4、BSP的蛋白表达异常变化可能是导致骨质疏松症发生的机理之一;3左归丸能够调控GPR48、ATF4、BSP的蛋白表达,表明左归丸对骨质疏松症有一定的防治作用。

P.g.LPS诱导的miR-19a调控hPDLFs中TLR2及BSP的表达

运用过表达或抑制miR-19a表达技术转染人牙周膜成纤维细胞(hPDLFs),检测Toll样受体2(TLR2)和骨涎蛋白(BSP)的mRNA及蛋白表达水平。结果表明,过表达miR-19a可以抑制TLR2、上调BSP的表达。

不同正畸力对大鼠磨牙牙根发育的影响

目的:探讨不同大小的正畸力对大鼠磨牙牙根发育的影响。方法:取5周龄健康雄性SD大鼠96只,随机分为3个实验组和1个空白对照组(n=24)。对3个实验组大鼠建立正畸模型后,分别对其施加50(A组)、75(B组)、100 g(C组)的正畸力;空白对照组大鼠不做任何处理。分别于正畸加力后1、3、7、14 d各时间点每组随机处死6只大鼠,取其左侧上颌骨并拍摄CBCT,比较大鼠第一磨牙近中根的长度;然后对颌骨进行连续切片后,进行HE染色及BSP、MMP-9免疫组化染色。结果:CBCT测量结果显示,与空白对照组相比,第一磨牙近中根长度B组在加力后14 d时及C组在加力后7、14 d时均有统计学差异(P<0.05)。免疫组化染色结果显示,与空白对照组相比,B组在加力后14 d时BSP表达下调(P<0.05),而在7 d时MMP-9表达开始上调(P<0.05);C组在加力7 d时BSP表达下调、14 d时达到峰值(P<0.05),从加力3 d时,MMP-9随着加力时间的延长其表达水平逐渐升高(P<0.05)。结论:BSP及MMP-9的表达均与正畸力值大小及加力时间相关,其中100 g的正畸力对大鼠牙根发育影响较大。

过表达Runx2基因对牙髓细胞分化相关基因的影响

目的探讨Runt相关转录因子(Runx)2基因在人牙髓细胞向成牙本质细胞分化过程中的作用。方法通过矿化诱导培养基(1μmolβ-磷酸甘油钠、10^(-6)μmol地塞米松和5 mg抗坏血酸)建立牙髓细胞向成牙本质细胞分化模型,通过检测碱性磷酸酶(ALP)的活性鉴定模型。将过表达载体pc DNA3.1-Runx2和空载体pc DNA3.1(阴性对照组)转染牙髓细胞,蛋白质免疫印迹法检测转染后细胞中Runx2蛋白的表达量;实时定量PCR(qRT-PCR)检测细胞中成牙本质细胞分化相关基因牙本质涎磷蛋白(DSPP)、骨涎蛋白(BSP)mRNA的表达。结果在人牙髓细胞向成牙本质细胞分化的过程中,ALP的活性含量逐渐增加,第14天的水平显著大于第7天(P<0.05)。与阴性对照组相比,pc DNA3.1-Runx2组细胞中Runx2蛋白的表达量显著升高(P<0.05);在分化诱导的第7和14天,细胞中DSPP mRNA(P<0.05)、BSP mRNA(P<0.05)均显著高于阴性对照组。结论 Runx2通过增加成牙本质细胞分化相关基因的表达,从而促进牙髓细胞向成牙本质细胞分化。