骨痹消对兔骨性膝关节炎软骨细胞p53、Bcl-2表达的影响

目的探讨骨痹消对兔实验性膝关节骨性关节炎(KOA)的治疗作用。方法参照文献[1]介绍的伸膝制动方法复制KOA动物模型,并随机分为正常组(A组)、模型组(B组)、骨痹消组(C组),治疗6周、10周后采用免疫组化技术测各组软骨细胞p53、Bcl-2表达。结果与正常组比较,模型组Bcl-2、p53表达增高,且其表达水平随着病程(6w、10w)呈正相关,骨痹消组用药6w及10w时Bcl-2的表达随时间的延长呈逐渐增强的趋势,较模型组相比呈显著性差异(P<0.01),同时p53的阳性表达明显下降,与模型组相比均呈显著性意义(P<0.01)。结论抑凋亡(APO)基因Bcl-2和促APO基因p53共同参与了软骨细胞APO的调节,骨痹消可通过上调Bcl-2、下调p53表达,以保护软骨细胞,防止发生APO。

骨痹消对兔骨关节炎软骨细胞凋亡的影响

目的探讨中药早期治疗对兔实验性膝关节骨性关节炎(KOA)软骨细胞凋亡的影响。方法参照Okazaki等[1]伸膝制动OA动物模型法造模,随机分为正常组(A组)、模型组(B组)、骨痹消组(C组),于治疗6周、10周后测各组兔血清NO水平变化;软骨电镜结构及TUNEL法软骨细胞凋亡指数(AI)。结果 B组血清NO水平逐渐升高,C组有不同程度的降低;B组电镜下6周时可见凋亡细胞,10周可见凋亡小体;TUNEL法细胞凋亡原位检测:B组软骨细胞AI明显增高。治疗后C组下降明显,10周时与B组相比具极显著差异(P<0.01)。结论骨痹消在一定程度上阻断软骨细胞凋亡,减少细胞凋亡数量,促进软骨的修复。

骨痹消对大鼠佐剂性关节炎血清中TNF-α、IL-1β、IL-6水平的影响

目的:观察骨痹消对关节损伤的防治作用及机制,为AS的治疗提供实验依据。方法:取Wistar雄性大鼠40只,随机分为4组,每组10只。分别为模型组、中药组、罗非西布组、对照组。用佛氏佐剂注射于模型组、中药组、罗非西布组大鼠左后足掌皮下,造佐剂性关节炎模型;对照组注射等量生理盐水。中药组和罗非西布组分别灌胃给中药水煎剂2ml/200g、罗非昔布2ml/200g(0.2mg),模型组和对照组灌胃给自来水2ml/200g,每天灌胃1次。结果:在使用中药骨痹消方后,大鼠血清TNF-α、IL-1β、IL-6水平均显著下降。结论:中药骨痹消对大鼠佐剂性关节炎有一定的治疗作用,可减轻炎症反应和关节肿胀,改善关节功能,其机制可能与下调TNF-α、IL-1β、IL-6,抑制炎症反应有关。

骨痹消痛散加推拿手法治疗退行性膝关节炎41例

目的:观察骨痹消痛散加推拿手法治疗退行性膝关节炎的临床疗效。方法:将73例患者随机分为治疗组和对照组,治疗组41例采用骨痹消痛散加推拿手法治疗,对照组32例采用单纯推拿治疗,疗程20 d,观察治疗前后的疼痛、压痛、肿胀、活动度及肌肉萎缩等症状和体征。结果:经统计学处理,治疗组疗效优于对照组(P<0.05)。结论:骨痹消痛散加推拿手法治疗退行性膝关节炎的疗效优于单纯推拿治疗。

骨痹消对兔骨关节炎软骨、滑膜组织病理学变化的影响

目的:探讨骨痹消对兔实验性膝关节骨性关节炎(KOA)关节软骨及滑膜的保护作用。方法:参照Okazaki等[1]介绍的伸膝制动方法建立KOA动物模型,并随机分为正常组(A组)、模型组(B组)、塞来昔布组(C组)、骨痹消组(D组)、壮骨关节丸组(E组),并于分组治疗6周、10周后观测各组软骨及滑膜组织形态。结果:光镜下B组6周软骨细胞排列紊乱,核固缩,胞内成份减少,胶原轻度纤维变性。10周细胞簇集,核固缩,胶原纤维明显,各组间关节软骨病理学变化评分比较有统计学意义;光镜下B组6周滑膜上皮增生,胞间炎细胞浸润。10周滑膜上皮重度增生,细胞肥大,大量肉芽组织增生,大量血管长入,炎细胞浸润。C、D、E组病变较B组有不同程度的减轻,以D组最佳。结论:骨痹消可促进软骨细胞代谢及软骨修复,维持软骨结构的相对完整;抑制滑膜炎性改变,减少滑膜炎性物质释放入关节腔,阻碍炎性滑膜对软骨的破坏。

骨痹消对兔实验性膝关节骨性关节炎氧自由基代谢的影响

目的:探讨骨痹消对兔实验性膝关节骨性关节炎血清中超氧化物歧化酶(SOD)活性及脂质过氧化的产物丙二醛(MDA)含量的影响。方法:按陈崇伟等[1]介绍的伸膝制动方法建立膝关节骨性关节炎动物模型,并随机分为正常空白组(A组)、模型组(B组)、塞来昔布组(C组)、骨痹消组(D组)、壮骨关节丸组(E组),并于分组治疗6周、10周后检测血清中SOD、MDA含量。结果:用药6周、10周后,D组动物SOD含量显著高于B组、C组和E组,而MDA含量显著低于B组、C组和E组。结论:骨痹消能提高抗氧化酶的活性,抗质脂过氧化,抑制氧自由基对软骨细胞及基质的损害,从而起到防止并延缓关节软骨的退变的作用。

骨痹消巴布剂中祖师麻甲素高效液相色谱法含量测定

目的 建立骨痹消巴布剂中祖师麻甲素含量测定的高效液相色谱(HPLC)法。方法 色谱柱采用Agilent ZORBAX C^(18)柱(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相为甲醇-0.5%磷酸(20∶80);检测波长为327 nm;柱温40℃;流速为1.0 mL/min。结果祖师麻甲素进样量在0.108~0.540μg范围内与峰面积线性关系良好,r=0.9997,平均回收率为100.50%,RSD=1.77%(n=9)。结论 本方法简便易行、灵敏准确,重现性好,可用于骨痹消巴布剂的质量控制。

骨痹消痛汤治疗肾虚血瘀型膝骨关节炎疼痛30例

膝关节骨性关节炎（OA）是一种多见于中老年人的以膝滑膜关节伴有关节周围骨质增生为特点的骨关节临床常见疾病，严重影响中老年人的健康和生活质量。笔者应用导师自拟骨痹消痛汤治疗膝骨关节炎（肾虚血瘀型）的疼痛，取得较好的疗效，现报告如下。

参麦注射液关节腔注射配合骨痹消痛汤治疗膝关节骨性关节炎疗效观察

目的;观察参麦注射液关节腔注射配合骨痹消痛汤治疗膝关节骨性关节炎的临床疗效。方法：将2011年3月～2013年6月门诊就诊患者112例，随机分为治疗组57例与对照组55例，治疗组予以参麦注射液关节腔注射配合骨痹消痛汤治疗，对照组予以玻璃酸钠关节腔注射治疗。比较组间及治疗前后膝关节AKS评分及临床疗效。结果：总有效率治疗组为94．7％，对照组为72．7％，2组比较，差异有显著性意义（P〈0．05）。2组治疗前后AKS膝评分比较，差异均有显著性意义（P〈0．05）；2组治疗后组间比较，差异也有显著性意义（P〈0．05）。2组治疗前后AKS功能评分比较，差异均有显著性意义（P〈0．05）；2组治疗后组间比较，差异也有显著性意义（P〈0．05）。结论：参麦注射液关节腔注射配合自拟骨痹消痛汤治疗膝关节骨性关节炎既能减轻膝关节因炎症引起的关节疼痛，又能改善关节活动功能，疗效确切，值得更好地在基层医院中推广应用。

自拟骨痹消痛散热敷治疗骨性关节炎关节肿痛84例临床观察

目的:观察自拟骨痹消痛散外敷治疗骨性关节炎关节肿痛的疗效。方法:骨痹消痛散热敷治疗84例骨性关节炎患者,每次30～60min,1～2次/d。结果:总有效率97.6%。结论:自拟骨痹消痛散热敷治疗骨性关节炎关节肿痛疗效肯定。

骨痹消热敷散中医定向透药治疗膝关节骨性关节炎临床观察

目的:观察骨痹消热敷散中医定向透药治疗膝关节骨性关节炎的临床疗效。方法:56例随机分为对照组和观察组各28例,对照组给予骨通贴膏外敷膝关节痛点,观察组给予骨痹消热敷散中医定向透药。结果:治疗后两组VAS疼痛评分均降低,观察组低于对照组(P<0.05)。总有效率对照组85.71%、观察组96.42%,两组比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论:骨痹消热敷散中医定向透药治疗膝关节骨性关节炎效果较好。

骨痹消积方熏洗联合透明质酸钠关节腔灌注治疗膝骨关节炎的疗效及对CRP、TNF-α、关节功能的影响

目的:观察骨痹消积方熏洗联合透明质酸钠关节腔灌注治疗膝骨关节炎(knee osteoarthritis,KOA)的疗效及对C反应蛋白(CRP)、肿瘤坏死因子(TNF)-α、关节功能的影响。方法:将168例KOA患者随机分为治疗组和对照组,每组84例。对照组给予透明质酸钠关节腔灌注治疗,每次2 mL,7 d灌注1次,共治疗5次。治疗过程中注意观察患者是否出现严重的药物不良反应,若出现严重药物不良反应则及时停止治疗。治疗组在对照组治疗基础上给予骨痹消积方(药物组成:红花、桃仁、赤芍、川芎、鸡血藤、当归、木瓜、伸筋草、苏木、延胡索、透骨草、海桐皮、威灵仙、牛膝)熏洗治疗,每日1次,每次熏蒸30 min。两组均以7 d为1个疗程,共治疗5个疗程。结果:治疗组治愈10例,显效45例,有效20例,无效9例,有效率为89.29%(75/84);对照组治愈5例,显效35例,有效13例,无效31例,有效率为63.10%(53/84)。两组疗效对比,差异有统计学意义(P<0.05)。治疗后,两组CRP、TNF-α水平降低,且治疗组低于对照组,差异具有统计学意义(P<0.01);两组视觉模拟评分法评分降低,膝关节主观症状评分量表评分升高,且治疗组优于对照组,差异具有统计学意义(P<0.01);两组疼痛、僵硬、关节功能等积分均明显下降,且治疗组低于对照组,差异具有统计学意义(P<0.01)。两组不良反应发生率比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论:骨痹消积方联合透明质酸钠关节腔灌注治疗KOH,能够有效降低患者的炎症反应及疼痛感,促进膝关节功能恢复。

骨痹消胶囊对膝骨性关节炎患者血浆SOD、MDA、NO的影响

目的探讨口服骨痹消胶囊对膝骨性关节炎(OA)患者血浆SOD、MDA、NO的影响。方法25例膝OA患者给予骨痹消胶囊口服,分别测量患者在用药前、1周后、3周后、7周后血浆SOD、MDA、NO的水平。结果用药1周后与用药前血浆SOD比较有显著提高(P<0.05),MDA、NO无明显差别(均P>0.05);用药3周后SOD极显著明显上升(P<0.01),MDA、NO明显下降(均P<0.05);用药7周后均有极显著性差异(均P<0.01)。结论骨痹消胶囊能有效改善膝OA患者异常的自由基代谢,降低NO的水平。

自拟骨痹消止痛膏外敷治疗膝痹临床观察

目的观察运用自拟中药“骨痹消止痛膏”外敷治疗“膝痹”的临床疗效。方法选取南阳市卧龙区中医院中医特色疼痛专科自2017年9月—2020年9月门诊住院收治212例患者,根据DR影像诊断患者病灶特点进行分类,按病情轻、中、重分为Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ3组进行治疗观察。其中治疗组116例,分为Ⅰ组26例、Ⅱ组68例、Ⅲ组22例;对照组96例,分为Ⅰ组23例、Ⅱ组56例、Ⅲ组17例。结果治疗组治愈率、有效率均显著优于对照组,2组疗效比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论自拟中药“骨痹消止痛膏”外敷治疗“膝痹”疗效满意。

骨痹通消颗粒干预激素性股骨头坏死小鼠模型的作用及机制

背景:研究发现,糖皮质激素可抑制甲状旁腺素1受体(parathyroid hormone typeⅠreceptor,PTH1R)/蛋白激酶A(protein kinase A,PKA)信号轴中关键基因表达,干扰骨髓间充质干细胞向成骨、成血管方向分化,导致骨内血供、骨组织结构的破坏。课题组前期研究结果表明骨痹通消颗粒可诱导血管形成、抑制成骨细胞凋亡,对激素性股骨头坏死具有一定的防治作用,其机制尚未明确。目的:观察骨痹通消颗粒对激素性股骨头坏死模型小鼠的治疗效果,从PTH1R/PKA信号轴探讨其作用机制。方法:采取腹腔注射脂多糖和臀肌注射醋酸泼尼松龙建立激素性股骨头坏死模型,将造模成功的60只C57小鼠随机分成模型组、骨痹通消颗粒组和通络生骨胶囊组,每组20只,另选取12只健康小鼠作为正常对照组,分别灌胃相应药物12周后,苏木精-伊红染色观察股骨头组织形态学变化,酶联免疫吸附测定法检测血清中骨碱性磷酸酶、Ⅰ型氨基端延长肽、甲状旁腺激素、骨钙素、碱性磷酸酶水平,Western blot和RT-qPCR法检测股骨头组织中PTH1R、PKA、MEF2、SOST、GNAS的蛋白及基因表达水平。结果与结论:骨痹通消颗粒可能通过降低小鼠血清甲状旁腺激素水平,抑制PTH1R/PKA信号轴的激活,进一步上调SOST、MEF2的表达,提高骨碱性磷酸酶、Ⅰ型氨基端延长肽、骨钙素、碱性磷酸酶水平,从而改善股骨头坏死情况,与通络生骨胶囊干预效果相当,推测骨痹通消颗粒可能通过调节PTH1R/PKA信号轴发挥防治激素性股骨头坏死的作用。

基于PI3K/AKT/mTORC信号通路探讨骨痹通消颗粒对人骨髓间充质干细胞成脂分化负性调节的机制研究

目的:观察骨痹通消颗粒对人骨髓间充质干细胞(hBMSCs)成脂分化的影响,探讨其防治激素性股骨头坏死(SANFH)的作用机制。方法:收集接受髋关节置换术的SANFH患者的骨髓组织,采用全骨髓贴壁法分离培养原代细胞并通过流式细胞术鉴定其表型。CCK-8法检测骨痹通消颗粒含药血清对hBMSCs增殖的影响,油红O、茜素红染色、RT-qPCR和Western blot检测骨痹通消颗粒含药血清作用后,hBMSCs骨脂分化、过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARγ)、胆固醇调节原件结合蛋白(SREBP)、人骨形态发生蛋白(BMP2)、生长转化因子β1(TGF-β1)mRNA和通路蛋白的表达情况。结果:不同体积分数的骨痹通消颗粒含药血清均可促进hBMSCs增殖,且存在着一定的量效和时效关系,尤以5%组作用48 h时促进细胞增殖最为明显;与模型组比,5%含药血清作用后可明显减少胞质中的脂滴着色进而增加钙盐沉积处的橙红色矿化结节(P<0.05),同时下调细胞中PPARγ、SREBP mRNA和上调BMP2、TGF-β1 mRNA表达水平(P<0.05);此外,骨痹通消颗粒含药血清还可明显降低细胞中PI3K、p-AKT和mTORC等蛋白表达水平,上调Maf1蛋白表达(P<0.05)。结论:骨痹通消颗粒可以负性调节hBMSCs的成脂分化,促进成骨分化,进而发挥治疗SANFH的作用,其机制可能与调控PI3K/AKT/mTORC信号通路有关。

基于RANKL/RANK/OPG信号轴探讨骨痹通消颗粒对激素性股骨头坏死模型小鼠的治疗作用

目的观察骨痹通消颗粒对激素性股骨头坏死模型小鼠的治疗作用,并从核因子-κB受体活化因子配体/核因子-κB受体活化因子/骨保护素(RANKL/RANK/OPG)信号轴探讨其作用机制。方法采取腹腔注射脂多糖和臀肌注射醋酸泼尼松龙复制激素性股骨头缺血坏死(SONFH)动物模型,经核磁共振鉴定后,将模型复制成功的60只小鼠分成模型(MC)组、骨痹通消颗粒(GBTX)组及通络生骨胶囊(PC)组,每组20只,另设12只正常小鼠作为空白对照(NC)组。分别予以对应组灌胃相应药物12周后麻醉状态下取材,观察各组小鼠治疗前后的一般行为;酶联免疫吸附试验(ELISA)检测各组小鼠的骨碱性磷酸酶(BALP)和I型氨基端延长肽(PINP)含量;Western blotting和实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-qPCR)检测各组RANK、RANKL、OPG、磷脂酰肌醇特异性磷脂酶Cγ2(PLCγ2)、组织蛋白酶K(CTSK)、抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)的蛋白和基因表达。结果核磁共振显示,模型复制成功后的小鼠左侧髋部呈高信号状态。与NC组比较,MC组BALP、PINP水平,以及OPG蛋白和基因相对表达量均降低(P<0.05),RANK、RANKL、PLCγ2、CTSK、TRAP蛋白和基因相对表达量均升高(P<0.05);与MC组比较,GBTX组和PC组BALP、PINP水平,以及OPG蛋白和基因相对表达量均升高(P<0.05),RANK、RANKL、PLCγ2、CTSK、TRAP蛋白和基因相对表达量均下降(P<0.05);与GBTX组比较,PC组OPG、RANK、RANKL、CTSK、TRAP蛋白和基因相对表达量,以及PLCγ2蛋白相对表达量差异均无统计学意义(P>0.05),而PC组PLCγ2基因相对表达量较GBTX组下降(P<0.05)。结论骨痹通消颗粒可能通过上调OPG表达,抑制RANK、RANKL、PLCγ2、CTSK和TRAP表达,从而改善股骨头坏死情况。

骨痹消对佐剂性关节炎兔关节软骨TNF-α、IL-1水平的影响

目的:观察骨痹消对佐剂性关节炎兔软骨中肿瘤坏死因子(tumor necrosis factor alpha,TNF-α)、白细胞介素1(interleukin-1,IL-1)水平的影响,探寻骨痹消治疗骨关节炎的作用机制。方法:取新西兰兔40只,雌雄各半,体质量450 g左右,其中10只为空白对照组,其余30只采用佛氏佐剂诱导兔关节炎模型。模型制作成功后,随机分为模型组、西药组、中药组,连续给药9d。中药组和西药组分别灌胃给予中药骨痹消水煎剂0.01 m L·g-1、罗非西布0.01 m L·g-1(0.2 mg),对照组和模型组灌胃给自来水0.01 m L·g-1,每天灌胃1次,常规饲养,给药9 d后取材,采用ELISA法测定兔关节软骨中TNF-α、IL-1含量。结果:中药组干预后兔关节软骨中TNF-α质量浓度为(19.52±1.84)μg·L-1、IL-1质量浓度为(54.95±7.24)ng·L-1,与正常组相比较,其余各组兔软骨中TNF-α、IL-1水平均显著升高(P<0.05);模型组兔软骨中TNF-α、IL-1水平显著高于中药组和西药组(P<0.05);但中药组兔软骨中TNF-α、IL-1水平显著低于西药组(P<0.05)。结论:骨痹消可抑制骨关节炎兔软骨细胞产生IL-1和TNF-α,这可能是骨痹消治疗佐剂性关节炎作用机制之一。

中药骨痹通消颗粒通过调控Wnt/β-catenin通路治疗激素性股骨头坏死的实验研究

目的通过动物实验探讨中药骨痹通消颗粒通过调控Wnt/β-catenin通路治疗激素性股骨头坏死的价值。方法将造模成功的激素性股骨头坏死大白兔随机分为3组模型组、碳酸钙组与中药组,每组13只。模型组用生理盐水灌胃治疗,碳酸钙组碳酸钙D3颗粒治疗,中药组给予骨痹通消颗粒治疗。记录实验动物的变化情况与股骨头Wnt/β-catenin蛋白表达水平变化情况。结果碳酸钙组与中药组给药后6周、8周的体质量高于模型组,中药组高于碳酸钙组,对比差异都有统计学意义(P<0.05)。碳酸钙组与中药组给药后6周、8周血清超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)含量高于模型组,丙二醛(malondialdehyde,MDA)含量低于模型组,对比差异有统计学意义(P<0.05),碳酸钙组与中药组对比差异也有统计学意义(P<0.05)。碳酸钙组与中药组给药后8周的股骨应变能力、最大载荷都高于模型组,中药组高于碳酸钙组,对比差异都有统计学意义(P<0.05)。碳酸钙组与中药组给药后8周的股骨Wnt、β-catenin蛋白相对表达水平高于模型组,中药组高于碳酸钙组,对比差异都有统计学意义(P<0.05)。模型组镜下见软骨细胞减少、成骨细胞减少,骨细胞固缩或消失;碳酸钙组骨小梁出现骨质紊乱、扭曲、毛糙,髓腔内脂肪细胞体积增大;中药组股骨头软骨细胞数量正常,排列规则,空骨陷窝较少。结论中药骨痹通消颗粒在激素性股骨头坏死实验动物中的应用能激活Wnt/β-catenin通路,改善股骨的生物力学状况,有利于维持正常机体氧自由基产生与清除处于平衡状态,从而发挥积极的治疗作用。

中药骨痹通消颗粒干预激素性股骨头坏死模型兔的细胞凋亡

背景:股骨头坏死属于中医"骨痿"范畴,其疼痛是风寒瘀血阻滞造成的。而中药骨痹通消颗粒具有补肾壮骨、活血通络等功效,临床应用有效果,但其治疗机制尚不清晰。目的:分析中药骨痹通消颗粒对激素性股骨头坏死的治疗效果,并研究其对细胞凋亡的影响,为中药骨痹通消颗粒的临床应用提供一定的实验依据。方法:纳入54只健康家兔,随机分为对照组、模型组和治疗组,每组18只。对照组不作处理,模型组与治疗组均制备激素性股骨头坏死模型,造模成功后模型组生理盐水灌胃,治疗组给予骨痹通消颗粒灌胃治疗,1次/d,持续12周。治疗后4,8,12周,各组分别处死6只动物,取出双侧股骨头,检测股骨头坏死空骨陷窝率、细胞凋亡指数,并置于光镜下进行观察。结果与结论:(1)治疗后不同时间点对照组与治疗组股骨头坏死空骨陷窝率显著低于模型组(P<0.05);(2)光镜观察可见,对照组的股骨头坏死空骨陷窝情况基本维持不变;模型组第4周时存在明显的骨空陷窝,并随着时间的延长,数量逐渐增多,断裂现象明显;治疗组第4周时存在一定的骨空陷窝,随时间延长,空骨陷窝进一步减少;(3)治疗后不同时间点,对照组与治疗组的细胞凋亡指数显著低于模型组(P<0.05);(4)结果提示,中药骨痹通消颗粒治疗激素性股骨头坏死家兔模型效果显著,可有效减少细胞凋亡,并改善坏死部位的病理变化。