基于Toll样受体4通路研究黄芪甲苷促进成骨细胞增殖分化的作用

目的研究黄芪甲苷促进成骨细胞增殖分化的作用,并初步探讨作用机制。方法将成骨细胞MC3T3-E1分为对照组和实验组,对照组正常培养成骨细胞,实验组采用不同浓度黄芪甲苷干预成骨细胞,并孵育不同时间,MTT法观察对细胞增殖的影响,检测碱性磷酸酶(ALP)活性观察对细胞分化的作用,Western blot检测成骨细胞Toll样受体-4(TLR-4)蛋白表达。结果与对照组比较,随着黄芪甲苷浓度的增加,成骨细胞活性或ALP活性逐渐上升,并趋于稳定。延长黄芪甲苷作用时间,低浓度组细胞活性显著升高,而各组细胞ALP活性均显著上升。与对照组比较,实验组细胞中TLR-4表达显著下降。结论黄芪甲苷能够促进成骨细胞增殖和分化,其作用机制可能与TLR-4通路有关。

成骨细胞Toll样受体4信号通路研究进展

Toll样受体4(TLR4)为天然免疫的关键模式识别受体,在骨丢失发病机制中发挥重要作用。TLR4通路与影响成骨细胞的其他通路如Wnt/β-catenin、TGF-β/BMP、Notch通路间存在密切联系。TLR4通路通过抑制NF-κB配体受体活化剂(RANKL)、骨保护素(OPG)、碱性磷酸酶(ALP)等成骨相关标志物表达抑制成骨细胞的分化、增殖、矿化等。TLR4通路还能促进成骨细胞凋亡、降低骨密度。本文就TLR4结构、功能及其对成骨细胞的作用进行综述。

Toll样受体4在成骨细胞共培养体系中对干细胞向破骨细胞分化的影响及机制

目的:探索Toll样受体(Toll like receptor,TLR)-4在成骨细胞共培养体系中对干细胞向破骨细胞分化的影响及机制。方法:Percoll密度梯度离心法分离原代大鼠骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs),流式细胞术鉴定细胞表面标志物CD34、CD44、CD54、CD90。用Transwell小室建立干细胞(上室)-成骨细胞(下室)共培养体系,在此体系下对BMSCs进行破骨细胞诱导培养。将共培养体系分为TLR-4激活组和空白组,前者以TLR-4激动剂LPS(10 ng/m L)激活,后者加入等体积PBS。在诱导培养第6天,对上室细胞行抗酒石酸酸性磷酸酶(tartrate resistant acid phosphatase,TRAP)染色,计数并比较各组破骨细胞数。同时,蛋白质印迹检测各组下室细胞悬液中核因子κB受体活化因子配体(receptor activator for nuclear factor-κB ligand,RANKL)的蛋白表达,观察电泳条带并行定量分析。结果:密度离心法获得原代大鼠BMSCs,流式细胞分析检测显示CD34阴性、CD44、CD54和CD90阳性。TRAP染色阳性细胞为破骨细胞,细胞计数显示,TLR-4激活组破骨细胞数明显多于空白组(t=13.556,P<0.05)。蛋白质印迹结果显示,TLR-4激活组RANKL的表达明显多于空白组(t=17.630,P<0.05)。结论:在成骨细胞共培养体系下,激活TLR-4能够促进BMSCs向破骨细胞分化,其机制可能与TLR-4促进成骨细胞分泌RANKL有关。

人重组骨形成蛋白-4与人重组胰岛素样生长因子-Ⅰ联合应用对大鼠成骨细胞的影响

目的探讨人重组骨形成蛋白-4(recombinant human bone morphogenetic protein-4,rhBMP-4)与人重组胰岛素样生长因子-Ⅰ(recombinant human insulin-like growth factor-Ⅰ,rhIGF-Ⅰ)联合应用对大鼠成骨细胞生长增殖及分化能力的影响。方法取大鼠颅盖骨组织块,采用改良组织块混合酶消化法培养成骨细胞,将第四代成骨细胞与10 ng/mL rhBMP-4(rhBMP-4组)、10 ng/mL rhIGF-Ⅰ(rhIGF-Ⅰ组)、10 ng/mL rhBMP-4加10ng/mLrhIGF-Ⅰ(联合组)、无血清低糖培养基(对照组)共同培养3 d,用噻唑蓝法测定细胞的增殖情况,用碱性磷酸酶试剂盒检测细胞碱性磷酸酶的活性,用羟脯氨酸试剂盒检测成骨细胞分泌Ⅰ型胶原的量。结果第3天时,4组促进大鼠成骨细胞增殖能力测定的光密度值差异具有统计学意义(F=4.080,P=0.016),碱性磷酸酶活性差异具有统计学意义(F=4.070,P=0.016),成骨细胞分泌Ⅰ型胶原的差异具有统计学意义(F=3.204,P=0.038);与对照组相比,rhBMP-4组,rhIGF-Ⅰ组及联合组,都可增强成骨细胞的增殖分化能力,但rhBMP-4和rhIGF-Ⅰ联合应用不比单独应用的作用强。结论 rhBMP-4与rhIGF-Ⅰ联合应用,不能协同促进大鼠成骨细胞增殖及分化能力。

铝暴露对大鼠成骨细胞Toll样受体4表达的影响

目的通过观察toll样受体4(TLR4)在铝暴露大鼠成骨细胞中的表达,探讨铝的骨毒性分子机制。方法原代培养新生SD大鼠颅盖骨成骨细胞,分为对照组和铝暴露组,铝暴露组细胞用含有AlCl3(100μmol)的DMEM培养基培养,两组细胞分别培养0、12、24和48 h。Real-time RT-PCR方法检测各时间点成骨细胞中TLR4 mRNA表达;Western blotting检测各时间点成骨细胞TLR4蛋白的表达情况;MTT检测各组各时间点的细胞生存率情况。结果在12、24和48 h时间点,铝暴露各组细胞的TLR4 mRNA和蛋白表达明显高于对照组(P<0.05);在铝暴露各组中,与0 h组相比,TLR4 mRNA和蛋白表达随着时间的增加而增强(P<0.05);在12、24和48 h时间点,铝暴露各组细胞的生存率明显低于对照组;在铝暴露各组中,与0 h比较,成骨细胞的生存率随时间的增加而下降,呈时间依赖性(P<0.05)。结论铝暴露抑制成骨细胞生存率,可能与上调TLR4表达相关。

通络生骨胶囊含药血清对破骨细胞及Toll样受体4/核因子κB信号通路的影响

背景:在激素性股骨头坏死发病机制中Toll样受体4(Toll-link receptors 4,TLR4)信号通路异常发挥着重大的作用,调控TLR4有望成为有效治疗激素性股骨头坏死的突破点。目的:研究通络生骨胶囊对破骨细胞分化过程中TLR4信号传导通路的影响,了解通络生骨胶囊对破骨细胞分化抑制过程的分子生物学机制。方法:将28只12周龄的C57BL/6小鼠随机分为通络生骨胶囊高、中、低剂量灌胃组[设置0.91 g/(kg·d)为中剂量,该浓度剂量的2倍为高剂量,0.5倍为低剂量]和生理盐水灌胃组,每日1次,持续灌胃14 d。末次给药8 h后,通过腹主动脉取血来制备含药血清和对照血清组。采用核因子κB受体激活蛋白配体和巨噬细胞集落刺激因子诱导因子联合诱导RAW264.7细胞株,将细胞分为5组:正常组、生理盐水组、通络生骨胶囊含药血清低、中、高浓度组。经CCK-8法观察含药血清对细胞增殖的影响后,选择剂量浓度为20%的含药血清在诱导的第4天干预破骨细胞前体,每组分别在诱导24,48,72,96 h观察破骨细胞前体的生长形态及融合程度,第8天通过TRAP染色来观察破骨细胞的数目,通过Western blot检测关键蛋白TLR4、核因子κBp65的表达,ELISA检测细胞上清液肿瘤坏死因子α的水平。实验方案经广西中医药大学动物实验伦理委员会批准。结果与结论:①通络生骨胶囊低、中、高剂量组培养液中肿瘤坏死因子α水平均低于正常组(P <0. 01),通络生骨胶囊低剂量组与中剂量组之间差异无显著性意义;②通络生骨胶囊高、中、低剂量组TLR4蛋白表达均显著低于正常组(P <0.05);通络生骨胶囊组中剂量、高剂量组核因子κBp65蛋白表达显著低于正常组(P <0.05);其中TLR4、核因子κBp65蛋白的表达在通络生骨胶囊中剂量组中抑制效果最为有效;③结果说明,通络生骨胶囊治疗激素性股骨头坏死的机制之一可能是通过抑制TLR4//NF-κB信号通路,减少了下游的炎症因子肿瘤坏死因子α的释放,改善了激素性股骨头坏死中的炎症环境;另一方面又抑制了破骨细胞活性,使骨吸收减弱,改善了激素性股骨头坏死中的骨代谢平衡。

LPS介导TLR4/NF-κB信号转导对小鼠成骨细胞活性和凋亡的影响

目的探讨脂多糖(LPS)介导Toll样受体4(TLR4)/核转录因子(NF-κB)信号转导通路对小鼠成骨细胞活性和凋亡的影响。方法以体外培养的成骨细胞为模型,分为对照组与LPS组,均采用含10%胎牛血清的DMEM/F12培养液培养。对照组不予LPS刺激;LPS组在正常培养1 d后,加入10 mmol/L LPS,分别在培养4、6、12、24 h后,采用反转录-聚合酶链反应法(RT-PCR)测定细胞培养液TLR4和NF-κB mRNA表达水平,并进行形态学观察,测定成骨细胞活性及成骨细胞凋亡情况。结果(1)培养不同时间后,LPS组TLR4和NF-κB mRNA相对表达量均高于对照组(P <0.05),且随培养时间的延长,TLR4和NF-κB mRNA相对表达量增多(P <0.05);(2)LPS组培养4～24 h时的成骨细胞活性低于对照组,细胞凋亡率高于对照组(P <0.05);且LPS组随培养时间的延长,成骨细胞活性降低,细胞凋亡率上升(P <0.05)。结论 LPS可介导TLR4/NF-κB通路活化,上调TLR4和NF-κB mRNA表达,导致成骨细胞活性降低,促进其凋亡。

机械力对骨细胞诱导破骨细胞分化作用的影响

目的评估机械力对骨细胞诱导破骨细胞分化作用的影响。方法对MLO-Y4骨细胞施以12 dyn/cm2流体剪切力,在加力第1、2、4、6、12、24小时,收集加力后的细胞与同源性小鼠骨髓干细胞共存培养,于第9天进行抗酒石酸磷酸酶染色,计数并比较染色阳性的破骨细胞数目。采用逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)检测不同加力时间点上骨细胞骨保护因子(OPG)和破骨细胞分化因子(RANKL)mRNA表达的时序性变化。结果与未受流体剪切力刺激的骨细胞相比,受力后所有时间点MLO-Y4骨细胞诱导形成的破骨细胞数量均明显降低(P均<0.01)。MLO-Y4骨细胞的OPG mRNA表达在流体剪切力作用12 h内明显升高(P<0.001),RANKL mRNA在流体剪切力作用4 h内明显降低(P<0.05),RANKL/OPG比值在流体剪切力作用12 h内均明显降低(P<0.01);上述变化在加力24 h时与加力前的差异无统计学意义(P>0.05)。结论在12 dyn/cm2流体剪切力负载作用下,MLO-Y4骨细胞表现出抑制骨吸收的骨保护作用。随着机械负载时间延长,这种作用逐渐消失。

槲皮素通过抗骨相关细胞衰老作用治疗雌激素缺乏骨质疏松症的初步研究

目的通过体内外实验探究槲皮素对骨相关细胞衰老的影响,验证槲皮素通过抗骨相关细胞衰老作用对绝经后骨质疏松症的治疗作用。方法选取小鼠骨细胞样细胞MLO-Y4及成骨细胞样细胞MC3T3-E1,构建体外压力诱导的成熟前衰老(stress induced premature senescence, SIPS)模型,通过qRT-PCR法和细胞衰老相关β-半乳糖苷酶染色确定细胞衰老样变化,利用CCK-8法确定槲皮素体外工作浓度,验证槲皮素在骨相关细胞SIPS中的作用。建立去势小鼠骨质疏松模型,槲皮素灌胃给药,与经典雌激素疗法相比较,利用micro-CT扫描分析骨参数及骨微结构的变化,并通过qPCR检测小鼠皮质骨内衰老相关基因p21、p53,衰老相关分泌表型(senescence associated secretory phenotype, SASP)TNF-α、IL-6以及破骨相关基因TRAP、CTSK和成骨相关基因OCN、RUNX2的表达情况。结果体外实验证明槲皮素能有效抑制骨相关细胞SIPS样改变( P <0.05)。体内实验发现,给药12周后,相较对照组小鼠,槲皮素组小鼠股骨骨表面积与骨体积比值(BS/BV)和骨小梁分离度(Tb.Sp)显著降低( P <0.05),骨小梁数量(Tb.N)显著升高( P < 0.05),骨质疏松程度减轻,较雌激素疗法差异无统计学意义,并伴骨内SIPS相关基因p21、p53及SASP水平下调( P <0.05),成骨水平不受明显抑制。结论槲皮素可通过抑制细胞衰老挽救由雌激素缺乏导致的骨丢失;这可能成为绝经后骨质疏松症治疗的新手段。

Toll样受体4信号通路过度激活在大鼠激素性股骨头坏死中的作用

目的建立大鼠激素性股骨头坏死模型并研究Toll样受体4(TLR4)信号通路在激素性股骨头坏死中的作用机制。方法成年雄性SD大鼠随机分为模型组、干预组,每组各24只,按照甲强龙20mg/kg的剂量给予双侧臀大肌交替肌注造模,1周1次,共8周。其中干预组在每次激素注射后,同时给予10mg/kg TAK242药物静脉注射;另12只大鼠设为对照组,仅在同等条件下给予生理盐水肌注。在激素注射后的8、10、12周时分别以过量麻醉法处死各组动物,采用ELISA测定血清中抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)的含量,并对股骨头进行组织病理学观察和TRAP特异性染色观察。分别提取各组大鼠股骨头总mRNA和总蛋白,采用RT-PCR和Western blot技术检测TLR4、髓样细胞分化因子88(MyD88)、NF-κB p65和单核细胞趋化蛋白(MCP-1)的mRNA及蛋白的表达。结果模型组股骨头坏死的组织病理学表现明显,其中血清TRAP含量、TRAP特异性染色面积、各因子的mRNA和蛋白含量表达均较其他两组有统计学差异(P<0.05)。干预组与空白对照组的各指标检测结果差异均无统计学意义(P>0.05)。结论大剂量激素的使用可以引起TLR4信号通路过度激活从而介导激素性股骨头坏死的发生。

小干扰RNA沉默Toll样受体2/4基因对成骨细胞迁移和增殖的影响

目的 观察利用RNA干扰技术特异性阻断Toll样受体2/4（TLR2/TLR4）对大鼠成骨细胞迁移及增殖的影响.方法 构建TLR2/TLR4的小干扰RNA （siRNA）,转染成骨细胞后采用反转录-聚合酶链反应（RT-PCR）及Western blot法检测TLR2/TLR4的mRNA及蛋白的含量.采用Transwell小室法及噻唑蓝（MTF）法检测转染组和非转染组成骨细胞的迁移能力以及增殖能力,同时采用Western blot法检测各组细胞内核因子-κB （NF-κB）的含量.结果 针对TLR2及TLR4的siRNA可有效抑制其mRNA的表达,抑制率分别达到了94％及84％,同时也抑制了受体蛋白的表达,使其降低至对照组的48％及65％.当TLR2及TLR4表达受到抑制后成骨细胞的迁移能力下降至对照组的76％及59％,但细胞增殖比较差异无统计学意义（P＞0.05）,同时细胞内NF-κB活性降低,细胞核内NF-κB p65的含量降至对照组的47％及75％.结论 siRNA能够有效沉默TLR2/TLR4基因的表达,减弱细胞内NF-κB的活化,抑制成骨细胞迁移,表明成骨细胞的迁移通过TLR2/TLR4及NF-κB途径.

类风湿关节炎中白三烯B4间接分化破骨细胞的实验研究

目的探讨在类风湿关节炎(RA)中,白三烯B4(LTB4)能否通过促进核因子KappaB受体激活剂配体(RANKL)的表达,起到间接分化破骨细胞的作用。方法利用RA滑膜成纤维细胞(RAFLs)和人外周血单核细胞的共培养体系,对照组2.5ng/ml巨噬细胞集落刺激因子(M-CSF)刺激、实验a组2.5ng/mlM-CSF+10-8mol/LLTB4刺激、实验b组2.5ng/mlM-CSF+10-8mol/LLTB4+100ng/ml骨保护素(OPG)刺激,培养3周后行抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)细胞化学染色,通过计数多核性TRAP酶染色阳性的破骨细胞样细胞,比较各组的分化破骨细胞作用。结果对照组几乎没有破骨细胞样细胞,而实验a组则出现较多的破骨细胞样细胞,实验b组则与对照组相似,几乎没有破骨细胞样细胞。结论在RA中,LTB4能够通过促进RAFLs细胞RANKL的表达来间接分化破骨细胞。

白三烯B4对人破骨细胞直接分化和激活功能的实验研究

目的探讨白三烯(LT)B4能否不依赖细胞核因子资B受体激活剂配体(RANKL)直接促进人破骨细胞的分化和激活。方法阳性对照组用25ng/ml巨噬细胞集落刺激因子(M-CSF)和30ng/mlsRANKL来诱导人外周血单核细胞的培养,实验组用25ng/mlM-CSF和10-9、10-8、10-7mol/LLTB4来诱导。通过抗酒石酸磷酸酶(TRAP)染色及10mm×10mm玻片上多核性TRAP染色(+)的破骨细胞样细胞计数,来确定LTB4的直接分化作用,并与RANKL的作用比较。通过甲苯胺蓝染色10mm×10mm牛皮质骨片上的骨质吸收陷窝并计数,来确定LTB4直接功能激活作用,并与RANKL的作用比较。结果当M-CSF存在时,LTB4能够直接分化人外周血单核细胞为破骨细胞样细胞,并能激活其骨质吸收功能。且随LTB4浓度的增加而增强,但要弱于RANKL。结论LTB4对人破骨细胞有不依赖RANKL的直接分化和激活作用。

沉默微小RNA-34a对类风湿关节炎大鼠症状改善和血清炎症因子水平的影响及其机制

目的探讨沉默微小RNA-34a(miRNA-34a)对类风湿关节炎大鼠关节症状改善和血清炎症因子水平的影响及其机制。方法将60只大鼠随机分为空白组、模型组、过表达组、沉默组各15只,其中模型组、过表达组、沉默组建立类风湿关节炎模型。建模成功后,于沉默组大鼠双后肢骨关节处注射含10μL miRNA-34a抑制载体的慢病毒悬液,过表达组大鼠双后肢骨关节处注射含10μL miRNA-34a过表达载体的慢病毒悬液,空白组、模型组大鼠不做任何处理。评价各组大鼠足跖肿胀度、关节组织评分;并检测各组大鼠血清肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素1β(IL-1β)、细胞间黏附因子1(ICAM-1)水平,成骨细胞增殖率和凋亡率,以及关节组织中Toll样受体4(TLR4)、核因子κB抑制蛋白α(IκBα)mRNA表达水平。结果与空白组相比,其他3组大鼠血清TNF-α、IL-1β、ICAM-1水平,足跖肿胀度和关节组织评分,以及关节组织TLR4、IκBαmRNA表达水平均增加(P<0.05);过表达组、模型组、沉默组大鼠血清TNF-α、IL-1β、ICAM-1水平,足跖肿胀度、关节组织评分以及关节组织TLR4、IκBαmRNA表达水平依次降低(均P<0.05)。各时间点,空白组成骨细胞增殖率高于其他3组,凋亡率低于其他3组,过表达组、模型组、沉默组大鼠成骨细胞增殖率依次升高,凋亡率依次降低(均P<0.05)。结论沉默miRNA-34a可抑制类风湿关节炎大鼠的炎症反应并缓解关节症状,其机制可能与其下调TLR4/IκBα信号通路表达,从而促进成骨细胞增殖、抑制成骨细胞凋亡有关。

Toll样受体4／核转录因子-κB信号转导通路介导趋化素样因子-1在骨代谢过程中的影响

目的观察趋化素样因子-1（CKLF-1）对骨代谢过程的影响，探讨Toll样受体4／核转录因子-κB（TLR4／NF—κB）信号转导通路在此过程中的作用机制。方法将C57BL／6小鼠骨髓内单个核细胞培养，给予不同浓度的趋化素样因子-1进行诱导后随机分组，分别运用反转录一聚合酶链反应（RT-PCR）和Western blot法检测各组细胞TLR4、骨保护素（OPG）、细胞间黏附分子-1（ICAM-1）、核因子KB抑制蛋白-α抗体（IKB-α）的表达；用酶联免疫吸附试验（ELISA）法测定培养的细胞上清液中自细胞介素-6（IL-6）的表达，比较各组指标表达变化。结果与正常对照组相比，CKLF-1可随着浓度（1×10^-7、1×10^-6和1×10^-5mol／L）升高，上调TLR4 mRNA的表达水平（P〈0．05），且CKLF-1不同浓度组之间相互比较，TLR4 mRNA的表达水平均差异有统计学意义（P〈0．05），浓度为1×10^-5mol／L的CKLF-1组上调幅度最为显著；经不同浓度CKLF-1诱导后，增加ICAM-1蛋白表达水平分别为112．50±10．01、173．60±15．82及191．90±20．23（P〈0．05）；下调IKB-α蛋白表达水平分别为0．68±0．05、0．59±0．05及0．51±0．05（P〈0．05）；下调OPG的蛋白表达水平分别为0．88±0．07、0．75±0．07及0．63±0．07（P〈0．05）；升高IL-6表达水平分别为（3．73±0．35）ng／L、（4．32±0．40）及（6．51±0．40）ng／L（P〈0．05）；且CKLF-1不同浓度组之间相互比较，ICAM-1、IL-6、IKB-α和OPG的表达水平差异有统计学意义（P〈0．05），当CKLF-1浓度为1×10^-5mol／L时效果最为明显。结论CKLF-1可调节TLR4 mRNA、ICAM-1、OPG、IKB—α的蛋白表达和IL-6的表达，其对骨代谢的影响可能与促炎反应和激活TLR4／NF—κB信号转导通路相关。

牛膝-杜仲药对治疗糖皮质激素性骨质疏松症的网络药理学分析

目的运用网络药理学方法及体外实验探讨牛膝-杜仲药对治疗糖皮质激素性骨质疏松症(GIOP)的作用机制。方法利用TCMSP数据库筛选牛膝-杜仲药对的活性成分并预测其作用靶点;利用DrugBank、GeneCards、OMIM、PharmGkb数据库筛选GIOP疾病相关靶点,并与牛膝-杜仲活性成分作用靶点映射取交集,交集基因即为牛膝-杜仲药对治疗GIOP的潜在作用靶点。采用STRING数据库构建潜在作用靶点的蛋白互作(PPI)网络;利用Cytoscape 3.8.2软件构建“活性成分-潜在作用靶点”网络;通过R 4.1.1软件对潜在作用靶点进行GO功能及KEGG通路富集分析。以牛膝-杜仲(10μg·mL-1)对地塞米松(10-5mol·L^(-1))诱导损伤的MLO-Y4骨细胞进行干预,采用CCK-8法检测细胞增殖能力,采用流式细胞术检测细胞凋亡情况。结果从牛膝、杜仲中分别筛选出20、28个活性成分,预测得到976个作用靶点(牛膝、杜仲共同作用靶点205个),筛选出2006个GIOP疾病相关靶点,最终确定133个牛膝-杜仲药对治疗GIOP的潜在作用靶点。筛选出槲皮素、山柰酚、汉黄芩素、黄芩素、β-胡萝卜素、β-谷甾醇、豆甾醇等关键活性成分;得到JUN、FOS、ESR1、MYC、CDKN1A、AKT1、CCND1、CTNNB1、HIF1A、MAPK14、RELA等核心靶点;KEGG通路富集分析得到166条信号通路,筛选得到与GIOP密切相关的细胞增殖、凋亡相关通路及骨代谢相关通路。体外实验结果显示,与模型组比较,牛膝+杜仲组的细胞存活率明显升高,细胞总坏死率显著降低,差异均有统计学意义(P<0.05,P<0.01)。结论牛膝-杜仲药对治疗GIOP具有多成分、多靶点、多途径的特点,可能与其通过槲皮素、山柰酚、黄芩素、β-谷甾醇等活性成分,调控细胞凋亡、自噬、PI3K-Akt、HIF-1等多条信号通路有关。