管充填材料对成骨细胞生长的影响

通过体外培养的成骨细胞,采用二甲基噻唑二苯基四唑溴盐比色法和流式细胞术对新型纳米根管充填材料(nHA-PA66)作用下的成骨细胞生长情况的变化进行研究,评价其对成骨细胞生长的影响。以该材料的细胞培养基浸提液作用于实验组细胞,对照组采用培养基本身。实验组和对照组成骨细胞的生长情况和细胞周期无显著性差异,表明该新型纳米材料对成骨细胞的生长和细胞周期无不良影响。提示新型纳米根管充填材料的成骨细胞相容性较好,具有用作根充材料的基础。

生物陶瓷与细胞外基质对成骨细胞生长及代谢影响

本研究采用了体外细胞培养技术 ,将人胚成骨细胞分别与不同生物陶瓷 (HA ,TCP ,FHA ,BGC)及复合生物陶瓷 (BMP ,TGF β1)共同培养。通过相差显微镜及扫描电镜观察材料表面及周围细胞形态及附着情况 ,分子生物学方法测定细胞增殖率 ,碱性磷酸酶 (ALP)、骨钙素 (OC)、白细胞介素 6 (IL 6 )及转化生长因子 β1 (TGF β1 )分泌水平 ,探讨其作用机理。结果发现复合生物陶瓷细胞增殖率 ,ALP、OC、IL 6及TGF β1 水平明显高于相应单一材料及空白对照。而不同的复合材料细胞增殖率及细胞基质蛋白分泌有所差异。FHA +BMP ,TCP +BMP及HA +BGC +TGF β1 显示了较高水平。不同材料培养不同时间对细胞生长及代谢影响有所不同 ,反映了成骨细胞培养方法评价人工骨替代材料成骨活性规律是切实可行的。

十味接骨药对家兔骨折骨细胞生长机理的实验研究

目的研究十味接骨药对家兔骨折骨细胞生长修复过程中骨痂中TGF-β1,羟脯氨酸、钙、磷;血清中碱性磷酸酶、钙、磷的变化和作用机理。方法实验用健康日本大白兔81只5～6月龄造成双侧前肢0.7cm横断性骨缺损,保留尺骨完整,并分成三组,对照组和实验组,空白组不用药,实验组给十味接骨药,对照组给骨折挫伤散。2周、5周、8周分别取材,观察十味接骨药对骨折修复的影响。结果实验组骨痂中TGF-β1、HRP先升高后递减;血中骨痂中Ca、P峰值提前出现,血中ALP随骨生长逐渐升高。与对照组相比较统计学*P<0.01,**P<0.001。结论十味接骨药对骨折的愈合修复有显著促进作用。

氟和地塞米松对成骨细胞生长因子表达的影响

目的 观察低浓度氟和地塞米松对成骨细胞生长因子或其受体表达的影响 ,探讨其对成骨细胞发育、分化的可能机制。方法 体外培养MC3T3 E1成骨细胞 ,利用免疫组化方法检测成骨细胞内血小板衍化生长因子 A(PDGF A)和胰岛素样生长因子 Ⅰ的α受体 (IGF Ⅰ Rα)表达 ,并对其结果作图像分析。结果 氟和地塞米松对PDGF A表达在各个时期都没有影响 ,而在细胞培养早期均促进了IGF Ⅰ Rα表达 ,地塞米松的促进作用尤为明显。结论 低浓度氟和地塞米松均促进幼稚成骨细胞中IGF Ⅰ Rα表达 ,IGF Ⅰ Rα表达增高可能与其对成骨细胞增殖、分化影响有关。

纯钛表面吸附硫酸软骨素A对成骨细胞生长的影响

目的 在体外研究纯钛表面吸附硫酸软骨素 A( CS- A)后对成骨细胞生物学行为的影响。方法 在吸附不同浓度的 CS- A钙处理钛片表面培养成骨细胞 ,检测其生长情况、碱性磷酸酶活性及细胞层钙含量。结果 钙处理钛片在吸附 CS- A后促进了成骨细胞的增殖 ,增加了成骨细胞层钙聚集 ,促进成骨细胞的矿化 ,同时还增高了成骨细胞的碱性磷酸酶活性 ,促进了细胞的分化。结论 钛吸附 CS-

纯钛表面吸附硫酸软骨素A对成骨细胞生长的影响

目的 在体外研究纯钛表面吸附硫酸软骨素 A(Chondroitin Sulfate-A,CS-A)后对成骨细胞生物学行为的影响。方法 在吸附不同浓度的CS—A钙处理钛片表面培养成骨细胞,检测其生长情况、碱性磷酸酶活性及细胞层钙含量。结果 钙处理钛片在吸附 CS—A后促进了成骨细胞的增殖,增加了成骨细胞层钙聚集,促进成骨细胞的矿化,同时还增高了成骨细胞的碱性磷酸酶活性,促进了细胞的分化。结论 钛吸附GS-A后提高了其生物相容性。

多糖降低血胆固醇和刺激骨细胞生长实验研究

目的 研究酸性多糖口服对骨缺损愈合和降低血胆固醇的影响。方法 对 6 0只小白鼠股骨施行人工骨折后分为对照组和实验组 ,后者口服饲料中加 1‰多糖 ,分别于 2、4周处死小鼠 ,借助光镜进行组织学观察 ;试验前后分别抽血查胆固醇。结果 骨性愈合时间组织学分析酸性多糖组均明显优于对照组 ,多糖组胆固醇组明显低于对照组。

破骨细胞分化因子和破骨细胞生长抑制因子在牙周组织细胞中的表达

目的:检测炎症前细胞因子IL-1β和骨成熟因子PGE2对人牙周膜细胞和牙龈成纤维细胞破骨细胞分化因子(osteoclastdifferentiation factor,ODF)和破骨细胞生长抑制因子(osteoclastogenesis inhibitory factor,OCIF)表达的影响。方法:用RT-PCR和Southern-blot对该2种细胞在IL-1β或PGE2作用下细胞中ODF和OCIF mRNA的表达进行半定量。结果:上述2种细胞在IL-1β或PGE2作用下,ODF和OCIF的合成均有升高,各细胞合成ODF和OCIF的峰值随IL-1β或PGE2作用时间和浓度的不同而发生变化。结论:牙周组织中ODF和OCIF可能同时参与炎症反应,并受致炎因子IL-1β和骨代谢因子PGE2调节。

β-磷酸三钙壳聚糖复合支架在促进成骨细胞生长相关效果的研究

目的:研究分析β-磷酸三钙壳聚糖复合支架在促进成骨细胞生长的临床应用效果。方法:选取20只家兔共40块骨缺损作为研究对象,随机分为观察组和对照组,每组各20块。对照组不植入任何材料,观察组植入β-磷酸三钙壳聚糖复合支架,分别于术后1个月处死所有参与研究的动物,测量两组新骨形成的情况,并应用骨密度诊断仪检测两组家兔的骨密度情况。结果:观察组新生骨面积百分比高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);观察组骨密度检测值显著优于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:β-磷酸三钙壳聚糖复合支架具有良好的骨生物降解、引导和相容性,能够有利改善骨细胞的生长,促进新生骨面积以及骨密度的提升,应用效果显著,值得临床应用推广。

中药骨细胞生长素在临床的应用

中药骨细胞生长素在临床的应用柳永明永登县中医院（７３０３００）关键词骨细胞生长素临床应用疗效分析中图分类号Ｒ２８９·５本院骨科自拟中药制剂骨细胞生长素（ＢＣＧ），１９９３—１９９５年治疗３６例骨折、１４例骨髓炎患者，效果优良。报告如下。１．临床资料本...

外源性血管内皮生长因素在成骨细胞内的表达及其对成骨细胞生长的影响研究

血管内皮生长因子（VEGF）是目前所知唯一特异作用于血管内皮细胞的细胞因子，能促进血管内皮细胞有丝分裂，加快血管形成。与正常人组织的生长、修复，及某些组织的异常增生、实体瘤的生长及转移中新生血管的形成密切相关。在胚胎形成时期，骨形成即与血管生成密切相关。骨生发中心即位于血管化的环境中，成骨细胞和骨祖细胞在新骨形成过程中总是比邻血管内皮细胞存在的。

孕激素调节人成骨细胞转化生长因子-β_1,β_2的表达

目的探讨孕激素对人成骨样细胞MG-63细胞株转化生长因子(TGF)-β1,TGF-β2表达的调节作用,验证孕激素治疗绝经后骨质疏松症(osteoporosis,OP)的假设机制。方法人成骨样细胞系MG-6购自美国培养物保存中心(ATCC号:CRL-1427);用无酚红的MEXX培养液培养,在细胞培养的不同时间,用α-磷酸奈酚法测定碱性磷酸酶(ALP)活性;放射免疫法测定骨钙素(BGP)含量。MG-63细胞用孕酮干预。ELISA检测MG-63细胞TGF-β1,TGF-β2蛋白质分泌。结果MG-63细胞分泌的ALP、孕酮促进MG-63细胞TGF-β1,TGF-β2蛋白质分泌呈剂量依赖性(t=10.232～109.454,P<0.001);1×10-9mol/L孕酮诱导12～24h促进TGF-β1,TGF-β2蛋白质分泌,呈时间依从性。结论孕激素可能通过诱导成骨细胞TGF-β1,TGF-β2表达,促进成骨细胞增殖与分化、增强成骨功能及骨基质合成,促进骨形成。

雌激素对骨质疏松大鼠骨折愈合过程成骨细胞血管内皮生长因子表达的影响分析

目的:探讨雌激素对成骨细胞血管内皮生长因子(VEGF)的影响,就骨质疏松大鼠骨折愈合进行试验。方法:选择40只雌性Wistar大鼠,随机分为观察组和对照组,每组各20例,取左股骨骨折模型,观察组每隔1d注射雌激素,就各项指标进行分析。结果:观察组优于对照组骨痂密度(P<0.05)。结论:观察组优于对照组的成骨细胞血管生长因子的表达量,其成骨细胞数量优于对照组,故其可促进骨组织的钙化及骨细胞的增殖分化,使骨密度提高。

凝血酶和PAR-1受体对成骨细胞白介素-6和成纤维细胞生长因子-2表达的影响

目的探讨凝血酶对小鼠成骨细胞某些因子表达的调节作用。方法使用小鼠颅骨的成骨细胞,通过荧光定量PCR方法和人工合成的PAR-1或PAR-4特异性激活短肽了解受体介导的凝血酶对成骨细胞因子表达的影响。结果凝血酶不影响成骨细胞转化生长因子、血小板生长因子A、胰岛素样生长因子-Ⅰ和-Ⅱ的表达,凝血酶和PAR-1受体激活肽可以显著上调成骨细胞成纤维细胞生长因子-2(FGF-2)和白介素-6(IL-6)的表达,但对IL-6表达的调节作用,凝血酶远较PAR-1激活肽为强,而PAR-4特异性激活肽并不影响这两种因子的表达。结论凝血酶可以促进小鼠成骨细胞FGF-2和IL-6的表达,此作用可能是通过PAR-1和非PAR-1通路介导的,凝血酶对FGF-2表达的调节可能完全是由PAR-1介导的,而凝血酶对IL-6表达的影响部分是由PAR-1介导的,部分可能是由未知受体介导的。PAR-4并不参与介导凝血酶对FGF-2和IL-6表达的调节作用。

成人骨髓基质干细胞体外诱导成骨细胞

目的 建立成人骨髓基质干细胞(BMSCs)分离、扩增以及诱导和分化为成骨细胞的体外培养方法,为骨组织工程选择理想的种子细胞来源。方法 抽取健康成人骨髓组织,用 Percoll分离液分离出骨髓中的单个核细胞,在含体积分数为 10%小牛血清的高糖 DMEM培养液中,置于37℃、含体积分数为5%的CO2 湿化空气孵箱中培养,通过传代培养扩增BMSCs,传三代时改用含地塞米松、β 甘油磷酸和维生素C的条件培养基培养,用倒置显微镜、HE染色观察增殖和分化情况,并测定碱性磷酸酶活性和钙结节形成能力。结果 体外培养的成骨细胞生长良好,表现出与典型的成骨细胞相似的形态特征和生物学特性。结论 所建立的成人 BMSCs分离、扩增以及诱导和分化为成骨细胞的体外培养方法稳定和实用,可作为骨组织工程种子细胞来源的常规方法之一。

骨肽对成骨细胞成骨功能表达的影响

骨肽具有调节骨代谢、刺激成骨细胞增殖、促进新骨形成等药理作用，多用于骨折和骨折手术愈合及风湿、类风湿关节炎的治疗。碱性磷酸酶（ALP）和骨钙素（OC）是成骨细胞分泌的两种非胶原成分。活性成骨细胞在早期发育阶段细胞内就富含ALP，后期成熟阶段成骨细胞可产生和分泌骨钙素，因此ALP和OC不仅是成骨细胞生长和发育早期和晚期的表型标志，同时是成骨细胞的功能状态的体现，是骨形成指标。

降钙素基因相关肽对兔成骨细胞增殖和TGF-β_1表达的影响

目的检测外源性降钙素基因相关肽(calcitonin gene-ralated peptide,CGRP)对体外培养兔成骨细胞转化生长因子-β1(transformation growth factor-β1,TGF-β1)表达的调控作用,探讨其对成骨细胞增殖的影响。方法将出生5 d以内新西兰大白兔头骨成骨细胞进行原代培养,用不同浓度的CGRP分别在不同时间段处理后,用MTT法检测细胞生长活力增殖情况;用Western blot检测成骨细胞TGF-β1的蛋白表达。结果成功分离并培养兔颅骨原代成骨细胞,进行碱性磷酸酶(ALP)染色鉴定成骨细胞。结果显示同一浓度的CGRP随着时间的增加MTT值呈增加趋势;而就同一时间点做比较,随着CGRP浓度的不断增加,MTT值也呈上升趋势,并且在48h和72h,这种趋势愈加明显(P<0.05)。另外随CGRP浓度的增加TGF-β1条带灰度显著升高,显示TGF-β1蛋白的表达逐渐增强(P<0.05),CGRP可能促进兔成骨细胞TGF-β1的表达。结论 CGRP可能通过调节成骨细胞TGF-β1蛋白的表达促进成骨细胞的增殖分化从而影响骨代谢。

小鼠骨髓细胞和脾细胞诱导形成破骨细胞潜能的比较

目的 在体外破骨细胞分化因子（RANKL）和巨噬细胞集落刺激因子（M-CSF）联合应用的情况下，比较小鼠骨髓细胞和脾细胞形成破骨细胞的能力。方法选用小鼠M-CSF依赖性非附着性骨髓细胞和脾细胞，以不同的细胞密度在舍有25ng／ml sM-CSF和30ng／ml sRANKL的（-MEM培养液中培养5、9天后，计数形成的抗酒石酸酸性磷酸酶染色（TRAP）阳性多核细胞的数目和骨吸收面积。结果脾细胞形成的破骨样细胞与骨髓形成的细胞形态与功能均无明显差异，但所需的细胞密度为骨髓细胞的10～20倍。结论在特殊情况下，脾细胞可替代骨髓细胞进行体外破骨细胞实验．但培养条件应适当调整。

纳米羟基磷灰石复合基因转染生长因子修复牙槽骨缺损

背景:研究发现成骨细胞可促进牙槽骨的形成,而血小板衍生生长因子A因子转染成骨细胞对于牙槽骨形成的作用尚不清楚。目的:将基因转染的血小板衍生生长因子A重组质粒与纳米羟基磷灰石复合移植到骨缺损处,观察其对骨缺损修复的影响。方法:将 24 只新西兰大白兔随机分成实验组与对照组,制作双侧下颌下缘 10 mm×6 mm×4 mm 骨质缺损,实验组植入血小板衍生生长因子A转染成骨细胞与纳米羟基磷灰石的复合材料,对照组单纯植入纳米羟基磷灰石。术后 4,8,12周取材行大体标本、锥形束 CT、组织学观察及扫描电镜观察。结果与结论:术后不同时间点,实验组缺损处新骨生成,成骨细胞、骨小梁、骨陷窝及新生血管修复情况,以及材料与牙槽骨连接处的骨结合均明显优于对照组(P < 0.05)。表明血小板衍生生长因子A转染成骨细胞与纳米羟基磷灰石复合生成的新型材料,有较好的生物相容性,可加速骨组织再生,促进骨组织缺损修复。