双基因(VP3、IL-18)联合致小鼠骨肉瘤S-180细胞凋亡的效应

目的探讨VP3、IL-18双基因抑制骨肉瘤S-180的联合抑瘤作用。方法将VP3、IL-18基因插入pVAX1表达载体的pCMV启动子之下的EcoRI位点,构建成pVVP3及pVVp3-IL18。将该重组质粒与单独表达凋亡素基因的重组质粒分别注射荷S-180肿瘤细胞的BALB/C小鼠,比较抑瘤趋势和抑瘤率。结果联合应用VP3基因和IL-18基因的重组病毒治疗组的抑瘤率(46.16%)高于单独应用VP3基因组的抑瘤率(19.56%),两组比较有统计学差异(P<0.05)。结论凋亡素基因具有凋亡诱导效应及体内的抑瘤效应。凋亡素基因VP3与IL-18基因有协同抑瘤效应,联合基因治疗骨肉瘤可提高抑瘤效果。

VP3、IL-18对小鼠体内骨肉瘤S-180细胞的治疗作用

目的:旨在探讨双基因(VP3、IL-18)抑制骨肉瘤S-180的联合抑瘤作用。方法:将VP3、IL-18基因插入pVAX1表达载体的pCMV启动子之下的EcoRⅠ位点,构建成pVVP3及pVVP3IL-18。将该重组质粒与单独表达凋亡素基因的重组质粒分别注射荷S-180肿瘤细胞的BALB/C小鼠,按照质粒与脂质体3:1的比例混合,每3天注射1次,连续注射3次,比较抑瘤趋势和抑瘤率。结果:联合应用VP3基因和IL-18基因的重组病毒治疗组对肿瘤的抑瘤效果明显优于单独应用VP3基因的重组病毒治疗组。结论:凋亡素基因具有凋亡诱导效应及体内的抑瘤效应。凋亡素基因VP3与IL-18基因有协同抑瘤效应,VP3、IL-18联合基因治疗骨肉瘤可显著提高抑瘤效果。

柴胡提取物对人肝癌细胞和小鼠S-180肉瘤的抑制作用

目的 :研究柴胡水提物对体外培养的人肝癌 SMMC-772 1细胞线粒体代谢活性、细胞增殖及小鼠移植性 S-1 80实体瘤的影响。方法 :中药柴胡 ( BCDC)经粉碎、浸提、超速离心、减压浓缩、冷冻干燥得柴胡提取物。人肝癌 SMMC-772 1细胞经不同浓度柴胡提取物处理不同时间后 ,检测了各实验组和对照组细胞的有丝分裂指数、细胞增殖及线粒体活性几方面的变化。S-1 80肉瘤小鼠连续 9d腹腔注射 3 3 .3 mg/ kg体重 BCDC提取物 ,停药 1 5d后 ,杀死小鼠称量瘤重。结果 :1经 3 55mg/ L BCDC提取物处理人肝癌 SMMC-772 1细胞 2 4 h,其线粒体活性为对照组的 50 .2 6% ,处理 72 h为 2 4 .82 %。2以 3 55mg/ L BCDC提取物处理 7d中 ,人肝癌细胞数分别是血清对照组( FCS)的为 57.5% ,4 5.88% ,3 7.0 6% ,2 8.3 7% ,2 0 .90 % ,1 2 .89% ,1 4.1 8% ;无血清对照组 ( NON)的 65.0 9% ,62 .2 4 % ,56.99% ,4 9.0 8% ,4 0 .78% ,2 6.78% ,2 8.4 1 %。 3经 BCDC提取物处理 2 4 h后 ,即使更换正常培养基 ,人肝癌细胞数在 96h的恢复培养中仍低于处理前的细胞数。 4有丝分裂指数实验组为 0 .3 0 ,对照组分别为 5.3和5.4 ( P<0 .0 0 1 )。 5BCDC提取物对小鼠 S-1 80实体瘤抑制率为 87.2 1 %。

山仙颗粒含药血清诱导S-180肉瘤细胞凋亡及其对bcl-2、Bax基因表达的影响

目的:探讨山仙颗粒(SXG)含药血清诱导体外培养S-180肉瘤细胞的凋亡作用及其对凋亡相关基因bcl-2及Bax表达的影响。方法:以不同浓度的山仙颗粒含药血清作用于体外培养的S-180肉瘤细胞,待24、48、72h后倒置显微镜下观察细胞形态变化并制备细胞涂片,采用TUNEL法检S-180肉瘤细胞凋亡率,免疫细胞化学(SABC)检测S-180肉瘤细胞中凋亡相关基因bcl-2、Bax表达的变化。结果:SXG含药血清可明显诱导S-180肉瘤细胞凋亡,导致其细胞形态改变,并能使bcl-2表达降低(P<0.01)、Bax表达增强(P<0.01),且呈浓度和时间依赖性。结论:SXG含药血清能有效诱体外培养的S-180肉瘤细胞凋亡,其机制可能与抑制bcl-2表达,促进Bax表达有关。

SD大鼠山仙颗粒含药血清对S-180肉瘤细胞VEGF的表达及对细胞凋亡影响的实验研究

目的探讨山仙颗粒(SXG)含药血清对S-180肉瘤细胞VEGF表达水平及细胞凋亡的影响。方法将不同浓度的SD大鼠SXG含药血清作用于体外培养的S-180肉瘤细胞,24h、48h、72h后制备细胞涂片,用免疫细胞化学法(SABC)检测不同浓度、不同作用时间的含药血清对S-180肉瘤细胞中VEGF表达的影响,用TUNEL法检测S-180肉瘤细胞凋亡率。结果 SXG含药血清能下调VEGF表达水平、促进S-180肉瘤凋亡,且呈浓度和时间依赖性。结论 SD大鼠SXG含药血清能显著降低S-180肉瘤细胞中VEGF的表达水平,提高S-180肉瘤细胞凋亡率,其临床抑转移、抗肿瘤机制可能与其下调VEGF表达水平及促进细胞凋亡有关。

山仙颗粒含药血清对大鼠S-180肉瘤细胞Fas/FasL基因表达的相关性研究

目的探讨山仙颗粒(SXG)含药血清对大鼠S-180肉瘤的抑制作用及肿瘤凋亡相关基因fas/fasl表达的影响,探讨其抗肿瘤发生和发展的机理。方法通过体外细胞培养扩增S-180肉瘤细胞制备细胞悬液,将其置入不同浓度的含药SD大鼠血清及正常SD大鼠血清中,分成对照组(1640培养液)、空白1组(10%正常鼠血清)、空白2组(100%正常鼠血清)、含药血清1组(10%鼠含药血清)和含药血清2组(100%鼠含药血清),分别培养24h、48h、72h后收集细胞计数并制成细胞涂片,免疫细胞化学(二步法)检测瘤组织中fas/fasl基因的表达情况对照分析。结果 1、各时间段的对照组及空白1、2组比较、含药血清1组与空白血清1组比较Fas基因及Fasl基因表达水平无显著差异(P>0.05);含药血清2组与空白血清2组比较Fas基因表达水平升高而Fasl基因表达水平下降(P<0.05)。2、含药血清2组各时间段比较,Fas基因表达水平48 h及72 h较24 h的Fas基因表达水平升高(P<0.05),而48 h与72 h比较无显著差异(P>0.05);Fasl基因表达水平各时间段无显著差异(P>0.05)。结论 SXG大鼠含药血清能显著使体外培养的S-180肉瘤的促凋亡基因Fas表达增强而抑凋亡基因Fasl表达减弱,从而诱导S-180肉瘤细胞的凋亡来抑制其生长。

博尔宁抑制S-180肉瘤细胞增殖抗癌作用机制研究

目的观察博尔宁对S-180肉瘤细胞及其实体瘤的增殖抑制作用,探讨其抗肿瘤效应及与NF-κB的相关性。方法 1体外实验:体外培养S-180肉瘤细胞,分为空白组,博尔宁A组、B组、C组,5-Fu组,联合给药组,分别培养24,48,72 h,MTT法检测细胞体外增殖程度,计算增殖抑制率。2体内实验:将含S-180肉瘤细胞的小鼠乳白色腹水接种于50只雄性裸小鼠右侧腋窝皮下,然后随机将裸小鼠分为5组,空白组给予生理盐水灌胃,5-Fu组给予5-Fu 10μg/m L灌胃,博尔宁A组、B组、C组给予10μg/m L、20μg/m L、40μg/m L博尔宁灌胃。灌胃15 d后取材,计算抑瘤率,RT-PCR法检测瘤组织NF-κp65 RNA的表达情况,考马斯亮兰法检测NF-κB蛋白浓度,凝胶电泳迁移率试验(EMSA)检测NF-κB活性。结果在体外,博尔宁呈浓度依赖性抑制S-180肉瘤细胞增殖,且在处理48 h时作用最佳。在体内,博尔宁各组荷瘤裸鼠的瘤质量呈浓度依赖性下降,差异均有统计学意义(P均<0.05),博尔宁C组与5-Fu组抑瘤率比较差异无统计学意义(P>0.05);各给药组瘤组织NF-κB p65 RNA及蛋白表达水平均明显低于空白组(P均<0.05),并随着博尔宁浓度的增加逐渐降低,各组间比较差异均有统计学意义(P均<0.05)。结论博尔宁可显著抑制S-180肉瘤细胞和实体瘤的增殖,其作用与降低NF-κB的表达、抑制其活性有关。

流式细胞仪检测甘草多糖对小鼠S-180肉瘤的凋亡诱导作用

随着单克隆抗体及标记技术的发展,流式细胞术(FlowCytometry,FCM)检测细胞凋亡技术已广为使用,为探讨中药甘草多糖抑瘤作用及其机制,本文应用流式细胞术(FCM)检测细胞凋亡,结果表明甘草多糖抑制肿瘤生长可能与诱导细胞凋亡有关。

小鼠肉瘤S-180转IL-2基因后细胞行为改变初探

探讨小鼠肉瘤 S-180细胞转 IL-2基因后是否存在细胞功能改变。通过 MTT 试验、流式细胞仪分析及电镜观察,结果提示 IL-2基因转染影响 S-180细胞的增殖活性、细胞周期。细胞间连接可能调节细胞通讯并由此抑制瘤组织生长。多种免疫细胞介导的免疫反应及从而导致的凋亡在移植瘤消退中也起重要作用。

山仙颗粒含药血清对大鼠S-180肉瘤细胞fas基因表达的相关性研究

目的:探讨山仙颗粒(SXG)含药血清对大鼠S-180肉瘤的抑制作用及肿瘤凋亡相关基因fas表达的影响,探讨其抗肿瘤发生和发展的机理。方法:通过体外细胞培养扩增S-180肉瘤细胞制备细胞悬液,将其置入不同浓度的含药SD大鼠血清及正常SD大鼠血清中,分成对照组(1640培养液)、空白1组(10%正常鼠血清)、空白2组(100%正常鼠血清)、含药血清1组(10%鼠含药血清)和含药血清2组(100%鼠含药血清),分别培养12h、24h、48h后收集细胞制成细胞涂片,免疫细胞化学(二步法)检测瘤组织中fas基因的表达情况对照分析。结果:与对照组及空白1、2组比较,鼠含药血清2组fas基因表达水平升高(P<0.05),对照组、空白1、2组及鼠含药血清1组无显著差异(P>0.05)。结论:SXG大鼠含药血清能显著使体外培养的S-180肉瘤的促凋亡基因fas表达增强,从而诱导S-180肉瘤细胞的凋亡来抑制其生长。

盐酸洛拉曲克在体内、外对S-180细胞株的抗增殖作用

研究全合成新型胸苷合成酶抑制剂盐酸洛拉曲克在体内、外对S 1 80细胞株及正常人胚肾HEK2 93细胞的抗增殖作用 ;使用MTT法测定抑制率 ,以提高荷腹水瘤小鼠存活时间及荷实体瘤瘤重减轻情况为指标考察盐酸洛拉曲克对S 1 80所致肿瘤的治疗作用 .结果表明 :在体外盐酸洛拉曲克对S 1 80肿瘤细胞株有较强的细胞毒作用 ,对正常细胞HEK2 93抑制作用较弱 (P <0 .0 5 ) ;体内实验显示盐酸洛拉曲克可明显提高荷腹水瘤小鼠的存活时间 ,减轻荷实体瘤小鼠的瘤重 ,疗效与氟尿嘧啶 ( 1 0mg kg)相当 (P >0 .0 5 )或更好 (P <0 .0 5 ) .可见 ,盐酸洛拉曲克在体内、外对S 1 80肿瘤细胞有显著的抗增殖作用 。

电脉冲致离体S-180细胞电穿孔的观察与研究

扫描电镜下我们观察到了一定强度电脉冲致 S- 180细胞电穿孔的现象。同时分别改变电压、电容、脉冲个数 ,对 S- 180离体细胞进行电脉冲作用 ,通过苔盼蓝追踪 ,发现在一定的条件下 ,随着对 S- 180离体细胞电穿孔的电压越大、电容越小、脉冲个数越多 ,其穿孔百分率越大。

山仙颗粒对S-180荷瘤小鼠T细胞活性及Caspase-3的影响

目的:探讨山仙颗粒(SXG)对S-180荷瘤小鼠T细胞活性及Caspase-3的影响。方法:将60只昆明种小鼠随机选取12只作为空白对照组,其余48只建立S-180荷瘤小鼠模型后随机分为模型组及SXG低(0.025 g/mL)、中(0.05 g/mL)、高(0.1 g/mL)剂量组各12只,空白对照组、模型组每日早晚灌胃生理盐水0.4 mL,其余各组每日早晚灌胃相应剂量药物,连续30天。末次给药24小时后,采用颈椎脱臼法处死小鼠,游离脾脏,剥离肿瘤组织;应用MTT比色法及免疫组织化学法检测荷瘤小鼠脾脏T细胞毒效应及S-180实体瘤组织中Caspase-3的表达。结果:SXG低、中、高剂量组小鼠脾脏T细胞对于S-180荷瘤小鼠细胞的抑制率高于模型组(P<0.01),且与SXG浓度呈正相关;各组效应细胞与靶细胞的比例不同,对S-180荷瘤小鼠细胞的抑制作用也不同(P<0.01),且与T细胞浓度呈正相关。SXG低、中、高剂量组S-180荷瘤小鼠肿瘤组织中Caspase-3表达率高于模型组(P<0.01),且与SXG浓度呈正相关。结论:SXG具有抑制肿瘤生长的作用,其机制可能与其增强T细胞活性进而抑制肿瘤细胞增殖及促进Capase-3介导的肿瘤细胞凋亡有关。

横纹肌细胞培养液对S-180细胞生长抑制作用的体外实验研究

目的:观察横纹肌细胞微环境对肿瘤细胞生长的影响,探讨横纹肌内转移瘤罕见这一现象的发生机制。方法:采用酶解法原代培养新生Wistar大鼠心肌细胞和骨骼肌细胞,形态学和免疫酶染色方法检测横纹肌α-肌动蛋白进行细胞鉴定,免疫酶染色法进行细胞纯度鉴定,MTT法分析比较骨骼肌和心肌细胞细胞培养液对S-180细胞和正常肾小球系膜细胞的体外生长抑制作用,并运用胰酶消化法,热灭活法初步探讨横纹肌细胞培养液中抑瘤物质的理化性质。结果:S-180细胞与CMCM、MMCM共同培养后,细胞存活率明显下降,与DMEM相比差异均具有显著性(P<0.05),MCs细胞的细胞存活率无明显影响(P>0.05)。DDP对S-180细胞和MCs细胞均具有显著性抑制作用(P<0.05)。心肌细胞培养液和骨骼肌细胞培养液经胰酶消化后抑制活性仍然存在(P<0.05),经热灭活后活性消失(P>0.05)。结论:新生大鼠横纹肌细胞培养液对S-180细胞的增殖有明显的抑制作用;而对正常细胞的增殖无明显影响,与顺铂的抑制作用明显不同。横纹肌细胞培养液中有可能存在一种抑瘤物质,可能是横纹肌转移瘤罕见的关键因素。

阿霉素诱导S-180瘤细胞凋亡核型分析

①目的探讨阿霉素诱导Ｓ－１８０瘤细胞凋亡过程中细胞核型的变化。②方法用低剂量（３．２５μｇ）阿霉素处理经Ｓ－１８０瘤细胞腹腔接种的ＢＡＬＡ／Ｃ鼠，０～７２ｈ分别取腹水进行细胞核型检测。③结果用阿霉素处理２４ｈ时，细胞变圆，胞浆浓缩；４８ｈ时，染色质密集度增高；７２ｈ时，核仁裂解，核膜内陷，形成内涵物不外溢的凋亡小体。④结论阿霉素是良好的细胞凋亡诱导剂，凋亡期间细胞外形及染色质凝聚逐渐改变，直至形成凋亡小体。

有机锡化合物对S-180和胃癌细胞的影响

有机锡化合物(Et_2SnCl_2phen)是类似于顺铂结构的新型抗癌物质。实验结果表明,Et_2SnCl_2phen对S-180细胞生长有明显的抑制作用,阻止G_2+M→G_1期的进行,造成G_2+M期细胞堆集。Et_2SnCl_2phen与胃癌作用后,扫描电镜观察表明,粘着在裸露的玻璃表面的癌细胞变为球形,膜皱襞,微绒毛减少。可使S-180和人胃癌细胞的DNA相对含量明显减少。

大枣多糖对S-180瘤细胞杀伤性实验研究

目的探讨大枣多糖对S-180瘤细胞的杀伤性及应用。方法将200只荷瘤BALB/c裸鼠按瘤体大小随机分为对照组,低浓度组,中浓度组,高浓度组各50只,每日分别给予腹腔注射生理盐水0.2 mL,大枣多糖0.05 g/kg,0.15 g/kg,0.25 g/kg。14 d后断颈法处死裸鼠,对比四组的抑瘤率,肿瘤细胞生长周期时间,裸鼠生存时间和病理组织学观察。结果大枣多糖浓度越高抑瘤率越高,肿瘤细胞生长周期时间越短,裸鼠生存时间越长。病理组织观察可见明显改变,差异有统计学意义(P<0.05)。结论大枣多糖对S-180瘤细胞具有一定的杀伤作用,为多糖治疗骨髓瘤提供了理论依据,具有较大的科学价值和实用性。

开口箭对S-180细胞和实体瘤的抑制作用研究

目的 研究开口箭（Tupistra chinensis Baker）对S-180细胞及其实体瘤的抑制作用.方法 SPF级BALB/c-nu小鼠30只,将肿瘤生长良好且小鼠精神状态佳者进行随机分为5组,每组6只：生理盐水组,开口箭低剂量组,开口箭中剂量组,开口箭高剂量组,环磷酰胺（cytoxan,CTX）组.观察细胞形态变化及实体瘤生长状况;用流式细胞术检测各组S-180细胞DNA含量及周期,比较各组对肿瘤细胞生长周期的影响;利用透射电镜观察开口箭干预各组实体瘤细胞超微形态结构的变化.结果 实验结果发现S-180细胞呈圆形或椭圆形,于接种第10天剥取实体瘤,瘤体组织生长良好;开口箭将S-180细胞生长周期阻滞在S期;电镜下开口箭各组细胞形态不规则,染色质凝聚、边缘化,细胞核固缩,与生理盐水组和CTX组比较有明显结构改变.结论 开口箭对S-180细胞及其实体瘤均有明显抑制作用,开口箭阻滞S-180细胞生长周期,导致细胞形态的变化,诱导肿瘤细胞凋亡.

转导人白介素-2基因对S-180细胞致瘤性的影响

转导人白介素┐２基因对Ｓ┐１８０细胞致瘤性的影响＊郑颂国１章月星２罗建民１沈兆忠１肖萍３董妙珠３朱雄增１许良中关键词小鼠肉瘤Ｓ┐１８０人白细胞介素┐２基因治疗基因转移＊上海医科大学科研基金资助作者单位：１．上海医科大学肿瘤医院（上海２０００３２）２．...

小鼠胚胎成纤维细胞介导的IL-12抗S-180肿瘤作用

目的:将IL-12重组载体转染入小鼠成纤维细胞,研究探讨转染后的抗肿瘤作用.方法:取小鼠胚胎获得原代成纤维细胞,应用PEI法将IL-12重组载体转染到小鼠胚胎成纤维细胞,同时设对照.建立肉瘤细胞(S-180)荷瘤小鼠模型,分别接种S-180细胞.于注射瘤细胞后定期给予转染后的成纤维细胞瘤体内注射,并设对照组.于致瘤后第21日处死小鼠,测肿瘤质量;ELISA法检测小鼠血清IL-12及γ-干扰素(IFN-γ)的表达;检测NK(natural killer cells)细胞活性和脾淋巴细胞增殖情况、CD4/IFN-γ、CD8/IFN-γ双标记阳性细胞的克隆能力.结果:抑瘤率、NK细胞活性及淋巴细胞增生反应、血清IL-12、IFN-γ水平、CD4/IFN-γ及CD8/IFN-γ双标记阳性细胞的百分率均高于对照组(P<0.01).结论:转染后的IL-12重组质粒可进一步增强机体的免疫功能发挥其抗肿瘤的治疗作用.