用自身软骨组织作为介质加速骨腱联合的愈合——兔组织学实验

最近对膝的研究中发现 ,在组织学上腱和关节软骨结构的愈合比腱与骨愈合要快。通过以兔子作为实验对象来探索 ,用自身软骨作为介质来重建纤维软骨骨腱联合区域并加速骨腱联合的愈合在生物学上的可能性。自身纤维软骨 (自身半月板 )和透明软骨 (关节软骨 )被用来作为介质修复骨腱联合。术后第 8个星期我们观察到 ,使用纤维软骨和透明软骨来修复肌腱接点比单纯的骨腱愈合要修复的更快更好 ,并且没有退行性改变。通过使用safranino染色法评价其蛋白多糖基质可以看出 ,介质软骨基质类似于骨腱接点处正常的纤维软骨基质。

红花黄色素对兔前交叉韧带重建术后骨腱愈合影响的生物力学研究

目的研究证实骨腱愈合过程中病灶区体视学及生物力学的变化,及红花黄色素对骨腱愈合的影响。方法 24只新西兰大白兔随机分为实验组和对照组,实验组于术中局部应用红花黄色素注射液,对照组局部使用生理盐水;构建前交叉韧带重建模型后,两组分别于术后4、8周各处死6只大白兔,借助体视学以及生物力学进行观察和评价,实验计数资料利用SPSS 16.0软件统计处理。结果重建的前交叉韧带拉脱负荷强度随损伤修复时间的延长逐渐增加,第8周组明显高于第4周组(P<0.01),而且实验组在各时间点均与对照组之间存在显著统计学差异(P<0.01)。结论重建的前交叉韧带在骨腱愈合中拉脱负荷强度的变化与损伤修复时间正相关,红花黄色素对兔前交叉韧带重建术的骨腱愈合有促进作用。

骨腱结合部损伤模型建立及伤后低强度循环载荷对愈合的影响

骨腱结合部过度使用性损伤常见于运动员。研究伤后48h进行低强度载荷训练对急性骨腱结合部损伤愈合的影响。研究对象和方法:12只雌性成年新西兰大白兔的后肢通过针刺建立急性损伤组(AI,n=6),伤后48h开始进行四周低强度训练建立伤后低强度训练组(PIERT,n=6)和对照组(CON,n=6)。第四周取样的标本结果提示,PIERT组的骨小梁厚度明显小于AI和CON组;和CON组相比,AI和PIERT组的胶原排列明显紊乱,瘢痕组织多,细胞密度低;PIERT组的纤维软骨带厚度明显厚于AI组。建立了一个定量、可重复骨腱结合部微细损伤动物模型,并发现伤后48h开始低强度训练没有延缓损伤愈合,并对结构重建具有一定促进作用。

低强度脉冲超声用于治疗骨腱连接点损伤及提高骨血管重建相关因子的研究

目的:观察低强度脉冲超声(LIPUS)治疗骨-腱连接点(bone-tendon junction,BTJ)损伤的效果,及对骨血管重建相关因子的促进作用。方法:选取BTJ损伤患者41例,采用LIPUS治疗2周。采用放射免疫法和酶联吸附免疫法(ELISA)检测碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)、血小板衍生因子(PDGF)、血管内皮生长因子(VEGF)、转化生长因子-β(TGF-β)及基质金属蛋白酶-3(MMP-3)。采用疼痛视觉模拟评分(VAS)及功能指标变化,评价LIPUS的治疗效果。结果:经LIPUS治疗2周后,血清中bFGF、PDGF、VEGF、TGF-β及MMP-3水平较治疗前均明显升高(P<0.05或P<0.01);VAS评分较治疗前明显下降([7.42±1.89)vs(4.00±1.05)分,t=8.492,P=0.000],Lysholm膝关节功能评分[(65.74±4.05)vs(83.69±8.25)分,t=5.114,P=0.000]、每分钟上下台阶次数([24.81±5.19)vs(40.32±6.33)次/min,t=15.333,P=0.000]及每日平均运动时间([20.25±2.74)vs(72.30±8.52)min/d,t=14.305,P=0.000]均较治疗前明显升高(P=0.000)。每日平均运动时间随时间呈逐渐增高趋势,由72h开始,与治疗前比较,差异有显著性意义(P<0.01)。结论:LIPUS治疗可提高骨血管重建相关因子水平,促进BTJ损伤恢复,效果显著。

兔膝关节髌骨骨腱接点重接的低场MR扫描和早期表现

目的研究新西兰成年白兔膝关节髌骨骨腱接点重接模型MR扫描方法和表现。方法 20只成年兔左膝髌骨骨腱接点损伤修复分别于术后2周、4周行MR横断、矢状、冠状面扫描,扫描序列包括SET_1WI、GET_1WI、GET_2WI和STIR序列,分析MR表现。结果成年白兔左膝髌骨骨腱接点损伤修复模型术后2周MR可见髌骨骨腱接点重接区域结构模糊,髌韧带下1/4段肿胀;术后4周见髌骨清晰,髌韧带上3/4段轮廓可辨,髌韧带下1/4段水肿减轻,张力良好。结论 MR可显示兔膝关节髌骨骨腱接点重接术后早期变化,可望应用于长期观察髌骨骨腱接点重接修复的影像研究。

柠檬酸钙复合材料促进骨腱愈合的实验研究

目的本实验为研发一种新型促进骨腱愈合材料——柠檬酸钙复合材料,并在合适动物实验模型中探究材料对骨腱愈合的作用。方法实验动物选用成年日本大白兔48只,将其随机分为6组,均采用双侧兔趾长伸肌腱模型,实验侧(右侧)注射注射型海藻酸钠-明胶-柠檬酸钙复合材料,对照侧(左侧)注射等量海藻酸钠-明胶液体。术后2、4、6、8、10、12周取材,行标本组织学染色观察,采用Image-Pro Plus 8.0图像分析软件测定肌腱周围每1mm2新生骨面积,进行生物力学测试。结果术后6周内,组织学示骨腱界面中,实验侧Sharpey纤维、纤维软骨、钙化软骨出现明显早于对照侧,骨腱间间隙明显减小;2、4、6、8、10周及12周,每1mm2中新生骨面积实验组均高于对照组;术后6周内,实验侧骨腱愈合抗牵拉强度明显高于对照侧。结论可注射型海藻酸钠-明胶-柠檬酸钙对骨腱愈合具有明显的促进作用,这种作用主要发生在早期。

关节镜下同种异体骨腱骨移植重建后交叉韧带的护理

目的探讨关节镜下同种异体骨腱骨重建后交叉韧带的护理方法。方法 15例同种异体肌腱重建患者术前给予心理护理、拟定术后康复锻炼方案;术后给予观察伤口情况、监测体温变化、疼痛护理、饮食指导、预防并发症及功能锻炼。结果随访12～24个月,本组平均得分术前43分,术后为87分。结论早期、有效地开展功能锻炼是保证手术成功的重要步骤。

组织工程技术促进骨腱界面有序再生的应用展望

骨腱界面是存在于肌腱和骨之间的锚定结构,由于其特殊的生理结构,受损后骨腱界面往往形成瘢痕愈合,生物力学强度明显低于正常骨腱界面,修复效果较差。随着组织工程技术的发展,越来越多的专家学者把组织工程技术应用到骨腱界面的修复中来。本文就骨腱界面支架材料的仿生设计,种子细胞优化,细胞因子控释等方面对组织功能技术在骨腱界面修复的应用进行综述。

巨噬细胞在骨腱界面损伤修复中的作用

以肩袖损伤和交叉韧带损伤为代表的骨腱界面损伤修复过程均以炎症反应为起始阶段,而炎症早期招募到损伤部位的巨噬细胞对骨腱界面远期愈合质量至关重要。巨噬细胞在组织损伤修复的整个过程中发挥着重要的调控作用,是局部微环境调控的核心。在损伤修复早期,主要表现为M1型巨噬细胞分泌多种促炎因子,发挥清除损伤及坏死组织细胞的作用。随着损伤修复进展,M2型巨噬细胞逐渐增多,并释放多种抗炎因子和生长因子促进组织损伤的修复。该文分析了目前已发表的关于巨噬细胞和骨腱界面损伤的文献,对巨噬细胞在骨腱界面损伤修复中的作用及可能的机制进行了综述,为日后骨腱界面损伤修复的研究及治疗提供了新思路。

红花黄色素对兔前交叉韧带重建术后骨腱愈合影响的MicroCT研究

目的探讨骨腱愈合过程中病灶区Micro CT的变化,以及红花黄色素对骨腱愈合的影响。方法24只新西兰大白兔随机分为实验组和对照组,实验组于术中局部应用红花黄色素注射液,对照组局部使用生理盐水;构建前交叉韧带重建模型后,两组分别于术后4、8周各处死6只大白兔,借助苏木精-伊红(HE)染色和Mi-cro CT进行观察和评价。结果组内比较:在不同时间点之间骨体积分数(BV/TV)差异有统计学意义(P<0.01),其变化的时相规律为术后逐渐增强,第8周时最高;组间比较:在损伤修复不同时间点,实验组BV/TV明显高于对照组,差异统计学意义(P<0.01)。实验组在术后各时间点纤维软骨带的细胞生长、胶原纤维及腱细胞排列比对照组更为整齐。结论红花黄色素对兔前交叉韧带重建术后的骨腱愈合有积极作用。

取尺骨鹰嘴处骨腱移植重建手指末节伸肌腱止点观察

目的：探讨取尺骨鹰嘴处骨腱移植重建手指末节无骨折的伸肌腱止点断裂治疗方法。方法：对28例手指末节指骨不伴有骨折的伸肌腱止点损伤，克氏针固定远指间关节，切取尺骨鹰嘴处合适骨腱移植，通过骨髓道缝合骨腱止点，腱性部分重叠缝合。6周后拔除克氏针进行功能练习。结果：术后随访3个月。采用Dargan功能评定法评定疗效：优20例、良6例。骨腱止点完全愈合、伸指有力。结论：采用取尺骨鹰嘴处骨腱移植能够治疗手指末节伸肌腱止点断裂。手术方法简便，费用少，疗效好。

骨腱瓣移位结合与不结合钩钢板治疗陈旧性肩锁关节脱位疗效观察

目的:探讨陈旧性肩锁关节脱位的治疗方法。方法:应用单纯骨腱瓣移位和骨腱瓣移位结合钩钢板固定治疗陈旧性肩锁关节脱位。结果:全部病历随访1~7.5年,两种术式优良率均达到100%。结论:两种方法治疗陈旧性TossyⅢ型肩锁关节脱位长期效果无显著差异。

尿源性干细胞外泌体促进前交叉韧带重建术后骨腱界面愈合的效应及机制研究

目的:探讨尿源性干细胞外泌体促进前交叉韧带重建术后骨腱界面愈合的效应及机制。方法:选取3个月月龄健康新西兰大白兔50只,分为对照组15只,USCs-Exos 107组15只,USCs-Exos 108组20只,加入细胞悬液培养并收集细胞,检测细胞增殖和细胞成软骨标志基因(Sox9、Col2a1)表达情况。了解其促进前交叉韧带重建术后骨腱界面愈合的效应及机制。结果:细胞培养第4、5、6天,同时间点USCs-Exos 107组和USCs-Exos 108组人脐静脉内皮细胞(HUVECs)的A450值均高于对照组,差异有统计学意义(P=0.000);USCs-Exos108组HUVECs的A450值均高于USCs-Exos 107组,差异有统计学意义(P<0.05)。USCs-Exos 107组和USCs-Exos 108组完成迁移的细胞数均多于对照组,差异有统计学意义(P=0.002);USCs-Exos 108组完成迁移的细胞数均多于USCs-Exos 107组,差异有统计学意义(P=0.000)。结论:尿源性干细胞外泌体可促进前交叉韧带重建术后骨腱界面愈合,其与促进骨不连周围血管再生密切相关。

兔肩袖腱骨愈合过程中基质细胞衍生因子1的表达及作用机制

背景:近年在腱骨损伤领域部分学者将基质细胞衍生因子1搭载在组织工程支架上用以促进腱骨愈合,取得了较好的成效,但在基质细胞衍生因子1促进腱骨愈合机制及自然愈合过程中其是否参与修复,目前尚未明确。目的:研究兔肩袖全层冈上肌断裂后腱骨愈合过程中基质细胞衍生因子1表达,及其在腱骨损伤时对干细胞的迁移作用和最佳体外促迁移浓度。方法:随机取成年新西兰大白兔18只建立肩袖损伤模型,另取3只为空白对照。于造模后3,5,7,14,21,28 d各处死3只并处死空白组兔,取腱骨连接处组织保存在-80℃冰箱。应用ELISA反应检测损伤后各时间点愈合处基质细胞衍生因子1表达。取幼兔股骨骨髓间充质干细胞分离培养鉴定,通过transwell实验验证基质细胞衍生因子1对干细胞的促迁移作用效果及体外促迁移最佳浓度,将培养到P3代的干细胞与Brdu共培养后注入兔耳缘静脉,通过免疫组化染色验证干细胞是否迁移至损伤处。结果与结论:①基质细胞衍生因子1在肩袖腱骨愈合过程呈双峰表达,于伤后3 d明显增高(P<0.01)随后下降,于伤后5 d达最低,后再次升高于伤后14 d达峰值(P<0.01),然后下降;②细胞免疫组化染色可见标记有Brdu的干细胞确有迁移至损伤处;③transwell实验结果表明60-80 ng/mL的基质细胞衍生因子1对干细胞促迁移效果最好,而200 ng/mL浓度反而会起到抑制迁移作用;④基质细胞衍生因子1参与了肩袖腱骨愈合的炎症反应期和增殖期的愈合过程,其作用机制可能为通过促进干细胞迁移至损伤处并分化为各类细胞促进修复,并且基质细胞衍生因子1的促迁移作用存在于一定浓度范围,超出范围则可能起到抑制作用。

前交叉韧带重建术后1年腱骨愈合的MRI纵向随访30例分析

目的:探索采用腘绳肌腱前交叉韧带重建术(ACLR)后1年内腱骨愈合的磁共振成像(MRI)信号变化规律,并探讨腱骨愈合情况与临床主观功能评分的关系。方法:回顾性分析30例男性患者于2019年1月至2020年12月在深圳市第二人民医院采用腘绳肌腱行ACLR术后的3、6、12个月不同时间节点MRI上腱骨结合部的信号变化;其中腱骨愈合程度以胫骨段及股骨段骨道内移植物的信噪比(SNQ)表示。采用重复测量方差分析比较不同时间节点的骨道内移植物SNQ值的差异,采用t检验比较同一时间节点胫骨、股骨骨道内移植物的SNQ值的差异。结果:在术后3、6、12个月,股骨段及胫骨段移植物的SNQ值在3个月开始逐渐升高,6个月达峰,随后逐渐下降;股骨段内移植物的SNQ值在3、6、12个月之间的差异具有统计学意义(F=6.88,P<0.05);胫骨段移植物的SNQ值在3、6、12个月不同时间节点组间差异无统计学意义(F=2.87,P>0.05)。在术后1年内,同一时间节点,股骨段移植物的SNQ值显著高于胫骨段,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论:前交叉韧带腱骨结合部信号在6月达峰,随后逐渐下降,股骨段愈合差于胫骨段。

中药调控相关信号通路促进腱骨愈合的研究进展

腱骨愈合是一种复杂的生物学过程,多条信号通路参与其中,如转化生长因子β信号通路、骨形态发生蛋白信号通路、Wnt信号通路、成纤维细胞生长因子信号通路、核因子κB信号通路等。本文总结了中药调控相关信号通路促进腱骨愈合的研究现状,发现多种中药单体或提取物(如黄芩素、淫羊藿苷、骨碎补总黄酮、小白菊内酯、三七总皂苷等)及中药复方(如桃红四物汤、六味地黄丸、续筋接骨液等)能够通过调节以上信号通路促进骨形成、抗炎、抗氧化等,进而有效促进腱骨愈合。

补片技术对巨大肩袖撕裂术后腱骨愈合的研究进展

肩袖撕裂是最常见的肩部损伤之一,影响超过40%的60岁以上的患者,随着微创技术的发展,肩关节镜下肩袖修复手术对于缓解肩关节疼痛、恢复肩关节功能具有良好的临床疗效。巨大肩袖撕裂是指撕裂部位>5 cm的损伤或肩袖部位包含两根及以上肌腱断裂的肩袖撕裂,一般多需要手术治疗。研究表明,肩袖补片可提高术后肩袖组织的力学性能,同时促进腱骨界面的愈合潜能,改善肩关节整体功能,增加肩袖肌腱厚度,增加肩关节活动度,降低再撕裂率。随着组织工程学的不断进步,肩袖补片的研究与应用正逐渐成为巨大肩袖撕裂修补中的热门领域,本文对补片技术对巨大肩袖撕裂术后腱骨愈合的应用及未来发展方向进行综述。

腱-骨界面的形成、重塑与再生研究进展

正常腱-骨界面具有复杂的拓扑异构特征,其发育和形成涉及多因素的共同调控。而在其发生损伤后,自然修复与愈合的结果通常是肌腱与皮质骨之间通过新生纤维瘢痕组织形成连接。因此,目前研究旨在通过设计具有拓扑异构特征的仿生支架、调控局部微环境等策略实现腱-骨界面的重塑与再生。本文中就腱-骨界面的形成、重塑与再生进行综述,旨在为腱-骨界面损伤的治疗提供思路。

表面修饰人工韧带以促进前交叉韧带重建后腱骨愈合的研究进展

前交叉韧带(anterior cruciate ligament, ACL)损伤在膝关节韧带损伤中最常见,通常为强大暴力所致,其损伤破坏膝关节稳定性,可引起关节软骨的退变及半月板损伤,严重者将发展为骨性关节病。现阶段在关节镜下行前交叉韧带重建(anterior cruciate ligament reconstruction, ACLR)是治疗前交叉韧带(ACL)损伤的金标准,临床上多采用以聚对苯二甲酸乙二醇酯(pET)为材料的LARS(ligament advanced reinforcement system)人工韧带对损伤的前交叉韧带进行手术重建,随访中短期效果较好,但移植物与宿主骨隧道生物愈合较差,难以达到术后移植物真正“韧带化”要求。对人工韧带进行涂层修饰改性可改善其亲水性和生物相容性进而可促进移植物与骨隧道的愈合。本文就对人工韧带行表面修饰以促进ACLR后腱骨愈合的研究进展作一综述。

Kartogenin促进肩袖损伤修复小鼠模型腱-骨愈合的作用及机制

目的构建纤维蛋白-Kartogenin(KGN)释放体系,探索其对肩袖损伤修复小鼠模型腱-骨愈合的作用及机制。方法使用纤维蛋白封闭剂负载KGN,使用高效液相色谱法测定体外释放效率。采用随机数字表法将小鼠分为KGN组和对照组,每组36只。构建肩袖损伤修复小鼠模型,每只小鼠均接受单侧冈上肌腱分离和经骨修复,对照组在腱-骨修复部位应用纤维蛋白空载体系,KGN组在腱-骨修复部位应用纤维蛋白-KGN释放体系。采用qRT-PCR检测两组小鼠肩关节中肌腱重塑和成熟相关分子腱调蛋白(TNMD)、血小板衍生生长因子-AA(PDGFAA)、软骨形成基因Y染色体性别决定区盒转录因子9(SOX9)、成骨基因SP7转录因子(SP7)mRNA表达水平;采用免疫组化染色法检测小鼠肩关节TNMD、PDGFAA、SOX9、SP7蛋白表达情况;采用HE染色及阿尔新蓝染色染色观察纤维软骨面积,采用天狼星红染色观察胶原纤维密度。结果纤维蛋白-KGN释放体系中的KGN可释放5 d,释放量随时间递减,以前3天为主,占释放体系中KGN总量的34.29%。与对照组比较,KGN组小鼠肩关节中TNMD、PDGFAA、SOX9、SP7 mRNA相对表达水平均上调(均P<0.01),相应蛋白的表达增加,纤维软骨面积减小,而胶原纤维密度增加。结论KGN可以促进肩袖损伤修复小鼠模型腱-骨愈合,可能是通过促进骨生成和肌腱的重塑与成熟实现的。