目的:为深入了解畜禽骨蛋白肽的滋味特征及其差异,探究电子舌快速判别鉴定不同物种畜禽骨蛋白肽的可行性。方法:取牦牛骨蛋白肽(yak bone peptides,YBPs)、黄牛骨蛋白肽(bovine bone peptides,BBPs)、猪骨蛋白肽(pig bone peptides,PBPs...目的:为深入了解畜禽骨蛋白肽的滋味特征及其差异,探究电子舌快速判别鉴定不同物种畜禽骨蛋白肽的可行性。方法:取牦牛骨蛋白肽(yak bone peptides,YBPs)、黄牛骨蛋白肽(bovine bone peptides,BBPs)、猪骨蛋白肽(pig bone peptides,PBPs)、鸡骨蛋白肽(chicken bone peptides,CBPs)各4份,共16份畜禽骨蛋白肽样本,首先分析畜禽骨蛋白肽的基本营养组分及氨基酸组成,明确滋味特征差异的物质基础,其次利用电子舌检测结合多元统计分析对种间畜禽骨蛋白肽的滋味特征数据进行定量判别分析。结果:4种畜禽骨蛋白肽的基本组分及氨基酸组成存在差异。主成分分析(principal component analysis,PCA)和判别因子分析(discriminant factor analysis,DFA)可有效区分畜禽骨蛋白肽的种间差异,且DFA的判别效果明显优于PCA;偏最小二乘判别分析、正交偏最小二乘判别分析及Fisher判别模型对畜禽骨蛋白肽种间滋味特征的判别能力良好,Fisher模型判别正确率为68.8%。结论:鲜味、甜味和苦味为4种畜禽骨蛋白肽主要的差异滋味特征,电子舌滋味检测结合多元统计分析能够为畜禽骨蛋白肽判别提供一种快速、可靠的技术手段。展开更多
【目的】制备骨蛋白肽(livestock and poultry bone peptides,LBPs)用于功能性骨源食品的开发是畜禽骨副产物高值化加工利用的重要途径之一。选取4种主要畜禽骨原料基于相同工艺分别制备LBPs,对比分析其理化特性与生物活性,为功能性骨...【目的】制备骨蛋白肽(livestock and poultry bone peptides,LBPs)用于功能性骨源食品的开发是畜禽骨副产物高值化加工利用的重要途径之一。选取4种主要畜禽骨原料基于相同工艺分别制备LBPs,对比分析其理化特性与生物活性,为功能性骨源食品的开发及畜禽骨资源的高值化加工利用提供参考。【方法】以牦牛腿骨、黄牛腿骨、猪腿骨及鸡腿骨为原料分别制备牦牛骨蛋白肽(yak bone peptides,YBPs)、黄牛骨蛋白肽(bovine bone peptides,BBPs)、猪骨蛋白肽(porcine bone peptides,PBPs)、鸡骨蛋白肽(chicken bone peptides,CBPs),并对4种LBPs基本营养组分、氨基酸组成、分子量分布、粒径分布等理化性质进行表征;对比分析4种LBPs的促成骨细胞增殖、促巨噬细胞增殖、血管紧张素转换酶抑制(angiotensin converting enzyme inhibitors,ACEI)、抗氧化等生物活性差异。【结果】YBPs、BBPs和PBPs粗蛋白含量分别为(89.70±0.77)%、(90.43±0.88)%和(89.36±1.32)%,显著高于CBPs((79.18±1.49)%);4种LBPs均缺乏色氨酸,CBPs的必需氨基酸和含硫氨基酸均显著高于YBPs、BBPs和PBPs;4种LBPs主要由MW<2 kD的小分子多肽片段组成,占比约90%;LBPs粉体粒径分布差异不显著,主要集中于10—20μm和40—60μm范围内;不同种源LBPs生物活性特征分析发现:YBPs促成骨细胞增殖效应最显著,0.5 mg·mL^(-1)时的促增殖率达37.27%;BBPs促巨噬细胞增殖效应最强,5 mg··mL^(-1)时的促增殖率达39.26%;PBPs的ACEI活性最强,15 mg·mL^(-1)时ACE活性抑制率为82.37%;与BBPs、PBPs和CBPs相比,YBPs的综合抗氧化能力最强。【结论】4种不同种源LBPs的理化特性存在一定的差异,但符合功能性骨源食品的原料要求。不同种源LBPs的生物活性存在一定的差异,因而适宜于不同功能性骨源食品的开发:YBPs的促成骨细胞增殖效应及综合抗氧化能力最强,更适宜于改善骨健康及抗氧化类功能性骨源食品的开发;BBPs的促巨噬细胞增殖效应最强,更适宜于开发免疫调节类功能性骨源食品;PBPs的ACEI活性最高,更适宜于开发血压控制类功能性骨源食品;CBPs具备更优良的粉体性质及更高的矿物质含量,可用作膳食营养补充剂。展开更多
含有编码人骨形成蛋白4成熟肽(Bone morphogenetic protein 4 mature peptide,hBMP-4m)cDNA表达质粒的菌株,经50代传代,质粒不丢失,仍然稳定高表达hBMP-4m。将此菌株导入15 L NBS发酵罐中进行恒溶氧高密度发酵、诱导表达,测定发酵菌液OD...含有编码人骨形成蛋白4成熟肽(Bone morphogenetic protein 4 mature peptide,hBMP-4m)cDNA表达质粒的菌株,经50代传代,质粒不丢失,仍然稳定高表达hBMP-4m。将此菌株导入15 L NBS发酵罐中进行恒溶氧高密度发酵、诱导表达,测定发酵菌液OD600值为43.5,离心收集菌体,PAGE电泳结果hBMP-4m占细菌总蛋白量的39％。悬浮所收集的菌体、裂菌,洗涤后的包涵体中hBMP-4m占蛋白量的85％。将少量包涵体用8 mol尿素缓冲液溶解分别上SP阳离子和Q阴离子交换柱,用连续盐浓度的洗脱液洗脱蛋白,收集各蛋白峰做蛋白电泳分析,找到洗脱液的最合适盐浓度。然后将全部包涵体用8 mol尿素缓冲液溶解,上阳离子交换柱SP柱,以最佳盐浓度洗脱液洗脱,获得纯度为91％的hBMP-4m。再上阴离子交换柱Q柱,最佳盐浓度洗脱液洗脱后,所得hBMP-4m纯度为98％。展开更多
含有能够高表达重组人骨形成蛋白成熟肽(recombinant human bone morphogenetic protein 4 mature peptide,rhBMP- 4m)质粒的工程菌株,导入15 L NBS发酵罐中进行恒溶氧高密度发酵和诱导表达,测定发酵菌液OD600值为30．8。离心收集菌体, ...含有能够高表达重组人骨形成蛋白成熟肽(recombinant human bone morphogenetic protein 4 mature peptide,rhBMP- 4m)质粒的工程菌株,导入15 L NBS发酵罐中进行恒溶氧高密度发酵和诱导表达,测定发酵菌液OD600值为30．8。离心收集菌体, PAGE电泳后光密度扫描表明hBMP-4m占细菌总蛋白量的42％。悬浮所收集的菌体,裂菌,洗涤4次后的包涵体中hBMP-4m占蛋白量的83．2％。预先取少量样品进行探索实验后,全部包涵体用8 mol尿素缓冲液溶解,上SP-Sepharose FF阳离子柱,以0.35 mol NaCl洗脱,获得纯度为96％的hBMP-4m。其收获量为1．34g/L发酵液;收得率为36．4％。结果表明:使用这套工艺流程大规模制备hBMP-4m,能够得到较好的收得率、较高的收获量和纯度。展开更多
目的验证在大鼠节段性骨缺损模型中骨形态发生蛋白结合肽（BMP Binding Peptide,BBP）对于重组人骨形态发生蛋白-2（recombinent human bone morphogenetic protein-2,rhBMP-2）骨诱导作用的影响。方法 70只缺损大鼠分别分成7组,每组不...目的验证在大鼠节段性骨缺损模型中骨形态发生蛋白结合肽（BMP Binding Peptide,BBP）对于重组人骨形态发生蛋白-2（recombinent human bone morphogenetic protein-2,rhBMP-2）骨诱导作用的影响。方法 70只缺损大鼠分别分成7组,每组不同剂量的rhBMP-2＋/-1000 gBBP,4w和8w后分别摄片,动物8w后处死,股骨样本分别手工评估,采用uCT测量骨容积,随后分别采用组织学和生物力学分析。结果高剂量（10 g）rhBMP-2组术后8w可见骨愈合,骨缺损处骨完全覆盖和桥接,但低剂量（5 g和2 g）rhBMP-2组术后8w骨愈合欠佳。与单独应用rhBMP-2相比,使用低剂量的rhBMP-2复合一定量的BBP可以取得更满意的骨形成量。BBP增强rhBMP-2的骨形成活性发生于4~8w时,而在术后早期并无明显作用。单纯应用BBP仅可见骨缺损处局部的钙化,未见骨愈合。结论 BBP能显著增强rhBMP-2的骨形成活性,这种增强作用需要一定时间来产生效果;其活性发生于术后4~8w时,在术后早期并无明显作用。而且BBP本身并没有骨诱导潜力,仅仅能增强rhBMP-2的骨形成活性。BBP起到缓释作用,与rhBMP-2紧密结合后,让rhBMP-2缓慢而持久的释放。展开更多
文摘目的:为深入了解畜禽骨蛋白肽的滋味特征及其差异,探究电子舌快速判别鉴定不同物种畜禽骨蛋白肽的可行性。方法:取牦牛骨蛋白肽(yak bone peptides,YBPs)、黄牛骨蛋白肽(bovine bone peptides,BBPs)、猪骨蛋白肽(pig bone peptides,PBPs)、鸡骨蛋白肽(chicken bone peptides,CBPs)各4份,共16份畜禽骨蛋白肽样本,首先分析畜禽骨蛋白肽的基本营养组分及氨基酸组成,明确滋味特征差异的物质基础,其次利用电子舌检测结合多元统计分析对种间畜禽骨蛋白肽的滋味特征数据进行定量判别分析。结果:4种畜禽骨蛋白肽的基本组分及氨基酸组成存在差异。主成分分析(principal component analysis,PCA)和判别因子分析(discriminant factor analysis,DFA)可有效区分畜禽骨蛋白肽的种间差异,且DFA的判别效果明显优于PCA;偏最小二乘判别分析、正交偏最小二乘判别分析及Fisher判别模型对畜禽骨蛋白肽种间滋味特征的判别能力良好,Fisher模型判别正确率为68.8%。结论:鲜味、甜味和苦味为4种畜禽骨蛋白肽主要的差异滋味特征,电子舌滋味检测结合多元统计分析能够为畜禽骨蛋白肽判别提供一种快速、可靠的技术手段。
文摘【目的】制备骨蛋白肽(livestock and poultry bone peptides,LBPs)用于功能性骨源食品的开发是畜禽骨副产物高值化加工利用的重要途径之一。选取4种主要畜禽骨原料基于相同工艺分别制备LBPs,对比分析其理化特性与生物活性,为功能性骨源食品的开发及畜禽骨资源的高值化加工利用提供参考。【方法】以牦牛腿骨、黄牛腿骨、猪腿骨及鸡腿骨为原料分别制备牦牛骨蛋白肽(yak bone peptides,YBPs)、黄牛骨蛋白肽(bovine bone peptides,BBPs)、猪骨蛋白肽(porcine bone peptides,PBPs)、鸡骨蛋白肽(chicken bone peptides,CBPs),并对4种LBPs基本营养组分、氨基酸组成、分子量分布、粒径分布等理化性质进行表征;对比分析4种LBPs的促成骨细胞增殖、促巨噬细胞增殖、血管紧张素转换酶抑制(angiotensin converting enzyme inhibitors,ACEI)、抗氧化等生物活性差异。【结果】YBPs、BBPs和PBPs粗蛋白含量分别为(89.70±0.77)%、(90.43±0.88)%和(89.36±1.32)%,显著高于CBPs((79.18±1.49)%);4种LBPs均缺乏色氨酸,CBPs的必需氨基酸和含硫氨基酸均显著高于YBPs、BBPs和PBPs;4种LBPs主要由MW<2 kD的小分子多肽片段组成,占比约90%;LBPs粉体粒径分布差异不显著,主要集中于10—20μm和40—60μm范围内;不同种源LBPs生物活性特征分析发现:YBPs促成骨细胞增殖效应最显著,0.5 mg·mL^(-1)时的促增殖率达37.27%;BBPs促巨噬细胞增殖效应最强,5 mg··mL^(-1)时的促增殖率达39.26%;PBPs的ACEI活性最强,15 mg·mL^(-1)时ACE活性抑制率为82.37%;与BBPs、PBPs和CBPs相比,YBPs的综合抗氧化能力最强。【结论】4种不同种源LBPs的理化特性存在一定的差异,但符合功能性骨源食品的原料要求。不同种源LBPs的生物活性存在一定的差异,因而适宜于不同功能性骨源食品的开发:YBPs的促成骨细胞增殖效应及综合抗氧化能力最强,更适宜于改善骨健康及抗氧化类功能性骨源食品的开发;BBPs的促巨噬细胞增殖效应最强,更适宜于开发免疫调节类功能性骨源食品;PBPs的ACEI活性最高,更适宜于开发血压控制类功能性骨源食品;CBPs具备更优良的粉体性质及更高的矿物质含量,可用作膳食营养补充剂。
文摘含有编码人骨形成蛋白4成熟肽(Bone morphogenetic protein 4 mature peptide,hBMP-4m)cDNA表达质粒的菌株,经50代传代,质粒不丢失,仍然稳定高表达hBMP-4m。将此菌株导入15 L NBS发酵罐中进行恒溶氧高密度发酵、诱导表达,测定发酵菌液OD600值为43.5,离心收集菌体,PAGE电泳结果hBMP-4m占细菌总蛋白量的39％。悬浮所收集的菌体、裂菌,洗涤后的包涵体中hBMP-4m占蛋白量的85％。将少量包涵体用8 mol尿素缓冲液溶解分别上SP阳离子和Q阴离子交换柱,用连续盐浓度的洗脱液洗脱蛋白,收集各蛋白峰做蛋白电泳分析,找到洗脱液的最合适盐浓度。然后将全部包涵体用8 mol尿素缓冲液溶解,上阳离子交换柱SP柱,以最佳盐浓度洗脱液洗脱,获得纯度为91％的hBMP-4m。再上阴离子交换柱Q柱,最佳盐浓度洗脱液洗脱后,所得hBMP-4m纯度为98％。
文摘含有能够高表达重组人骨形成蛋白成熟肽(recombinant human bone morphogenetic protein 4 mature peptide,rhBMP- 4m)质粒的工程菌株,导入15 L NBS发酵罐中进行恒溶氧高密度发酵和诱导表达,测定发酵菌液OD600值为30．8。离心收集菌体, PAGE电泳后光密度扫描表明hBMP-4m占细菌总蛋白量的42％。悬浮所收集的菌体,裂菌,洗涤4次后的包涵体中hBMP-4m占蛋白量的83．2％。预先取少量样品进行探索实验后,全部包涵体用8 mol尿素缓冲液溶解,上SP-Sepharose FF阳离子柱,以0.35 mol NaCl洗脱,获得纯度为96％的hBMP-4m。其收获量为1．34g/L发酵液;收得率为36．4％。结果表明:使用这套工艺流程大规模制备hBMP-4m,能够得到较好的收得率、较高的收获量和纯度。
