纯钛-骨补碎-生物复合涂层的研究

钛及钛合金在骨植入材料领域应用广泛,但也面临不能诱导骨生长且无抗菌活性等一系列问题,在钛合金表面超声微弧氧化膜,再用植酸偶联剂/骨补碎提取液制备生物活性涂层复合材料,改善钛合金无生物活性的问题。方法以浓度依次提高的骨碎补为实验组,经过植酸等手段处理的涂层作为对照组,利用能谱、接触角,SEM等手段研究载药涂层的耐蚀性,生物活性以及与适应性等涂层性能。结果当骨补碎浓度为50 g/L时涂层表面变得平整光滑,涂层有较好的润湿性,经过模拟体液浸泡后发现涂层表面长出大量的类羟基磷灰石,证明制备的新型复合涂层材料综合性能优良。结论钛合金UMAO-植酸/骨补碎-生物复合涂层具有较好的生物活性。

骨碎补及其活性成分防治骨质疏松症的作用机制

骨碎补是补肾强骨的经典药材,药理学研究显示其主要活性成分为黄酮类和二氢黄酮类柚皮苷,其在抗骨质疏松、修复骨缺损等方面发挥着积极作用。细胞分子生物学研究提示骨碎补对成骨细胞、破骨细胞和间充质干细胞具有多通路、多因子调节作用,如Wnt/β-catenin、MAPK、OPG/RANKL/RANK、Notch、BMP-Smads、PI3K/Akt等信号通路和TNF-α、白介素-1(IL-1)、白介素-6(IL-6)、雌激素及其受体、组织蛋白酶K(CTSK)等细胞因子。笔者重点综述了中药骨碎补及其提取物防治骨质疏松的信号通路和细胞因子研究进展,旨在为骨碎补的药理药效研究及临床应用提供参考。

骨碎补大棚栽培品与野生品的广靶代谢组学比较分析

【目的】骨碎补是一种多年生传统中药材,目前药材原料多来源于野生采集,鲜见有人工栽培的报道。因过度采集,骨碎补野生资源破坏严重,导致药材资源锐减,人工种植成为必然趋势。在探索骨碎补设施大棚栽培技术的基础上,利用代谢组学技术开展大棚栽培药材与野生药材的靶向代谢组学比较研究,探讨栽培品与野生品主要代谢产物的差异,为骨碎补人工栽培技术推广提供依据。【方法】以骨碎补基源植物槲蕨为研究对象,采用UPLC-MS/MS分析技术对比分析设施大棚栽培3年的槲蕨根茎与其野生根茎之间的差异代谢物,并开展差异代谢物富集通路分析。【结果】从两种药材检测到的749种代谢物中筛选到100种差异代谢物,且与野生品相比,大棚栽培品中有58种代谢物含量上调、42种含量下调。这些差异代谢物主要包括黄酮类化合物、有机酸、氨基酸及其衍生物、酚酸类、生物碱、游离脂肪酸等。在大棚栽培品中,黄酮醇、黄酮碳糖苷、糖及糖类代谢物含量全部上调;而在野生品中,氨基酸及衍生物、酚酸类、溶血磷脂酰胆碱和花青素类代谢物含量上调幅度较大。通路富集分析结果显示,100个差异代谢物共注释到47条代谢通路,其中显著富集的有维生素B6代谢、芪类化合物生物合成、二芳基庚烷生物合成、姜酚的生物合成、黄酮和黄酮醇生物合成、半胱氨酸代谢、蛋氨酸代谢、花青素生物合成、氨酰基tRNA生物合成等途径。【结论】大棚栽培的骨碎补,其黄酮醇、黄酮碳糖苷、糖及糖类代谢物化合物含量显著高于野生品,因总黄酮被公认为主要药效成分,因此大棚栽培的骨碎补比野生品具有主效成分优势,可为骨碎补规模化设施栽培或人工栽培提供科学依据。

骨碎补总黄酮及其成分柚皮苷促进牵张成骨新骨愈合作用比较

目的中药骨碎补是中医骨伤科的常用药,现代研究表明,骨碎补总黄酮及其成分柚皮苷均能促进牵张成骨过程。通过动物体内实验,观察比较骨碎补总黄酮和柚皮苷对牵张成骨骨愈合的影响。方法取雄性新西兰兔15只,按前期研究造模步骤完成牵张成骨模型兔造模;将模型兔分为3组(n=5),在术后第2天开始分别予生理盐水、骨碎补总黄酮[200 mg/(kg·d)]和柚皮苷[100 mg/(kg·d)]灌胃给药。术后第56天处死动物,观察各组骨标本牵张区骨缺损修复情况,并行显微CT(Micro computed tomography,Micro-CT)检查、生物力学检测。结果与柚皮苷组相比,骨碎补总黄酮组骨骼矿物质密度(Bone mineral density,BMD)、骨表面积组织体积比值(Bone volume to tissue volume,BV/TV)、骨小梁厚度(Trabecular thickness,Tb.Th)、骨小梁数量(Trabecular number,Tb.N)更高,差异有统计学意义(P<0.05),而骨碎补总黄酮组骨小梁分离度(Trabecular separation,Tb.Sp)更小,差异有统计学意义(P<0.05)。与柚皮苷组相比,骨碎补总黄酮组骨标本能承受的最大应力(Maximum stress,N/mm^(2))和最大载荷(Maximum loading,N)均更大(P<0.05)。结论本研究表明,骨碎补总黄酮和柚皮苷对牵张成骨骨愈合均有促进作用,而总黄酮比其成分柚皮苷更显著。

骨碎补抑制骨髓腔内脂肪异常积累引起的脂毒性介导的成骨细胞焦亡及其机制

目的探讨骨碎补(rhizoma drynariae,Rhd)对骨髓腔内脂肪异常积累引起的脂毒性介导成骨细胞焦亡的影响及其机制。方法体内构建卵巢摘除(ovariectomy,OVX)骨质疏松小鼠模型,用Rhd进行灌胃,给药8周后称重,取股骨组织和血清。HE染色观察髓腔内脂肪堆积状态。体外构建成脂-成骨细胞共培养系统,茜素红S(alizarin red S,ARS)染色观察钙化结节的数量,碱性磷酸酶(alkaline phosphatease,ALP)染色检测碱性磷酸酶活性水平,乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH)检测和Hoechst33342/PI染色检测共培养下成骨细胞(osteoblasts,OBs)焦亡水平,酶联免疫吸附试验(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)检测细胞培养上清液中白细胞介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)和白细胞介素-18(interleukin-18,IL-18)的释放量,Western blot检测成骨能力相关蛋白Runt相关转录因子2(runt-related transcription factor 2,RUNX2)、骨形态发生蛋白2(bone morphogenetic protein,BMP2)和1型胶原蛋白(collagen-1,COL-1)。选择NLRP3特异性抑制剂MCC950作为阳性对照检测焦亡相关蛋白NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3(NOD-like receptor thermal protein domain associated protein 3,NLRP3)、半胱天冬酶-1(cysteinyl aspartate specific proteinase-1,CASP-1)、效应蛋白消皮素D(gasdermin D,GSDMD)、IL-1β和IL-18的表达。结果OVX小鼠髓腔内发生骨质流失伴大量脂肪堆积,Rhd灌胃可以有效缓解这一趋势。在成脂-成骨共培养系统中,共培养环境抑制了OBs活性和OBs中ALP活性及矿化结节,抑制了RUNX2、BMP2、COL-1蛋白表达,并且诱导焦亡发生,提高了LDH释放量和PI染色细胞阳性率,以及上调NLRP3、CASP-1、GSDMD、IL-1β和IL-18蛋白表达水平。而这一趋势在Rhd干预后得到逆转。结论大量脂肪堆积引起的脂毒性可以抑制OBs活性并通过激活NLRP3炎症小体诱导OBs焦亡,而Rhd可能通过抑制NLRP3炎症小体的激活以抑制OBs焦亡和炎性反应,从而起到抗骨质疏松的作用。

骨碎补总黄酮调控H型血管影响大鼠股骨Masquelet诱导膜模型的骨重建

背景:多项研究发现,骨碎补总黄酮可促进诱导膜中血管新生、改善诱导膜生物性能、加速诱导膜技术骨重建,但相关分子机制仍需进一步探究。目的:观察骨碎补总黄酮通过调控H型血管对大鼠股骨Masquelet诱导膜模型骨重建的影响。方法:将36只雄性SD大鼠按体质量分层后随机分为空白组、模型组、中药组,每组12只,3组均建立4 mm右后肢股骨骨缺损模型,模型组与中药组骨缺损处充填聚甲基丙烯酸甲酯骨水泥;造模后6周,空白组骨缺损处填充大鼠自体尾骨,模型组与中药组取出诱导膜内的骨水泥后植入大鼠自体尾骨。植骨第3天开始,中药组灌胃给予骨碎补总黄酮157.5 mg/(kg·d),其余两组灌胃给予生理盐水,连续给药至植骨后8周。植骨后8周取材进行相关检测。结果与结论:①X射线片显示,空白组缺损区骨折线清晰,仅有少量骨痂形成;模型组缺损区可见不连续皮质骨,骨缺损区仍存在;中药组缺损区充满新生骨组织,骨髓腔与部分皮质骨形成,骨折线消失。②Micro-CT扫描显示,空白组缺损区新生骨量较少,模型组缺损区骨小梁数量明显增多,中药组大量新生骨组织填充于骨缺损区。③苏木精-伊红染色显示,空白组缺损区仅见少量新骨形成,成骨质量较差;模型组缺损区有较多的新骨形成,但骨组织内夹杂有部分纤维结缔组织;中药组缺损区可见大量新骨形成,成骨质量最佳。④CD31/Emcn免疫荧光双标染色显示,空白组骨缺损区新生骨组织内H型血管数量稀少、分布稀疏;相比空白组,模型组骨缺损区骨组织内含更多H型血管,血管呈相对规则的条状分布;中药组骨缺损区H型血管数量最多,并且血管分布密集。⑤结果表明,骨碎补总黄酮可通过上调H型血管表达增强成血管-成骨作用,提高大鼠股骨Masquelet诱导膜模型成骨效能、促进骨重建。

基于网络药理学和分子对接探讨三七-骨碎补治疗股骨头坏死的作用机制

目的 基于网络药理学和分子对接探究“三七-骨碎补”药对治疗股骨头坏死的作用机制。方法 利用中药系统药理学数据库与分析平台(TCMSP)对“三七-骨碎补”药对的活性成分及成分靶点进行采集、筛选,通过CNKI、PubMed数据库对其进行补充,并利用UNIPORT数据库对靶点进行转换;通过GeneCards、TTD和OMIM数据库收集股骨头坏死的作用靶点,取得交集靶点后导入STRING数据库,生成PPI网络,并通过Cytoscape 3.9.0软件构建中药-活性成分-靶点网络;通过DAVID数据库对核心靶点进行GO功能富集分析与KEGG通路富集分析。结果 共得到“三七-骨碎补”药对的20个活性成分和229个潜在靶点,1386个股骨头坏死的靶点。GO富集分析主要包括炎症反应、凋亡过程、调节血管生成、与雌性激素响应等功能;KEGG富集分析主要包括脂质与动脉硬化、白细胞介素-17信号通路、类风湿性关节炎等信号通路。结论 “三七-骨碎补”药对治疗股骨头坏死具有成分多、靶点广、通路复杂的特点,可能通过IL6、TNF、TP53等靶点以及脂质代谢、白细胞介素-17等信号通路共同发挥治疗股骨头坏死的作用。

骨碎补活性成分促进骨缺损后骨重建的机制及其组织工程学应用

骨缺损的治疗难度大、周期长,一直都是骨科临床面临的重大挑战。骨碎补是我国中医骨伤科的常用药材,其活性成分(主要为黄酮类)可促进骨髓间充质干细胞成骨分化、成骨细胞增殖、成血管-成骨耦联,抑制破骨细胞活力,从而促进骨缺损区的骨质矿化和修复重建。骨碎补活性成分是骨再生治疗药物的良好替代品,将其负载于组织工程支架材料上,可极大地提高药物的生物利用度。同时,缓释微球进一步解决了支架药物的突发性释放等问题,应用其所制备的含骨碎补活性成分的复合支架具有较好的成骨活性和骨诱导性,骨修复效果确切,可满足骨移植物的多样化性能要求,临床应用前景广阔。

骨碎补UPLC指纹图谱与人骨肉瘤细胞MG63中碱性磷酸酶活性的谱效关系研究

建立骨碎补生品和砂烫品提取物的UPLC指纹图谱,并研究骨碎补提取物与人骨肉瘤细胞MG63中碱性磷酸酶(ALP)活性之间的谱效关系。采用UPLC法建立骨碎补生品和烫品的指纹图谱并通过UPLC-Q-TOF MS法对其化学成分进行鉴别;通过测定MG63细胞中ALP活性检测骨碎补提取物对MG63细胞成骨分化的影响;采用灰色关联度分析、双变量相关性分析以及偏最小二乘回归分析法分析骨碎补生品和烫品的UPLC特征指纹峰与其促ALP活性之间的谱效关系。在标定的12个共有峰中,确定了4、5、12号峰与ALP活性呈正相关,其对应的物质依次是咖啡酸-4-O-β-D-吡喃葡萄糖苷、儿茶素7-葡糖苷、柚皮苷,为深入研究骨碎补的促成骨分化活性物质基础提供依据。

骨碎补研究进展

骨碎补是水龙骨科植物槲蕨[Drynaria fortune(Kunze)J.Sm.]的干燥根茎,是骨伤治疗常用中药,具有治疗疼痛、补肾强筋骨的功效,所含化学成分有黄酮类、酚酸类、木质素、甾体类和苷类等,被广泛用于治疗骨科相关疾病,药用价值高。通过对骨碎补的生物学习性、植物学特征、繁育技术等进行综述,以期为骨碎补的研究和进一步开发利用提供参考和借鉴。

骨碎补总黄酮双水相提取工艺优化及抗氧化活性研究

试验旨在优化超声辅助PEG400-(NH_(4))_(2)SO_(4)双水相体系提取骨碎补中总黄酮的工艺,并对骨碎补中总黄酮的抗氧化活性进行评价。在单因素试验的基础上,以(NH_(4))_(2)SO_(4)质量分数、PEG400质量分数、超声功率以及超声时间为自变量,以骨碎补中总黄酮得率为因变量,采取响应面法优化骨碎补中总黄酮的提取工艺。以维生素C为阳性对照,分别测定骨碎补总黄酮对1,1-二苯基-2-苦基肼自由基(1,1-Diphenyl-2-picryl-hydrazyl radical,DPPH·)、羟基自由基(Hydroxyl radical,·OH)的清除能力和铁还原力。结果表明:骨碎补中总黄酮的最佳提取工艺为PEG400质量分数19%,(NH_(4))_(2)SO_(4)质量分数19%,超声功率180 W,超声时间40 min,该条件下骨碎补总黄酮得率为183.29 mg/g,与理论预测值接近。抗氧化活性分析表明,在一定的浓度范围内,骨碎补总黄酮对DPPH·、·OH的清除能力和铁还原力随浓度的增加不断增强并趋于稳定。以PEG400-(NH_(4))_(2)SO_(4)双水相体系提取骨碎补中总黄酮的方法可行,且最佳工艺条件可靠。

基于指纹图谱及聚类分析的烫骨碎补质量评价研究

目的通过HPLC指纹图谱与聚类分析方法对烫骨碎补进行质量评价研究。方法采用Ultimate XB-C18(4.6 mm×250 mm,5μm),流动相为乙腈-0.05%磷酸溶液,梯度洗脱,检测波长为218 nm,柱温为30℃,流速1.0 mL/min。建立烫骨碎补的指纹图谱,利用2012版中药指纹图谱相似度评价系统,通过SPSS 22.0软件进行聚类分析。结果10批烫骨碎补样品的指纹图谱共标定了8个共有峰,相似度均>0.95。聚类分析结果显示,受地域影响,烫骨碎补从质量上可分为三类,江西和广西产的烫骨碎补化学成分较为接近。结论建立的方法科学合理、操作简便,可用于烫骨碎补内在质量的综合评价。

黔东南产骨碎补品质分析及产地加工对 柚皮苷含量影响研究

目的:了解黔东南产骨碎补品质及产地加工对品质的影响,为黔东南骨碎补资源开发提供参考。方法:参照《中国药典》2020年版进行薄层色谱鉴别、水分、浸出物、灰分、柚皮苷含量测定对黔东南各产地骨碎补的品质进行分析;考察4种产地加工方式对骨碎补鲜品中柚皮苷含量影响。结果:黔东南骨碎补均符合药典要求;骨碎补鲜品直接清洗去毛切片50℃烘干产地加工工艺对其柚皮苷含量影响最小。结论:黔东南骨碎补品质好,直接清洗去毛切片50℃烘干产地加工工艺为下一步资源的开发利用提供一定的参考。

红花三七骨碎补胶囊干预小鼠对免疫功能的影响

目的:探究红花三七骨碎补胶囊对小鼠免疫功能的影响,为其推广使用提供理论依据。方法:给予小鼠不同剂量的红花三七骨碎补胶囊(0.167 g/kg bw、0.333 g/kg bw、1.000 g/kg bw),连续灌胃30 d,比较4组小鼠(对照组和低、中、高剂量组)体质量、脾脏指数、胸腺指数、溶血空斑、NK细胞活性。结果:低剂量组动物第3周体质量、高剂量组动物第2周、第3周及试验末体质量均高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);与对照组相比,各剂量组小鼠溶血空斑、NK细胞活性显著增大(P<0.05)。结论:红花三七骨碎补胶囊干预后的雌性昆明小鼠的溶血空斑和NK细胞活性在正常水平内有所增强,说明红花三七骨碎补胶囊有助于强化小鼠免疫功能。

骨碎补总黄酮调控骨质疏松症分子机制研究进展

骨质疏松症是一种全身性代谢性骨骼疾病,可导致骨量减少并由于微结构退化而增加骨折的风险。目前,西药治疗往往伴随有较为严重的不良反应,降低患者的依从性,从而影响治疗效果。中药具有不良反应小、多途径、多靶点的特点,在“肾主骨生髓”理论的指导下,发现骨碎补具有治疗骨质疏松症的作用。骨碎补总黄酮是骨碎补发挥抗骨质疏松作用的主要活性成分,随着中药药理学研究的不断深入,发现骨碎补总黄酮可以从多个环节调控骨性细胞的成骨增殖、分化、凋亡,促进骨形成,增加骨量,达到防治骨质疏松症的作用。涉及的信号通路包括Wnt/β-catenin信号通路、MAPK信号通路、OPG/RANKL/RANK信号通路、BMPs信号通路、PI3K/AKT/mTOR信号通路等。本文对近年来骨碎补总黄酮在防治骨质疏松方面的分子作用机制进行综述,探讨骨碎补总黄酮在体内抗骨质疏松作用的确切机制,为研究和开发抗骨质疏松新型药物研究提供理论依据。

骨碎补总黄酮抑制Notch1/Hes1/Prdx1通路对骨质疏松大鼠抗氧化能力的影响

目的探讨骨碎补总黄酮(total flavonoids of rhizoma drynariae,TFRD)对去卵巢(ovariectomized,OVX)骨质疏松大鼠氧化应激的影响及其机制。方法构建OVX骨质疏松大鼠模型,分别用TFRD和补佳乐(BJL)灌胃,给药12周后称重,取股骨组织和血清。HE染色观察股骨组织形态学变化,免疫组织化学染色检测股骨组织中骨保护素(osteoprotegerin,OPG)和骨形态发生蛋白2(bone morphogenetic protein 2,BMP-2)的表达,生化试剂盒检测血清中超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)、丙二醛(malondialdehyde,MDA)和活性氧(reactive oxygen species,ROS)的水平,Western blot检测股骨组织中Notch1、发状分裂相关增强子1(hairy and enhancer of split 1,Hes1)、过氧化还原酶1(peroxiredoxin 1,Prdx1)蛋白的表达。结果TFRD和BJL均能显著抑制OVX所致的大鼠体重的增加(P<0.01),并改善骨小梁的结构的完整性,缩短骨小梁间距,显著降低病理评分(P<0.01)。此外,TFRD和BJL均能升高血清SOD水平(P<0.01),降低MDA和ROS水平(P<0.01),促进股骨组织中OPG、BMP-2的表达(P<0.01),并抑制Notch1、Hes1和Prdx1蛋白的表达(P<0.01)。结论TFRD可抑制OVX大鼠的氧化应激反应,调控骨稳态,其发挥抗骨质疏松的作用可能与抑制Notch1/Hes1/Prdx1通路有关。

骨碎补总黄酮对口腔种植骨整合中牙槽骨成骨细胞增殖和凋亡的影响研究

目的 探讨骨碎补总黄酮(total flavonoids of rhizomadrynariae, TFRD)对牙槽骨成骨细胞的增殖和凋亡的影响及其机制。方法 分离和培养大鼠牙槽骨成骨细胞。将细胞分为对照组、低剂量TFRD组(50 mg/L)、高剂量TFRD组(100 mg/L);NC mimic和miR-93-5p mimic转染至成骨细胞后,与高剂量的TFRD孵育,分别记为TFRD+NC mimic组和TFRD+miR-93-5p mimic组;CCK-8法检测细胞增殖;流式细胞术检测细胞凋亡;采用RT-qPCR和Western blotting分别检测miR-93-5p、成骨分化相关基因(Osteriex和RUNX2)和WNT通路相关基因(Dishevelled和β-catenin)的表达水平;ALP染色和活性测试检测细胞成骨分化。结果 TFRD处理后的牙槽骨成骨细胞增殖能力增加(P<0.05),细胞凋亡率降低(P<0.05),ALP活性、Osteriex和RUNX2的表达增加(P<0.05),miR-93-5p的表达降低(P<0.05),FZD6、Dishevelled和β-catenin的表达增加(P<0.05),激活WNT通路。过表达miR-93-5p逆转TFRD对成骨细胞的保护作用,导致细胞增殖能力降低(P<0.05),细胞凋亡率增加(P<0.05),ALP活性和Osteriex和RUNX2的表达降低(P<0.05),miR-93-5p的表达增加(P<0.05),FZD6、Dishevelled和β-catenin表达减少(P<0.05),抑制WNT通路。结论 TFRD通过miR-93-5p/FZD6/WNT通路促进牙槽骨成骨细胞增殖,抑制凋亡。

miR-93-5p在骨碎补总黄酮介导的兔骨髓间充质干细胞成骨分化中的作用及机制

目的:探讨miR-93-5p在骨碎补总黄酮(TFRD)介导的兔骨髓间充质干细胞(rBMSCs)成骨分化中的作用。方法:采用成骨培养液对rBMSCs进行成骨诱导分化,通过茜素红S和油红O染色分别检测rBMSCs的成骨和成脂分化。运用荧光定量PCR(qPCR)检测miR-93-5p的表达,Western免疫印迹检测FZD6、ALP、Runx2和WNT通路相关蛋白(Dishevelled和β-catenin)的蛋白表达水平。双荧光素酶报告基因分析法检验miR-93-5p和FZD6的结合。采用SPSS 22.0软件包对数据进行统计学分析。结果:与对照组相比,TFRD促进rBMSCs的成骨分化,抑制miR-93-5p的表达,促进FZD6和成骨相关基因ALP和Runx2的表达。双荧光素酶报告基因分析表明,FZD6是miR-93-5p的下游靶基因。过表达miR-93-5p抑制rBMSCs的成骨分化和FZD6、ALP和Runx2的蛋白表达,而过表达FZD6逆转miR-93-5p的抑制作用。使用WNT通路抑制剂(KYA1797K)处理rBMSCs,可逆转TFRD对成骨分化的促进作用,导致成骨细胞分化减少,ALP、Runx2和WNT通路相关蛋白(Dishevelled和β-catenin)表达下调。结论:TFRD通过下调miR-93-5p,促进FZD6的表达,激活WNT信号通路,促进rBMSCs成骨分化,从而有助于口腔种植体骨结合。

骨碎补总黄酮通过调节Wnt信号通路促进低氧环境中犬骨髓间充质干细胞成骨分化的研究

基于Wnt信号通路研究骨碎补总黄酮(GSB)对低氧环境中骨髓间充质干细胞(BMSCs)成骨分化的影响。运用GSB干预低氧浓度(10%)环境中成骨分化培养的BMSCs 4周,试验分为常氧对照组、低氧组、GSB干预组,观察BMSCs钙结节沉积和碱性磷酸酶(ALP)活性水平,Western blot检测成骨分化蛋白骨钙素(OCN)、骨桥蛋白(OPN)、Ⅰ型胶原(COLⅠ)和Wnt信号通路相关蛋白GSK-3β、p-GSK-3β、β-Catnine表达水平。结果:与对照组相比,10%低氧浓度抑制BMSCs钙结节形成、ALP活性降低,成骨分化相关蛋白OCN、OPN、COLⅠ表达升高,Wnt信号通路GSK-3β表达降低,p-GSK-3β、β-Catnine表达升高(P<0.05);与低氧组相比,GSB能显著促进低氧浓度中BMSCs钙结节产生、ALP活性升高,OCN、OPN、COLⅠ表达升高,GSK-3β表达升高,p-GSK-3β、β-Catnine表达降低(P<0.05)。研究表明,GSB能够通过抑制Wnt信号通路,促进低氧条件下BMSCs向成骨方向分化。

骨碎补总黄酮对乳牙牙髓干细胞增殖及成骨向分化的影响

目的初步探索不同浓度骨碎补总黄酮(total flavone of rhizoma drynariae)对乳牙牙髓干细胞(stem cells from human exfoliated deciduous teeth)增殖及成骨分化能力的影响。方法2020年3月—2021年8月黑龙江省医院检验科初步筛选出适宜浓度的RDTF,三代分离、培养SHEDs,通过流式细胞术及茜素红染色分别对细胞表面标志物和成骨分化潜能进行鉴定。实验分为4组(0时段为对照组,24、48、72 h组),每组设置3个复孔,采用不同浓度RDTF处理SHEDs后钙钴法染色,Western blot法检测其成骨相关蛋白表达情况。结果结果显示,所获取的细胞为具有成骨分化能力的SHEDs。与对照组相比,24、48、72 h内各浓度组均对SHEDs增殖无明显影响,差异无统计学意义(P>0.05),12.5、25 mg/L RDTF组的Runt相关转录因子2(Runx2)及骨钙素(OCN)的蛋白表达均显著上调,其中25 mg/L RDTF组对Runx2表达的促进效果最明显(249.681±14.653),差异有统计学意义(F=102.7,P<0.001)。结论RDTF对SHEDs的增殖无显著影响,可促进SHEDs成骨分化。