石榴籽油对雌激素相关的骨质疏松症小鼠骨量的影响及分子机制的研究

目的观察石榴籽油对雌激素相关的骨质疏松症小鼠股骨近端骨密度及骨小梁微结构的影响,观察相关细胞的形态学变化,分析探讨其作用机制。方法将30只雌性KM小鼠按体重随机分为3组:空白对照组、实验对照组、实验组,除空白对照组实施假手术外,其余2组全部在麻醉下切除卵巢制作成骨质疏松症模型,分别给实验对照组和实验组喂食普通饲料和添加一定剂量的石榴籽油的饲料,4周后拟对小鼠股骨近端骨小梁微结构进行检测。同时对4周后3组动物采血获得其血清,利用体外血清培养成骨细胞和破骨细胞,研究3组动物血清对成骨细胞和破骨细胞相关基因表达的影响。结果实验对照组动物股骨近端骨小梁微结构破坏程度最为严重,其次为实验组,空白组骨小梁微结构正常;石榴籽油代谢物(CLA9C)抑制RANKL诱导破骨细胞的分化,通过增加碱性磷酸酶(ALP)活性和基质矿化促进成骨,同时,主要的转录水平(ALP,Coll1a1,BSP,OCN,OPG,OPN and成骨细胞标记物(DDR2,Coll1a1,ALP等)呈现上调。结论石榴子油可以抑制雌激素相关的骨质疏松症骨量的丢失同时可以促进成骨细胞分化,抑制破骨细胞活性。

石榴籽油对雌激素相关骨质疏松症小鼠软骨代谢的保护作用及对相关蛋白表达影响的探究

目的观察石榴籽油抑制骨质疏松症小鼠软骨代谢的效果。方法将36只雌性ddY小鼠随机分为6组:正常组、模型组、石榴籽油低、中和高剂量组以及雌二醇组,分别给予各组小鼠1g/kg/d饲料灌胃,于1、2、3、4周后检测各组小鼠的体质量变化以及4周后的子宫质量,观察正常组、模型组、不同PSO剂量实验组的骨质疏松病理切片情况,通过RT-PCR比较开始给予饲料以及1、2、3、4周后检测各组破骨细胞相关基因MMP2、CTR、Itgβ3以及成骨细胞相关基因Lrp5、OPN的表达水平。结果卵巢切除后模型组小鼠子宫质量显著下降;石榴籽油的低剂量对子宫质量的下降有显著抑制作用,其效果与雌二醇相当;石榴籽油的中剂量和大剂量对子宫质量的下降无明显抑制作用。模型组动物股骨近端骨小梁微结构破坏,程度最为严重,骨密质比较薄,骨细胞数量减少,骨小梁稀疏、断裂、排列紊乱,髓腔增大,测定其骨密度为(0.98±0.15)g/cm^3显著低于正常组(1.37±0.23)g/cm^3及PSO低剂量组(1.21±0.19)g/cm^3;同时PSO低剂量组骨质疏松的病理改变改善明显,骨小梁密增多,骨密质增厚。低剂量组(5%)石榴籽油对破骨细胞的三种基因(CTR、ITGb3、MMP2)呈现下调,其中CTR下调最为显著;而对成骨细胞相关基因Lrp5呈现显著上调,P<0.05。结论石榴籽油通过相关基因调节抑制破骨细胞活性,减轻骨吸收和破坏,从而抑制骨质疏松症小鼠骨量的丢失;同时通过作用于成骨细胞相关基因,促进成骨细胞分化,促进成骨。