AngⅡ诱导大鼠成肌细胞萎缩模型的构建

目的构建AngⅡ诱导大鼠成肌细胞(L6)萎缩模型,为进一步研究心衰合并肌少症提供模型依据。方法采用大鼠成肌细胞(L6),用2%马血清诱导分化,镜下观察和MyHC蛋白表达情况判断诱导分化的时间。CCK-8检测不同浓度AngⅡ对L6细胞的影响。为确定细胞萎缩模型的条件,选择不同浓度的AngⅡ作用于L6细胞,并用Western Blot和免疫荧光检测MyHC蛋白的表达情况。结果L6细胞在2%马血清下生长6 d,能被成功诱导分化,镜下显示细胞出现融合现象和肌管,MyHC蛋白表达也增加。0.1~10μM的AngⅡ对L6细胞活性无影响,而Western Blot和免疫荧光检测提示在5μM和10μM的AngⅡ作用72 h下,MyHC蛋白表达水平逐渐下降。结论诱导分化后的L6细胞经10μM AngⅡ刺激72 h可形成细胞萎缩模型,为心衰合并肌少症的体外细胞研究提供基础。