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骨髓分离方法的比较及在自体骨髓移植中的应用
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作者 白海 达万明 +2 位作者 董国平 刘源 钟建庭 《西北国防医学杂志》 CAS 1993年第2期18-19,共2页
本研究首次使用0.05%甲基纤维素分离骨髓有核细胞与5%羧甲基淀粉钠、自然沉降及Ficoll分离法等方法比较,甲基纤维素法具有方法简便易行,分离速度快,有核细胞及CFU—GM回收率高(分别为79.0±17.7%和93.0±10.7%)等特点.将此方法... 本研究首次使用0.05%甲基纤维素分离骨髓有核细胞与5%羧甲基淀粉钠、自然沉降及Ficoll分离法等方法比较,甲基纤维素法具有方法简便易行,分离速度快,有核细胞及CFU—GM回收率高(分别为79.0±17.7%和93.0±10.7%)等特点.将此方法应用于4例恶性血液病病人的大容量骨髓的体外分离进行自体骨髓移植(ABMT)均重建了造血,取得了移植成功.我们认为此方法适于国内推广应用进行ABMT. 展开更多
关键词 骨髓分离 甲基纤维素 自体骨髓移植
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小鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs)的体外分离扩增及鉴定 被引量:3
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作者 石云 张晓英 《长治医学院学报》 2012年第3期164-166,170,共4页
目的:探讨一种简单易行的的小鼠骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stemcells,BMSCs)体外分离培养方法。方法:通过全骨髓贴壁分离法体外分离、扩增小鼠BMSCs。观察原代及传代小鼠BMSCs形态变化,对第3代小鼠BMSCs表面抗原CD34、C... 目的:探讨一种简单易行的的小鼠骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stemcells,BMSCs)体外分离培养方法。方法:通过全骨髓贴壁分离法体外分离、扩增小鼠BMSCs。观察原代及传代小鼠BMSCs形态变化,对第3代小鼠BMSCs表面抗原CD34、CD45、CD105和CD106进行流式细胞仪检测。结果:小鼠BMSCs的原代接种培养24h后可见大量悬浮细胞,少许贴壁细胞,呈小圆形;72h后贴壁细胞逐渐增多,培养至第7天细胞伸展成长梭形,呈集落生长。BMSCs在培养的2~6d细胞增殖较慢,7~10d细胞增殖较快。传代后的小鼠BMSCs 24h基本全部贴壁,呈均匀性梭行细胞样生长。流式细胞仪检测结果显示:CD105、CD106表达阳性,表达率分别为92.2%、90.4%;CD34、CD45表达阴性,表达率分别为8.8%、13.1%。结论:采用全骨髓贴壁分离法操作简便,是培养小鼠BMSCs的理想方案。流式细胞术可以鉴定体外分离培养的小鼠BMSCs。 展开更多
关键词 骨髓 间充质干细胞 小鼠 流式细胞术 骨髓贴壁分离
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全骨髓贴壁法分离培养大鼠骨髓间充质干细胞研究 被引量:2
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作者 何丁文 殷嫦嫦 殷明 《九江学院学报(自然科学版)》 CAS 2012年第4期67-70,共4页
目的探讨体外全骨髓贴壁法分离大鼠骨髓间充质干细胞的可行性,为体外获取纯度较高的骨髓间充质干细胞提供理论基础。方法采用全骨髓贴壁法分离培养大鼠骨髓间充质干细胞,倒置相差显微镜下观察细胞的黏附、增殖及细胞形态的变化,并采用MT... 目的探讨体外全骨髓贴壁法分离大鼠骨髓间充质干细胞的可行性,为体外获取纯度较高的骨髓间充质干细胞提供理论基础。方法采用全骨髓贴壁法分离培养大鼠骨髓间充质干细胞,倒置相差显微镜下观察细胞的黏附、增殖及细胞形态的变化,并采用MTT法绘制P3代细胞生长曲线。结果全骨髓贴壁法分离出的骨髓间充质干细胞经多次换液及传代后得到形态比较一致的典型的纤维样细胞,细胞呈漩涡样、栅栏样及鱼群样集落式生长,细胞间紧密排列,细胞生长曲线呈近似"S"型。结论全骨髓贴壁法能分离出纯度较高的骨髓间充质干细胞,且能最大限度的保持细胞活力。 展开更多
关键词 骨髓贴壁法 大鼠 骨髓间充质干细胞 分离培养
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骨髓间充质干细胞分离及条件培养基在其培养扩增中的作用 被引量:3
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作者 郑杰 王培训 周联 《广州中医药大学学报》 CAS 2006年第4期356-359,362,共5页
【目的】建立一种简便、快速、实用的大鼠骨髓间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)体外分离、纯化和扩增的方法。【方法】采用贴壁法分离纯化大鼠骨髓MSCs(rMSCs),并对其形态学特征进行观察,培养时观察条件培养基对rMSCs生长的... 【目的】建立一种简便、快速、实用的大鼠骨髓间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)体外分离、纯化和扩增的方法。【方法】采用贴壁法分离纯化大鼠骨髓MSCs(rMSCs),并对其形态学特征进行观察,培养时观察条件培养基对rMSCs生长的影响。【结果】贴壁法能有效地分离rMSCs,采用条件培养液培养,细胞活力好,增殖能力强,对维持细胞正常形态有着重要作用。【结论】贴壁分离法能成功地进行rMSCs的体外分离,采用条件培养液建立的rMSCs培养方法有效可行。 展开更多
关键词 骨髓间充质干细胞/分离和提纯 细胞培养
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心肌微环境对骨髓间充质干细胞的诱导分化作用 被引量:2
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作者 袁岩 陈连凤 +3 位作者 张抒扬 吴炜 陈浩 严晓伟 《中国介入心脏病学杂志》 2005年第5期315-318,共4页
目的通过与心肌细胞(CMs)共同培养和采用含有CMs裂解液的培养基两种方法体外模拟心肌微环境,探讨心肌微环境对骨髓间充质干细胞(MSCs)分化的诱导作用。方法自新生乳鼠的心脏分离CMs,自成年大鼠的骨髓分离MSCs,将MSCs与CMs按1∶4的比例... 目的通过与心肌细胞(CMs)共同培养和采用含有CMs裂解液的培养基两种方法体外模拟心肌微环境,探讨心肌微环境对骨髓间充质干细胞(MSCs)分化的诱导作用。方法自新生乳鼠的心脏分离CMs,自成年大鼠的骨髓分离MSCs,将MSCs与CMs按1∶4的比例共同培养1周,观察细胞形态的改变,并通过免疫荧光方法检测共培养后MSCs表达心脏特异性肌钙蛋白T(cTnT)及CD31的情况;将分离的CMs反复冻融制成CMs裂解液,将MSCs在含有4倍CMs裂解液的培养基中培养1周,观察细胞形态的改变,并通过免疫化学方法检测MSCs表达心脏特异性肌钙蛋白T(cTnT)及CD31的情况;以仅用普通培养基所培养的MSCs作为对照。结果与CMs共培养的MSCs和CMs裂解液培养的MSCs逐渐伸展变长,形成肌细胞形态,培养1周后经抗cTnT和抗CD31免疫染色均呈阳性;对照组MSCs没有明显形态变化,抗cTnT和抗CD31免疫染色成阴性。结论与CMs共培养和采用含有CMs裂解液的培养基两种方法均可在体外模拟心肌微环境,诱导MSCs向心肌样细胞和内皮样细胞方向分化。 展开更多
关键词 心肌 细胞 培养的 骨髓细胞 间质干细胞 骨髓间充质干细胞 诱导分化作用 心肌微环境 免疫荧光方法 MSCS CD31 骨髓分离 细胞形态 CMs
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种植转染VEGF_(165)基因骨髓基质细胞的脱蛋白异体骨在裸鼠体内的成骨
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作者 刘日光 尹培荣 +3 位作者 杨述华 易诚青 刘建湘 杨操 《中国骨伤》 CAS 2005年第4期212-215,共4页
目的:探讨脱蛋白骨支架种植转染血管内皮生长因子(vascularendothelialgrowthfactor,VEGF)165基因的骨髓基质细胞体内的成骨作用。方法:从狗的髂骨穿刺骨髓分离骨髓基质细胞,应用脂质体转染VEGF165基因,以RTPCR检测转染的基因表达。随... 目的:探讨脱蛋白骨支架种植转染血管内皮生长因子(vascularendothelialgrowthfactor,VEGF)165基因的骨髓基质细胞体内的成骨作用。方法:从狗的髂骨穿刺骨髓分离骨髓基质细胞,应用脂质体转染VEGF165基因,以RTPCR检测转染的基因表达。随机选取4周龄BALB/C裸鼠30只,随机分为3组,各组10只。实验组A为脱蛋白骨+转染pcDNA3hVEGF165基因的骨髓基质细胞;实验组B为脱蛋白骨+骨髓基质细胞;对照组C为单纯植入脱蛋白骨+DMEM。在脊柱两侧分开肌间隙,每只裸鼠植入2块脱蛋白骨材料至肌腹内。术后4、8周处死取材,经大体观察、组织形态学与免疫组化方法检查细胞-材料复合物植入后的成骨作用及VEGF表达。结果:组织学检查A、B组均有成骨,并随时间延长而新骨增多,但其中转基因的A组其成骨作用明显,并在植入4周后免疫组化可见VEGF表达呈阳性;对照组C无成骨现象。结论:转染VEGF165基因骨髓基质细胞复合脱蛋白骨在体内具有较好的成骨作用。 展开更多
关键词 VEGF165基因 骨髓基质细胞 体内 种植 异体骨 血管内皮生长因子 BALB/C裸鼠 RT-PCR检测 VEGF表达 成骨作用 脱蛋白骨 factor 免疫组化方法 脂质体转染 组织学检查 组织形态学 骨髓分离 髂骨穿刺 基因表达 细胞材料 时间延长
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小儿肱骨远端骨骺分离12例临床分析
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作者 黄志 孟凡超 李加龙 《黑龙江医学》 2001年第9期687-687,共1页
关键词 诊断 治疗 肱骨 骨髓分离 儿童
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MSCs 2种分离培养方法及其培养液中的VEGF、SDF-1α浓度比较 被引量:1
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作者 潘家义 周胜华 +1 位作者 黄峰 白忠乐 《重庆医学》 CAS 北大核心 2015年第8期1017-1021,共5页
目的通过2种分离培养方法所得骨髓间充质干细胞(MSCs)的生长特征和微环境中细胞因子的比较,提供一种可以快速、安全、高效地为临床和实验提供大量优质MSCs的方法。方法提取C57BL/c小鼠的骨髓,分别作密度梯度离心法和全骨髓贴壁培养分离... 目的通过2种分离培养方法所得骨髓间充质干细胞(MSCs)的生长特征和微环境中细胞因子的比较,提供一种可以快速、安全、高效地为临床和实验提供大量优质MSCs的方法。方法提取C57BL/c小鼠的骨髓,分别作密度梯度离心法和全骨髓贴壁培养分离法分离培养MSCs,通过流式细胞仪检测细胞表面CD29+、CD31-、CD34-、CD45-表达水平,并比较各自所得细胞的生长曲线;ELISA检测培养液中的血管内皮生长因子(VEGF)、SDF-1α浓度并比较二者的差异。结果与密度梯度离心法比较,全骨髓贴壁分离法所得原代细胞有较快的生长速度,较短的生长周期;培养液中VEGF和SDF-1α浓度也稍高于密度梯度离心法。结论全骨髓贴壁培养法可以快速、方便、有效地为临床和实验提供大量MSCs,所得细胞的培养环境优于密度梯度离心法,减少了对细胞功能的损害。 展开更多
关键词 密度梯度离心法 骨髓贴壁分离 骨髓间充质干细胞
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全骨髓贴壁法培养兔骨髓间充质干细胞体外定向成骨诱导分化及鉴定 被引量:13
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作者 肖仕辉 韦庆军 +3 位作者 赵劲民 薄占东 韦积华 李伟岸 《中国组织工程研究》 CAS CSCD 2013年第6期1069-1074,共6页
背景:流式细胞仪分离法和免疫磁珠分离法对细胞活性影响较大,密度梯度离心法虽然能够获得纯度高的单核细胞,但由于多次离心可造成细胞的大量流失且对细胞活性有一定的影响使其应用值得商榷。目的:采用全骨髓贴壁法分离兔骨髓间充质干细... 背景:流式细胞仪分离法和免疫磁珠分离法对细胞活性影响较大,密度梯度离心法虽然能够获得纯度高的单核细胞,但由于多次离心可造成细胞的大量流失且对细胞活性有一定的影响使其应用值得商榷。目的:采用全骨髓贴壁法分离兔骨髓间充质干细胞进行成骨诱导分化及鉴定。方法:采用全骨髓贴壁法体外分离培养兔骨髓间充质干细胞,倒置显微镜下观察细胞形态学特征。在成骨诱导剂作用下,通过碱性磷酸酶染色试剂盒行碱性磷酸酶染色,Ⅰ型胶原免疫细胞化学染色,VonKossa法及茜素红进行矿化结节染色以及电镜下检测兔骨髓间充质干细胞成骨诱导后的形态结构。结果与结论:经诱导后细胞出现与成骨细胞相似的形态学特征,碱性磷酸酶染色阳性,Ⅰ型胶原免疫细胞化学染色,Von-Kossa法及茜素红矿化结节染色阳性。表明经成骨诱导剂诱导后全骨髓贴壁法体外分离纯化培养的兔骨髓间充质干细胞能向成骨细胞方向分化增殖。 展开更多
关键词 干细胞 干细胞培养与分化 骨髓贴壁法分离 骨髓间充质干细胞 细胞培养 成骨分化 组织工 程骨 省级基金 干细胞图片文章
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小儿肱骨远端骨骺分离12例临床分析
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作者 李怀忠 李冬梅 +1 位作者 杨健 王辉 《黑龙江医学》 1997年第8期19-19,共1页
关键词 临床分析 肱骨远端 骨骺分离 山河屯林业局 黑龙江省 骨关节损伤 手法整复 骨髓分离 问题分析 肘关节脱位
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牵之易来的“牵拉肘”
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作者 张锦星 《健康生活》 2001年第1期40-40,共1页
三岁的畅畅是个任性又淘气的孩子,家人常拿他没办法。这天,他缠着爸爸带他到动物园去玩,谁知竟玩上瘾了,怎么也不愿回家,爸爸给他买了许多好吃的食物哄他也不行,气得爸爸不管三七二十一拉起他的右手就走,没走几步,就见畅畅突然大哭起来... 三岁的畅畅是个任性又淘气的孩子,家人常拿他没办法。这天,他缠着爸爸带他到动物园去玩,谁知竟玩上瘾了,怎么也不愿回家,爸爸给他买了许多好吃的食物哄他也不行,气得爸爸不管三七二十一拉起他的右手就走,没走几步,就见畅畅突然大哭起来,嚷着说胳膊痛。当时爸爸以为他在撒娇也就没理他,过了两三天时间,畅畅的右手仍然不能动弹,这下一家人可慌了神,赶紧带孩子来医院找到我。 我仔细地进行检查,只见畅畅的右肘部不红不肿也没有外伤的痕迹,但是其右前臂紧贴胸前。 展开更多
关键词 牵拉肘 半脱位 肘关节 突然大哭 环状韧带 习惯性脱位 手法复位 三七二十一 动物园 骨髓分离
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两种较少见的肘关节损伤
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作者 陈步法 《交通医学》 1995年第2X期17-18,共2页
肘关节损伤是很多见的,损伤类型也比较复杂。最近,我们遇到两种少见的肘关节损伤,特介绍如下。
关键词 肘关节脱位 肘关节损伤 骨折线 X线征象 骨密度减低 骨性关节炎 尺侧移位 骨髓分离 排列关系 半月形
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Clinical features of AIDS patients with Hodgkin's lymphoma with isolated bone marrow involvement:report of 12 cases at a single institution 被引量:1
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作者 Marcelo Corti Maria Villafa?e +3 位作者 Gonzalo Minue Ana Campitelli Marina Narbaitz Leonardo Gilardi 《Cancer Biology & Medicine》 SCIE CAS CSCD 2015年第1期41-45,共5页
Objective: To study the main clinical and histopathological features of 12 patients with Hodgkin's lymphoma (HL) diagnosed primarily from bone marrow (BM) involvement. Methods: We included 12 acquired immunodef... Objective: To study the main clinical and histopathological features of 12 patients with Hodgkin's lymphoma (HL) diagnosed primarily from bone marrow (BM) involvement. Methods: We included 12 acquired immunodeficiency syndrome (AIDS) patients with HL assisted in the F. J. Mufiiz Infectious Diseases Hospital since January 2002 to December 2013. The diagnosis of ilL with primary BM involvement in patients was confirmed by clinical, histopathological, and immunohistochemical findings. Results: All patients presented "B" symptoms and pancytopenia. All of them had stage IV neoplasm disease because of BM infiltration. The median of CD4+ T-cell counts was 114 cells/μL, and mixed cellularity (MC) was the most frequent histopathological subtype of 92% cases. Conclusion: When other causes are excluded, BM biopsy should be performed in AIDS patients with "B" symptoms and pancytopenia to evaluate BM infiltration by atypical lymphocytes. 展开更多
关键词 Acquired immunodeficiency syndrome (AIDS) Hodgkin's lymphoma (HL) bone marrow (BM)
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白细胞介素-15对放射线诱导T淋巴细胞凋亡的保护作用 被引量:3
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作者 吴华 余忠华 +1 位作者 张万清 庞伟君 《中华实验外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第7期813-814,共2页
目的观察重组人白细胞介素(rhIL)-15对放射线照射的T淋巴细胞损伤的保护作用。方法从30例正常人的骨髓分离淋巴细胞,随机分为实验组及对照组各15例。实验组加入100μg/L的IL15,两组分别放射线照射,流式细胞术和细胞核形态检测等方法观... 目的观察重组人白细胞介素(rhIL)-15对放射线照射的T淋巴细胞损伤的保护作用。方法从30例正常人的骨髓分离淋巴细胞,随机分为实验组及对照组各15例。实验组加入100μg/L的IL15,两组分别放射线照射,流式细胞术和细胞核形态检测等方法观察照射前后T细胞亚群、bclXL、bax和bcl-2蛋白水平变化和淋巴细胞凋亡率。结果放射线照射后淋巴细胞出现大量凋亡;实验组的淋巴细胞凋亡率较对照组明显降低,T细胞亚群表达率较对照组明显升高,差异有统计学意义(P<0.01);实验组的细胞凋亡相关基因bcl2、bclXL的表达水平较对照组上调,bax表达则较对照组下调(P<0.01)。结论IL-15能抑制放射线引起的淋巴细胞凋亡,改善急性放射病引起的免疫损伤。 展开更多
关键词 白细胞介素-15 保护作用 T淋巴细胞凋亡 淋巴细胞凋亡率 重组人白细胞介素 bcl-XL 放射线照射 bcl-2蛋白 基因BCL-2 IL-15 T细胞亚群 淋巴细胞损伤 对照组 流式细胞术 bax表达 急性放射病 实验组 骨髓分离 形态检测 水平变化
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Novel nanocomposites based on a strawberry-like gold-coated magnetite (Fe@Au) for protein separation in multiple myeloma serum samples 被引量:3
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作者 Jose E. Araujo Carlos Lodeiro +4 位作者 Jose L. Capelo Benito Rodrfguez-Gonzalez Alcindo A. dos Santos~ Hugo M. Santos Javier Ferna.ndez-Lodeiro 《Nano Research》 SCIE EI CAS CSCD 2015年第4期1189-1198,共10页
A new process to produce magnetite partially coated with strawberry-like gold nanoparticles in aqueous media is reported. The fast response to magnetic fields and optical properties of gold nanoparticle-based colloida... A new process to produce magnetite partially coated with strawberry-like gold nanoparticles in aqueous media is reported. The fast response to magnetic fields and optical properties of gold nanoparticle-based colloidal systems are the two main advantages of this new Fe@Au nanomaterial. These advantages allow for the use of this new colloidal nanomaterial for various purposes in proteomics and biomedicine, as proteins can bind to the surface, and the surface can also be funcfionalized. As proof-of-concept, the new Fe@Au nanoparticles have been assessed in biomarker discovery as a tool for pre-concentration and separation of proteins from complex proteomes. To this end, sera from healthy people were compared with sera from patients diagnosed with multiple myeloma. The application of this new Fe@Au nanomaterial combined with mass spectrometry has allowed for the identification of 53 proteins, and it has also shown that the heat shock protein HSP75 and the plasma protease C1 inhibitor are potential biomarkers for diagnostics and control of multilvle mveloma vro^ression. 展开更多
关键词 NANOPROTEOMICS strawberry-nanopartides multifunctional hybridnanoparticles biomarkers multiple myeloma
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