环状RNA hsa_circ_0085576调控微小RNA-498/B细胞特异性莫洛尼鼠白血病病毒整合位点1轴对口腔鳞状细胞癌细胞迁移和侵袭的影响

目的探究环状RNA hsa_circ_0085576对口腔鳞状细胞癌(OSCC)细胞迁移和侵袭的影响及其分子机制。方法使用实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)和蛋白印迹法检测OSCC细胞中hsa_circ_0085576、微小RNA-498(miR-498)以及B细胞特异性莫洛尼鼠白血病病毒整合位点1(BMI-1)的表达水平。使用CCK-8、划痕实验、Transwell实验以及qRT-PCR、蛋白印迹法分别检测SCC-15细胞增殖活力、迁移及侵袭能力以及相关基因和蛋白的相对表达量。结果OSCC细胞中hsa_circ_0085576与BMI-1表达上调,miR-498表达下调(P<0.05)。下调hsa_circ_0085576表达或过表达miR-498后SCC-15细胞的增殖活性、划痕愈合率、侵袭细胞数目以及细胞周期蛋白D1、波形蛋白表达水平下调,miR-498和E-钙黏蛋白表达水平上调(P<0.05);抑制miR-498表达可减弱下调hsa_circ_0085576表达对OSCC细胞增殖、迁移及侵袭的抑制作用;上调BMI-1表达可减弱过表达miR-498对OSCC细胞增殖、迁移及侵袭的抑制作用。结论下调hsa_circ_0085576表达可通过激活miR-498/BMI-1轴抑制OSCC细胞增殖、迁移及侵袭。

三阴性乳腺癌组织亲嗜性病毒整合位点1和核转运蛋白基因2的表达及与临床病理特征和预后的关系

目的探讨亲嗜性病毒整合位点1(EVI1)、核转运蛋白基因2(KPNA2)在三阴性乳腺癌(TNBC)的表达,分析EVI1、KPNA2表达与临床病理特征及预后的关系。方法选取2012年1月—2015年1月中国人民解放军联勤保障部队第983医院收集的73例TNBC患者手术切除的癌组织、癌旁组织及70例正常乳腺组织(对照组)的石蜡标本,采用免疫组织化学法检测EVI1、KPNA2的阳性表达。收集相关临床病理资料,分析EVI1、KPNA2表达与TNBC患者临床病理特征的关系,采用Kaplan-Meier生存曲线分析不同EVI1、KPNA2表达下TNBC患者无进展生存时间(PFS)及总生存时间(OS)差异。结果癌组织、癌旁组织和对照组EVI1、KPNA2阳性表达率比较,差异有统计学意义(P<0.05),TNBC癌组织中EVI1、KPNA2阳性表达率高于癌旁组织和对照组(P<0.05),癌旁组织和对照组EVI-1、KPNA2阳性表达率比较,差异无统计学意义(P>0.05)。不同组织学分级、淋巴结、Ki-67表达、脉管内癌栓TNBC患者的EVI1阳性表达率比较,差异有统计学意义(P<0.05),淋巴结是否转移的TNBC患者的KPNA2阳性表达率比较,差异有统计学意义(P<0.05)。Kaplan-Meier生存分析结果显示EVI1阳性表达、KPNA2阳性表达患者PFS、OS生存率均低于EVI1阴性表达、KPNA2阴性表达患者(P<0.05)。结论EVI1、KPNA2阳性表达与TNBC患者肿瘤恶性侵袭行为和预后不良有关,评价EVI1、KPNA2表达可为TNBC患者预后预测提供一定的依据。

B细胞特异性莫洛尼鼠白血病病毒整合位点1的生物学功能及肿瘤相关性的研究进展

B细胞特异性莫洛尼鼠白血病病毒整合位点1(BMI1)是第一个被发现的多梳基因家族(PcG)成员,BMI1在乳腺癌、结直肠癌和食管鳞状细胞癌等多种人类恶性肿瘤中表达异常升高,参与细胞增殖、凋亡、侵袭、迁移的调控,与患者的临床特征、化疗耐药性和不良预后密切相关。BMI1基因与干细胞的自我更新和一系列恶性肿瘤的发生、发展及预后密切相关,可能是一个重要的肿瘤治疗靶点,因而日益被重视。本文就BMI1的结构、功能及其在肿瘤细胞中生物学作用的研究进展进行综述。

幽门螺杆菌通过诱导上调B细胞特异性Moloney小鼠白血病病毒整合位点1(Bmi-1)表达促进人胃癌细胞的侵袭

目的验证幽门螺杆菌(H.pylori)能够通过诱导B细胞特异性Moloney小鼠白血病病毒整合位点1(Bmi-1)高表达促进胃癌细胞的转移。方法收集82名胃癌患者手术标本,实时定量PCR和免疫组织化学染色检测胃腺癌组织Bmi-1的表达,并回顾性分析Bmi-1表达与胃癌病理特征及预后的相关性;采用pLPCX-Bmi-1质粒转染和H.pylori感染GES-1细胞,在过表达Bmi-1后,TranswellTM实验检测细胞的侵袭能力、流式细胞术检测细胞周期和细胞凋亡。结果胃癌组织中Bmi-1的mRNA及蛋白表达均高于癌旁组织,且高表达Bmi-1与肿瘤浸润程度、TNM分期、分化程度、淋巴结转移及H.pylori感染相关;转染及H.pylori感染所致的Bmi-1表达上调后,GES-1细胞具有更高的侵袭能力和较低的凋亡比率。结论H.pylori感染能上调Bmi-1表达,抑制胃癌细胞的凋亡并促进其侵袭。

胃癌中异位病毒整合位点-1的表达及临床意义

目的探讨异位病毒整合位点-1(EVI-1)在胃癌中的表达及临床意义。方法采用免疫组织化学法检测胃癌组织和癌旁组织中EVI-1蛋白的表达情况;采用蛋白质印迹法(Western blot)和实时荧光定量逆转录聚合酶链反应,分别检测人胃癌细胞株AGS、NCI-N87、MGC-803、HGC27和永生化正常胃黏膜细胞株GES-1中EVI-1的3个剪切变异体蛋白(MDS1/EVI-1、EVI-1、EVI-1△324)和EVI-1 mRNA(除MGC-803)的表达水平。结果胃癌组织中EVI-1蛋白的阳性表达率为76.7%(46/60),明显高于癌旁正常胃组织的41.7%(25/60),差异有统计学意义(P﹤0.01)。胃癌细胞中MDS1/EVI-1和EVI-1蛋白相对表达量均高于正常胃黏膜上皮细胞,差异均有统计学意义(P﹤0.05);MGC-803、AGS胃癌细胞中EVI-1△324蛋白相对表达量也高于正常胃黏膜上皮细胞,但差异无统计学意义(P﹥0.05)。HGC27、NCI-N87、AGS细胞株中EVI-1 mRNA相对表达量均高于GES-1细胞株,差异均有统计学意义(P﹤0.05)。结论胃癌中EVI-1蛋白(除EVI-1△324亚型)和EVI-1 mRNA的表达均较癌旁正常胃黏膜组织高。EVI-1基因可能是潜在的胃癌原癌基因,尚有待进一步深入研究。

MEIS1表达对胃癌根治术后患者生存期的影响及其在预后评估中的价值

目的:探讨不同表达水平骨髓嗜病毒整合位点1 (MEIS1)胃癌患者的术后生存情况,分析MEIS1表达在胃癌患者预后评估中的预测价值。方法:在胃癌生存队列中选取215例行胃癌根治术的患者。免疫组织化学染色法检测胃癌和癌旁正常组织中MEIS1表达水平。采用χ^(2)检验或Fisher确切概率法分析MEIS1表达水平与患者临床病理特征的关系;采用Kaplan-Meier法绘制生存曲线,采用Log-rank检验比较MEIS1高表达组和MEIS1低表达组胃癌患者生存差异;采用多因素Cox比例风险回归模型计算风险比(HR)及其95%置信区间(CI),评价MEIS1表达水平与胃癌患者生存的关系。结结果果:免疫组织化学染色,MEIS1在胃癌组织中表达水平降低;单因素分析,MEIS1高表达患者比MEIS1低表达患者总生存期长(P=0.049),预后更好;多因素Cox比例风险回归分析,MEIS1低表达和TNM分期高是胃癌患者预后的独立危险因素(HR=1.577, 95%CI:1.011~2.460, P=0.045;HR=2.709, 95%CI:1.708~4.297, P<0.001)。结结论论:MEIS1低表达胃癌患者术后总生存期短,MEIS1有望成为胃癌根治术后患者预后评估的生物标志物。

桥接整合因子1通过c-MYC途径抑制非小细胞肺癌A549细胞中PD-L1的表达

目的:研究人非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)A549细胞中桥接整合因子-1(bridging intergrator-1,BIN1)对程序性死亡受体-配体1(programmed death-ligand 1,PD-L1)表达的影响及其机制。方法:采用q RT-PCR和Western blotting方法检测A549细胞和正常人胚肺成纤维细胞2BS中BIN1与PD-L1基因和蛋白表达情况,通过基因转染技术、利用阳离子脂质体将含有人全长BIN1基因序列的真核表达质粒CMV-MCS-GFP-SV40-Neomycin-BIN1转染到A549细胞中(BIN1+组),构建过表达BIN1的细胞株,采用RNA干扰技术将干扰骨髓细胞瘤病毒癌基因(cellular-myelocytomatosis viral oncogene,c-MYC)的c-MYC-si RNA转染到A549细胞中(c-MYC-si RNA组)以敲低c-MYC基因表达,通过q RT-PCR和Western blotting方法验证转染效果及过表达BIN1基因或敲低c-MYC基因对A549细胞中c-MYC和PD-L1表达的影响。结果:与2BS细胞相比,A549细胞中BIN1基因和蛋白均呈低表达状态,而PD-L1呈高表达状态(均P<0.05)。将携带BIN1基因的真核表达质粒转染到A549细胞后,BIN1基因和蛋白表达水平较对照组显著升高(P<0.05),而PD-L1表达显著降低(P<0.05)。c-MYC-si RNA转染到A549细胞后,细胞内c-MYC表达显著降低(P<0.01),PD-L1表达明显下调(P<0.01)。结论:BIN1过表达可以通过失活c-MYC通路降低PDL1表达,从而抑制A549细胞的免疫逃逸。

血清miR-340-5p、Bmi-1与老年急性脑梗死后血管性认知障碍的相关性研究

目的探讨血清微小RNA-340-5p(miR-340-5p)、B细胞特异性Moloney小鼠白血病病毒整合位点1(Bmi-1)与老年急性脑梗死后血管性认知障碍(VCI)的相关性。方法选取2021年3月至2023年2月就诊的103例老年急性脑梗死患者作为研究对象,根据MoCA评分将患者分为VCI组(n=60)和无VCI组(n=43)。比较2组患者的一般资料;采用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)法检测2组血清中miR-340-5p、Bmi-1的表达情况;ENCORI预测miR-340-5p与Bmi-1的靶向关系;Pearson法分析VCI患者血清miR-340-5p与Bmi-1表达水平相关性;Spearman相关分析血清miR-340-5p、Bmi-1水平与MoCA评分的相关性;Logistic回归分析老年急性脑梗死患者发生VCI的影响因素;受试者工作特征(ROC)曲线分析血清miR-340-5p、Bmi-1水平对老年急性脑梗死患者发生VCI的诊断价值。结果VCI组患者吸烟史、既往脑梗病史占比显著高于无VCI组(P<0.05),MoCA评分显著低于无VCI组,差异有统计学意义(P<0.05);与无VCI组相比,VCI组miR-340-5p表达水平均明显降低(P<0.05),Bmi-1表达水平明显升高,差异有统计学意义(P<0.05);ENCORI网站预测结果显示,miR-340-5p与Bmi-1可能存在靶向关系;且VCI组患者血清miR-340-5p表达水平与Bmi-1呈负相关,血清miR-340-5p表达与MoCA评分呈正相关,Bmi-1表达与MoCA评分呈负相关(P<0.05);Logistics回归分析结果显示,MoCA评分、miR-340-5p是影响老年急性脑梗死患者发生VCI的保护因素(P<0.05),吸烟史、既往脑梗死病史、Bmi-1是影响老年急性脑梗死患者发生VCI的危险因素(P<0.05);ROC曲线分析结果显示,血清miR-340-5p、Bmi-1表达水平(AUC=0.851、0.886)对老年急性脑梗死后VCI有良好的诊断效果,且二者联合诊断效果更佳(AUC=0.947,Z二者联合-miR-340-5p=3.018、P=0.003,Z二者联合-Bmi-1=2.636,P=0.008)。结论老年急性脑梗死后VCI患者血清,miR-340-5p表达下调,Bmi-1表达上调,二者表达水平与老年急性脑梗死患者发生VCI过程密切相关。

骨髓间充质干细胞分泌半乳凝素1可抑制哮喘小鼠的气道炎症

背景:课题组前期研究表明移植骨髓间充质干细胞能减轻哮喘气道炎症程度且能调节哮喘炎症因子水平,进一步体外研究提示骨髓间充质干细胞分泌的半乳凝素1能影响树突状细胞的免疫功能,而骨髓间充质干细胞分泌的半乳凝素1对哮喘的作用尚不明确。目的:观察骨髓间充质干细胞分泌的半乳凝素1对哮喘小鼠气道炎症的影响。方法:构建小鼠pLVX-gal-1-shRNA并感染骨髓间充质干细胞。取40只雌性BALB/c小鼠,随机分为正常对照组、哮喘模型组、骨髓间充质干细胞组、重组半乳凝素1蛋白组、干扰半乳凝素1表达的骨髓间充质干细胞组,对比各组小鼠肺泡灌洗液中炎症细胞总数及分类的差异,采用苏木精-伊红染色观察各组小鼠气道炎症变化。结果与结论:(1)针对小鼠半乳凝素1基因设计了4条RNA干扰序列,通过Real-timePCR验证249干扰位点的干扰序列对半乳凝素1基因干扰效果最佳,并以此进行后续的体内实验;(2)与正常对照组相比,哮喘模型组肺泡和气道周围有大量的炎症细胞聚集,以嗜酸性粒细胞为主;骨髓间充质干细胞组或重组半乳凝素1蛋白组气道及肺泡灌洗液中炎症细胞显著减少,而半乳凝素1基因干扰的骨髓间充质干细胞输注对哮喘小鼠气道及肺泡灌洗液炎症细胞聚集无明显影响;(3)结果表明骨髓间充质干细胞分泌的半乳凝素1对哮喘小鼠气道炎症有明显的抑制作用。

亲嗜性病毒整合位点1负向调控微小RNA-9与急性髓系白血病发病机制研究

目的探讨亲嗜性病毒整合位点1（EVI1）对微小RNA－9（miR－9）的调控作用和机制及对急性髓系白血病细胞增殖能力的影响及机制，研究EVI1参与髓系白血病的分子机制.方法首先使用MSCV－EVI1及MSCV－vector制备反转录病毒并感染Uocm1细胞系，比较EVI1过表达后miR－9表达水平，miR－9启动子序列甲基化程度及EVI1过表达对细胞周期和克隆形成能力的影响；然后使用去甲基化药物地西他滨以0.1 μmol/L浓度处理EVI1过表达的Uocm1细胞，以逆转miR－9启动子过度甲基化，研究恢复miR－9表达对细胞周期和增殖能力的影响.结果相对于空载体组，过表达EVI1可以显著下调miR－9表达水平：对照组相对表达量为0.006±0.001，而EVI1过表达组相对表达量为0.004±0.000 （t＝4.09，P〈0.05），并且miR－9启动子序列出现过度甲基化现象；EVI1过表达组的Uocm1细胞较空载体组Uocm1细胞克隆形成能力增强（对照组122.3±7.8，空载体组45.7±6.1）（t＝－13.44，P〈0.01），EVI1过表达组细胞中S期、G2期比例增高（均P〈0.05），而G0/G1期细胞比例降低（P〈0.05）。相对于对照组，0.1 μmol/L地西他滨可显著降低EVI1引起的miR－9启动子过度甲基化，恢复miR－9的表达（P〈0.01）；G0/G1期细胞比例在对照组为（48.25±2.19）%，地西他滨组为（65.9±2.90）%（t＝－6.85，P〈0.05）；对照组细胞集落数为123.40±8.12，而地西他滨组仅为51.00±10.01（t＝9.59，P〈0.01），提示地西他滨可通过G0/G1期阻滞遏制细胞增殖.结论EVI1通过诱导miR－9启动子过度甲基化下调miR－9表达可能是EVI1参与髓系白血病的机制之一；地西他滨能降低miR－9启动子甲基化水平，逆转EVI1对miR－9的负向调控，为其用于EVI1高表达急性髓系白血病的治疗提供了理论依据。

地西他滨治疗亲嗜性病毒整合位点1高表达的慢性髓细胞性白血病分子机制研究

目的探索亲嗜性病毒整合位点1(ecotropic viral integration site 1,EVI1)高表达对K562细胞的影响,及DNA甲基转移酶抑制剂地西他滨治疗EVI1高表达的慢性髓细胞性白血病(chronic myelogenous leukemia,CML)的分子机制。方法使用逆转录病毒载体转染K562细胞,检测空载体组和EVI1组微小RNA(micro RNA,miR)-9表达水平、miR-9启动子序列甲基化程度及细胞克隆数。使用地西他滨和溶媒处理EVI1高表达的K562细胞,检测miR-9表达水平、miR-9启动子序列甲基化程度、细胞克隆数及细胞周期。结果与空载体组相比,EVI1组miR-9相对表达量显著降低[(0.0021±0.0003)比(0.0034±0.0003),P<0.01],miR-9启动子序列甲基化程度显著增加,细胞增殖能力增强[(232.67±6.81)比(124.67±5.03),P<0.01]。地西他滨组较溶媒组miR-9表达水平显著升高[(0.0023±0.0003)比(0.0007±0.0001),P<0.01],miR-9启动子甲基化程度显著降低[(44.67±6.57)%比(90.22±4.29)%,P<0.01],细胞增殖能力减弱[(173.67±12.06)比(219.33±10.26),P<0.01],G_(0)/G_(1)细胞比例增高[(59.25±1.20)%比(50.45±1.06)%,P<0.05]。结论EVI1通过增加miR-9启动子甲基化程度,下调miR-9表达,可能是EVI1参与CML的机制之一。地西他滨可逆转EVI1高表达所致的miR-9甲基化程度,肿瘤细胞克隆增殖能力得以遏制,为其用于EVI1高表达的CML治疗提供理论依据。

黄芪多糖调控Wnt1信号对糖尿病大鼠糖脂代谢紊乱影响机制研究

目的探讨黄芪多糖(astragalus polysaccharide,APS)改善糖尿病(diabetes mellitus,DM)大鼠糖脂代谢的分子机制,以及其对无翅型小鼠乳房肿瘤病毒整合位点1(Wnt1)信号的调控机制。方法采用高脂饲料诱导构建大鼠DM模型,随机分为模型组(DM)、黄芪多糖低剂量组(APS-L)、黄芪多糖高剂量组(APS-H)、激动剂组(SB216763),每组10只,另取10只正常大鼠作为对照组(Control)。采用脱氧核糖核苷酸末端转移酶介导的缺口末端标记试剂盒(TUNEL)检测大鼠肝脏和胰腺组织中的细胞凋亡,酶联吸附反应试剂盒检测大鼠血清超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)和丙二醛(malondialdehyde,MDA)的水平,5,5',6,6'-四氯-1,1',3,3'-四乙基苯丙咪唑羰花青碘化物(JC-1)染色检测胰腺组织中的线粒体膜电位,免疫荧光检测胰腺组织中葡萄糖转运子4(glucose transporter 4,GLUT4)和糖原合酶激酶3β(glycogen synthase kinase-3β,GSK-3β)的表达,油红O检测肝组织中的脂质沉积,免疫组化检测肝组织中脂肪酸合成酶(fatty acid synthase,FAS)和脂蛋白脂酶(lipoprotein lipase,LPL)的表达,Western blot实验检测大鼠肝组织中Wnt1、β-连环蛋白(β-catenin)、淋巴细胞瘤-2(B cell lymphoma-2,Bcl-2)和Bcl-2相关X蛋白(Bcl2-associated x protein,Bax)的表达。结果与Control组相比,DM组、APS-L组、APS-H组、SB216763组动物的空腹血糖(fasting blood glucose,FBG)、总胆固醇(total cholesterol,TC)和甘油三酯(triglyceride,TG)的含量,血清中MDA的水平,肝和胰腺组织中的细胞凋亡率,肝组织中脂质沉积,肝组织中Wnt1、β-catenin、Bax的表达均明显升高;胰腺组织中的线粒体膜电位,胰腺组织中GLUT4、GSK-3β的表达,肝组织中FAS、LPL、Bcl-2的表达均明显下降。与DM组大鼠相比,APS-L组、APS-H组、SB216763组大鼠FBG、TC、TG的含量,血清中MDA的水平,肝和胰腺组织中的细胞凋亡率,肝组织中脂质沉积,肝组织中Wnt1、β-catenin、Bax的表达明显下降;胰腺组织中的线粒体膜电位,胰腺组织中GLUT4、GSK-3β的表达,肝组织中FAS、LPL、Bcl-2的表达均明显升高。与APS-L组相比,APS-H组大鼠的FBG、TC、TG的含量,血清中MDA的水平,肝和胰腺组织中的细胞凋亡率,肝组织中脂质沉积,肝组织中Wnt1、β-catenin、Bax的表达均明显下降;胰腺组织中的线粒体膜电位,胰腺组织中GLUT4、GSK-3β的表达,肝组织中FAS、LPL及Bcl-2的表达明显升高。与APS-H组相比,SB216763组动物的FBG、TC、TG的含量,血清中MDA的水平,肝和胰腺组织中的细胞凋亡率,肝组织中脂质沉积,肝组织中Wnt1、β-catenin、Bax的表达均明显升高;胰腺组织中的线粒体膜电位,胰腺组织中GLUT4、GSK-3β的表达,肝组织中FAS、LPL、Bcl-2的表达均明显下降,差异均具有统计学意义(均P<0.05)。结论黄芪多糖能明显抑制DM大鼠的氧化应激,升高胰腺组织的线粒体膜电位,降低肝组织中的脂质沉积,抑制肝和胰腺组织中的细胞凋亡率,降低动物的血糖,这可能与抑制Wnt1信号的转导有关。

B淋巴细胞特异单克隆鼠白血病病毒整合位点基因-1及辅助性T淋巴细胞相关细胞因子在儿童免疫性血小板减少症中的变化

目的通过检测新诊断免疫性血小板减少症（ITP）患儿B淋巴细胞特异单克隆鼠白血病病毒整合位点基因-1（Bmi-1）及辅助性T淋巴细胞相关因子1干扰素（IFN-γ）、白细胞介素4（IL-4）mRNA的表达变化，分析探讨Bmi-1及Th1／Th2细胞比例在新诊断ITP患儿中的变化及意义。方法试验组36例ITP患儿均来源于新乡医学院第一附属医院儿科2013年4至12月住院和门诊患儿，同期小儿外科择期手术患儿26例作为对照组，采用反转录-聚合酶链反应（RT-PCR）方法检测外周血淋巴细胞中Bmi-1、TFN-γ、IL-4mRNA的表达；并采用t检验和直线相关分析进行分析比较。结果1．试验组外周血淋巴细胞中Bmi-1 mRNA为2．63±0．54，对照组Bmi-1 mRNA为3．91±0．92，试验组明显低于对照组（P〈0．001）；试验组IFN-γmRNA为3．84±0．43，对照组IFN-γmRNA为2．88±0．57，试验组明显高于对照组（P〈0．001）；试验组IL-4mRNA为1．444-0．39，对照组IL4mRNA为1．874-0．34，试验组明显低于对照组（P〈0．001）。2．试验组外周血淋巴细胞中IFN-γmRNA表达与IL-4mRNA表达呈负相关（r=一0．667，P〈0．001），IL-4mRNA表达与Bmi-1mRNA表达呈正相关（r=0．776，P〈0．001），IFN-γmRNA表达与Bmi-1mRNA表达无相关性（r=一0．206，P〉0．05）。结论Bmi-1可能通过调节Th细胞参与ITP发病；ITP患儿存在Th细胞功能紊乱、Th1／Th2比例失调，可能是Th1优势。

MEIS1在子宫内膜样腺癌中的表达及其临床意义

目的探讨骨髓嗜病毒整合位点1(MEIS1)在子宫内膜样腺癌中的表达及其临床意义。方法选取45例子宫内膜样腺癌患者的病变组织(内膜癌组),以及12例非内膜病变患者的正常子宫内膜组织(对照组),采用免疫组织化学染色检测2组组织中MEIS1蛋白的阳性率,分析内膜癌组MEIS1蛋白与临床病理特征、雌激素受体(ER)和孕激素受体(PR)间的关系。结果子宫内膜样腺癌组织中,MEIS1蛋白主要表达于腺上皮细胞胞核中。内膜癌组的MEIS1蛋白阳性率高于对照组(P<0.05)。子宫内膜样腺癌组织中,MEIS1的表达与腺癌细胞分化级别、分期、肌层浸润深度、淋巴结转移、脏器转移等均无关(P均>0.05),与ER、PR的表达有关(P均<0.05)。结论MEIS1在子宫内膜样腺癌中呈高表达,并与ER、PR的表达相关,可能参与了子宫内膜样腺癌的发生机制。

HIV-1整合位点分布机制及检测的研究进展

艾滋病是由人类免疫缺陷病毒1型(HIV-1)引起的慢性传染性疾病,对人类的生命健康构成了严重威胁.整合是HIV-1病毒复制生命周期的关键环节,不同于新冠病毒等非整合型病毒,HIV-1自身基因编码的逆转录酶和整合酶,可帮助病毒整合入宿主细胞基因组,同步复制,确保病毒的遗传信息长期存在于宿主细胞中.然而HIV-1整合位点的选择不是随机的,而是与染色体结构和宿主基因功能等紧密相关.本文综述了有关HIV-1整合位点的检测方法、分布特征及影响其选择的因素等方面的研究进展,旨在为艾滋病的精准防控、治疗,乃至最终治愈提供信息参考.

子宫内膜癌组织中miR-128-3p、Notch1 mRNA、BMI1 mRNA的表达变化及其意义

目的观察子宫内膜癌组织中微小RNA-128-3p(miRNA-128-3p)及缺口受体1(Notch1)、B细胞特异性莫洛尼鼠白血病病毒整合位点1(BMI1)mRNA的表达变化,并探讨其临床意义。方法选取子宫内膜癌及其癌旁组织各150例份,采用qRT-PCR法检测两组织miR-128-3p及Notch1、BMI1 mRNA,Pearson相关分析法分析三指标间及其与子宫内膜癌临床病理特征的关系,K-M法绘制不同miR-128-3p、Notch1 mRNA、BMI1 mRNA表达子宫内膜癌患者生存曲线,多因素Cox回归分析法分析子宫内膜癌患者死亡影响因素。结果子宫内膜癌组织中miR-128-3p、Notch1 mRNA、BMI1 mRNA相对表达量分别为0.66±0.22、2.79±0.43、1.25±0.26,癌旁组织分别为1.00±0.21、2.02±0.37、0.76±0.28,两者比较,P均<0.05。子宫内膜癌组织中miR-128-3p与Notch1 mRNA、BMI1 mRNA表达呈负相关(r分别为-0.744、-0.733,P均<0.05),Notch1 mRNA与BMI1 mRNA表达呈正相关(r=0.803,P<0.05)。miR-128-3p、Notch1 mRNA、BMI1 mRNA表达均与子宫内膜癌分化程度、国际妇产科联盟(FIGO)分期、血管侵犯、淋巴结转移有关(P均<0.05)。miR-128-3p≥0.66、0.66者术后3年累积生存率分别为80.56%(58/72)、57.69%(45/78),两者比较,P<0.05;Notch1 mRNA≥2.79、<2.79者术后3年累积生存率分别为60.00%(45/75)、77.33%(58/75),两者比较,P<0.05;BMI1 mRNA≥1.25、<1.25者术后3年累积生存率分别为55.84%(43/77)、82.19%(60/73),两者比较,P<0.05。FIGO分期Ⅲ~Ⅳ期、淋巴结转移、Notch1 mRNA≥2.79、BMI1 mRNA≥1.25为子宫内膜癌患者死亡独立风险因素,miR-128-3p≥0.66为独立保护因素。结论子宫内膜癌组织中miR-128-3p低表达,Notch1、BMI1 mRNA高表达,均与子宫内膜癌分化程度、FIGO分期、血管侵犯、淋巴结转移有关,是子宫内膜癌患者死亡的影响因素,可能成为患者预后评估的生物标志物。

Meis1与VEGFR-2在早期肾癌组织中的表达及其临床意义

目的:探讨髓系亲嗜性白血病病毒整合位点1(myeloid ecotropic viral integration site 1,Mesi1)及血管内皮生长因子受体2(vascular endothelial growth factor receptor 2,VEGFR-2)在人早期肾癌中表达的临床意义及相关性。方法:收集中南大学湘雅医学院附属海口医院2005年4月至2018年9月间手术切除后的肾癌及癌旁组织标本,其中石蜡组织80对,新鲜冻存组织15对。利用real-time PCR及免疫组织化学技术分别检测肾癌组织中Meis1和VEGFR-2的mRNA和蛋白质表达水平,并分析其与患者的临床病理学参数及预后的相关性。结果:肾癌组织中Meis1和VEGFR-2的mRNA和蛋白质表达水平均较癌旁组织低,差异均有统计学意义(均P<0.01),并且Meis1与VEGFR-2在表达量上呈正相关(r=0.681,P<0.01)。患者的临床病理学相关参数分析显示:Meis1表达的阳性率与肾癌的病理类型有关(P<0.01),Meis1和VEGFR-2表达的阳性率与肾癌患者性别、年龄、T分期等均无关,差异均无统计学意义(均P>0.05),但其与患者的预后明显有关(P<0.05)。Cox回归分析显示:Meis1是影响患者预后的独立因素(95%CI:0.08~1.85,P<0.05)。结论:早期肾癌组织中Meis1和VEGFR-2的mRNA和蛋白质表达水平明显降低,在肾癌中可能可作为肿瘤抑制因子来影响肾癌的发生、发展,Meis1可作为预测肾癌患者预后的生物标志物。

Meis1和Cyclin D3在子宫内膜癌中的表达及临床意义

目的探讨粒细胞嗜酸性白血病整合位点1(Meis1)和细胞周期蛋白D3(Cyclin D3)在子宫内膜癌中的表达及临床意义。方法采用免疫组化的方法检测12例正常子宫内膜及45例子宫内膜样腺癌患者组织中的Meis1和Cyclin D3的蛋白阳性表达情况,分析它们之间的相关性。结果与正常子宫内膜相比,Meis1在子宫内膜样腺癌腺细胞中阳性表达率高,差异有统计学意义(P<0.05);Cyclin D3在子宫内膜样腺癌组中的表达高于正常子宫内膜组(P<0.05)(77.8%>33.3%);高、中分化腺癌组CyclinD3的阳性表达率高于低分化组及正常子宫内膜组,差异有统计学意义(P<0.05);Cyclin D3与Meis1的阳性表达率之间呈正相关(χ^(2)=0.296,P<0.05);Meis1和Cyclin D3阳性表达的子宫内膜癌患者生存时间短(P<0.05)。结论在子宫内膜样腺癌中,Meis1的表达阳性率升高,与Cyclin D3的表达存在相关。

基于Wnt1/β-catenin信号通路观察白藜芦醇对小鼠炎症相关结直肠癌的作用机制

目的基于无翅型小鼠乳房肿瘤病毒整合位点1(Wnt1)/β-连环蛋白(β-catenin)信号通路观察白藜芦醇对炎症相关性结肠癌(CAC)小鼠的抑制机制。方法采用氧化偶氮甲烷(AOM)/葡聚糖硫酸钠(DSS)诱导构建CAC小鼠,实验分为正常组、模型组、实验组、对照组,自造模开始,实验组每日定点腹腔注射100 mg/kg白藜芦醇,每日一次;对照组小鼠每日定点腹腔注射100 mg/kg的β-catenin通路抑制剂(iCRT14),每日一次;正常组、模型组小鼠腹腔注射等剂量的0.9%生理盐水。酶联免疫(ELISA)检测血清中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)的含量。免疫组化检测结肠组织中髓过氧化物酶(MPO)的表达。免疫印迹技术(Western-blot)检测小鼠结肠组织中骨髓细胞瘤原癌基因(c-Myc)、Wnt1、β-catenin的表达。结果与正常组相比,模型组小鼠血清中IL-6、TNF-α的含量,以及结肠组织中MPO、c-myc、Wnt1、β-catenin的表达明显升高(P均<0.05);与模型组相比,实验组和对照组小鼠血清中IL-6、TNF-α的含量,以及结肠组织中MPO、c-myc、Wnt1、β-catenin的表达明显降低(P均<0.05)。结论白藜芦醇能够在炎症相关结直肠癌小鼠中发挥抗肿瘤、抗炎性的作用,可能是通过抑制Wnt1/β-catenin信号的激活实现的。