骨髓增生异常综合征红细胞输注依赖患者外周血Tfh细胞比例变化与红细胞输注指标的相关性

目的 探讨骨髓增生异常综合征(MDS)红细胞输注依赖患者外周血滤泡辅助性T(Tfh)细胞比例变化与红细胞输注指标的相关性。方法 选择MDS患者23例(MDS组)和同期健康体检者23例(对照组)。采集受试者外周血,采用流式细胞术检测Tfh细胞及其亚型ICOS^(+)Tfh、PD-1^(+)Tfh细胞比例,计算ICOS^(+)/PD-1^(+)Tfh细胞比值。通过输血管理系统提取MDS患者的输血信息,计算其红细胞输注总量、红细胞输注密度,根据过去4个月内平均每8周输注红细胞总量判断患者是否存在红细胞输注依赖,比较红细胞输注依赖与非红细胞输注依赖患者外周血Tfh、ICOS^(+)Tfh、PD-1^(+)Tfh细胞比例及ICOS^(+)/PD-1^(+)Tfh。采用Pearson相关分析法分析MDS患者外周血Tfh、ICOS^(+)Tfh、PD-1^(+)Tfh细胞比例及ICOS^(+)/PD-1^(+)Tfh与红细胞输注总量、红细胞输注密度的相关性。结果 MDS组外周血Tfh、ICOS^(+)Tfh、PD-1^(+)Tfh细胞比例高于对照组(P<0.05或<0.01),两组ICOS^(+)/PD-1^(+)Tfh比较差异无统计学意义(P>0.05)。MDS患者中,红细胞输注依赖17例、非红细胞输注依赖6例,红细胞输注依赖患者外周血PD-1^(+)Tfh细胞比例高于非红细胞输注依赖患者(P<0.05),且红细胞输注依赖患者Tfh、ICOS^(+)Tfh、PD-1^(+)Tfh细胞比例均较对照组升高(P均<0.01),ICOS^(+)/PD-1^(+)Tfh与对照组比较无统计学差异(P>0.05);非红细胞输注依赖患者上述指标与对照组比较差异均无统计学意义(P均>0.05)。与非红细胞输注依赖患者比较,红细胞输注依赖患者红细胞输注总量、红细胞输注密度均升高(P均<0.01)。MDS患者外周血ICOS^(+)/PD-1^(+)Tfh与红细胞输注密度呈正相关(r=0.467,P<0.05),与红细胞输注总量无明显相关性(r=-0.398,P>0.05)。结论 MDS红细胞输注依赖患者外周血PD-1^(+)Tfh细胞比例升高,ICOS^(+)/PD-1^(+)Tfh与输血强度有关,Tfh细胞可能参与了MDS患者输血相关的免疫紊乱。

铁过载对初诊骨髓增生异常综合征患者T淋巴细胞亚群及生存预后的影响

目的 探讨铁过载对初诊骨髓增生异常综合征(MDS)患者T淋巴细胞亚群及生存预后的影响。方法 回顾性分析2018年1月至2023年12月山西医科大学附属运城市中心医院收治的58例MDS患者的临床资料,根据血清铁蛋白(SF)水平将其分为铁过载组(SF≥1 000 ng/mL,27例)和非铁过载组(SF<1 000 ng/mL,31例)。比较两组一般临床资料、淋巴细胞亚群及生存预后。结果 铁过载组SF、转铁蛋白饱和度水平高于非铁过载组,外周血CD3^(+) T淋巴细胞、CD4^(+) T淋巴细胞和CD8^(+) T淋巴细胞水平低于非铁过载组,差异有统计学意义(P<0.05)。铁过载组和非铁过载组中位生存时间分别为8个月和30个月,非铁过载组的总生存期显著优于铁过载组(log-rank检验:χ^(2)=5.368,P=0.020)。多因素Cox回归分析结果显示,铁过载[HR(95%CI)=3.50(1.46~8.39),P=0.005]、IPSS-R危险分类为极高危[HR(95%CI)=6.28(1.15~34.27),P=0.034]是影响MDS患者生存预后的独立危险因素(P<0.05)。结论 铁过载是MDS患者不良生存预后的危险因素,并可影响T淋巴细胞亚群水平,值得临床医师关注。

去铁胺(DFO)诱导骨髓增生异常综合征(MDS)细胞株SKM-1的P15^(INK4B)基因去甲基化

目的探讨铁螯合剂去铁胺(deferoxamine,DFO)诱导骨髓增生异常综合征(myelodysplastic syndrome,MDS)细胞株SKM-1的P15INK4B基因去甲基化作用。方法以枸橼酸铁铵(ferric ammonium citrate,FAC)和DFO处理SKM-1细胞,按不同铁负荷分成3组:对照组、FAC组和FAC+DFO组,分别检测不同铁负荷组细胞内可变铁池(labile ironpool,LIP)、细胞内活性氧类(reactive oxygen species,ROS)、P15INK4B基因甲基化状态、P15INK4B基因mRNA表达情况、细胞增殖(CFSE的平均荧光强度MFI)、细胞早期凋亡率以及细胞周期。结果与对照组相比,FAC组的LIP(64.04%±2.12%vs.1.45%±0.65%)、ROS(45.57%±1.18%vs.33.38%±12.96%)、细胞增殖MFI(23.01%±5.20%vs.51.67%±1.61%)明显升高,P15INK4B基因mRNA表达水平(0.72±0.08 vs.1)和细胞早期凋亡率(13.97%±2.25%vs.22.53%±1.76%)明显减少,差异均有统计学意义(P<0.05);与FAC组相比,FAC+DFO组的LIP(8.34%±4.21%vs.64.04%±2.12%)、ROS(34.39%±2.12%vs.45.57%±1.18%)、细胞增殖MFI(37.34%±6.61%vs.23.01%±5.20%)明显减少,P15INK4B基因mRNA表达水平(1.50±0.15 vs.0.72±0.08)和细胞早期凋亡率(55.07%±1.30%vs.13.97%±2.25%)明显升高,差异均有统计学意义(P<0.05);3组细胞周期的差异无统计学意义。结论 DFO可使LIP和ROS降低,诱导铁过载的SKM-1细胞P15INK4B基因去甲基化,使其mRNA重新表达,并可抑制铁过载的SKM-1细胞增殖,促进其凋亡。

中西医结合治疗骨髓增生异常综合征(RAEB、RAEB-t)48例报告

目的 观察中西医结合治疗 MDS的疗效。方法 选择 48例 MDS患者 ,随机分为中西医结合治疗组38例 ,西药治疗组 10例。治疗 3个月评定疗效。结果 中西医结合组 ,西药治疗组的总有效率分别为 73.7%、5 0 .0 % ,两组差异有显著性 (P<0 .0 5 )。中西医结合治疗组的不良反应明显少于西药治疗组。结论 中西医结合治疗既可提高疗效 。

对骨髓异常增生综合征MDS新认识及临床分析

本文阐述了对骨髓异常增生综合征，并从形态学角度分析临床结果。就我院的报告结果讨论血像、骨髓像的变化情况进行总结。并推断病因及判断预后及探讨其在临床诊断的意义，包括职业病诱发MDS，推断化学物理因素药物或长期使用免疫抑制剂药物易激发MDS。并总结了几个类型的结果和特征；骨髓增生低下，脂肪细胞、伪足增多，可有一系或二系病态造血，骨髓增生活跃、可伴有纤维化、环状铁粒细胞增多、周围原始细胞增多、血像骨髓像看到异常的巨核细胞和幼稚的巨核细胞升高。对难治性贫血形态学的体会，资料收集，撰写本文意义供血液病的同行借鉴，是很有意义的。主要论述了对骨髓分类不明难以诊断的疾病主张划其为MDS。

地西他滨治疗骨髓增生异常综合征(MDS)及白血病的护理及护理体会

目的:探讨地西他滨治疗骨髓增生异常综合征(MDS)以及白血病的护理价值。方法:选取在我院确诊为骨髓增生异常综合征(MDS)以及白血病的患者共38例,随机分为对照组与观察组,每组19例。对照组通过常规护理,观察组通过全面护理干预。结果:观察组不良反应发生率明显低于对照组(P<0.05),观察组护理满意度评分高于对照组(P<0.05)。结论:全面护理在地西他滨治疗骨髓增生异常综合征(MDS)以及白血病的护理中具有显著价值。

再生障碍性贫血、骨髓增生异常综合征、急性髓系白血病患者CD8^+T细胞亚群的变化及临床意义

本研究检测再生障碍性贫血(AA)、骨髓增生异常综合征(MDS)和急性髓系白血病(AML)患者细胞毒T细胞亚群平衡及其活性的改变,探讨三种疾病造血异常的细胞免疫机制,为临床治疗选择提供实验室依据。采用流式细胞术检测AA组17例、MDS组35例(其中RA 19例,RAEB 16例)、AML组15例和正常对照组10例的细胞毒性T细胞(Tc1、Tc2)以及部分T细胞亚群比例并进行对比分析。结果表明:与正常对照组相比,AA组、MDS-RA组Tc1、Tc1/Tc2、CD8+HLA-DR+、CD3+CD8+CD28+、CD8+CD45RO+显著升高,Tc2无明显统计学差异,CD8+CD45RA+显著减低;MDS-RAEB组Tc1、CD3+CD8+CD28+、CD8+HLA-DR+比例显著减低,Tc、Tc1/Tc2无明显变化,CD8+CD45RA+减低但差异不明显,CD8+CD45RO+显著升高;AML组Tc1、CD3+CD8+CD28+、CD8+CD45RA+、CD8+CD45RO+、CD8+HLA-DR+,Tc1/Tc2显著减低,Tc2显著上升。结论:AA、MDS不同阶段、AML患者的细胞免疫状态不同,在AA和MDS早期阶段,Tc1/Tc2的平衡向Tc1偏移,且伴有T细胞亚群活性增加;而在MDS晚期和AML阶段,则向Tc2偏移,T细胞亚群活性减低。前者可能与骨髓造血衰竭密切相关,而后者可能是恶性克隆免疫逃逸的重要机制之一。

再生障碍性贫血、骨髓增生异常综合征和急性髓系白血病患者CD4^+T细胞亚群转录因子表达的变化及其临床意义

本研究通过检测CD4+T细胞亚群特异性转录因子的mRNA(T-bet、GATA-3、Foxp3、RORγt)在再生障碍性贫血(AA)、骨髓增生异常综合征(MDS)和急性髓系白血病(AML)患者外周血中的表达变化,探讨3种疾病的细胞免疫状态及其作用机制。采用实时荧光定量方法检测AA组23例、MDS组42例、AML组17例和正常组16例外周血单个核细胞(PBMNC)中转录因子的T-bet、GATA-3、Foxp3、RORγt mRNA表达并进行对比分析。结果显示:与正常组比较,AA组患者T-bet、RORγt mRNA的表达均显著增高(P<0.01),GATA-3、Foxp3表达减低(P<0.01)。MDS组T-bet、GATA-3 mRNA表达无显著性变化,而Foxp3、RORγt表达均显著增高(P<0.05);MDS-RA组T-bet、RORγt表达均较正常组升高(P<0.01),GATA-3表达显著性减低(P<0.05),Foxp3较正常组无显著性差异;MDS-RAEB和AML组T-bet、RORγt表达均低于正常对照(P<0.05),而GATA-3、Foxp3 mRNA表达均高于正常对照组(P<0.01)。结论:AA、MDS不同阶段以及AML患者外周血中CD4+T细胞转录因子表达水平不同,提示细胞免疫状态有差异,在AA和MDS早期阶段,异常免疫介导的造血细胞过度凋亡在骨髓衰竭中可能起重要作用,而在MDS晚期阶段和在AML时,恶性克隆的大量积聚可能是其主要原因。

重型再生障碍性贫血和骨髓增生异常综合征骨髓中T辅助细胞亚群的变化

为研究SAA和MDS骨髓Th细胞亚群的数量及比例改变情况。用FACS同期对照研究 16例正常对照组、 2 4例发病期SAA、 15例MDS骨髓Th细胞的改变。结果显示 ,正常对照组Th1、Th2细胞及Th1/Th2为 :0 33%、 0 34%、 1 0 0 ,发病期SAA为 :4 4 2 %、 0 4 0 %、 10 5 7,恢复期SAA为 :0 39%、 0 2 0 %、 0 92 % ,MDS为 :0 4 1%、 0 5 7%、 0 75。发病期SAA的Th1、Th2细胞均显著增高 (P <0 0 1、 0 0 5 ) ,Th1/Th2显著向Th1偏移 (P <0 0 1) ;恢复期SAA与正常对照基本相当 (P>0 0 5 )。与正常对照组比较 ,MDS组的Th1细胞未升高 (P >0 0 5 ) ,亦显著低于发病期SAA组 (P <0 0 1) ,虽然Th2细胞升高 ,但无统计学意义 (P >0 0 5 ) ,但Th1/Th2比值降低 (P <0 0 5 ) ,向Th2偏移。SAA的发病可能由于Th1细胞增多 ,Th2细胞代偿不足 ,Th1/Th2向Th1偏移 ;MDS骨髓Th1细胞改变不显著 ,Th2有增多的趋势 。

青黄散联合健脾补肾中药对骨髓增生异常综合征患者活化T细胞的影响

目的探讨青黄散联合健脾补肾中药对骨髓增生异常综合征(MDS)患者活化T细胞的影响。方法 24例MDS患者用青黄散联合健脾补肾中药治疗9个月前后,流式细胞仪检测外周血T细胞CD3+CD28+、CD3+CD28+CD4+CD8-、CD3+CD28+CD8+CD4-、CD3+CD25+、CD3+CD25+CD4+CD8-、CD3+CD25+CD8+CD4-、CD3+DR+、CD3+DR+CD4+CD8-、CD3+DR+CD8+CD4-的百分数与绝对值,分析有效组及无效组上述指标治疗前后的差异变化。结果有效组(13例)治疗后CD3+CD28+、CD3+CD28+CD4+CD8-、CD3+CD28+CD8+CD4-绝对值较治疗前明显下降(P<0.05),无效组(11例)此3项指标百分数也明显下降(P<0.05)。有效组治疗后CD3+CD25+、CD3+CD25+CD4+CD8-百分数与绝对值较治疗前明显下降(P<0.05),无效组此2项指标治疗前后比较差异均无统计学意义(P>0.05)。结论青黄散联合健脾补肾中药可通过降低MDS患者体内共刺激分子的表达引起T细胞第二信号缺失使T细胞处于失能状态,减少T细胞(特别是Th)细胞的活化,使MDS亢进的免疫状态得以抑制,避免正常造血细胞受到免疫攻击而致凋亡。

骨髓增生异常综合征CD3^+CD4^+T细胞共刺激分子表达的研究

本研究检测骨髓增生异常综合征(myelodysplastic syndromes,MDS?CD3+CD4+T细胞共刺激分子的表达,为进一步探讨MDS发病机制积累信息。以38例初治MDS患者为研究对象,依据FAB分型将他们进一步划分为RA/RARS、RAEB/RAEB-t组;以11例献血员为正常对照,应用流式细胞术检测两组外周血CD3+CD4+T细胞共刺激分子CD28、CD154、CTLA-4、PD-1、CD25的表达。结果表明:MDS组CD28表达下降,CD154升高,CTLA-4、PD-1、CD25表达明显升高。随着疾病恶性程度的增高,RAEB/RAEB-t组CTLA-4、PD-1的表达以及CTLA-4/CD28比值亦较RA/RARS组升高。结论:MDS患者CD3+CD4+T细胞共刺激分子表达存在异常改变,其表达异常可能在MDS的发病机制中起一定作用。

骨髓增生异常综合征患者血清白介素-35表达水平及其诱导产生的新型调节性T细胞iTR35比例和临床意义

目的:探讨骨髓增生异常综合征(MDS)患者血清新型免疫抑制因子——IL-35表达水平及其诱导产生的新型调节性T细胞iTR35的临床意义。方法:选取2014年1月至2016年1月福建省泉州市第一医院血液科收治的23例初诊MDS患者为研究对象,根据MDS国际预后积分系统(IPSS)将其分为高危(n=4),中危-2(n=10),中危-1(n=5)和低危型(n=4)4个亚组。选取同期在我院体检的20例正常人为正常对照组。分别采用酶联免疫吸附试验(ELISA)和流式细胞术(FCM)检测各亚组患者血清IL-35表达水平及iTR35细胞比例。结果:MDS组患者外周血CD4^+CD25^+Foxp3^+Treg细胞比例显著高于对照组(P<0.01),iTR35细胞比例高于正常对照(P<0.01),而两组的CD4^+CD25^-Foxp3^+Treg细胞比例无显著的统计学差异(P>0.05)。MDS组的血清IL-35水平显著高于对照组(P<0.05),Treg细胞内IL-12p35和IL-27EBl3表达水平也较对照组显著上调(P<0.05),且MDS组的血清IL-35水平与IL-12p35和IL-27EBl3表达水平及iTR35细胞比例呈正相关(r分别为0.92、0.99和0.52,P<0.05)。MDS的4个亚组中,iTR35细胞比例及血清IL-35表达水平总体具有显著性差异(P<0.05),高危组与中危-2组患者的血清IL-35水平无明显差别(P>0.05),但两组均分别明显高于中危-1组和低危组(P<0.05),中危-2组也明显高于中危-1组及低危组(P<0.05),而中危-1组与低危组无差别(P>0.05)。高危组与中危-2组的iTR35细胞比例无显著差别,但高危组和中危-2组的iTR35细胞比例均显著高于中危1组和低危组(P<0.05),而中危1组与低危组无明显差别(P>0.05)。结论:IL-35水平和iTR35细胞的数量和(或)功能失衡在MDS发生、发展过程中起着重要作用,有望为MDS免疫靶向治疗研究提供新的理论依据。

骨髓增生异常综合征患者T细胞亚型和CD3zeta表达的分析

免疫介导的骨髓抑制和 (或 )造血异常被认为是导致MDS患者血细胞减少的重要机制之一。本研究旨在通过分析 11例骨髓增生异常综合征患者外周血T淋巴细胞亚群及CD3zeta的表达 ,以进一步评价MDS患者的免疫状态 ,探讨MDS患者血细胞减少可能的原因。对 11例诊断明确的MDS患者 ,用流式细胞术计数外周血表达IFNγ+CD4 +细胞 (Th1)、IL4 +CD4 +细胞 (Th2 )、IFNγ+CD8+细胞 (Tc1)及IL4 +CD8+细胞 (Tc2 ) ,同时分析CD3zeta在T细胞亚群中的表达。结果显示 :CD8+细胞在MDS患者外周血中比例明显升高 ;T细胞亚群Th1/Th2、Tc1/Tc2比值与正常对照无显著差异 ;T细胞活化信号传导通路上的功能蛋白CD3zeta在CD8+细胞中的表达明显增高。结论 :MDS患者外周血T细胞亚群比例异常 ,以CD8+细胞增高为主要表现 ;CD3zeta在CD8+细胞中表达明显增高 ,在CD4 +细胞中变化不大 ,提示MDS患者细胞免疫的过度活化主要与CD8+细胞有关 ;T细胞介导的细胞免疫过度活化是MDS患者外周血细胞减少的重要机制之一。

骨髓增生异常综合征小鼠滤泡辅助T细胞及表面分子PD-1表达的研究

目的:观察骨髓增生异常综合征(MDS)小鼠血象和骨髓象变化、骨髓和脾脏滤泡辅助T细胞(Tfh)数量及表面分子程序化死亡分子-1(PD-1)的表达情况,探讨其在MDS发病机制中的作用。方法:分别选取10只雄性NUP98-HOXD13转基因小鼠及其同源的野生型C57BL/6J小鼠作为实验对象,行外周血细胞计数,瑞氏染色观察外周血细胞变化、骨髓细胞涂片检查细胞形态;流式细胞术检测骨髓单个核细胞(BMMNC)及脾脏来源的Tfh细胞数量及其表面分子PD-1表达;实时定量PCR法分析BMMNC及脾脏来源细胞PD-1 mRNA的表达。结果:上述转基因小鼠的红细胞、中性粒细胞和血小板数均低于野生型C57BL/6J小鼠;与野生型C57BL/6J小鼠比较,转基因小鼠外周血红细胞及血小板形态相对大小不均,骨髓中可见双核红细胞、环状核粒细胞和红系造血岛等;转基因小鼠骨髓及脾脏Tfh数量较野生型小鼠少,且表面分子PD-1表达率增高;还发现该小鼠BMMNC PD-1 mRNA表达量明显高于野生型小鼠。结论:NUP98-HOXD13转基因小鼠出现全血细胞减少和病态造血,Tfh数量减少,PD-1表达量升高,可能是导致机体免疫功能抑制,促进恶性克隆逃逸免疫监视的重要原因之一。

HLA-DR15与T细胞亚群、免疫球蛋白在再生障碍性贫血和骨髓增生异常综合征中的变化及意义

本研究旨在探讨再生障碍性贫血(AA)、骨髓增生异常综合征(MDS)患者HLA-DR15表达频率及与疾病的相关性,并分析HLA-DR15与免疫球蛋白、T细胞亚群的关系。采用聚合酶链式反应-序列特异性引物(PCR-SSP)技术检测HLA-DR15的表达,免疫散色比浊法测定免疫球蛋白,流式细胞术检测T细胞亚群。结果显示:AA组、MDS组和正常对照组HLA-DR15表达频率分别为78.6%、63.2%和24.6%,AA组、MDS组与正常对照组比较表达水平有显著性差别(p<0.01),AA组和MDS组的OR值分别为11.262、4.710;正常对照组和血液恶性肿瘤组HLA-DR15表达频率比较无统计学显著差异;AA组、MDS组免疫球蛋白水平和T细胞亚群比例异常在HLA-DR15阳性组与阴性组之间比较无显著性差异(p>0.05)。结论:AA、MDS患者HLA-DR15表达频率显著高于正常人及血液恶性肿瘤患者,AA、MDS组OR值均>1,说明疾病与HLA-DR15呈正相关,HLA-DR15可能是AA、MDS的易感基因;AA和MDS常见免疫球蛋白水平和T细胞亚群比例异常,但与HLA-DR15的表达无明显关系。

骨髓增生异常综合征伴原始细胞增多(MDS-EB)诊疗指南(2022年版)

1概述骨髓增生异常综合征(myelodysplastic syn⁃dromes,MDS)是一组起源于造血干细胞的异质性髓系克隆性疾病,其特点是髓系细胞发育异常,表现为无效造血、难治性血细胞减少,高风险向急性髓系白血病(acute myelogenous leukemia,AML)转化。MDS的诊断与分型标准自1982年由FAB协作组首次确立以来,在过去近40年里几经补充修改,日趋完善。其中MDS伴原始细胞增多(myelodys⁃plastic syndromes with excess blasts,MDS-EB)亚型是指骨髓中原始细胞达5%~19%,较其他亚型向AML转化的风险进一步提高。

Th17细胞在骨髓增生异常综合征骨髓组织中的表达及意义

目的了解骨髓增生异常综合征(MDS)骨髓Th17细胞、调节性T细胞(Treg)的表达量,以探讨MDS的免疫学机制。方法流式细胞术检测65例MDS患者和18例健康对照骨髓细胞Th17细胞及Treg细胞表达量。ELISA方法分析骨髓血浆细胞因子IL-17、IL-10、TGF-β、IL-21、IL-22水平。结果 MDS患者骨髓Th17细胞及Treg细胞数量均高于健康对照组(P均<0.01)。在MDS亚型中Th17细胞及Treg细胞数量从RA/RAS、RAEB-Ⅰ到RAEB-Ⅱ逐渐增高(P均<0.05)。骨髓细胞因子IL-17、IL-10、TGF-β、IL-21、IL-22水平较对照组显著增高(P均<0.01),在MDS亚型中细胞因子IL-17、IL-10、TGF-β、IL-21、IL-22水平从RA/RAS、RAEB-Ⅰ到RAEB-Ⅱ也逐渐增高(P均<0.05)。结论 MDS骨髓微环境中Th17细胞、Treg细胞表达量均增多,可能促进了MDS病程进展。

MDS发病分子机制、预后和表观遗传学治疗进展——第12届骨髓增生异常综合征(MDS)国际研讨会采撷

1MDS基因突变 MDS是一组克隆性造血千细胞疾病，其特征是血细胞减少，髓系细胞一系或多系发育异常（dysplasia），无效造血（ineffective haematopoiesis）及演变为急性髓系白血病（AML）的风险增高。MDS主要病理生理本质是：（1）起源于造血干细胞的克隆性疾病；（2）粒系、