慢性粒-单核细胞白血病与骨髓增生异常综合征的遗传学差异分析

目的探讨慢性粒-单核细胞白血病(CMML)和骨髓增生异常综合征(MDS)的遗传学差异。方法回顾性分析2012—2021年32例CMML患者和159例MDS的临床和实验室资料,比较CMML患者和MDS患者染色体核型、基因突变等方面的差异。结果与MDS患者相比,CMML患者血小板、白细胞计数、中性粒细胞数、单核细胞数、骨髓原始细胞比例、乳酸脱氢酶及β2微球蛋白更高(均P<0.05),染色体核型异常率更低(25.92%vs51.60%,P<0.05),总体基因突变率更高(85.7%vs60.00%,P<0.05)。按基因功能分类,CMML表观遗传学调控和信号通路调控的基因突变概率高于MDS(60.90%vs 36.00%,38.10%vs4.28%,均P<0.05)。结论与MDS相比,CMML具有高代谢特征,更低染色体异常率,更高基因突变率。

硫化砷对骨髓增生异常综合征骨髓单个核细胞体外凋亡的作用

为了研究硫化砷(As2S2)在体外对骨髓增生异常综合征患者骨髓单个核细胞增殖的影响,并探讨其可能的作用机制,采用MTT法、流式细胞术、RT-PCR等多参数检测不同浓度As2S2诱导MDS细胞的凋亡。结果表明:①低浓度(0-0.6mg/L)的硫化砷对MDS细胞无明显抑制作用;②相对高浓度的硫化砷(1.5-50mg/L)对低危组MDS以及高危组MDS的单个核细胞均有诱导凋亡作用,且呈时间浓度依赖关系;bcl-2mRNA在As2S2作用后表达明显下调,bcl-2/bax比例明显下降(P<0.05);③MDS病人存在骨髓造血细胞的过度凋亡。结论:MDS病人存在骨髓造血细胞的过度凋亡;低浓度的硫化砷对MDS细胞没有明显的增殖抑制作用,高浓度的硫化砷主要通过诱导凋亡使MDS细胞死亡。

正常核型和异常核型骨髓增生异常综合征的细胞形态学特点比较

目的:比较正常核型和异常核型骨髓增生异常综合征(MDS)的细胞形态学的特点。方法:回顾分析82例MDS患者,通过对正常核型和异常核型MDS患者的细胞形态进行观察,分析二者形态学的差别。结果:核型异常组31例,占37.8%,核型正常组51例,占62.2%,2组外周血比较,核型异常组易出现原粒细胞、早幼红细胞、大红细胞,P<0.05;骨髓细胞形态比较,核型异常组三系病态造血比例高(>30%),P<0.05;原粒、淋巴样小巨核和畸形血小板比例高,P<0.05;核型异常组红系病态造血易见子母核、奇数核和多核,P<0.05;核型异常组有6例转为急性白血病。结论:异常核型MDS较正常核型组细胞病态造血发生率明显增高,原始细胞比例增高,转为白血病的比例高,预后差。

骨髓增生异常综合征患者外周血单个核细胞中视网膜母细胞瘤蛋白结合锌指结构基因1的表达

目的探讨骨髓增生异常综合征(MDS)患者外周血单个核细胞(PBMC)中视网膜母细胞瘤蛋白结合锌指结构基因1(RIZ1)的表达及其临床意义。方法选取2012年7月至2015年7月于新乡医学院第一附属医院收治的MDS患者86例为研究对象(MDS组),并选取同期体检健康者90例作为对照组,采用实时荧光定量聚合酶链反应和Western blot法检测PBMC中RIZ1蛋白及其mRNA表达水平,并分析RIZ1表达与MDS患者临床病理特征的关系。结果对照组和MDS组受试者PBMC中RIZ1 mRNA表达水平分别为1.73±0.41和0.47±0.18,MDS组患者PBMC中RIZ1 mRNA表达水平显著低于对照组(P<0.05)。对照组和MDS组受试者PBMC中RIZ1蛋白表达水平分别为1.32±0.36和0.35±0.22,MDS组患者PBMC中RIZ1蛋白表达水平显著低于对照组(P<0.05)。RIZ1蛋白表达与MDS患者的年龄、性别、白细胞计数、血红蛋白水平及血小板计数无关(P>0.05),而与骨髓原始细胞比例、世界卫生组织(WHO)分型及染色体核型有关(P<0.05)。结论 RIZ1在MDS患者PBMC中呈低水平表达,并与患者的骨髓原始细胞比例、WHO分型及染色体核型显著相关,这为MDS的早期诊断和靶向治疗提供了新的思路。

应用DNA微阵列对骨髓增生异常综合征患者骨髓单个核细胞基因表达谱的初步研究(英文)

为了探讨应用DNA微阵列研究骨髓增生异常综合征 (MDS)的基因表达谱的可行性 ,将 2例患者骨髓单个核细胞RNA各取等量混合后进行逆转录Cy5标记 ,与Cy3标记的正常对照cDNA混合 ,与H14 1微阵列杂交、扫描、软件分析。结果H14 1s芯片中共点样 13484个基因克隆 ,其中 10 6 4个靶克隆是由针对同一基因内不同序列的cDNA片段重复点样至少 2次。重复点样检测结果表明 :在 2张芯片内各自完全一致的分别为 6 2 5个 (5 8.7% )和6 30个 (5 9.2 % ) ,而存在完全相反结果的cDNA片段分别有 2 1个 (2 .0 % )和 11个 (1.0 % )。 10 6 4个靶克隆中重复点样数据完整且分别在 2张芯片内结果一致的共有 4 11个 ,其中在 2张芯片间结果也完全一致的共有 4 0 0个(97 3% )。 2张芯片中MDS与正常对照比较存在差异表达的靶基因分别为 15 4 9和 1311个 ,而 2张芯片间表达差异一致的靶基因为 4 0 9个 ,其中 10 1个基因参与造血调控 ,主要涉及转录因子、细胞周期调节蛋白、代谢相关基因、表面黏附分子等。结论 :DNA微阵列可用于对MDS患者混合标本的表达谱分析 ,为深入研究MDS的发病分子机理提供线索 ,但需要进行重复实验以降低微阵列操作过程引起的表达偏差。

AXL基因在骨髓增生异常综合征外周血单个核细胞中的表达

目的 探讨AXL基因在正常人、骨髓增生异常综合征 (MDS)及其他血液病患者外周血单个核细胞中的表达情况。方法 采用RT PCR法。结果 ①AXL基因在 10例正常人外周血单个核细胞中不表达 ,正常骨髓单个核细胞中有表达。② 5 0例MDS患者的外周血单个核细胞中有 4 1例 (82 % )AXL基因阳性。FAB亚型与AXL表达关系 :3 5例难治性贫血 (RA)者中 2 7例阳性 ,3例环形铁粒幼细胞性难治性贫血 (RAS)阳性 ;9例难治性贫血伴过多母细胞 (RAEB)者中 8例阳性 ,3例难治性贫血伴过多母细胞伴有转化 (RAEB T)患者均阳性。 6例实验时临床不能确诊为MDS者AXL基因阳性 ,经随访骨髓转为MDS ;3例骨髓疑为MDS或诊为MDS者AXL基因阴性 ,经随访确诊为其他疾病。③ 12例再生障碍性贫血 (AA)、1例缺铁性贫血 (IA)、1例溶血性贫血、2例夜间阵发性血红蛋白尿 (PNH)、3例特发性血小板减少性紫癜 (ITP)患者的AXL均阴性。

用血细胞计数仪计数法评价骨髓有核细胞增生度

骨髓有核细胞增生度对于各类血液病的诊断、治疗、疗效观察、指导疗法、判断疗效及愈后都有重要意义.特别目前在有核细胞增生度五级法的基础上提出的七级分类法对成熟红细胞与有核细胞比例的计数提出了更高的要求.

流式细胞术检测41例维族尔族骨髓增生异常综合征患者有核红细胞免疫表型的临床意义

目的：探讨维吾尔族骨髓增生异常综合征（myelodysplastic syndrome，MDS）患者有核红细胞免疫表型特点及其在诊断和预后中的临床意义。方法：应用多参数流式细胞术（flow cytometry，FCM），对41例MDS患者和30例非MDS（non—MDS）患者有核红细胞免疫标志的表达率进行检测。结果：MDS与non—MDS相比，有核红细胞群比例显著升高（P=0．029），在MDS亚型间无显著差异（P〉0．05）；有核红细胞群中GPA＋CD71＋、CD71、CD105和GPA表达均显著升高（P值分别为：0．026、0．020、0．033和0．024），GPA＋CD105＋和CD71＋CD105＋表达均无显著差异（P值分别为：0．050和0．938）；其余抗原亚型间比较均无显著差异（P〉0．05）。结论：多参数FCM能够检测到维吾尔族MDS患者有核红细胞异常免疫表型特点，为，临床上对MDS患者诊断和预后评价提供更多有价值的客观信息。

判断骨髓有核细胞增生程度几种方法的比较

目的探讨和比较判断骨髓有核细胞增生程度几种方法的准确性.方法对临床206份抗凝骨髓标本采用直接定量计数法和涂片染色后高倍镜视野观察有核细胞数;比较低倍镜法、成熟红细胞与有核细胞比值法、高倍镜视野法和直接定量计数法,对骨髓有核细胞高、中、低值标本的测试精度.结果 206份EDTA-K2抗凝的骨髓标本有核细胞直接定量计数,结果介于(5.0～770.0)×109/L之间,-x83.86×109/L;其中男性骨髓标本120例,有核细胞介于(5.0～388)×109/L之间,-x79.4×109/L,女性患者86例有核细胞介于(8.0～770)×109/L之间,(-x)94.2×109/L;高、中、低值骨髓标本有核细胞直接定量计数法,变异系数(CV)分别为0.061,0.061和0.096(平均CV0.073).4种方法,除方法1只能按五级增生法大体估计外,其它二种方法高、中、低值骨髓标本的平均CV分别为0.424,0.186.结论选用EDTA-K2抗凝骨髓并进行骨髓有核细胞直接定量计数是必要的也是可行的,该法较目前国内传统方法准确性高、重复性好、便于操作,能满足现代临床血液学诊断、治疗和预后的需要.

骨髓增生异常综合征患者骨髓单个核细胞免疫表型的测定

骨髓增生异常综合征(MDS)是一组难治的以血细胞质、量异常和极易发展为急性髓系白血病为特征的恶性克隆性造血干细胞疾病。对MDS的髓系免疫表型的研究已有报道。笔者从1997年开始应用流式细胞仪对12例MDS患者的骨髓单个核细胞淋巴细胞、髓细胞等进行了免疫表型的检测,现将结果报道如下。

环形杆状核粒细胞在骨髓增生异常综合征与巨幼细胞性贫血中的鉴别诊断

目的探讨环形杆状核粒细胞在骨髓增生异常综合征(MDS)与巨幼细胞性贫血(MA)鉴别诊断中的意义。方法使用光学显微镜,观察初次确诊的53例MDS与40例MA骨髓涂片中环形杆状核粒细胞检出阳性率和形态特点。结果环形杆状核粒细胞检出阳性率:MDS为13.2%(7/53),MA为65%(26/40),MA高于MDS,两者间的差异有显著意义(P<0.01),MA中部分环形杆状核粒细胞有巨幼样改变,MDS中未见巨幼样改变。结论环形杆状核粒细胞对MDS与MA的鉴别诊断有一定的参考意义。

骨髓增生异常综合征骨髓单个核细胞内负调控因子的研究

为研究MDS患者细胞凋亡与骨髓内不同T细胞亚群胞内负调控因子的关系 ,采用胞内细胞因子染色技术对骨髓内不同亚群T细胞胞内的TNF a和IFN γ水平进行检测和分析 ,用RT PCR技术测定BMMNC的凋亡基因Fas的mRNA水平。结果表明 ,MDS患者骨髓内产生TNF α增多的淋巴细胞为CD4 + CD4 5RO+ 、CD8+CD4 5RO+ 细胞 ,产生IFN γ增多的为CD4 + CD4 5RO+ 、CD8+ CD4 5RO+ 、CD8+ CD4 5RA+ 细胞 ,但均以CD8+CD4 5RO+ 细胞为主 ;MDS患者T淋巴细胞产生的IFN γ与FasmRNA存在相关性 ,而TNF α与FasmRNA相关性不强。结论 :MDS患者造血微环境中不仅T淋巴细胞亚群失调 ,而且各亚群分泌负调控因子增多 ;MDS患者髓内IFN γ主要来自于T淋巴细胞。

骨髓增生异常综合症粒细胞核异常现象的分析

骨髓增生异常综合症(mds)是由多种病因所致的一组表现多样、转归不一的血液学异常综合症,是一种造血干细胞为一克隆性疾病。mds的诊断目前仍靠骨髓象的改变,关键之一是血细胞的病态造血,病态造血可表现在粒、红、巨三系;也可两系,本文主要对粒系的病态造血进行观察,现介绍如下:1.资料和方法1.1 选自我院建院来(1982—1995年)已确诊mds25例,其中男16例,女9例。1.2 25例mds(其中RA5例、RAS5例、RAEB11例、RAEB—t4例)的骨髓象,我们重新进行回顾性诊断。具体方法,对骨髓有核细胞计数100个,确认粒系病态造血的分类粒细胞100个,对Pelger—huet粒系病态造血的分类粒细胞100个,对pelger粒细胞再做计数和形态分类。

306例骨髓增生异常综合征染色体核型的研究

本研究目的是探讨染色体异常克隆在骨髓增生异常综合征 (MDS)诊断及预后评估中的重要地位。运用染色体常规G显带技术及FISH技术对 30 6例MDS患者的染色体核型进行分析 ,并对其中 93例进行临床追踪观察。结果表明 :30 6例MDS中有 14 4例检出异常克隆 ,总的核型异常率为 4 7.1% ,发生频率较高的染色体畸变依次为 :+8,易位型 ,复杂及高度复杂异常核型 ,- 7/ 7q - ,2 0q - / - 2 0 ,三体 1或部分三体 1,+9/ +9q +,-Y ,+11/+11q - ,- 9/ 9q - ,dup(1q) ,+2 1。难治性贫血伴原始细胞增多 (RAEB)与转化性难治性贫血伴原始细胞增多(RAEBT)的核型异常率明显高于难治性贫血 (RA)及难治性贫血伴缺粒幼细胞 (RAS) (P <0 .0 5 )。有诱变剂接触史者染色体畸变率高于无诱变剂接触史者。随访 93例中核型异常者生存时间明显短于核型正常者 (P <0 .0 0 5 ) ,向急性白血病转化的机率明显高于核型正常者 (P <0 .0 5 ) ,其中复杂或高度复杂核型 ,- 7/ 7q - ,+11/ +11q -者预后差。结论 :MDS是一组高度异质性的克隆性疾病 ,染色体核型分析对MDS的正确诊断、病情监测、治疗方案选择及预后评估有重要价值。

胰岛素样生长因子I型受体在恶性血液病骨髓有核细胞的表达及其抗凋亡作用

为探索胰岛素样生长因子I型受体(IGFIR)在骨髓增生异常综合征(MDS)和急性髓细胞白血病(AML)骨髓有核细胞表面的表达及其与细胞凋亡的关系,收集MDS和AML患者各16例骨髓有核细胞,经离心涂片机制片,用免疫酶标记方法(APAAP)及TdT凋亡检测(TUNEL)法先后在同一标本上检测IGFIR表达和凋亡信号,并以16名正常人骨髓有核细胞作对照。结果显示:①MDS组骨髓细胞IGFIR表达[(56.8±14.3)%]高于正常对照[(40.4±9.6)%](P<0.01),AML组骨髓细胞IGFIR表达[(86.8±13.8)%]高于正常对照(P<0.01),AML骨髓细胞IGFIR表达高于MDS骨髓细胞(P<0.01);②MDS组骨髓细胞凋亡率为[(5.4±3.0)%]高于正常对照[(1.2±0.9)%](P<0.01),AML组骨髓细胞凋亡率为[(0.3±0.4)%]低于正常对照(P<0.01),MDS组细胞凋亡率明显高于AML组(P<0.01);③细胞凋亡主要发生在IGFIR阴性细胞[(9.0±4.8)%],IGFIR阳性细胞中凋亡细胞仅占[(1.4±2.4)%](P<0.01),IGFIR表达与细胞凋亡呈负相关(r=-0.852;P<0.01);④MDS骨髓细胞IGFIR表达阳性率RAEB/RAEBt/CMML组高于RA/RAS组,分别为(64.1±3.2)%和(53.5±16.2)%,但差异无显著性,细胞凋亡率RAEB/RAEBt/CMML组低于RA/RAS组,分别为(3.1±2.1)%和(6.4±2.8)%,(P<0.05);⑤MDS和AML中IGFIR阳性率与原始细胞百分比存在明显的?

骨髓增生异常综合征的细胞遗传学分析及其预后意义

目的:探讨骨髓增生异常综合征(MDS)的细胞遗传学异常及其演变与MDS的亚型和转归的关系。方法:采用骨髓细胞直接法和(或)短期培养法按常规制备染色体,采用R显带技术进行核型分析。结果:8例MDS检出染色体异常核型,占40%,主要异常有5q-,+8,-7,t/del(3)(q21),-18;MDS-RAEB和RAEBT(63.7%)比MDS-RA(11.1%)异常核型检出率高(P<0.05),且多为复杂异常;核型异常者进展为白血病的危险性明显高于核型正常者。结论:MDS的核型分析对其明确诊断,分型和预后评价有重要的参考价值。

骨髓增生异常综合征患者骨髓细胞凋亡的初步探讨

采用 TUNEL 法对 2 6例骨髓增生异常综合征 (MDS)、11例巨幼细胞贫血 (Meg A)、8例阵发性血红蛋白尿 (PNH)、6例 Evans综合征患者和 10例正常健康志愿者的骨髓单个核细胞 (BMMNC)凋亡进行探讨。结果发现 ,5 0 % MDS呈现凋亡过度 ,Meg A、PNH和 Evans综合征患者与对照组无显著差异。 MDS患者凋亡累及粒、红、巨三系各阶段造血细胞 ,随病情演变 ,凋亡程度渐下降。提示凋亡过度为 MDS无效造血机制之一 ,病情演变可能与异常克隆逃逸凋亡有关 ,抗凋亡疗法可试用于早期 MDS。

大鼠肝脏再生过程中细胞标志物演变与骨髓细胞增生

目的:为研究大鼠在部分肝切除术后肝再生过程中是否存在骨髓细胞的增生与动员以支持肝脏再生过程,以及肝卵圆细胞(hepatic oval cells,HOC)在体内细胞标志物的演变过程. 方法:SD(Sprague-Dawley)大鼠81只,随机分为3组: 2/3部分肝切除组(partial hepatectomy,PHx)、2/3部分肝切除加2-乙酰氨基芴(2-acetylaminofluorene, 2AAF)预处理组(PHx+2AAF)及假手术组,每组分为9小组(n=3),分别于术后1,2,4,6,8,12,16, 20,24 d采集大鼠骨髓细胞及再生肝组织;采用percoll密度梯度液分离骨髓细胞中的单个核细胞,并用流式细胞分析技术检测单个核细胞中CD34+,CD45+细胞比例; 采用冰冻组织切片技术进行再生肝组织切片,并用免疫荧光组织化学染色检测再生组织中与CD34共表达的部分造血干细胞、肝卵圆细胞及肝细胞的细胞标志物Thy1.1,CD45,CK19,vimentin,AFP,Alb. 结果:在PHx模型中,流式细胞检测结果显示大鼠骨髓单个核细胞中CD34+及CD45+细胞在术后2,4, 6 d与对照组相比增高(分别为2.774±0.166 vs 1.903±0.044,P=0.016<0.05;3.164±0.056 vs 1.862±0.057, P=0.002<0.01;2.708±0.160 vs 1.897±0.149,P= 0.032<0.05),免疫荧光组织化学染色结果示在肝组织中第4 d发现少量CD34,CD45共表达细胞,但未检出其他共表达的细胞标志物.在PHx+2AAF模型中, 流式细胞仪检测结果示CD34+及CD45+细胞于术后2, 4 d与对照组相比增高(分别为2.472±0.141 vs 1.903±0.044,P=0.020<0.05;2.985±0.120 vs 1.862±0.057, P=o.008<0.01),荧光免疫组织化学染色显示其再生肝组织中与CD34共表达的抗原Thy1.1,CK19,Alb, AFP,vimentin等存在动态演变:在标志物出现过程中,Thy1.1最早出现,随后可检出AFP,vimentin, CK19,而Alb最后检出;在标志物的消失过程,则Thy1.1, Alb,CK19最早消失,随后AFP,vimentin未检出. 结论:大鼠在急性肝损时的肝再生过程中存在骨髓CD34+与CD45+的细胞增生现象,再生肝组织中与CD34共表达抗原的动态演变可能反映肝卵圆细胞在体内的产生与分化的演变过程.

281例骨髓增生异常综合征患者染色体核型分析及临床意义的研究

目的：探讨骨髓增生异常综合征（MDS）患者染色体核型异常特征及其与临床预后的关系。方法采用染色体常规 G 显带技术，对281例 MDS 患者进行细胞遗传学核型分析。结果281例 MDS 患者中，染色体异常核型检出率48.75％（137／281），其中单纯染色体数目异常43.07％（59／137），单纯染色体结构异常者31.39％（43／137），同时有数目与结构异常者25.54％（35／137）。MDS 亚型中，RAEB-2异常核型检出率为63.41％（26／41），RAEB-1为58.73％（37／63）， RCMD 39.2％（49／125），RAS 15.38％（2／13），RA 22.58％（7／31）。RA，RAS 异常核型检出率明显低于 RAEB-1和RAEB-2（P ＜0.01），RAEB-1和 RAEB-2检出率高于 RCMD（P ＜0.05）。出现频率较高的染色体畸变依次为＋8，-7／7q-，-20／20q-，复杂异常核型，染色体易位，i（17），－Y，＋21等。随访的159例 MDS 患者中核型正常者68例，中位生存时间为39个月，核型异常者91例中位生存期21个月的，前者明显长于后者（P ＜0.05），分析白血病转化率，核型异常者（35.5％），明显高于核型正常者（10.3％）（P ＜0.01），其中以复杂核型、-7／7q-核型较易转为白血病。结论MDS 系克隆性恶性血液病，具有高度异质性，染色体核型检查对 MDS 的正确诊断、分型和预后判断具有重要意义。

骨髓增生异常综合征患者骨髓凋亡细胞类型及TRAIL表达水平研究

目的探讨骨髓增生异常综合征(MDS)患者骨髓细胞凋亡累及的细胞类型,以及其与肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TRAIL)表达水平的关系。方法用流式细胞术检测骨髓有核细胞总凋亡率、CD3+、CD3+4细胞凋亡率和TRAIL表达水平,运用CellQuest及ModFit软件对所测得结果进行数据分析。结果MDS患者骨髓有核细胞总凋亡率为(17.39±10.17)%,CD+3、CD3+4细胞凋亡率分别为(20.41±11.61)%、(21.32±12.17)%,TRAIL表达水平为(7.55±3.10)%,均显著高于正常对照组[(5.88±1.38)%、(5.47±1.65)%、(4.92±2.11)%、(1.26±0.46%)],P<0.05。早期MDS有核细胞总凋亡率为(21.95±9.44)%、TRAIL表达水平为(9.00±2.47)%,均高于进展期[(8.26±2.27)%、(4.65±2.04)%],P<0.05。骨髓有核细胞总凋亡率与骨髓原始细胞数呈负相关(r=-0.65,P<0.05),与TRAIL表达水平呈正相关(r=0.85,P<0.05)。结论MDS存在过度凋亡,凋亡累及早期造血细胞和淋巴细胞;TRAIL可能是引起凋亡增加的原因之一。