改良EDTA脱钙液在骨髓活检组织中染色效果观察

骨髓活检结合免疫组化染色对于血液系统疾病诊断、判断临床预后具有重要意义。骨髓组织细胞种类多和组织学形态丰富,部分病例需结合免疫组化染色以明确诊断。骨髓组织质地较硬,需脱钙后才能进行常规制片和免疫组化染色。

骨髓活检组织检查中应用的分子诊断技术

骨髓活检组织检查对恶性和非恶性造血系统疾病的诊断和分期至关重要［1］。目前临床多采用细胞形态学和组织化学的方法（如苏木素-伊红染色、吉姆萨染色、铁染色等）对骨髓活检组织进行分析以达到诊断疾病的目的。此外，流式细胞免疫表型分析和细胞遗传学分析也是骨髓活检组织检查常用的技术方法［2］。近年来随着分子技术的发展，分子诊断技术也作为骨髓活检组织检查的辅助诊断方法。尽管细胞形态学仍是诊断造血系统疾病最基本的方法，然而分子诊断技术可以提高诊断的准确性，进行疾病亚类的鉴别和提高微小残留病灶诊断的敏感性，在造血系统紊乱的诊断中不可或缺［3］。骨髓环钻活检和抽吸活检均是获得骨髓标本常用的方法，嘱患者侧卧位从髂后上棘经活体组织穿刺针而得到。因为骨髓抽吸活检会破坏骨髓中各成分的分布、细胞的结构、造血成分和肿瘤细胞浸润的分布，以及骨髓的内部结构，所以在应用分子诊断技术对疾病进行辅助诊断时主要选用骨髓环钻活检的方法［4］。骨髓环钻活检组织经甲醛固定、酸化、乙二胺四乙酸（ethylene diamine tetraacetic acid ，EDTA）脱钙、石蜡包埋后即获得形态学完整的骨髓活检标本。本综述概述了分子诊断技术在骨髓环钻活检法制备的活检组织中的应用，主要包括以DNA 为基础的技术、以mRNA为基础的技术、DNA和mRNA定量分析技术和荧光原位杂交技术。

骨髓活检组织EBER原位杂交检测影响因素分析

目的探讨骨髓活检组织行EBV encoded RNA(EBER)原位杂交检测的影响因素,优化检测条件以期提高骨髓活检组织中EB 病毒的检出率。方法收集35 例EB 病毒相关疾病的骨髓活检标本,通过对比实验,比较不同脱钙方法、不同蛋白酶K 消化条件、不同抗体孵育温度下的骨髓活检组织行EBER 原位杂交检测的切片质量、脱片率及染色质量情况。结果脱钙以运用改良EDTA 脱钙液脱钙20~24h 后流水冲洗30min^1h 最佳;蛋白酶K 消化时间为9min 的组织切片脱片率低,杂交效果最好,阳性细胞着色深,定位准确;在37℃条件下进行抗体孵育杂交染色质量为佳。结论选取合适的脱钙方式,延长蛋白酶K 消化时间,选择最佳抗体孵育温度,可降低脱片率,显著提高骨髓活检组织行EBER 原位杂交检测的染色质量,为EBV 相关疾病的诊断和鉴别诊断提供重要依据。

骨髓活检组织前脱钙法与后脱钙法的体会

鉴于骨髓组织含有大量的钙盐而非常坚硬致密,不能直接进行石蜡制片。需经过脱钙处理后,才能进行切片、HE染色、特殊染色和免疫组化染色[1]。一种好的脱钙方法能够提高骨髓活检组织的制片质量,提高HE染色和免疫组化染色的效果,更好地满足临床病理的精准诊断。目前常用的方法是前脱钙法即传统脱钙法:在脱水前采用4%盐酸甲醛溶液先行脱钙2 h的骨髓活检组织。

骨髓活检组织印片在全血细胞减少性疾病诊断中的应用

目的探讨骨髓活检组织印片在全血细胞减少诊断中的应用价值。方法分析 5 6例全血细胞减少患者的骨髓活检组织印片、骨髓活检组织切片和骨髓穿刺涂片的诊断结果。结果骨髓活检组织印片及切片的诊断符合率高于骨髓穿刺涂片 ,尤其在诊断原发性骨髓纤维化 (骨纤 )、再生障碍性贫血 (再障 )、骨髓转移癌时 ,其符合率明显高于骨髓穿刺涂片检查 .骨髓活检组织印片及切片两者之间的诊断符合率无明显差异 ,但骨髓活检组织印片观察细胞细微结构较切片好 ,且操作简单、确诊及时。

骨髓活检组织印片在骨髓转移癌诊断中的价值

目的:探讨骨髓活检组织印片在骨髓转移癌诊断中的价值。方法:对28例骨髓转移癌患者骨髓活检组织印片结果进行回顾性分析,并与同步进行的骨髓穿刺涂片、骨髓活检组织切片结果进行比较。结果:骨髓活检组织印片阳性25例,阳性率89.3%;骨髓穿刺涂片阳性18例,阳性率64.3%;骨髓活检组织印片与骨髓穿刺涂片均阳性17例;骨髓活检组织印片阳性率高于骨髓穿刺涂片,差异有统计学意义(P<0.05);骨髓活检组织切片阳性28例,阳性率100%,高于骨髓活检组织印片,但差异无统计学意义(P>0.05)。骨髓活检组织印片与骨髓穿刺涂片对细胞形态结构清晰可辨。结论:骨髓活检组织印片操作简单,阳性检出率较高,对细胞形态结构辨认清晰,可作为骨髓转移癌的重要检查手段。

骨髓活检组织印片在血液病诊断中的临床意义

目的探讨骨髓活检组织印片在血液病诊断中的价值。方法对326例血液病患者同时进行骨髓活检组织印片、骨髓活检切片及骨髓穿刺涂片检查。结果骨髓活检组织印片与骨髓活检切片在骨髓增生程度及诊断符合率均高于骨髓穿刺涂片,特别是在白血病、恶性淋巴瘤、再生障碍性贫血、骨髓纤维化、多发性骨髓瘤诊断中具有重要意义。结论骨髓活检组织印片操作简单,确诊及时,可作为血液病的重要检查方法。

骨髓活检组织切片诊断全血细胞减少的应用价值

目的:探讨骨髓活检组织切片诊断全血细胞减少的价值。方法:回顾性分析32例全血细胞减少患者的骨髓穿刺涂片及骨髓活检组织切片资料。结果:骨髓活检组织切片确诊率高于骨髓穿刺涂片检查(P<0.05);骨髓涂片发现增生低下22例(68.7%),骨髓活检组织切片发现增生低下14例(43.7%),二者比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论:骨髓活检组织切片可提高全血细胞减少诊断的确诊率。

骨髓组织活检在急性白血病完全缓解期应用61例分析

骨髓组织活检在急性白血病完全缓解期应用６１例分析安微淮北矿工总医院李海金，杜炜红中国人民解放军第一军医大学珠江医院郭琳琅中国医学科学院血液学研究所甘芾应用塑料包埋薄切片技术进行骨髓活检，不仅能显示髓内造血组织与基质间的构形变化，且可清晰观察细胞形态，...

骨髓组织活检联合骨髓涂片在恶性血液病诊断中的临床应用

恶性血液病多是因骨髓造血系统异常所致，如急性白血病、骨髓增生异常综合征等。骨髓穿刺涂片是一种血液系统疾病诊断的常规方法，其可观察到骨髓细胞形态学的变化，并以此用于血液系统疾病的诊断和鉴别。但因骨髓穿刺涂片极易出现干抽现象，在骨髓造血组织很少或者增生极度活跃的情况下，使得涂片很难真实地反应出骨髓的实际情况，导致误诊、漏诊等现象。骨髓组织活检是一种通过活检针截取小块骨髓组织进行检测分析的方法，其能够真实地展现骨髓组织增生的细胞分布和增生程度。本研究选取上述两种检测手段联合应用，探讨其在恶性血液疾病诊断的应用价值。现将有关情况报道如下。

骨髓组织检查对慢性粒细胞白血病与骨髓增生异常综合征的诊断价值探讨

目的探讨慢性粒细胞白血病(CML)骨髓组织病理学特征,为提高诊断准确性提供依据。方法对该院初诊的53例CML患者,以及38例骨髓增生异常综合征(MDS)患者取骨髓组织后采用伊红(HE)染色法、网状纤维染色(Gomorri)法,观察其骨髓切片形态特征。结果 CML患者骨髓造血组织容量明显增加,骨髓细胞增生以中性粒细胞中、晚阶段为主,慢性期CML患者75%可见幼稚细胞异常定位(ALIP),而加速期CML患者100%可见ALIP,53例CML患者全部可见巨核细胞明显增多且形态异常,其中有43例可见纤维化。38例MDS患者中各型患者粒、红、白3系形态异常检出率低于骨髓细胞学涂片,部分骨髓增生异常综合征原始细胞增多型(RAEB)和骨髓增生异常综合征(RCMD)患者可检出ALIP,78.95%患者Gomorri结果显示+^++,2例RCMD和2例RAEB患者Gomorri大于++。结论 CML的骨髓病理表现为极度增生,以中性中、晚幼粒细胞为主;大部分可见ALIP及并发骨髓纤维化。骨髓组织Gomorri对MDS诊断和分型有一定价值,可以正确判断增生程度和骨髓纤维组织状态。

病理的特殊检查在诊断病理中的应用

目的:研讨病理的特殊检查在诊断病理中的应用。方法:选取我院2010年9月-2011年9月收治100例血液病患者进行髓切片组织病理检查,对其进行统计分析。结果:骨髓组织活检的结果同骨髓的细胞形态学检查结果完全相同的72例患者(72.00%),在进行骨髓的细胞形态学检查时没有明确诊断,经过骨髓组织活检进行明确的诊断为15例(15.00%),骨髓的细胞形态学检查同骨髓组织活检结果完全不同13例(13.00%)。结论:骨髓组织活检的病理诊断可以作为骨髓形态学的检查进行修正和补充,两种检查手段联合应用能有效提高血液疾病的正确诊断率,及进行更加系统有效的诊疗。病理的特殊检查在诊断病理中具有重要的临床意义。

急性白血病初诊及缓解后bcl-2表达水平的比较及临床意义

目的探讨急性白血病(AL)初诊及缓解后白血病基因2(bcl-2)表达水平及临床意义。方法回顾性分析2016年1月至2020年1月于本院确诊并接受治疗的91例AL患者的临床资料,分别在治疗前、缓解后抽取所有患者骨髓活检组织和骨髓液,检测bcl-2表达水平,并分析急性白血病骨髓活检组织和骨髓细胞中bcl-2表达水平对患者预后的预测价值。结果联合化疗后,骨髓活检组织中bcl-2、骨髓细胞中bcl-2水平均低于治疗前,差异有统计学意义(P<0.05);将AL患者预后作为因变量,将骨髓活检组织和骨髓细胞中bcl-2表达水平作为协变量,进行Logistics回归分析,得到回归方程Y=14.582-4.220X1-10.938X2,提示骨髓活检组织和骨髓细胞中低bcl-2表达水平是AL患者预后的保护因素(OR<1,P<0.05);将AL患者预后作为状态变量,骨髓活检组织和骨髓细胞中bcl-2表达水平作为检验变量,绘制ROC曲线,骨髓活检组织中bcl-2表达水平单独预测的AUC为0.861,具有一定的预测价值;骨髓细胞中bcl-2表达水平单独预测AUC为0.854,具有一定的预测价值;骨髓活检组织和骨髓细胞中bcl-2表达水平联合预测AL患者预后的AUC为0.944,具有较高的预测价值。结论 AL缓解后骨髓活检组织中bcl-2、骨髓细胞中bcl-2水平均低于治疗前,骨髓活检组织和骨髓细胞中bcl-2水平表达与AL患者的预后水平密切相关,联合检测具有较高的临床价值,可为临床评估AL患者疾病恢复情况并实施有效的治疗方案提供参考依据,值得临床推广应用。

三种特殊染色方法的改进

随着病理技术的发展，免疫组织化学、原位杂交等技术越来越普及，与此同时，传统的特殊染色技术仍然是病理学诊断和鉴别诊断必不可少的技术。尤其在肾、骨髓活检组织的病理学诊断中，特殊染色与苏木精一伊红染色、免疫组织化学、电镜有着同等重要的地位。由于特殊染色方法众多，如何选择1种既稳定高效又方便快捷的方法是技术工作者普遍关注的问题，笔者在长期的特殊染色操作中积累了一些经验，对常用的3种特殊染色方法进行改进，获得良好效果，现介绍如下。