紫黑糯米皮层对促进小鼠骨髓祖细胞分化和脾淋巴细胞增殖的影响

紫黑糯米皮层对促进小鼠骨髓祖细胞分化和脾淋巴细胞增殖的影响顾德法，李军，易扬华，郑钦岳，沈有安（上海市农业科学院作物育种栽培研究所，上海２０１１０６）（中国人民解放军第二军医大学药学院，上海２００４３３）关键词：紫黑糯米，骨髓祖细胞分化，脾淋巴细胞增...

儿童再生障碍性贫血骨髓祖细胞的测定和意义

目的通过对再生障碍性贫血 (AA)患儿红系 (BFU E、CFU E)、粒单核系 (CFU GM)及巨核系 (CFU Meg)祖细胞培养 ,了解骨髓祖细胞增殖情况。方法抽取 4 7例AA患儿骨髓分别作四类祖细胞培养 ,在 7、14d测定其集落数。结果 4 7例AA患儿中 ,四类集落数均值与对照组比较均有显著下降 (P <0 .0 5 ,P <0 .0 1) ,且四类集落数均值在AA三种类型中 ,基本上随病情加重均值逐步下降 ,其中四类集落数低于对照组下限的患儿分别为BFU E 36 .17%、CFU E 85 .11%、CFU GM 74 .4 7%、CFU Meg 91.4 9 %。BFU E、CFU GM和CFU Meg随着患儿疾病的加重 ,低于对照组下限的患儿百分比同步上升 ,且三者的表现与外周血三系表现一致 ,而CFU E却未见上述现象。结论在部分AA患儿中存在着四类祖细胞培养集落数的下降 ,且基本上与患儿病情成正比 ;BFU E的变化较CFU E更能代表患儿骨髓红系祖细胞的变化。

围术期心血管危险因素对骨髓祖细胞的影响

背景:移植自体骨髓干细胞治疗缺血性心脏病已进行了10余年的临床试验,但试验结果在不同的患者中存在差异。因此,有必要鉴定哪些心血管病患者的危险因素影响骨髓干细胞的水平和功能。目的:观察冠心病患者围术期危险因素对骨髓祖细胞数量及功能的影响。方法:选择44例拟行冠状动脉旁路移植的冠心病患者,采集实验室和临床资料;术中经胸骨穿刺采集骨髓,应用Ficoll淋巴细胞分离液密度梯度离心法分离骨髓单个核细胞,计数并应用锥虫蓝拒染法检测其活性;应用流式细胞仪分析检测CD34+、CD133+和CD34+CD133+细胞的水平;应用集落形成试验和细胞迁移试验评价骨髓祖细胞功能。结果与结论:术中经胸骨抽取20 mL骨髓可获得(10-89)×106个骨髓单个核细胞,活性在95%以上,等量的骨髓血获得的骨髓单个核细胞的量与患者年龄之间存在明显负相关关系(n=44,r=-0.788,P=0.001);流式细胞仪检测CD34+细胞占(0.94±0.39)%,CD133+细胞占(0.46±0.28)%,CD34+CD133+细胞占(0.53±0.26)%;糖尿病患者骨髓CD34+和CD133+细胞水平明显低于非糖尿病患者;高龄、女性和心功能较差与骨髓祖细胞集落形成能力降低有关;CD34+细胞水平与骨髓单个核细胞的迁移能力存在明显的正相关。结果表明经胸骨应用密度梯度离心法可获得足够数量的骨髓单个核细胞作为缺血性心脏病治疗的供体细胞,年龄、性别、糖尿病、心功能与骨髓单个核细胞数量和功能有关。

肝炎肝硬化患者血常规和骨髓祖细胞造血功能的改变

目的观察肝炎肝硬化患者骨髓祖细胞造血功能和血液常规的变化,为对该类患者采用新的临床治疗措施提供理论依据。方法随机选择26例病毒性肝炎肝硬化患者作为试验组(代偿期、失代偿期肝硬化患者各13例);随机选择13例本院健康体检者作为对照组。对2组观察对象进行骨髓晚期红系祖细胞(CFU-E)、粒-单系祖细胞(CFU-GM)及成纤维祖细胞(CFU-F)体外培养,观察2组间三系的变化及外周血象、血浆白蛋白变化。结果失代偿期肝炎肝硬化患者的血红蛋白、白细胞、血小板白蛋白水平、白球比均明显低于健康对照组和代偿期肝炎肝硬化组的水平(P<0.01);而球蛋白水平则明显高于健康对照组和代偿期肝炎肝硬化组的水平(P<0.01)。代偿期及失代偿期肝炎肝硬化患者CFU-E、CFU-GM、CFU-F集落生长不良率分别为76.9%、30.8%、38.5%及92.3%、69.2%、84.6%,明显高于对照组三系祖细胞集落生长不良率(0%、0%、0%),2组间差异有显著性(P<0.01)。结论与健康对照组比较,肝炎肝硬化患者骨髓祖细胞造血功能明显异常。

放射损伤后骨髓祖细胞变化的探讨

分析 16例放射损伤患者的骨髓祖细胞变化 ,提示放射损伤后除骨髓粒、巨系祖细胞受损外 ,骨髓造血微环境也受到严重破坏 ,如何改善微环境以利造血恢复 ,是今后治疗的新课题。

CCL25/CCR9与骨髓祖细胞胸腺归巢

在骨髓中多种祖细胞有T细胞系潜能,但骨髓祖细胞胸腺归巢具有选择性.骨髓祖细胞胸腺归巢是多级粘附分子和趋化因子的级联过程,趋化因子CCL25及其受体CCR9在这一过程中发挥了重要作用.综述了CCL25/CCR9的结构特征及其对骨髓祖细胞胸腺归巢的作用和调节机制.

再生障碍性贫血患者骨髓祖细胞培养的临床意义

目的探讨再生障碍性贫血(AA)患者红细胞集落生成单位(CFU-E)、爆式红细胞集落生成单位(BFU-E)、粒细胞-单核细胞集落生成单位(CFU-GM)及巨核细胞集落生成单位(CFU-Meg)骨髓祖细胞培养情况。方法抽取39例AA患者骨髓分别作四类祖细胞培养,在7d、14d测定其集落数,与同期住院非血液病患者比较。结果39例再障患者四类集落数均值与对照组比较,差异有统计学意义(P<0.01或P<0.001)。集落数随着病情加重而逐步下降。治愈及进步者四类集落数接近对照组水平,治疗无效及进展者与治疗前比较差异无统计学意义。结论部分AA患者存在四类祖细胞培养集落数的降低,基本与患者的病情严重程度呈正比。动态监测AA患者骨髓四类祖细胞集落数的变化对辅助诊断、观察疗效及预后判断均有指导意义。

再生障碍性贫血患儿骨髓祖细胞培养的临床意义

目的探讨再生障碍性贫血(AA)患儿红细胞集落生成单位(CFU-E)、爆式红细胞集落生成单位(BFU-E)、粒细胞-单核细胞集落生成单位(CFU-GM)及巨核细胞集落生成单位(CFU-Meg)骨髓祖细胞培养情况,了解骨髓祖细胞在AA发病中的作用及意义。方法抽取28例AA患儿骨髓3～4mL,以淋巴细胞分离液提取单个核细胞,用磷酸盐缓冲液(PBS)洗涤2次,调节单个核细胞水平为106/mL,取0.3mL分别接种于红系、粒-单核系、巨核系培养基分别作4类祖细胞培养,在7、14d测定其集落数。结果28例AA中,4类集落数均值与对照组比较,差异有显著意义(P<0.01或P<0.001)。集落数随病情加重而逐步下降。4类集落数低于对照组患儿下限所占百分比分别为BFU-E35.71%、CFU-E85.71%、CFU-GM75.00%、CFU-Meg89.29%。治愈及进步者4类集落数接近对照组水平,治疗无效及进展者与治疗前比较无变化。结论动态监测AA患儿骨髓4类祖细胞集落数变化对辅助诊断、观察疗效及预后判断均有指导意义。

急性心肌梗死病人冠脉内注入骨髓祖细胞的临床结果

为研究急性心肌梗死（AMI）病人冠脉内滴注自体骨髓祖细胞的临床结果。将临床实验设计为双盲、安慰剂对照、多中心。204例成功再灌注后3～7天的AMI病人,随机分入冠脉内滴注骨髓祖细胞（BMCs）或安慰剂组。12个月时BMCs组先期设定 的积累终点（死亡、心肌梗死或需血运重建）明显少于安慰剂组（P=0．009）。同样，冠脉内滴注BMCs病人综合终点（死亡、心肌梗死复发，因心衰再住院）明显减少（P=0．006）。

自体骨髓祖细胞移植对下肢动脉缺血导致创面中VE-钙黏附分子的影响

目的检测自体骨髓祖细胞移植前后下肢创面中VE-钙黏附分子的变化特性,对自体骨髓祖细胞移植治疗下肢动脉缺血导致创面进行机理探讨,为临床的治疗提供依据。方法2003年6月至2006年8月对199例下肢动脉缺血导致创面的患者采用超声彩色多普勒和选择性血管造影进行检查是否存在下肢动脉的缺血,97例患者行自体骨髓祖细胞移植治疗,应用RT-PCR、Western blot和免疫荧光染色等技术检测检测移植前和后1周、2周、1月、2月和3月下肢创面中VE-钙黏附分子mRNA和蛋白质的变化。结果(1)超声彩色多普勒检查结果:阳性结果173例(阳性率87%,173/199),其中完全闭塞者40例(23%,40/173),重度狭窄者64例(37%,64/173),中度狭窄者69例(40%,69/173);(2)199例患者中行选择性血管造影者169例,阳性结果为128例(76%,128/169),其中髂总动脉+髂外动脉+股动脉闭塞或狭窄者15例(12%,15/128),髂外动脉+股动脉闭塞或狭窄者31例(24%,31/128),股动脉+腘动脉闭塞或狭窄者45例(35%,45/128),腘动脉下动脉血管闭塞或狭窄者37例(29%,37/128);(3)199例患者中,应用自体骨髓祖细胞移植的患者97例(48%,97/199),和同程度未行自体骨髓祖细胞移植的患者比较创面愈合时间平均缩短28±3天(P<0.05);(4)自体骨髓祖细胞移植后1周到1月VE-钙黏附分子的mRNA和蛋白质表达呈缓慢增长趋势,移植后2月到3月为明显表达增加趋势。结论自体骨髓祖细胞的移植可以促进下肢动脉缺血导致溃疡创面的愈合,VE-钙黏附分子的表达在新生的血管形成和侧枝循环的形成中起关键的作用。

附子理中汤对变应性鼻炎大鼠骨髓干细胞鼻腔归巢的影响

目的研究附子理中汤对变应性鼻炎大鼠骨髓间充质干细胞(MSCs)和内皮祖细胞(EPCs)归巢的影响及意义。方法复制变应性鼻炎的疾病模型,将12只模型大鼠分为治疗组(附子理中汤干预)和空白组,雌雄各半,每组6只。在模型建立后的7 d分别评价两组的症状积分及鼻腔黏膜取材免疫荧光检测鼻腔黏膜MSCs和EPCs的阳性率。结果空白组0、7天的积分比较差异无统计学意义(P>0.05)。治疗组在治疗后积分减少(P<0.05)。两组间同期比较,第0天时积分比较差异无统计学意义(P>0.05)。第7天的积分差异有统计学意义(P<0.05)。变应性鼻炎造模成功后,骨髓MSCs和EPCs都能够从循环系统向鼻腔黏膜归巢,在鼻腔黏膜都有阳性表达。经χ2检验,治疗组在治疗后鼻腔黏膜的MSCs和EPCs阳性率均较空白组提高(P<0.05)。说明治疗组附子理中汤能有效改善变应性鼻炎大鼠的症状,且能促进变应性鼻炎大鼠的骨髓MSCs和EPCs向鼻腔归巢。结论骨髓MSCs和EPCs能够向变应性鼻炎的鼻腔黏膜归巢,而附子理中汤能够促进骨髓MSCs和EPCs的鼻腔归巢。

人参二醇、三醇皂苷对人骨髓造血祖细胞增殖作用的研究

目的:探讨人参二醇皂苷(panaxadiol saponin,PDS)和三醇皂苷(panaxtrol saponin,PTS)对骨髓造血祖细胞增殖的作用。方法:从人参总皂苷进一步分离纯化出PDS和PTS,用体外造血祖细胞集落形成技术,观察PDS、PTS对小鼠骨髓红系祖细胞(CFU-E、BFU-E)、粒-单系祖细胞(CFU-GM)和多向祖细胞(CFU-Mix)的刺激增殖作用。结果:不同浓度的PDS(2.5～200μg/ml)可促进造血祖细胞增殖;CFU-E,BFU-E,CFU-GM和CFU-Mix集落产率均显著高于对照组(P<0.05),提高率(％)分别达54.9±6.3、48.8±5.1、27.6±4.2和48.9±3.9。而PTS在同样浓度时,CFU-E、BFU-E产率均显著低于对照组(P<0.05);终浓度为200μg/ml时,CFU-E、BFU-E集落产率为零。在CFU-GM培养中,12.5μg/ml浓度的PTS使集落产率提高(29.7±2.2)％(P<0.05);而100μg/ml和200μg/ml的PTS却出现对CFU-GM的抑制作用,抑制率分别为(48.6±3.9)％和100％。结论:PDS是总皂苷内促进造血的有效成分,而PTS对红系祖细胞具有抑制作用,对粒-单系祖细胞的作用呈剂量依赖关系。

黄芪多糖对体外人骨髓造血祖细胞生成的影响

应用甲基纤维素半固体培养法观察了黄芪多糖 (AstragalusPolysaccharides ,APSs)在体外对人骨髓粒单集落 (CFU GM )、红细胞集落 (CFU E)和爆式红细胞集落 (BFU E)生成的影响。结果显示 :APSs 5mg/L对人骨髓CFU GM和CFU E的生成具有促进作用 (均为P <0 .0 5 ) ,在APSs 12 5mg/L时 ,能促进BFU E的生成 (P <0 .0 5 ) ;在CFU GM的培养体系中 ,如果没有GM CSF ,APSs在 5mg/L的终浓度时 ,仍能促进CFU GM的生成 (P <0 .0 5 ) ,过高或过低的浓度无效。在培养CFU E时 ,不含EPO ,则APSs对CFU E无刺激作用。骨髓细胞与APSs孵育 2小时后 ,再进行造血祖细胞培养 ,则CFU GM、CFU E和BFU E的生成均略有下降 ,但与孵育时APSs的浓度高低无关。提示浓度合适的APSs在体外能促进人骨髓细胞中红细胞系和粒细胞系祖细胞的生成 ,这种促进作用在造血因子存在时 ,才能发挥 ,或发挥的作用最大 ,并且这种促进作用的发挥需APSs的持续刺激 ,短时间的刺激无效。

补肾泻肝方药对再生障碍性贫血患者骨髓造血祖细胞的影响

为研究补肾泻肝方药治疗再生障碍性贫血的机理 ,将 2 5例再障患者 (其中肾阴虚 14例 ,肾阳虚 11例 )的骨髓进行体外培养 ,观察不同中药复方 [滋肾阴 (Ⅰ )、泻肝火 (Ⅱ )、温肾阳 (Ⅲ )、补肾泻肝 (Ⅳ ) ]和细胞因子 (IL - 2、IFN -γ)对其红系、粒 -巨噬系造血祖细胞 (CFU -E、BFU -E、CFU -GM)集落形成的影响。结果 :Ⅰ、Ⅲ、Ⅳ方对CFU -E、BFU -E、CFU -GM均有促进作用 ,Ⅳ方的作用尤其明显 ,而Ⅱ方无此作用 ;IL - 2、IFN -γ对上述指标有抑制作用 ;加入Ⅱ、Ⅳ方后能减除这种抑制 ,但Ⅰ、Ⅲ方无此作用。提示 :补肾泻肝方药是治疗再障的有效处方 ,减除IL - 2、IFN -γ对造血祖细胞的抑制、促进CFU -E、BFU -E、CFU

动脉粥样硬化鼠骨髓内皮祖细胞数量和功能的变化及其意义

目的观察动脉粥样硬化大鼠骨髓内皮祖细胞(endothelialprogenitorcells,EPCs)数量和功能的改变,探讨EPCs在动脉粥样硬化发生发展中的可能作用。方法选择动脉粥样硬化大鼠和非动脉粥样硬化大鼠各10例,用密度梯度离心法从骨髓获取单个核细胞,将其接种在培养板,培养7d后对贴壁细胞进行细胞化学分析。激光共聚焦显微镜鉴定FITC标记荆豆凝血素Ⅰ(FITC UEA I)和DiI标记的乙酰化低密度脂蛋白(DiI acLDL)双染色阳性细胞为正在分化的EPCs。采用改良的Boyden小室和黏附能力测定观察EPCs的迁移和黏附能力。结果动脉粥样硬化大鼠骨髓EPCs数量明显减少[EPCs/(视野×400):(27.2±3.3)与(43.0±12.2),P<0.01],且动脉粥样硬化大鼠骨髓EPCs的黏附和迁移能力明显受损。结论动脉粥样硬化的发生、发展可能与骨髓EPCs数量减少、迁移、黏附功能减退有关。

重型再生障碍性贫血患者免疫抑制治疗后骨髓造血祖细胞水平的变化及其意义

为更好地评价重型再生障碍性贫血(SAA)患者免疫抑制治疗(IST)后骨髓造血功能恢复程度,采用造血祖细胞体外培养技术,动态观察了48例接受IBT的SAA患者及20例正常对照者骨髓晚期红系爆式集落形成单位(mBFU-E)及粒-巨噬系集落形成单位(CFU-GM)的水平变化。结果表明,IST前所有SAA患者骨髓mBFU-E及CFU-GM水平均显著低于正常对照组(P<0.001);IST后1年,29例有效者骨髓mBFU-E及CFU-GM水平显著增高,增高程度与其临床疗效相关;12例mBFU-E及10例CFU-GM水平恢复正常,其中8例患者mBFU-E及CFU-GM水平同时恢复正常。这表明SAA确是一组异质性疾病,其造血功能衰竭与异常免疫关系密切,若去除这种异常,造血功能可获得部分甚至完全重建。

重组人白细胞介素2对骨髓造血祖细胞体外增殖的影响

重组人白细胞介素２对骨髓造血祖细胞体外增殖的影响郝思国邹正辉①杨吉成②虞斐①盛伟华②王苏③沈美凤①（安徽医科大学附一院，合肥２３００２２）①苏州医学院附二院，苏州２１５００４②苏州医学院，苏州２１５００７③辽宁省人民医院血液科，沈阳１１０００３作者简...

小鼠骨髓基质祖细胞低剂量辐射效应研究

采用体外液体单层和半固体培养方法，研究小鼠骨髓细胞在受到0、25、50、75、100mGy照射后，骨髓基质祖细胞的形成、特性及功能变化。结果表明：各照射组CFU－F有不同程度增多，50、75mGy组有显著意义；CFU－F基质层对粒系祖细胞集落形成单位（CFU－GM）的支持作用明显增加；CFU－F基质层对骨髓细胞的粘附能力在50、75mGy组有显著提高。结论是骨髓基质祖细胞低剂量照射时具有兴奋效应。