骨髓腔输注的发展及应用

近些年来，在临床工作中，尤其是在严重创伤或急危重症患者的救治过程中，简单、安全、有效、快速地建立输注通道，直接关系到急诊救治的成功与否。当传统的静脉输注通道变得困难或不可能时，骨髓腔内（Intraosseous，IO）输注技术重新引起了人们的兴趣和关注。该项技术能迅速、可靠地建立输液通道，并且不影响心肺复苏术的实施，为急诊急危重症患者的抢救提供了新的方法，有效的提高了休克抢救及心肺复苏的成功率。

骨髓腔输注造血干/祖细胞在致敏模型应用的实验研究

本研究旨在致敏模型中通过骨髓腔输注异基因造血干/祖细胞方法探讨致敏移植的新策略。应用脾细胞输注方法建立的致敏BABL/c小鼠作为致敏模型,取正常BALB/c小鼠作为非致敏受者,通过骨髓腔输注同种异基因造血干/祖细胞,观察移植后受者的生存及血象恢复情况。同时分离致敏及非致敏小鼠的血清,应用补体依赖细胞毒性反应方法检查血清抗体对异基因造血干/祖细胞损伤的影响。结果显示:非致敏受鼠经骨髓腔输注造血干/祖细胞后能长期存活,血象随时间推移而逐渐恢复正常。而致敏移植受鼠中有1只小鼠于移植前由于麻醉意外而死亡,其余90%致敏受鼠(9/10)经骨髓腔注射骨髓细胞后于2周内死亡,血象随时间推移而逐渐下降。取濒死的致敏受鼠组织行病理切片检查,证实致敏受鼠死于骨髓衰竭。补体依赖细胞毒性反应实验结果显示,非致敏组和致敏组的造血干/祖细胞死亡细胞百分比分别为(7.80±1.93)%和(50.80±3.12)%,两组差异有明显统计学意义(p<0.05),提示致敏血清对异基因造血干/祖细胞具有损伤作用。结论:通过骨髓腔输注造血干/祖细胞的方法并不能促进异基因供者细胞在致敏受者体内植入。

骨髓腔输注异基因间充质干细胞对移植后大鼠骨髓间充质干细胞重建的作用

为了研究骨髓腔内注射(IBM)异基因间充质干细胞(MSC)对造血干细胞移植后大鼠骨髓MSC重建的作用,研究供体MSC植入状态以探讨MSCs的作用机制,将雌性F344胎鼠及新生鼠外周血(FNPB)及雄性F344大鼠BrdU标记骨髓MSC共移植入经致死量60Coγ射线预处理的雌性Wistar大鼠,其中FNPB均由IBM输注,MSC则通过IBM或尾静脉注射。观察受鼠存活状况、供体HSC植入水平及骨髓MSC恢复情况,并以PCR检测Y染色体和免疫荧光法检测受鼠骨髓MSC的来源。结果显示:两个FNPB+MSCs共移植组大鼠移植后60天均100%存活,两组比较生存率和供体HSC植入水平无统计学差异,但明显优于单纯FNPB移植组;移植后30天时各移植组受鼠骨髓MSC的增殖能力均未达正常水平,但MSC骨髓腔共移植组集落数(66.0±10.6)明显优于MSC骨髓腔和静脉共移植组及单纯FNPB移植组(p<0.01);移植后60天时,免疫荧光法检测供体BrdU标记的MSC显示仅在少部分受体发现供、受体源性MSCs嵌合,但两个共移植组存活受鼠均检测到供体MSC来源Y染色体。结论:异基因MSC输注可促进造血干细胞移植受者骨髓MSC恢复,尤以IBM输注为佳。

骨髓腔输注参附注射液对多发性骨折失血患者的影响

多发性骨折造成大量血液急性丢失进而严重影响全身氧气的供应,导致一系列缺血、缺氧、代谢障碍的病理过程。近年来观察发现参附注射液在纠正失血缺氧方面有积极的影响,本研究采用国外急救中常用的骨髓腔注射技术,现报告如下。

外周血干细胞骨髓腔内输注对移植物抗宿主病的影响

本研究建立髓腔内外周造血干细胞输注(IBM-PBSCT)动物移植模型并观察该方法对移植物抗宿主病(GVHD)的影响。选取雌性C57BL/6小鼠为移植受鼠,于第0天接受全身照射(TBI)4Gy后,输注经rhG-CSF动员的雄性BABL/c小鼠外周血造血干细胞(1×107),2天后腹腔注射环磷酰胺(CTX),观察各组小鼠GVHD发生情况。结果显示:髓腔内PBSCT组的受鼠GVHD发生率较尾静脉输注组明显减低(p<0.05),移植后在受鼠体内观察到供鼠来源的Y染色体存在。结论:与尾静脉输注比较,髓腔内输注外周血造血干细胞不仅能减少GVHD的发生,而且更有利于干细胞植入。

骨髓腔内输注脐带血及间充质干细胞对大鼠免疫重建影响

目的探讨骨髓腔内(IBM)输注脐带血及骨髓间充质干细胞(BMSC)对移植后大鼠免疫重建的影响。方法雌性F344胎鼠及新生鼠外周血(FNPB)及雄性F344大鼠BMSC共移植经致死量60Coγ射线辐照的雌性Wistar大鼠,其中FNPB均由IBM输注,BMSC则通过IBM或尾静脉(IV)注射。观察受鼠存活状况、供体造血干细胞(HSC)植入水平、免疫细胞及功能恢复、移植物抗宿主病(GVHD)表现,并用PCR检测受鼠供体BMSC来源Y染色体。结果两共移植组60d均100%存活,生存率和供体HSC植入水平差异无统计学意义,但明显优于单纯FNPB移植组;骨髓腔共移植组外周血白细胞及粒单系细胞集落形成单位(CFU-GM)、混合集落形成单位(CFU-GEMM)集落产率恢复较快,14d显著高于其他组(P<0.05)。而单纯FNPB移植组各检测时点集落计数均明显低于共移植组(P<0.05),30dCD19+细胞比例亦明显低于正常;30d各移植组PHA、LPS诱导淋巴细胞增殖实验及单向混合淋巴细胞培养无明显差异;60d两共移植组存活受鼠均检测到供体BMSC来源Y染色体。结论 HSC与BMSC联合输注可促进受者免疫重建,尤以IBM输注为佳。

骨髓腔内输注人造血干／祖细胞促进NOD-SCID小鼠体内造血功能的恢复

本研究比较经骨髓腔内输注(intra-bone marrow infusion,iBMI)及静脉输注(intravenous infusion,iVI)人脐血(cord blood,CB)造血干/祖细胞(HS/PC)对NOD-SCID受鼠体内造血重建的影响。将纯化的CBCD34+细胞移植到受亚致死剂量照射的NOD-SCID受鼠体内。受鼠随机分为3组:①iBMI组:骨髓腔内输注CD34+细胞5×105/只;②iVI组:尾静脉输注CD34+细胞5×105/只;③阴性对照组:输注PBS缓冲液。于异种移植后第3、5及第8周通过流式细胞术、聚合酶链式反应、免疫组织化学及造血祖细胞集落分析的方法比较人造血系统各系细胞植入率,通过二次移植实验比较NOD-SCID受鼠体内人HS/PC长期造血重建能力。结果表明:移植后第8周,iB-MI组受鼠骨髓、外周血及脾脏中人CD45+细胞比例均显著高于iVI组(p<0.05);iBMI组及iVI组移植的HS/PC均具有多向分化能力;移植后第8周,iBMI组受鼠骨髓中CD45+CD19+细胞、CD45+CD33+细胞、CD45+CD56+细胞及CD45+CD34+细胞比例均显著高于iVI组(p<0.05),CD45+CD14+细胞及CD45+CD41a+细胞比例亦高于iVI组(p>0.05)。iVI组及iBMI组长期存活受鼠的肝脏、脾脏、肺脏、外周血、骨髓细胞中均可检测到人17号染色体α-卫星特异性片段。应用免疫组织化学法在移植后第8周的iBMI组受鼠的脾脏、肝脏和肺脏中均可检出人CD45抗原的表达。iBMI组受鼠的骨髓细胞各系集落总数于移植后第8周显著高于iVI组(p<0.05)。二次移植后第6周,iVI组及iBMI组受鼠的各组织脏器中均可检出人17号染色体α-卫星特异性片段的表达。结论:与iVI相比,经iBMI移植人CBCD34+细胞至NOD-SCID受鼠可以促进HS/PC的造血重建及多向分化,提高植入率。

经骨髓腔建立静脉通路成功抢救急性阻塞性窒息儿童1例

心肺复苏（CPR）成功率及最终预后与多种因素有关，在基本生命支持基础上给予药物复苏，如何选择快速、安全、有效的给药途径，确保复苏药物在最短时间内到达心脏发挥作用被认为是CPR成功率的重要保障。紧急CPR时，静脉通路难以建立，延迟获得给药通路可影响复苏效果。因此，当未有静脉通路时，骨髓内给药是一种很好的替代途径，尤其适用于6岁以下的儿童。现将经骨髓腔建立静脉通路成功抢救1例急性阻塞性窒息儿童的救治经验报道如下。

不同途径输注造血干细胞对小鼠移植效果的比较

为比较骨髓腔内(IBM)或静脉(IV)等不同途径输注小鼠造血干细胞后在受体内的分布特点及对移植效果的影响,将C57BL/6胎鼠及新生鼠外周血(FNPB)单个核细胞(MNC)移植经亚致死量60Coγ射线辐照的BALB/c鼠。受鼠随机分为6组:单侧IBM组;双侧IBM组;IV组;双侧IBM+IV组;照射对照组;空白对照组。用组织冰冻切片和流式细胞术动态了解CFSE标记的FNPBMNC在受体内的分布变化,观察移植后受鼠生存状况、植入水平、造血恢复及GVHD情况。结果显示:IBM注射的供体FNPBMNC主要积聚于注射侧骨髓腔内,少量FNPBMNC可经血循环二次归巢,肺部滞留很少。单/双侧IBM组输注的FNPBMNC总数无明显差异,但经双侧IBM输入FN-PBMNC渗漏至外周血或其它组织器官的比例更少;IBM各组造血重建速度均优于IV组,尤以双侧IBM组最快,其外周血象和造血干祖细胞集落产率在移植后第21天已接近正常水平,单侧IBM组、双侧IBM+IV组次之;IBM组各时点植入水平均明显高于IV组,双侧IBM组注射侧胫骨植入水平与单侧IBM组无明显差异,二次移植中双侧IBM组的植入水平明显高于IV组;IBM移植组90天存活率≥80%,IV组仅为50%。结论:双侧IBM有利于更多造血干细胞归巢,促进植入和造血重建,提高IBM途径移植的效果。

局部骨髓腔内输注预防性抗生素在全膝关节置换术中的应用进展

全膝关节置换术是将人工膝关节假体置入到人体内替换受损的关节,从而矫正膝关节畸形、缓解疼痛并改善膝关节活动功能。虽然医学技术水平不断提高,全膝关节置换术在各级医院也呈现逐步增加的趋势,但依然面临着一系列严重并发症的问题。假体周围感染是全膝关节置换术后严重的并发症之一,发生率为0.5%~2%,医疗水平差距较大的医院其发生率差异也较大,假体周围感染将导致预后不良,严重的患者甚至需要翻修和截肢[1-5]。

骨髓腔穿刺建立循环对心搏骤停患者自主循环恢复的影响

在心搏骤停患者的抢救治疗中，快速建立静脉通路并尽早给予复苏药物治疗与患者的复苏成功率密切相关，而且直接影响心肺脑复苏的效果。为了提高抢救的效果，国内外学者在心肺复苏（CPR）的流程、技术方面进行了大量研究。本研究中采用EZ—IO骨髓腔内注射系统经骨髓腔建立静脉通路，

拓展个性化人道救援复苏方法 提高创伤后心脏骤停复苏成功率

随着自然灾害和人为灾害的频发，由意外事件导致的严重创伤引发的心脏骤停呈上升趋势，且多在特殊条件下发生。创伤性心脏骤停常由颅脑损伤、胸部伤、腹部创伤、脊柱和脊髓损伤、四肢创伤、多发伤与复合伤等所致，而创伤引发的心脏骤停复苏成功率低嵋一。因此，在实施人道医学救援的过程中，应根据创伤并发心脏骤停的特点，比如创伤引发心脏骤停多伴有胸肋骨骨折、腹部脏器损伤、失血性休克等，